大鼠急性甲醇中毒大脑皮质单核细胞趋化蛋白-1蛋白的表达

目的　观察大鼠急性甲醇中毒后单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）在大脑皮质的表达变化。 方法　应用通有混合气体（N2O/O2）的密闭有机玻璃箱并灌胃相应剂量甲醇溶液复制急性高剂量和低剂量甲醇中毒大鼠模型,运用Western Blot和免疫组化染色检测不同时间点大脑皮质中MCP-1的表达变化。 结果　Western Blot显示急性甲醇中毒后低剂量组和高剂量组MCP-1蛋白表达在12 h明显升高（P<0.01）,24 h达高峰,然后逐渐下降,3 d仍高于对照组（P<0.01）。高剂量组MCP-1蛋白表达在12 h和24 h高于低剂量组（P<0.05）,3 d 组MCP-1的表达无显著差异。免疫组化染色显示对照组大鼠大脑未见明显MCP-1阳性表达,急性甲醇中毒后,高剂量组24 h MCP-1阳性表达数增加,3 d达高峰,和对照组相比有显著差异（P<0.01）,阳性表达多集中在梨状皮质,1周阳性反应减少,但与对照组相比仍有显著差异（P<0.01）。 结论　大鼠急性甲醇中毒后,脑组织MCP-1蛋白表达显著增高并持续一定时间,可能参与了脑组织病理变化过程,程度与甲醇中毒剂量有关。     

单核细胞趋化蛋白-1与糖尿病肾病

单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)是一种特异性趋化因子，在糖尿病肾病 (diabetic nephropathy，DN)的发生发展中起重要作用。代谢性因素如高糖（HG）、糖基化白蛋白（glycated albumin， Gly-Alb）、氧化应激，蛋白激酶C(protein kinase C，PKC)等和血流动力学因素如肾素-血管紧张素系统（RAS）等均可上调肾小球内皮细胞、系膜细胞 (mesangial cell，MC)、小管上皮细胞（tubulus epithelial cells，TECs）中MCP-1基因和蛋白的表达，使单核/巨噬细胞在肾组织中聚集，通过多种机制引起肾脏损伤。     

单核细胞趋化蛋白-1在CNS疾病中的表达

中枢神经系统(CNS)并非免疫豁免区是最近几年来神经免疫学研究的进展之一,在用细菌脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱发的炎症反应中,CNS脑实质内的小胶质细胞、脑室周围、脉络膜、室管膜细胞均可检测到受体TLR2、TLR4(Toll—like recep—     

甘草甜素抑制肺纤维化大鼠肺组织单核细胞趋化蛋白-1的表达

目的: 观察甘草甜素对博来霉素(BLM)诱导的大鼠肺纤维化的干预作用及可能机制。方法: 随机将大鼠分为对照组、肺纤维化模型组、甘草甜素干预组。气管内注入博莱霉素造成动物模型后,于当天开始每天给药,分别于7 、28 d处死,取肺组织,行嗜伊红染色、Masson染色；检测肺组织匀浆中羟脯氨酸(HYP) 的变化; RT-PCR法测肺组织单核细胞趋化因子-1 mRNA的表达,免疫组化测肺组织单核细胞趋化因子-1蛋白的表达。结果: 干预组肺纤维化程度轻于模型组; 肺组织匀浆羟脯氨酸(HYP)含量显著低于模型组( P<0.01) ;在模型组 MCP-1第7 d表达就明显升高，第28 d下降，但仍高于对照组，干预组与模型组有同一规律，但均减弱，第7、28 d与模型组(M组)比较，P<0.05。结论: 甘草甜素能减轻博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化，这种作用可能部分是通过抑制MCP-1的表达而实现。     

人单核细胞趋化蛋白-1的研究进展

人单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)为一由76个氨基酸组成的单肽链,它既具有特异的单核细胞趋化活性,也具有激活单核细胞的活性,在机体防御、炎症恢复和抗肿瘤等方面起着重要作用。本文就MCP-1近几年来的研究进展作一综述。     

