雷公藤属3种植物不同群体和个体中雷公藤甲素的研究

目的测定雷公藤属3种植物(雷公藤、昆明山海棠和黑蔓)不同群体和个体中雷公藤甲素(tripto lide),为评价雷公藤药材质量和寻找雷公藤的优质种质奠定基础。方法建立雷公藤甲素HPLC测定方法,并测定了全国主要分布区25个群体91个个体的木质部和韧皮部中的雷公藤甲素。结果黑蔓的雷公藤甲素质量分数很低;雷公藤和昆明山海棠种间的雷公藤甲素差异不明显,个体质量分数木质部为1.0×10-6~5.83×10-5;韧皮部为2.3×10-6~1.030×1-0 4。结论雷公藤和昆明山海棠不同个体雷公藤甲素质量分数最高值与最低值相差约50倍,不同居群雷公藤甲素质量分数最高值与最低值相差10多倍,不同来源的药材质量差异极大,严重影响用药的安全性;雷公藤甲素质量分数高的居群位于浙江西南部和中部、湖南新宁、贵州雷山和安徽黄山;湖南新宁、贵州雷山和浙江江山居群中有雷公藤甲素质量分数极高的个体,值得进一步研究,以寻找质量分数高的优良单株。     

雷公藤药材存贮期间成分变化的研究

目的研究雷公藤药材中活性成分之一雷公藤甲素的稳定性。方法以甲醇-水为流动相,采用HPLC梯度洗脱法,测定了雷公藤药材的根、枝、叶中雷公藤甲素在不同存贮期的含量。结果雷公藤甲素在雷公藤药材中的含量随着存贮时间的增长而下降。结论雷公藤甲素在雷公藤药材中有不稳定现象存在。      

雷公藤中雷公藤甲素和雷公藤乙素的测定

目的建立雷公藤药材中雷公藤甲素和雷公藤乙素的HPLC定量测定方法。方法药材经95%乙醇回流提取,过中性氧化铝柱,三氯甲烷-甲醇(9:1)洗脱,洗脱液蒸干后用流动相定容。色谱柱:Hypersil BDS色谱柱(250mm×4.0mm,5μm)。流动相为乙腈-水(23:77)(雷公藤甲素),乙腈-水(16:84)(雷公藤乙素)。检测波长:220nm。结果雷公藤甲素与雷公藤乙素线性范围均在5～100μg/mL,线性关系良好。平均回收率分别为97.5%和97.3%,RSD<2%(n=9)。结论本方法重现性好,灵敏度高,可用于雷公藤中雷公藤甲素和雷公藤乙素的测定。     

薄层扫描法测定复方雷公藤合剂中雷公藤甲素的含量

目的 :研究复方雷公藤合剂中雷公藤甲素的含量测定。方法 :采用薄层扫描进行测定。结果 :雷公藤甲素点样量在 0 .2 1μg～ 1.2 5 μg之间线性关系良好 ,相关系数 r=0 .9989。回收率为 96 .4 % ,RSD=2 .14 %。结论 :本法灵敏、简便、准确 ,可用于本制剂的质量控制     

薄层扫描法测定复方雷公藤合剂中雷公藤甲素的含量

目的:研究复方雷公藤合剂中雷公藤甲素的含量测定.方法:采用薄层扫描进行测定.结果:雷公藤甲素点样量在0.21μg～1.25μg之间线性关系良好,相关系数r=0.998 9.回收率为96.4%,RSD=2.14%.结论:本法灵敏、简便、准确,可用于本制剂的质量控制.     

HPLC法测定雷公藤提取物中雷公藤甲素及两种生物碱的含量

目的 建立高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定雷公藤提取物中雷公藤甲素、雷公藤精碱和wilfornine F的含量.方法 采用YMC-Pack ODS-A(4.6 mm×150 mm,5 μm)色谱柱,以乙腈-0.02 mol/L磷酸二氢钠水溶液为流动相梯度洗脱,210 nm波长处检测,流速1.0 mL/min,温度25℃.结果 雷公藤甲素、雷公藤精碱和wilfornine F在一定范围内均呈良好的线性关系,平均加样回收率在98.81%～99.84%范围内,RSD≤1.42%(n=6).结论 该方法准确、重复性好,适用于雷公藤提取物的质量评价.     

