白花蛇舌草提取液诱导人肺癌SPC-A-1细胞凋亡的实验研究

目的:探讨中药白花蛇舌草提取液(HDE)诱导人肺癌SPC-A-1细胞凋亡的作用及初步作用机制。方法:MTT法检测HDE对人肺癌SPC-A-1细胞生长的影响;采用倒置显微镜和荧光显微镜观察细胞形态变化;用DNA琼脂糖凝胶电泳检测DNA断裂的情况(DNA梯状条带);用流式细胞仪检测细胞凋亡率;用免疫组化分析bcl-2基因在SPC-A-1细胞中的表达。结果:HDE抑制SPC-A-1细胞的生长,其效果与白花蛇舌草的浓度和作用时间相关;倒置、荧光镜下SPC-A-1细胞出现细胞凋亡早期形态学改变;琼脂糖凝胶电泳呈现典型的“ladder”;流式检测到凋亡峰,且凋亡率呈浓度依赖性;免疫组化结果提示HDE能使SPC-A-1细胞bcl-2蛋白表达降低。结论:一定浓度的HDE对SPC-A-1细胞具有抑制增殖和诱导凋亡作用,其机制可能与相关基因bcl-2的调控有关。     

白花蛇舌草注射液诱导非小细胞肺癌A549细胞凋亡的机制研究

目的：研究白花蛇舌草注射液（HDI）对非小细胞肺癌A549细胞凋亡的影响及其可能的机制。方法不同浓度HDI作用于A549细胞72h,CCK-8法检测细胞增殖,AnnexinV/PI双染与流式细胞术检测细胞凋亡,Westernblot检测Bcl-2和survivin蛋白的表达。结果随着HDI浓度的增加,A549细胞增殖明显被抑制,细胞凋亡显著增加,凋亡相关蛋白Bcl-2和survivin的表达水平降低。结论HDI可促进A549细胞凋亡,其机制可能与减少凋亡相关基因Bcl-2和survivin的表达有关。     

DC-CIK细胞对人肝癌HEPG2细胞周期、凋亡的影响

目的 探讨细胞因子从肝癌患者外周血贴壁单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)诱导的树突状细胞( dendritic cells,DCs)与杀伤细胞(cytokine induced killer,CIK)对人肝癌HEPG2细胞系周期、凋亡的影响.方法 用肝癌患者肝...     

复方白花蛇舌草对肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨复方白花蛇舌抑制肝癌细胞增殖及诱导细胞凋亡的作用。方法体外培养人肝癌细胞Bel-7402和SK-Hep-1,用不同浓度的HDWF干预,采用MTT法检测肝癌细胞的活力,计算HDWF对细胞增殖的抑制率。采用倒置显微镜观察肝癌细胞形态,细胞计数仪计算肝癌细胞数,集落形成实验观察肝癌细胞的集落形成能力,Annexin-V/PI染色实验检测肝癌细胞凋亡情况。结果 MTT法检测结果显示HDWF对抑制肝癌细胞增殖有显著抑制作,形态观察和细胞计数显示HDWF可减少肝癌细胞的密度及细胞数量,HDWF可显著抑制肝癌细胞的集落形成及促进肝癌细胞凋。结论 HDWF具有抑制肝癌细胞增殖和诱导肝癌细胞凋亡的作用。     