法舒地尔对大鼠动脉粥样硬化斑块中单核细胞趋化蛋白-1表达的抑制作用

目的探讨Rho/Rho激酶途径在大鼠动脉粥样硬化形成过程中的作用及机制。方法将30只健康雄性Wistar大鼠（体质量220～250g）,随机分为正常对照组、动脉硬化组和法舒地尔组,每组10只。正常对照组行假球囊损伤手术给予正常饮食,余两组每只大鼠给予30万U/kg维生素D3右下肢肌肉注射后用球囊行动脉拉伤,在基础饲料中加入2%胆固醇、0.5%胆酸钠、0.2%丙基硫氧嘧啶、维生素D3粉剂（1.25×10^6U/kg饲料）、3%猪油等饲养。法舒地尔组同时给予法舒地尔5mg/kg体质量,每日2次腹腔注射。喂养9周后空腹24h抽血并处死,检测血脂水平,自主动脉弓下约1cm处留取动脉组织1cm用4%甲醛溶液固定,行HE染色,用免疫组织化学法检测斑块中血管紧张素Ⅱ-1型受体（AT1R）和单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）蛋白的表达。结果动脉硬化组均形成了典型的粥样斑块;免疫组化半定量分析表明：动脉硬化组与正常对照组和法舒地尔组比较,AT1R和MCP-1蛋白均明显升高（P〈0.001）,法舒地尔组与正常对照组比较,AT1R和MCP-1蛋白的表达也明显升高,有明显差异（P〈0.05）。结论Rho/Rho激酶途径在大鼠动脉粥样硬化的形成过程中参与了重要的作用,该途径的激活与RAS系统的激活有密切关系,Rho激酶抑制剂的抗动脉粥样硬化作用可能是通过抑制了MCP-1的表达而起作用。     

叶酸降低高同型半胱氨酸血症大鼠主动脉单核细胞趋化蛋白-1的表达

目的： 探讨补充叶酸对高蛋氨酸(Met)喂养所致的高同型半胱氨酸（Hcy）血症大鼠主动脉单核细胞趋化蛋白（MCP-1）表达的影响。方法: SD大鼠30只随机分3组:即正常对照组(control)、高蛋氨酸组(Met)、蛋氨酸＋叶酸组(Met＋folate)，每组10只，分别给予普通饲料、普通饲料加1.7%蛋氨酸、普通饲料加1.7%蛋氨酸和0.006%的叶酸，饲养45 d，测定血浆总同型半胱氨酸浓度(thcy)，用免疫组织化学染色法及蛋白免疫印迹（Western blotting）法检测大鼠的主动脉单核细胞趋化蛋白MCP-1表达。结果: 高Met组血浆总同型半胱氨酸浓度明显高于control组(P<0.01)，Met＋folate组血浆总同型半胱氨酸浓度明显低于Hhcy组(P<0.01)； 高Met组大鼠主动脉表达的MCP-1明显多于control组(46.41±4.23 vs 15.73±2.74； P<0.05)，而Met＋folate组能抑制高同型半胱氨酸血症所致的主动脉MCP-1的表达(23.12±4.40 vs 46.41±4.23; P<0.05)。结论: 大鼠喂以高Met饲料45 d，可充分诱导高Hcy血症。而叶酸补充治疗，在显著降低血浆tHcy水平的同时，也降低了高同型半胱氨酸大鼠主动脉单核细胞趋化蛋白MCP-1的表达。     

IL-17对心肌细胞单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

目的:研究IL-17对原代培养心肌细胞中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的影响。方法:差速贴壁法分离乳鼠心肌细胞进行原代培养,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测心肌细胞IL-17R和MCP-1基因表达情况,并采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测心肌细胞培养上清中MCP-1蛋白的表达。结果:心肌细胞存在IL-17R的基因表达。IL-17呈浓度依赖式上调心肌细胞MCP-1基因和蛋白的表达水平,与不加刺激因子的对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。心肌细胞MCP-1 mRNA的表达量在IL-17作用4 h时达到高峰,随后开始下降,而IL-17作用下心肌细胞MCP-1蛋白的表达呈时间依赖式升高,与对照组相比有显著性差异(P<0.05)。结论:心肌细胞表达IL-17R。IL-17可上调心肌细胞MCP-1的表达,其作用与IL-17的浓度和作用时间有关。     

二十碳五烯酸抑制早期糖尿病肾病单核细胞趋化蛋白-1的表达

目的:观察二十碳五烯酸(EPA)对早期阶段的糖尿病肾病单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的影响。方法:体内实验中,KKAy/Ta小鼠随机分为2组:治疗组予以EPA1g·kg-1.d-1腹腔内注射共8周,对照组同步予以生理盐水注射,应用免疫组化和实时RT-PCR检测肾脏中MCP-1表达及巨噬细胞浸润的变化。应用ELISA方法检测高糖和EPA刺激后的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)上清MCP-1的表达。结果:EPA治疗后KKAy/Ta小鼠肾脏MCP-1的蛋白表达及巨噬细胞浸润明显减弱。实时RT-PCR结果显示EPA治疗组小鼠肾皮质MCP-1mRNA的表达明显低于对照组。25mmol/LD-葡萄糖作用72h可引起HUVECs分泌MCP-1明显增加,30μmol/L和50μmol/LEPA均可显著地抑制高糖诱导的MCP-1表达。结论:EPA降低了KKAy/Ta小鼠肾脏及高糖诱导的内皮细胞MCP-1的表达,提示EPA可能抑制早期糖尿病肾病的炎症反应。     