RP-HPLC法测定雷公藤甲素外用凝胶中雷公藤甲素的含量

目的:建立RP-HPLC法测定雷公藤外用凝胶中雷公藤甲素的含量.方法:采用Diamonsil C18色谱柱(250mm×4.6mmi.d,5μm),检测波长为220nm,流动相为甲醇:水(46:54),流速1ml/min,柱温为室温.结果:在10.24～51.20μg/ml间,雷公藤甲素的浓度与峰面积积分值呈良好的线性关系(γ＝0.999 7),方法回收率为98.3%,RSD为0.23%(n=5).结论:此方法准确、简便,可用于雷公藤甲素外用凝胶中雷公藤甲素的含量测定.     

超声提取雷公藤中雷公藤甲素的提取工艺研究

目的:研究超声提取雷公藤甲素的最佳提取工艺。方法:采用正交试验法进行优选,并以雷公藤甲素含量为指标,采用HPLC法测定雷公藤甲素含量。结果:根据实验所得数据表明,雷公藤甲素的最佳提取工艺:提取溶剂为乙酸乙酯,药剂比为1∶15,提取时间为60 min。结论:该方法简便快捷,可作为超声提取雷公藤中雷公藤甲素最佳的提取工艺。     

HPLC法测定桂林产粉背雷公藤茎枝中雷公藤甲素的含量

目的：运用高效液相色谱法测定桂林产粉背雷公藤茎枝中雷公藤甲素含量。方法：色谱柱为C8柱（150mm×4．6mm,5μm）,流动相为甲醇-水（45：55）,检测波长217nm,流速1mL／min,柱温29℃。结果：雷公藤甲素在0．5～10mg／L范围内呈良好的线性关系,r=0．9999;平均加样回收率为99．61％;RSD为1．68％（n=5）。结论：本方法检测快速,定量准确,重现性好,可用于雷公藤甲素的含量测定。     

雷公藤甲素对外周血单个核细胞分泌促炎、抑炎细胞因子的影响

【目的】探讨雷公藤甲素(triptolide A,TA)对健康人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)分泌促炎、抑炎细胞因子的影响。【方法】分离培养健康人PBMC,采用脂多糖(LPS,终浓度为1μg/mL)或LPS 植物血凝素(PHA,终浓度为25μg/mL)刺激培养细胞,并给予TA(终浓度为5.4 ng/mL)处理,收集培养上清液,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测上清液中肿瘤坏死因子α(tumour necrosis factor-,αTNF-α)、白介素4(interleukin-4,IL-4)、白介素10(interleukin-10,IL-10)的含量。【结果】TA能抑制LPS或LPS PHA刺激的PBMC分泌TNF-α和IL-10,且对正常人PBMC分泌IL-10的抑制作用强于对TNF-α的抑制作用,但对IL-4的分泌无显著性影响。【结论】雷公藤甲素可不同程度地抑制促炎性细胞因子TNF-α及抑炎性细胞因子IL-10,使促炎、抑炎两种作用趋于平衡。     

乙型肝炎病毒相关性肾炎肾组织中HBV DNA的原位检测

目的：检测HBV DNA在乙型肝炎病毒相关性肾炎肾组织中的分布,探讨乙型肝炎病毒相关肾炎的发病机制。方法：应用针对HBV全基因组的DNA探针进行原位杂交及原位PCR研究,对45例肾炎病人肾组织中的HBV DNA进行检测。结果：肾组织HBV抗原阳性的38例标本中,肾组织HBV DNA的检出率为71%（27/38）;其中,HBV相关肾炎HBV DNA的阳性率为73%（19/26）,IgA肾病及狼疮肾炎伴HBV抗原沉积病例HBV DNA的阳性率为67%（8/12）。原位杂交显示HBV DNA以肾小管上皮细胞胞浆分布为主;原位PCR方法可使阳性信号增强,并可见HBV DNA在部分肾小管细胞胞核、肾小球上皮细胞及系膜细胞的胞核和胞浆以及肾小球基底膜内均有分布。结论：HBV在肾组织内存在感染及复制,其在乙型肝炎病毒相关性肾炎的发病机制中具有重要作用。     