白花蛇舌草对人B淋巴细胞瘤Ramos细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨白花蛇舌草对Ramos细胞增殖和凋亡的影响。方法使用0、10、20、40 m L·L-1白花蛇舌草处理Ramos细胞24 h后收获细胞;采用细胞增殖检测试剂盒检测白花蛇舌草对Ramos细胞增殖的影响,并检测Ramos细胞线粒体膜电位的变化;流式细胞术检测白花蛇舌草对Ramos细胞凋亡的影响,并检测Ramos细胞中caspase-3、caspase-9活性的变化;Western blot法检测Ramos细胞Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果细胞增殖实验结果证明白花蛇舌草处理的Ramos细胞增殖受到明显抑制;20、40 m L·L-1白花蛇舌草干预Ramos细胞24 h后,Ramos细胞线粒体膜电位低于0 m L·L-1(P<0.05,P<0.01);流式细胞术检测结果表明细胞凋亡增加;与0 m L·L-1白花蛇舌草比较,20 m L·L-1白花蛇舌草处理Ramos细胞24 h,caspase-3和caspase-9活性增加了96%和37%(P<0.05),40 m L·L-1白花蛇舌草处理Ramos细胞24 h,caspase-3和caspase-9活性增加了148%和115%(P<0.01)。Western blot法证实Bax蛋白表达量增强,而Bcl-2蛋白表达量减弱,且呈现一定程度的剂量依赖性。结论白花蛇舌草可通过活化调控胱天蛋白依赖的线粒体途径,诱导Ramos细胞凋亡。     

白花蛇舌草对人前列腺癌DU145细胞增殖和凋亡的影响

目的:观察白花蛇舌草提取物对人前列腺癌DU145细胞增殖和凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法:不同浓度(0.25 g·L-1、0.5 g·L-1、1 g·L-1)白花蛇舌草提取物作用人前列腺癌DU145细胞24 h、48 h、72 h后,使用CCK-8法检测白花蛇舌草提取物对DU145细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞凋亡的改变;实时定量PCR检测COX-2 m RNA和PCNA m RNA的表达;Western bloting法检测Bcl-2、Bax、Caspase3、Cyclin D1蛋白表达。结果:随着作用时间的延长和剂量的增加,白花蛇舌草提取物对DU145细胞增殖抑制率明显提高,呈时效和量效依赖效应。白花蛇舌草提取物作用48 h后,可明显提高细胞凋亡率,下调DU145细胞COX-2 m RNA、PCNA m RNA及Bcl-2、Cyclin D1蛋白表达,上调Bax、Caspase3蛋白表达,呈量效依赖效应。结论:白花蛇舌草提取物能降低人前列腺癌DU145细胞增殖能力,并诱导其凋亡,其机制可能与改变细胞周期和影响凋亡相关基因表达有关。     

白花蛇舌草通过JAK2/STAT3通路途经诱导膀胱癌T24细胞凋亡

目的：研究白花蛇舌草对膀胱癌T24细胞凋亡的影响及其潜在机制。方法 MTT法检测不同浓度白花蛇舌草对T24增殖的抑制作用,AnnexinV-FITC/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测细胞中JAK2、STAT3、Bax、Caspase-3和Bcl-2的表达情况。结果白花蛇舌草明显抑制膀胱癌T24细胞的增殖同时诱导其凋亡,且作用强度随着浓度的增加而增加。Western blot检测证实白花蛇舌草能够显著抑制细胞中JAK2、STAT3和Bcl-2表达,上调Bax和Caspase-3表达。结论白花蛇舌草能够抑制膀胱癌细胞T24增殖,促进其凋亡,可能与抑制JAK2/STAT3通路有关。     

白花蛇舌草抑制Hela细胞肿瘤活性的体外实验研究

目的探讨中药白花蛇舌草抑制人宫颈癌Hela细胞肿瘤活性的作用及分子生物学机制。方法MTT法检测白花蛇舌草对宫颈癌Hela细胞生长的影响,采用倒置显微镜观察细胞形态学变化,化学比色法测定Hela细胞活性氧（ROS）产生状态,流式细胞仪检测细胞凋亡率,免疫组化染色并用计算机图像分析观察p53基因表达。结果白花蛇舌草可抑制Hela细胞的生长,其效果与药物的浓度和作用的时间相关,倒置显微镜下Hela细胞出现细胞凋亡的形态学改变,流式细胞仪检测到凋亡峰,白花蛇舌草作用后细胞内ROS水平下降,而突变型p53表达降低。结论一定浓度的白花蛇舌草对人宫颈癌Hela细胞具有抑制增殖和诱导凋亡的作用,其机制可能与细胞内ROS水平和p53基因调控有关。     

白花蛇舌草激发肿瘤细胞产生超氧化物和激活半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶诱导肿瘤细胞凋亡

