抗肝纤维化姜黄素脂质体的制备及初步稳定性考察

目的:制备姜黄素(Curcumin,Cur)脂质体并考察其包封率及稳定性.方法:采用逆相蒸发法制备Cur脂质体,葡聚糖凝胶柱层析法分离含药脂质体与游离药物并测定包封率;正交设计优选制备处方;离心加速实验与渗漏率的测定考察脂质体的稳定性.结果:所得优化处方为磷脂与药物的重量比60:1,磷脂与胆固醇的重量比4:1,pH6.5的磷酸盐缓冲液水合递质,超声时间为5 min.以优化处方制得的脂质体平均包封率达95.06%.结论:选用逆相蒸发法优化Cur脂质体处方合理,工艺简便可行,包封率高,稳定性好.     

透明质酸修饰的绿原酸脂质体的制备及细胞学研究

目的 制备透明质酸(HA)靶向绿原酸(CA)脂质体,探讨其对HA受体(CD44)高表达A549细胞及低表达HepG2细胞的增殖抑制作用.方法 合成HA-二油酰磷脂酰乙醇胺(DOPE);通过薄膜分散法制备HA-CA脂质体并用动态光散射粒径分析仪测定粒径;采用高效液相色谱法(HPLC)建立CA体外水平测定方法并测定HA-CA脂质体的包封率;采用噻唑蓝(MTT)法检测游离CA、CA脂质体及HA-CA脂质体对A549细胞和HepG2细胞的增殖抑制作用;采用荧光细胞摄取实验验证HA脂质体的靶向性.结果 HA-CA的平均粒径为219.20 nm,多分散系数(PDI) =0.16;包封率为(85.36±1.01)％;HA-CA脂质体对A549细胞的增殖抑制作用明显大于CA脂质体,且CA脂质体大于游离CA;CA脂质体和HA-CA脂质体对HepG2细胞的增殖抑制作用则基本相当,均大于游离CA;A549细胞对载6-香豆素HA脂质体(HA-C脂质体)的摄取高于HepG2细胞.结论 HA-CA脂质体能与高表达的HA受体细胞特异性结合,达到肿瘤细胞主动靶向效果.     

盐酸万古霉素阳离子脂质体的制备及其性质研究

目的制备万古霉素阳离子脂质体（cationic liposomal vancomycin,CLVs）,确定其最佳处方制备工艺,并研究其性质。方法采用正交法确定逆相蒸发法制备CLVs的最佳处方;采用HPLC法测定药物含量;用微型葡聚糖凝胶柱分离脂质体混悬液中的CLVs与游离药物;在电镜下观察CLVs的形态,并采用激光散射法测定其粒径和Zeta电位。结果制备的CLVs为多囊脂质体;通过正交实验,确定逆相蒸发法制备CLVs的最佳处方为∶磷脂∶硬脂酰胺∶胆固醇的摩尔比为7∶3∶1,脂质∶药物的质量比为15∶1,有机相∶水相的体积比为3∶1;制备的脂质体平均粒径、Zeta电位、pH值以及包封率分别为（185.75±16.33）nm、（69.11±4.62）mV、（6.98±0.01）和（8.58±0.045）%,脂质体在4℃和-80℃条件下保存3个月,稳定性良好,药物泄漏率〈5.0%。结论采用逆相蒸发法制备万古霉素阳离子脂质体,方法简便,重现性好,包封率较高。     