肾移植术后重症肺炎患者免疫抑制剂的减量应用

目的回顾性分析肾移植后重症肺炎患者免疫抑制剂的应用。方法自2003年3月至2007年12月期间共有10例移植后的重症肺炎患者,减少免疫抑制剂用量,并监测减药前后患者肾功能变化,移植肾彩色多普勒超声检查移植肾大小、搏动指数、阻力指数、肾皮质厚度等指标,同时根据病原学诊断抗感染治疗,必要时机械辅助通气缓解缺氧。结果10例重症肺炎患者中1例死于呼吸衰竭,9例治愈。减量应用免疫抑制剂前以及减药后15天、1月、恢复免疫抑制剂用量后3月,肌酐、尿素氮减药前后不同时间比较差异无统计学意义。移植肾彩色多普勒超声检查移植肾大小、搏动指数、阻力指数、肾皮质厚度等减药前后不同时间比较差异均无统计学意义。结论肾移植术后严重肺炎患者减少免疫抑制剂用量,有利于感染控制,不会引起排斥反应的发生。     

中脑多巴胺受体亚型在针刺减轻海洛因欣快记忆激发中的作用

目的：研究针刺减轻欣快记忆激发的中脑多巴胺受体机制。方法：将无天然位置偏爱的90只雄性昆明种小鼠随机分为空白组、针刺空白组、模型组、模型针刺腧穴组、模型针刺非穴组、模型纳曲酮组,造海洛因康复期心理依赖模型,选用低频电针作用于实验小鼠的＂三阴交＂、＂内关＂、＂四神聪＂,每日1次,10次为1疗程;采用免疫组化检测中脑DA受体亚型D1、D2、D3、D4活性,用原位杂交法检测D1、D2、D3、D4mRNA表达的变化。结果：小鼠造模后,中脑DA受体亚型D1、D2、D3、D4活性极显著性升高（P〈0.01）,受体相应的mRNA表达极显著性增多（P〈0.01）;治疗后针刺腧穴组的D1、D2、D3活性极其mRNA表达均降低（P〈0.01）,针刺腧穴组D1、D2、D3活性及其mRNA表达显著低于针刺非穴组（P〈0.05）,针刺腧穴组D1、D2活性极其mRNA表达显著低于纳曲酮组（P〈0.01）。治疗后模型组、模型针刺腧穴组、模型针刺非穴组、模型纳曲酮组间D4活性极其mRNA表达水平无显著性差异（P〉0.05）。结论：针刺减轻海洛因心理依赖小鼠欣快记忆的激发,主要通过下调中脑多巴胺受体亚型D1、D2、D3的活性及其mRNA表达来实现。针刺腧穴组与针刺非穴组相比对D1、D2、D3活性极其mR-NA表达下调作用更显著,针刺腧穴组与纳曲酮相比对D1、D2活性极其mRNA表达下调作用更显著。D4可能没有参与针刺减轻欣快记忆激发途径。     

胃液血液中铁蛋白测定对胃癌的临床意义

用放射免疫法测定了２９名胃癌、２９名慢性萎缩性胃炎、３１名消化性溃疡患有液和血液中铁蛋白含量，以２８例慢性浅表性胃炎作为对照。结果表明：胃癌组胃液铁蛋白浓度较其他各组明显增高，差异非常显著，慢性萎缩性胃炎组较对照组亦显著升高，而血液铁蛋白浓度在各组间无显著差异。     

子宫内膜切除术治疗功能失调性子宫出血

目的：探讨子宫膜切除术治疗功能失调性子宫出血的疗效，预后及影响因素，方法：选择有手术指征的功能失调性子宫出血患者38例，使用被动式连续灌流电切镜行子宫内膜切除术，术前均子宫颈准备和机械性子宫内膜预处理。结果：手术均顺利完成，术后随访3－20个月，月经改善总有效率为92．1％，结论：子宫内膜切除术可以有效改善月经情况，术前机械性子宫内膜预处理可薄化子宫内膜，保证子宫内膜切除的手术效果。     