背景与目的:白花蛇舌草是常用于抗肿瘤的中药之一。实验研究和临床使用表明该药有明显的抗肿瘤作用,但是该药抗癌作用的原理尚不清楚。本文研究了白花蛇舌草的乙醇和水的提取物对人急性髓样白血病细胞HL60生存和死亡的影响及其机制。方法:我们用白花蛇舌草的提取物处理细胞,在处理后2h开始测量细胞内的超氧化物及各种半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)的水平,并于24h测量细胞的生存及凋亡情况。结果:我们发现乙醇和水的提取物对HL60细胞的生存有较强的抑制作用。对乙醇提取物的进一步研究则表明该提取物能有效地激活caspase-2和caspase-3并诱发癌细胞凋亡。乙醇提取物在较短的时间(2h)内诱导细胞产生超氧化物。结论:白花蛇舌草乙醇提取物能有效地激发肿瘤细胞产生超氧化物并诱导肿瘤细胞凋亡。由于细胞内产生超氧化物能诱导细胞凋亡,我们认为白花蛇舌草的抗癌机制是通过激发肿瘤细胞产生大量超氧化物,致使癌细胞内氧爆破,最终激活凋亡信号网络而使癌细胞凋亡。     

白花蛇舌草抗肿瘤作用及其机制研究进展

白花蛇舌草Hedyotis diffusa willd为茜草科植物白花蛇舌草的全草,广泛分布于亚热带地区,我国长江以南各省诸有分布,别名蛇舌草、矮脚白花蛇利草、目目生珠草、蛇总管等近30个名称[1]。其味苦、甘、性寒,归心、肺、肝、大肠经。清热解毒,利湿,抗癌,主治肺热喘咳、咽喉肿痛、肠痈疮疡、毒蛇咬伤、热淋涩痛、水肿、痢疾、肠炎、湿热黄疸、癌肿等。近年来,许多学者对白花蛇舌草的抗肿瘤作用进行了研究,为此,我们对白花蛇舌草的抗肿瘤作用及其可能机制作一综述。1抗肿瘤作用1.1体外抗肿瘤作用钱韵等研究了白花蛇舌草提取物的体外抗肿瘤活性[2],…     

人参皂甙Rh2诱导人喉癌细胞株Hep-2凋亡的研究

目的:研究人参皂甙Rh-2(G-Rh2)诱导喉癌Hep-2细胞凋亡的作用。方法:应用流式细胞术、琼脂糖凝胶电泳检测G-Rh2处理前后Hep-2细胞的凋亡情况,并应用SP免疫组化法检测药物处理前后相关基因产物Bax、Bcl-2蛋白的表达,观察G-Rh2对喉癌Hep-2细胞的诱导凋亡作用及其对细胞周期的影响。结果:(1)G-Rh2具有诱导凋亡作用,且呈量效、时效关系,细胞凋亡率随G-RH2浓度及作用时间的增加而升高,并可将细胞周期阻滞于G0/G1期。(2)G-Rh2处理Hep-2后,Bax表达上调,Bcl-2在G-Rh2处理前后无明显变化。结论:G-Rh2对体外培养的Hep-2细胞具有诱导凋亡的作用,其机制可能与上调Bax的表达及细胞周期阻滞有关。     