脂质体阿霉素对人喉癌HEP-2细胞株增殖与凋亡作用的影响

目的 以游离阿霉素为对照,研究脂质体阿霉素对人喉癌HEP-2细胞株增殖与凋亡作用的影响.方法 本研究以人喉癌HEP-2细胞株为研究对象,以游离阿霉素为对照,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定脂质体阿霉素对HEP-2细胞的增殖抑制率,并计算出半数抑制浓度(IC50);光镜观察脂质体阿霉素作用于HEP-2细胞后细胞凋亡的形态学变化;用FCM法测定脂质体阿霉素对HEP-2细胞的凋亡率.结果 脂质体阿霉素对HEP-2细胞的IC50是游离阿霉素的1/4倍;脂质体阿霉素组与游离阿霉素组分别采用0.06μg/mL的浓度作用于HEP-2细胞72h后,观察脂质体阿霉素组,发现细胞生长受抑制,活细胞数量减少,部分细胞体积缩小;脂质体阿霉素和游离阿霉素作用于HEP-2细胞72h的凋亡率分别为(6.73±0.17)%、(23.79±0.33)%.结论 本实验研究显示,与游离阿霉素相比较脂质体阿霉素对人喉癌HEP-2细胞具有较好的体外增殖抑制作用,能够显著诱导HEP-2细胞凋亡.     

槲皮素纳米脂质体的处方工艺优化

目的 制备槲皮素脂质体,并测定其包封率.方法 采用薄膜蒸发-高压均质法制备槲皮素脂质体,通过正交设计优化处方工艺,以鱼精蛋白沉淀法分离脂质体与游离药物,测定药物的量,并计算包封率.结果 优化的最佳处方工艺:胆固醇与磷脂比为1:3;药物与载体比为1:40;103.4 MPa压力下均质3次.最佳条件下制得的脂质体平均包封率达92.1%.结论 薄膜蒸发-高压均质法适合于制备槲皮素脂质体,鱼精蛋白沉淀法测定包封率操作简单,准确.     

松萝酸脂质体的制备及质量评价

目的:制备松萝酸脂质体,并对其质量进行初步评价。方法:采用机械分散挤压法制备松萝酸脂质体。采用Sephadex G-25微型凝胶柱分离脂质体和游离药物,HPLC法测定脂质体中松萝酸的含量,测定松萝酸脂质体的包封率。结果:用蛋黄卵磷脂-胆固醇(70:30)为辅料制成了松萝酸脂质体,粒径为(130±20)nm,包封率达90%以上,稳定性好。结论:采用该方法可以制备质量稳定的脂质体,建立的包封率测定方法稳定可靠。     

甘草次酸脂质体的制备及其药剂学性质的研究

目的 研究甘草次酸阳离子脂质体的制备方法并考察其药剂学性质。方法 采用正交设计筛选处方,乙醇注入法制备甘草次酸脂质体;用葡聚糖凝胶G-50柱分离脂质体和游离药物,用HPLC法测定包封率;用透射电镜观察脂质体的外观形态,并用粒径分析仪测定脂质体的粒径和zeta电位;进一步考察脂质体的释放规律。结果 所得脂质体包封率为(91.61±1.16)％;形态为粒径均匀的球形和类球形,粒径为(141±10) nm,Zeta电位为(35.9±5) mV;脂质体的体外释放符合Higuchi方程;具有较好的稳定性。结论 优选得到的甘草次酸脂质体处方和制备工艺合理、稳定,其体外释放具有缓释特点。     

新乌头碱脂质体制备工艺的研究

目的以减毒增效、适合于工业化生产、稳定性好为目标,对新乌头碱脂质体的制备工艺与处方进行研究和优化。方法采用冷冻干燥法制备新乌头碱脂质体,单因素实验优化处方和制备工艺,以包封率、粒径为评价指标,离心法测定脂质体的包封率,并对离心条件进行考察。结果最佳处方为卵磷脂与胆固醇的比例3∶1,药脂比1∶20,糖脂比5∶1,有机溶剂与水的比例1∶3。测定包封率的最佳离心条件为2 000 r/min、5 min,在该条件下游离药物能与含药脂质体分离。结论优化得到的新乌头碱脂质体处方合理,工艺可行,包封率高,稳定性好。     

足叶乙苷长循环脂质体的制备及血浆中稳定性研究

[目的]研究足叶乙苷长循环脂质体的制备方法并考察其在大鼠血浆中的稳定性.[方法]采用乙醇注入法制备足叶乙苷长循环脂质体,用聚乙二醇2000-二硬脂酰磷脂乙醇胺(PEG2000-DSPE)修饰脂质体膜,反相高效液相色谱(HPLC)法测定脂质体浓度,动态透析法考察其在大鼠血浆中的稳定性.[结果]足叶乙苷长循环脂质体的平均粒径为(180±26)nm,含量为(4.78±0.22)mg/mL,药物包封率为(88.71±8.2)%.在大鼠血浆中,普通脂质体和长循环脂质体24 h累积释药率分别为(80.14±1.59)%和(46.72±2.61)%.[结论]乙醇注入法可制得包封率高、粒径小的足叶乙苷脂质体,PEG2000-DSPE修饰脂质体膜可增加脂质体的稳定性.     