单核细胞趋化蛋白－1在大肠杆菌中的表达

将人单核细胞趋化蛋白－１（ＭＣＰ－１）的ｃＤＮＡ插入融合蛋白表达载体ｐＧＥＸ－４Ｔ－１中，构建成质粒ｐＧＥＸ／ＭＣＰ转化大肠杆菌ＪＭ１０９，经ＩＰＴＧ诱导后合成ＧＳＴ－ＭＣＰ－１融合蛋白。用１２％ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测在３０ｋＤ左右有新生蛋白条带出现，表达量约占菌体总蛋白的３１．７％。趋化实验证明，该产物具备明确的单核细胞趋化活性。     

单核细胞趋化蛋白—1在大肠杆菌中的表达

将人单核细胞趋化蛋白－１（ＭＣＰ－１）的ｃＤＮＡ插入融合蛋白表达载体ｐＧＥＸ－４Ｔ－１中，构建成质粒ｐＧＥＸ／ＭＣＰ转化大肠杆菌ＪＭ１０９，经ＩＰＴＧ诱导后合成ＧＳＴ－ＭＣＰ－１融合蛋白。用１２％ＳＣＳ－ＰＡＧＥ检测在３０ｋＤ左右有新生蛋白条带出现，表达量约占菌体总蛋白的３１．７％，趋化实验证明，该产物具备明确的单核细胞趋化活性。     

实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠单核细胞趋化蛋白-1的表达与临床评分的相关性

目的：探讨实验性变态反应性脑脊髓炎（EAE）大鼠脑和脊髓中单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的表达及其与临床评分的关系。方法：将Wistar大鼠分为正常组、佐剂（CFA）组和EAE组,取脑和脊髓制成石蜡切片,进行HE染色和MCP-1mRNA的原位杂交,并与各项临床指标比较。结果：EAE组的体重减轻、MCP-1 mRNA表达的阳性细胞百分数与正常大鼠、佐剂组相比显著性增加。EAE组大鼠MCP-1 mRNA的表达呈动态性变化,其MCP-1 mRNA先于临床症状高表达,并随临床评分的升高而升高,与临床评分呈正相关。结论：MCP-1是参与EAE发病的重要的炎性介质。     

人单核细胞趋化因子蛋白-1的临床研究进展

MCP-1作为趋化因子家族的一个主要成员，具有诱导单核细胞趋化及激活单核细胞的双重功能、在人体各器官的疾病中均有表达，同时又对机体的防御、炎症恢复及抗肿瘤发挥重要作用。本文就人单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）近年来在临床方面的研究进展作一综述。     

探讨肺纤维化时表达单核细胞趋化蛋白-1的主要效应细胞

目的研究凝血酶对人肺上皮细胞及正常人肺成纤维细胞释放单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的调节作用。方法人肺支气管上皮细胞（normal human bronchial epithelial cells,NHBE）、人肺癌上皮细胞系A549及正常人肺成纤维细胞（normal human lung fibroblasts,NH-LF）分别培养于96孔或6孔板培养板内,凝血酶诱导4h和24h后,收集上清液及细胞裂解液。ELISA方法检测MCP-1蛋白水平;实时荧光定量RT-PCR技术检测MCP-1mRNA水平。结果凝血酶可诱导NHBE、A549及NH-LF细胞释放MCP-1,但NH-LF细胞的MCP-1释放量远远高于NHBE及A549细胞;凝血酶还可诱导NH-LF细胞mRNA表达。结论人肺成纤维细胞可能是肺内表达MCP-1的主要来源细胞,因此在肺纤维化时可能起重要作用。     