CyclinE干扰RNA对肝癌HepG2细胞增殖和蛋白质组的影响

目的:研究siRNA对HepG2细胞株cyclinE表达的抑制及细胞生长的影响,并用双向凝胶电泳和质谱技术分析鉴定转染前后细胞内差异表达的蛋白质.方法:构建质粒表达载体pU6-cyclinE-shRNA,稳定转染肝癌HepG2细胞株,获得HepG2-cyclinEshRNA细胞系,RT-PCR检测cyclinE mRNA表达,MTT测定细胞的增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期.裂解、抽提HepG2-cyclinEshRNA细胞和Cl期肝癌HepG2细胞全蛋白,用双向电泳技术进行分离后.用Proxpress2D分析软件对两组细胞全蛋白质表达谱进行差异分析,并应用MALDI-TOF-MS和数据库搜索鉴定差异显著的蛋白点.结果:HepG2-cyclinE-shRNA细胞与转染空质粒HepG2细胞和未转染的HepG2细胞相比,生长速度减慢,出现G0/G1期细胞增多,C2/M和S期细胞减少.双向电泳后软件分析G1期肝癌HepG2细胞株平均检测到435±51(n=3)个蛋白点,HepG2-cyclinEshRNA细胞376±44(n=3)个,匹配分析,筛选出两组间差异6倍及以上且出现频率大于等于50%的蛋白点20个.应用质谱鉴定出角蛋白19、波形蛋白、神经多肽113等8个G1期HepG2细胞高表达蛋白点.结论:在HepG2细胞株中,导入eydinE干扰RNA,可有效抑制cyclinE的表达,进而使细胞增殖减缓,逆转其恶性表型.两组细胞蛋白质谱有明显差异,鉴定出G1期HepG2细胞高表达蛋白点8个,这些蛋白的高表达引起肿瘤的基因修饰异常、分化异常、增殖紊乱,肿瘤侵袭转移.     

热疗对人肝癌细胞株HepG2生长影响的体外研究

目的:探讨热疗对人肝癌细胞株HepG2生长的影响.方法:人肝癌细胞株HepG2细胞常规方法培养,采用水浴加热法(43.0℃)分别加热0.5h、1h和1.5h.处理后继续培养48h、72h、96h、120h和144h,绘制生长曲线;处理后分别培养0h、3h、6h、12h和24h,倒置显微镜观察细胞的形态变化.结果:随着加热时间的延长HepG2细胞数明显减少(P＜0.05,P＜0.01),细胞的形态也发生明显病理变化.结论:热疗对人肝癌细胞株具有细胞毒性作用,加热时间对癌细胞的生长有重要影响,热疗作为治疗肝癌的一种辅助疗法,值得进一步研究.     

索拉菲尼对人肝癌细胞株HepG2抑制作用的研究

目的:探讨分子靶向药物索拉菲尼(Sorafenib)在体外对人肝癌细胞株HepG2的抑制作用.方法:采用MTT法检测Sorafenib对HepG2细胞的增殖抑制率,流式细胞仪分析细胞周期和凋亡率.结果:Sorafenib能明显抑制HepG2细胞增殖,呈时间-剂量依赖效应;6μmol/L的Sorafenib理HepG2细胞72d,时,HepG2 细胞周期中的S期比例明显升高,G0-G1期、G2-M期比例明显下降,凋亡率明显上升(P<0.05,P<0.01).结论:Sorafenib对体外人肝癌HepG2细胞具有明显的抑制作用,主要表现为抑制其增殖和促进其凋亡.     

紫杉醇诱导HL—60细胞凋亡的研究

目的：观察抗微管药紫杉醇对急性白血病细胞株HL－60是否具有凋亡诱导作用,并进一步研究bcl－2基因在此过程中的作用。方法：（1）以紫杉醇处理HL－60细胞,观察细胞生长抑制作用的时间效应和剂量效应,在光镜和电镜下观察细胞形态变化;（2）用流式细胞仪检测药物孵育前后细胞凋亡率（AP）的变化;（3）用RT－PCR法检测药物孵育前后bcl-2基因的表达水平。结果：（1）在一定剂量和时间范围内紫杉醇能抑制HL－60细胞生长;（2）紫杉醇能诱导HL－60细胞凋亡,并显示剂量效应：（3）在紫杉醇诱导HL－609细胞凋亡过程中,bcl－2基因表达水平下调。结论：紫杉醇能诱导HL－60细胞凋亡;bcl-2基因参与了紫杉醇诱导HL－60细胞凋亡的调控。     