尼莫地平纳米脂质体制备工艺及处方优化研究

目的优化制备尼莫地平纳米脂质体的工艺和处方。方法采用正交设计法,以尼莫地平脂质体冻干粉重建包封率、药物利用率、重建后0 h及10 h小粒径(<0.15μm)脂质体包封药物的百分率、粒径分布、泄漏率等多个指标综合评分,优化尼莫地平脂质体的处方和工艺。结果尼莫地平脂质体的最佳工艺处方为:药物:(磷脂+胆固醇)为1:40;胆固醇:磷脂为1:6;去氧胆酸钠:(磷脂+胆固醇)为1:4;吐温280:(磷脂+胆固醇)为1:4;冻干保护剂甘露醇的用量为处方总重的65%,水合介质为注射用蒸馏水,制备浓度为0.4 mg/mL,采用乙醇滴加2超声工艺制备,按该处方工艺组合制备3批脂质体,包封率平均为92.8%,平均粒径为18.9 nm。结论按优化处方制得的尼莫地平纳米脂质体的包封率和粒径均令人满意。     

浅蓝菌素对人结肠癌裸鼠移植瘤bcl-2及bax基因表达水平的影响

目的 :通过观察人结肠癌LoVo细胞裸鼠移植瘤bcl 2及bax基因表达水平 ,探讨脂肪酸合酶抑制剂浅蓝菌素选择性的抑瘤途径和机制。方法 :建立人结肠癌裸鼠移植瘤模型 ,浅蓝菌素每公斤体重 160mg腹腔注射 ,1次·d-1,连续10d ,第 17天处死并解剖动物 ,瘤组织作免疫组织化学检测bcl 2及bax基因表达水平。结果 :浅蓝菌素处理组结肠癌LoVo细胞移植瘤bcl 2基因蛋白表达率为 68.5 % ;对照组bcl 2蛋白阳性表达率为 87.8% ,阳性细胞弥漫分布。两组间有显著性差异 (P <0 .0 1)。bax基因蛋白在浅蓝菌素组移植瘤组织阳性表达率为 75 .4% ,主要呈强阳性表达 ;对照组阳性表达率为 9.5 %。两组间比较有统计学差异 (P <0 .0 1)。结论 :浅蓝菌素可使结肠癌LoVo细胞移植瘤的bcl 2基因表达下调 ,bax基因表达增强 ,提示bcl 2及bax基因在浅蓝菌素诱导的人结肠癌LoVo细胞凋亡中可能起着重要的调控作用。     

载基因纳米脂质体的制备及有关性质的初步研究

目的用去污剂透析法制备载基因脂质体并考察其性质。方法以大豆磷脂和双十八烷基二甲基溴化铵为脂质材料,以Myrj53为表面修饰材料制备载基因纳米脂质体,用透射电子显微镜观察脂质体的形态,用纳米粒度及电位分析仪测定脂质体的粒径大小、多分散指数及zeta电位,并考察载基因纳米脂质体对DNA的包封率及体外保护DNA抵抗核酸酶降解的性质。结果制得的脂质体形态较为圆整,平均粒径为(72.73±7.14)nm(n=3),多分散指数为0.288±0.093(n=3),zeta电位为(-23.77±3.51)mV(n=3),包封率为88.13%±4.41%(n=3),DNase体外降解实验和凝胶电泳分析表明脂质体对质粒DNA有较强的保护作用。结论去污剂透析法是制备载基因纳米脂质体有效可行的方法。     