尘螨抗原对支气管上皮细胞单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

目的探讨屋尘螨（Dermatophagoides pteronyssinus，Derp）抗原对支气管上皮细胞单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）表达的影响。方法使支气管上皮细胞BEAS-2B暴露于系列不同浓度（0．02、0．2．2、20μg／ml）的Derp抗原24h至96h，分别观察各时间点细胞的表现，然后用酶联免疫法（ELISA）检测其细胞上清MCP-1的浓度表达。结果正常为未加Derp抗原。表现为单层细胞完全平铺；实验各组在抗原的刺激下，表现为随着浓度和时间的增加，细胞逐渐变瘦长，细胞间距逐渐增大；在无抗原刺激因素培养条件下的对照组，MCP-1释放水平很低，而在加入Derp抗原组，引起细胞分泌MCP-1蛋白水平的显著增加，并随着时间和浓度增加，MCP-1蛋白的表达水平呈上升趋势，特别是在高浓度组，即20μg／ml抗原组，各时间点MCP-1的表达差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论Derp抗原刺激气道上皮细胞，引起支气管上皮损伤和脱落等气道炎症反应，激发单核巨噬细胞产生大量的MCP-1，促成和加重气道炎症反应，因此认为MCP-1可能参与哮喘疾病的某些过程。     

流体切应力下血管内皮单核细胞趋化蛋白-1的表达

目的研究流体切应力对人血管内皮细胞的单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的影响,探讨血流动力在动脉粥样硬化(AS)发生早期中的作用.方法利用平行板流动腔对血管内皮细胞施加不同切应力,分别采用夹心酶联免疫吸附测定(EL,ISA)及逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测MCP-1蛋白及mRNA水平.结果以0.72Pa切应力进行不同时间作用,0.5h后MCP-1mRNA即达到静态时(0.160±0.037)的4倍(0.684±0.033),5h时略有升高,达0.707±0.089,12h后下降到低于对照组的水平(0.036±0.006,P＜0.001).灌流液中MCP-1蛋白时间依赖性增加,但5h后增长趋缓;而在不同切应力(0.30、0.72、2.40Pa)相同时间(5h)下,0.72Pa的作用最显著,MCP-1蛋白比静态对照增加了2倍多,mRNA水平则升高达4倍.结论MCP-1的表达对切应力的变化反应强烈,持续稳定的切应力则下调MCP-1的表达,此研究结果表明血流紊乱可促进AS病变的发生发展.     

突触后密度蛋白-93在大鼠脊髓损伤后的表达变化

目的 探讨突触后密度蛋白-93(PSD-93)在脊髓损伤(SCI)后的表达变化以及定位情况.方法 使用改良Allen法制备大鼠急性脊髓损伤模型,致大鼠脊髓(T9、T10)重度撞击伤.采用实时定量PCR(Real-time PCR)和Western blotting测定损伤后各时间段PSD-93 mRNA及其蛋白水平在脊髓中的表达变化.采用免疫荧光双标方法检测PSD-93在正常脊髓中的分布以及损伤后的定位改变.结果 PSD-93 mRNA水平在SCI后呈现逐渐下降的趋势,在3d降到最低水平;蛋白水平则在SCI后显著上调,于1d达高峰.免疫荧光双标显示,PSD-93在SCI后除与神经型一氧化氮合酶(nNOS)存在着共定位之外,还高表达于损伤局部活化的小胶质细胞和星形胶质细胞.结论 脊髓损伤后PSD-93在基因和蛋白水平呈现明显的时相变化,并且与nNOS、活化的胶质细胞存在共定位,提示PSD-93参与了脊髓继发性损伤过程.     

单核细胞趋化蛋白-1在EAE大鼠血清中的动态变化及意义

目的 探讨单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)在实验性自身免疫性脑脊髓炎(ex-perimental autoimmune encephalomyelitis,EAE大鼠血清中的动态变化及意义.方法 以豚鼠脊髓匀浆(guinea pig spinal cord ho-mogenate,GPSCH)加完全弗氏佐剂(complete freund's adjuvant,CFA)作为抗原,给予Wistar大鼠四足皮内注射,建立EAE模型.采用双抗体夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA)检测EAE大鼠免疫后7、14、21 d不同时间段血清中MCP-1水平.结果 EAE组免疫后第7天血清MCP-1水平即出现明显升高,早于临床症状的发生;免疫后第14天随着EAE大鼠进入症状高峰期,血清MCP-1水平亦达高峰;免疫后第21天MCP-1水平恢复到正常水平.与NS组和佐剂(CFA)组比较,EAE组大鼠免疫后第7、14天MCP-1水平显著性增高(P＜0.01),并且EAE组大鼠免疫后第14天MCP-1水平与临床评分呈显著正相关(r=0.8993,P=0.0001).结论 MCP-1 在EAE免疫学发病机制中具有重要作用,为深入研究多发性硬化(multiple sclerosis,MS)的发病机理及探索新的有效治疗途径提供了理论依据.