三氧化二砷抑制神经母细胞瘤SK-N-SH细胞增殖及诱导凋亡的初步研究

目的：探讨三氧化二砷（AS2O3)抑制神经母细胞瘤SK－N－SH细胞增殖及诱导凋亡的作用。方法：①采用MTT法测定不同浓度的As2O3在不同时间对SK－N－SH细胞增殖的抑制率；②用TUNEL－POD法检测不同浓度的As2O3诱导SK－N－SH细胞凋亡的情况。结果：①各浓度组As2O3均可抑制SK－N－SH细胞增殖，而且延长作用时间比增加作用浓度更能增强药物的抑制作用；②两个浓度的As2O3均可诱导SK－N－SH细胞凋亡，且凋亡指数与浓度高低有关。结论：As2O3可以通过诱导神经母细胞瘤SK－N－SH细胞凋亡而抑制其增殖，有一定的临床应用价值。     

桂枝茯苓丸诱导卵巢癌HO8910细胞凋亡的研究

目的：探讨桂枝茯苓丸对卵巢癌细胞株HO8910的抑制增殖效应及凋亡诱导作用。方法：用桂枝茯苓丸处理HO8910细胞，采用MTT法检测药物对细胞的抑制作用，倒置显微镜观察细胞形态学改变，以及应用流式细胞仪观察细胞凋亡过程中细胞周期的变化。结果：在桂枝茯苓丸作用下，HO8910细胞呈凋亡改变，DNA琼脂糖凝胶电泳呈典型的凋亡特征。细胞凋亡的同时，细胞周期发生特定的改变。结论：桂枝茯苓丸能抑制卵巢癌细胞增殖，能诱导卵巢癌细胞凋亡。     

电离辐射对HepG2细胞系细胞周期的影响

目的:探讨放疗对人肝癌细胞系HepG2细胞细胞周期的影响.方法:以人肝癌细胞系HepG2细胞为研究对象:分别以2Gy、4Gy、6Gy、8Gy和10Gy吸收剂量的6MV-X线照射HepG2细胞,照射后培养24h;以4Gy吸收剂量的6MV-X线照射HepG2细胞,照射后分别培养6h、12h、24h和48h;以未予射线照射的同步培养细胞为对照.采用流式细胞技术检测不同照射剂量及照射后不同时间点HepG2细胞细胞周期的变化.结果:2Gy、4Gy、6Gy、8Gy和10Gy剂量6MV-X线照射后培养24h,HepG2细胞表现为随着照射剂量的增加,G1期细胞百分率下降;6Gy、8Gy和10Gy剂量组HepG2细胞表现为G2/M期阻滞.4GyX线照射后培养6h,即可观察到G2/M期阻滞,阻滞峰值为正常的56倍;然后细胞被释放,再度进入细胞周期或死亡.结论:不同剂量X线照射人肝癌细胞系HepG2细胞,大分割剂量组主要诱导G2/M期阻滞;4Gy剂量射线照射后,S期细胞阻滞明显,并与G2/M期阻滞同步解除,阻滞解除后启动增殖或进入凋亡.     

不同浓度五味子乙素对人胃癌细胞株MGC-803增殖、凋亡的影响

目的：观察五味子乙素诱导人胃癌细胞株MGC-803凋亡作用。方法：用10、50、100、200μmol/L浓度五味子乙素作用胃癌细胞株48 h,倒置显微镜下观察细胞增殖情况;MTT法检测五味子乙素对细胞增殖的抑制作用;凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡。结果：倒置显微镜下,随着五味子乙素作用浓度升高,细胞增殖能力随之下降;MTT法亦检测到上述结果;当五味子乙素作用浓度是100μmol/L时,可检测到明显的凋亡细胞。结论：高浓度的五味子乙素可诱导胃癌细胞株MGC-803细胞的凋亡,具有量效依赖关系。     

维生素E琥珀酸酯对人鼻咽癌CNE2细胞增殖、凋亡影响的实验研究

目的:探讨维生素E琥珀酸酯(Vitamin E Succinate,VES)在体外对人鼻咽癌CNE2细胞的生长抑制作用.方法:以5,10,20,40 mg/L浓度的VES作用于人鼻咽癌CNE2细胞,使用光镜、透射电镜、MTT法、流式细胞仪观察和检测作用24,48,72 h后细胞形态、增殖、凋亡及细胞周期分布情况.结果:...