光谱法研究槲皮苷与人血清白蛋白的相互作用

目的 研究槲皮苷与人血清白蛋白（HSA）的相互作用,并探讨葡萄糖对二者结合的影响。方法 应用光谱法研究槲皮苷与HSA的作用机制,以双对数方程和能量转移原理计算槲皮苷与HSA的结合常数、结合位点数和结合距离;根据热力学参数判断二者的作用力类型;用同步荧光光谱考察槲皮苷对HSA构象的影响;观察葡萄糖浓度对反应结合常数和结合位点数的影响。结果 槲皮苷对HSA的荧光猝灭过程为生成复合物的静态猝灭;结合常数和结合位点数随温度的升高而降低;结合距离小于7 nm;二者主要以疏水作用力相结合;槲皮苷与HSA的相互作用改变了色氨酸残基所处的微环境;葡萄糖的加入使结合常数和结合位点数均增加。结论 槲皮苷能与HSA结合并改变HSA的构象,生理浓度的葡萄糖可增加槲皮苷与HSA的结合常数和结合位点数。     

GM-CSF-MA脂质体对急性白血病小鼠的治疗作用

目的:观察GM-CSF-MA(粒-巨噬细胞集落刺激因子-米托蒽醌及阿糖胞苷)脂质体对急性髓细胞白血病(AML)小鼠的治疗作用。方法:将AML小鼠随机分为5组,分别为GM-CSF-MA脂质体组、MA脂质体组、MA组、GM-CSF组和生理盐水对照组。观察各组小鼠的生存时间及外周血象、肝功(AST)、肾功(Cr)、磷酸肌酸激酶(CK)的变化。结果:GM-CSF-MA脂质体组小鼠的生存时间为(53.2±22.25)d,生命延长率为254.7%;外周血及骨髓中白血病细胞迅速减少,血象恢复快,与其它治疗组及对照组相比,有显著差异;治疗后GM-CSF-MA脂质体组AST、Cr恢复快,CK无明显变化,而MA组各项生化指标均明显升高,两组比较有显著差异。结论:GM-CSF-MA脂质体是一种高效、低毒的靶向治疗急性髓细胞白血病的新方法。     

cRGD靶向阿霉素脂质体制备及其对Hela细胞的影响

目的 :制备含有二硫键的环形RGD肽(cyclic RGD peptide,c RGD)修饰长循环阿霉素主动靶向脂质体,对其理化性质、靶向性和对Hela细胞的影响进行评价。方法:用DSPE-PEG-NHS耦联c RGD,插入采用p H法制备的磁性长循环阿霉素脂质体中制备主动靶向脂质体;利用透射电镜、紫外分光光度计和质谱仪进行表征;流式细胞术和免疫荧光验证其靶向性;MTT和流式细胞术验证其对Hela细胞的影响。结果:制备的主动靶向脂质体粒径在100~180 nm之间,包封率达到72%,免疫荧光及流式细胞术均显示其对Hela细胞具有一定靶向性,且能显著诱导Hela细胞凋亡。结论:本研究制备的c RGD靶向阿霉素脂质体具有一定靶向性,能显著提高其杀伤肿瘤细胞的作用。这种具有靶向及穿透功能的脂质体载体可能为肿瘤治疗提供一个新方法。     

靶向叶酸受体的蟾酥提取物长循环脂质体的制备及其体外抗肿瘤活性

目的 制备具有靶向叶酸受体的蟾酥提取物长循环脂质体,并对其进行表征,再进一步考察其体外抗肿瘤活性.方法 合成叶酸-聚乙二醇单硬脂酸酯并用红外光谱和质谱进行表征,采用薄膜分散法制备靶向叶酸受体的蟾酥提取物长循环脂质体,用透射电镜、激光粒度仪、高速离心法分别测定脂质体的形状、粒径、电位、包封率,MTT法考察脂质体对肿瘤细胞的抑制作用.结果 经红外光谱及质谱分析证实,成功合成了靶向材料叶酸-聚乙二醇单硬脂酸酯;制备的靶向叶酸受体的蟾酥提取物长循环脂质体在透射电镜视野中粒径大小均一,约160 nm,Zeta电位约4.0 mV,包封率达90%以上;体外细胞毒性显示,叶酸修饰的蟾酥提取物长循环脂质体的IC50值为0.46μg/mL,普通长循环脂质体的IC50值为0.76μg/mL.结论 成功合成叶酸-聚乙二醇单硬脂酸酯靶向材料并构建了靶向叶酸受体的蟾酥提取物长循环脂质体,可靶向性抑制肿瘤细胞生长.     