同型半胱氨酸对大鼠心肌细胞钙摄取的影响

目的：研究同型半胱氨酸（ｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅ，ＨＣＹ）对心肌细胞钙摄取的影响及其作用机制。方法：采用同位素技术测定培养大鼠心肌细胞钙的摄取，观察不同ＨＣＹ浓度对培养心肌细胞钙摄取的影响及蛋白激酶Ｃ（ｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅＣ，ＰＫＣ）抑制剂或蛋白磷酸酶抑制剂与ＨＣＹ同时培养对培养心肌细胞钙摄取的影响。结果：ＨＣＹ呈浓度依赖性促进心肌细胞钙的摄取，ＨＣＹ促进心肌细胞钙摄取的作用为ＰＫＣ抑制剂Ｈ７和多粘菌素（ｐｏｌｙｍｙｃｉｎＢ，ＰＢ）所抑制，并且受蛋白磷酸酶抑制剂Ｏｋａｄａｉｃａｃｉｄ作用而增强。结论：ＨＣＹ促进心肌细胞钙摄取，可能与ＰＫＣ所介导的蛋白磷酸化过程有关。     

甲型H1N1流感病毒感染小鼠的发病机制

目的 甲型H1N1 流感病毒A/California/7/2009感染BALB/c小鼠,研究甲型H1N1流感病毒病毒性肺炎发病机制.方法 4～6 周龄雌性BALB/c 小鼠60只,随机分为2组,实验组和对照组,每组30只.CA7 流感病毒滴鼻制备甲流病毒感染小鼠模型.攻毒后第5天解剖实验和对照组小鼠,取肺组织,测定肺组织中IL-2,IL-6,TNF-α含量.结果 结果实验组肺组织中IL-6,TNF-α,水平明显高于对照组,IL-2水平明显低于对照组,差异均有显著性(P<0.05).结论 IL-6、TNF-α、IL-2这3种细胞因子在感染甲流病毒后的显著性变化与病毒感染后的肺组织病理损伤有密切的关系.     

血浆同型半胱氨酸水平检测对原发性高血压患者患冠心病的诊断价值

【目的】探讨血浆同型半胱氨酸（Homocysteine ,Hcy）水平检测对原发性高血压（Essential hyperten-sion ,ES）患者患冠心病的诊断价值。【方法】从2011年5月至2013年4月,对本院173例确诊为ES病患者进行冠脉造影检查。由冠脉造影检查结果分为高血压组（A组,76例）和高血压与冠心病并发组（B组,97例）;检测两组患者的 Hcy水平并进行分析比较。另外以血浆内 Hcy含量15μmol/L为分界值,比较不同Hcy水平患者发生冠心病的概率。【结果】通过Hcy水平比较发现B组患者 Hcy水平为（21．1±7．9）μmol/L ,明显高于A组（14．0±4．5）μmol/L ,且两组相比较差异有显著性（ P＜0．05）。另外以血浆内Hcy含量15μmol/L为分界值,得出Hcy正常组患冠心病概率为35．1％,比Hcy偏高组患冠心病概率67．7％明显更低,且两组相比较差异有显著性（ P＜0．05）。【结论】Hcy水平检测对ES发展为冠心病的概率具有一定的预测价值。     

对危及生命的肝肾出血行动脉栓塞止血的评价

本文总结8例危及生命的肝肾出血经导管动脉栓塞(TAE)的体会。所有病人均在选择性动脉造影明确诊断后行TAE治疗。其中肝破裂3例,晚期肾癌5例,作者采用钢圈加明胶海绵作为栓塞剂进行TAE术,使严重的肝肾出血迅速控制。本文讨论了TAE的临床应用价值、栓塞剂使用及治疗效果等。     

气相色谱法测定血液中毒鼠强的含量

目的:对血液中的毒鼠强进行提取和检测.方法:采用酸水解及GC/FPD、GC/MS分析的方法,研究酸水解过程中的水解温度、水解强度等方面的影响,并对毒鼠强的GC/MS图谱进行解析,建立了一个定性准确、提取效率高、干扰少的毒鼠强提取分析方法.结果:毒鼠强工作曲线在0.01～0.2μm/μl之间呈线性关系,相关系数r=0.9999.与传统的液-液提取方法相比,血液样品毒鼠强的检出率提高1.69倍.结论:本方法可应用于生物样品中毒鼠强的提取和检测.