靶向脂质体制备的实用方法—戊二醛法探讨

本文报道了一种实用、高效的脂质体与抗体共价偶联的方法—戊二醛法。探索了不同比例的脂、不同戊二醛浓度和不同类型脂质体的偶联情况。并把抗胃癌细胞的单克隆抗体共价偶联到脂质体外层,与胃癌细胞进行了结合实验。研究了碱性磷酸酶(AKP)和辣根过氧化物酶(HRP)与脂质体偶联后对其活性的影响。电镜观察了偶联后脂质体的形态。     

脂质体粒径对促进托氟啶口服吸收的影响

目的：考察不同粒径的托氟啶(TFu)脂质体对小鼠口服吸收的影响。方法:按照托氟啶脂质体的处方工艺,采用薄膜分散-乳匀法分别制备530、320和180nm三种粒径的托氟啶脂质体,并考察脂质体的Zeta电位、多分散性、包封率和体外释药等特性;将托氟啶混悬液和托氟啶脂质体分别给予小鼠灌胃,给药剂量均为100mg/kg,在设定的时间点于眼底静脉丛取血,采用HPLC法测定托氟啶的血药浓度。用DAS(2.0) 程序计算药物动力学参数,比较不同粒径组脂质体的相对生物利用度。结果:小鼠口服530、320和180nm的托氟啶脂质体后的相对生物利用度分别为160.5%,221.6%和260.3%。结论:脂质体粒径对促进托氟啶的口服吸收有显著影响,口服吸收生物利用度随脂质体粒径的减小而增大。     

腹腔途径时脂质体和糖化多聚赖氨酸对外源基因肝脏靶向导入性能的比较

目的　比较脂质体和糖化多聚赖氨酸经腹腔途径时对目的基因肝脏靶向定位效果的影响。方法　将真核细胞表达质粒分别与脂质体和糖化多聚赖氨酸偶联 ,经腹腔注射导入大鼠体内 ,通过原位杂交和免疫组化的方法观察目的基因在肝脏和其他脏器的分布表达。结果　经脂质体或糖化多聚赖氨酸包埋的质粒DNA导入体内2 4h后均见明显表达 ,1周后逐渐下降 ,3周时仍有表达 ;均以肝脏为主要分布器官 ,但用糖化多聚赖氨酸包埋的质粒在肝脏中的分布表达高于使用脂质体的包埋 ,在其他脏器中的分布表达低于使用脂质体的包埋。结论　腹腔途径时糖化多聚赖氨酸对DNA的肝脏靶向定位效果优于脂质体。     

Angiopep-2修饰脂质体的构建及其脑靶向性研究

目的 构建Angiopep-2修饰脂质体,并对其理化性质和跨血脑屏障能力进行评价。方法 采用薄膜分散法制备Angiopep-2修饰脂质体（AP-LP）,研究其理化特征。原代培养脑毛细血管内皮细胞（BCEC）,通过定量细胞摄取实验研究BCEC对AP-LP脂质体的摄取率。复制体外模型,观察不同修饰的AP-LP穿过血脑屏障的能力。结果 制备的AP-LP粒径为（125.0±15.5）nm,Zeta电位为（8.35±3.64）mV。BCEC对AP-LP脂质体的摄取率是普通脂质体的4.1倍,差异有统计学意义（P?<0.05）;AP-LP的透过血脑屏障能力是普通脂质体的3.6倍,两者比较差异有统计学意义（P?<0.05）。结论 AP-LP制备方法简便易行,Angiopep-2修饰脂质体后,脂质体的血脑屏障穿透力增加,靶向性增加,是一种潜在高效的脑部靶向给药系统。