BALB/c系裸小鼠雌性纯合子繁殖试验

裸小鼠是一种先天性免疫缺陷型动物。一般认为,雌性纯合子(nu/nu)裸小鼠缺乏生育能力或母性差,故采用nu/+((?))×nu/nu((?))方式来繁殖生产。作者在BALB/c裸小鼠的饲养繁殖过程中,曾发现雌性纯合子有受孕现象,继而进一步作繁殖试验,旨在探讨雌性纯合子裸小鼠的可育性,并期望寻找新的繁殖方式,加速裸小鼠的繁殖生产速度。材料与方法 1.试验动物以BALB/c系裸小鼠4对为试验组,BALB/c系nu/+((?))×nu/nu((?))3对为对照组,均由中科院上海实验动物中心购入(购入时为4周龄),按雌雄单配式繁殖。     

BALB/c裸小鼠人宫颈癌模型的建立

目的采用在裸鼠腹部皮下移植人原代宫颈癌组织的方法,研究其在裸鼠体内的成瘤性,并初步探讨此动物模型腹部肿瘤的生物学特性。方法将人宫颈癌组织接种于裸鼠腹部皮下建立人宫颈癌裸鼠模型,观察荷瘤鼠成瘤、一般特性和移植瘤生长情况。80d后处死裸鼠,取肿瘤块做病理切片;用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测肿瘤组织、外周血和肝、脾等脏器HPV DNA表达情况。结果接种后第42天在接种部位可见结节,第80天后肿瘤块平均表面积为(50.0±5.1)mm2,肿瘤移植平均成功率为90.5%。移植瘤生长以局部浸润为主,未见转移瘤。组织学检查结果示所有移植瘤与种植前肿瘤组织病理检查结果一致,HPV DNA呈阳性,且为高危型人乳头瘤病毒HPV16型阳性。而外周血与肝、脾等脏器HPV DNA呈阴性。结论本研究所建立裸鼠人宫颈癌组织模型成瘤率较高,操作简便,可保持人宫颈癌生物学特性,为进一步研究宫颈癌的发病机制提供了重要的科研工具。     

BALB/c系裸小鼠脏器重量、脏器系数的测定

目的测定SPF级BALB／c裸小鼠脏器重量、脏器系数的生物学特性指标。方法选用成年SPF级BALB／c裸小鼠38只，雌雄各半，分别测定体重和12个脏器重量，计算脏器系数。结果雌雄裸小鼠肾、脑重量差异有显著性（P〈0．01），体重、心、肝、肾上腺重量差异有显著性（P〈0．05），脑系数、肾上腺系数差异有显著性（P〈0．01）。肾系数差异显著（P〈0．05）。雄性裸小鼠体重与心、肝、肾、脑、肾上腺、睾丸有线性关系。雌性裸小鼠体重与肝、肾、胃有线性关系。结论BALB／c雌雄裸小鼠的体重、心重量、肝重量、肾重量、脑重量、肾上腺重量、肾系数、脑系数、肾上腺系数具有差异，其体重与某些脏器存在一定的线性关系。     

人肝癌细胞HepG2接种于BALB/C裸小鼠移植瘤的性别差异

目的 研究性别对人肝癌细胞HepG2接种于BALB/C裸小鼠成瘤及移植瘤生长趋势的影响.方法 18只4~6周龄BALB/C裸小鼠雌雄各半,按照性别分成雌雄两组,每组9只,将全部裸小鼠肩胛部接种处于对数生长期且浓度为1.0×107/mL的HepG2细胞0.2 mL,10 d后观察两组的成瘤情况并测量肿瘤体积.结果 雌性组成瘤模型4只,成瘤率为44.44%;雄性组成瘤模型9只,成瘤率为100.00%,差异有统计学意义(P=0.029);造模成功的移植瘤体积走势图显示移植瘤生长速度雄性组大于雌性组.结论 人肝癌细胞HepG2接种于BALB/C裸小鼠成瘤率及移植瘤生长速度有明显的性别差异.     

BALB/c小鼠肥大细胞瘤/白血病模型的建立

目的研究建立BALB/c小鼠肥大细胞瘤/白血病模型。方法 BALB/c小鼠尾静脉注入小鼠肥大细胞瘤P815细胞,实验按每只小鼠接种细胞数量分为1×107/只组、5×106/只组、2.5×106/只组、1×106/只组、5×105/只组、1×105/只组和溶剂(RPMI1640培养液)对照组。观察小鼠的生存状态、体重及肝肺脾(重量、形态、病理)、染色体、血涂片、骨髓涂片、白细胞及血小板计数。结果注入P815细胞≥1×106/只的所有组小鼠均死亡,<1×106/只的所有组生存良好,且死亡小鼠的生存时间与注入细胞数量呈负向依赖关系(P<0.05)。死亡组小鼠体重较注射前相当或减轻、肝肺脾重较对照组及未死亡组显著增加(P<0.05);肝质地变硬,表面可见大量大小不一的白色结节突起,部分脾肺可见出血梗死灶,病理示肝脾有大量异形肥大细胞瘤细胞浸润;脾细胞染色体分析可见肥大细胞瘤细胞的非正常染色体核型;白细胞和血小板计数较对照组降低(P<0.01),血涂片可见少量肥大细胞瘤细胞,骨髓涂片示骨髓原始细胞比例增高。结论 P815细胞通过静脉注射能使BALB/c小鼠形成肥大细胞瘤/白血病,可作为肿瘤实验研究的一种模型构建方法。     

不同性别BALB/c裸小鼠血液学及脏器系数观测

目的 测定SPF级BALB/c裸小鼠血液学参数,脏器重量、脏器系数,并进行性别间比较.方法 选取10周龄SPF级BALB/c裸小鼠80只,雌雄各半.40只采集血液,运用血液分析仪测定血液常规指标;40只活体称重,采集血液,运用全自动生化分析仪测定血生化指标,并采集脏器测定脏器重量,计算脏器系数.结果 雌雄裸小鼠测定项目比较,①雄性白细胞数、平均血红蛋白量、血小板、淋巴细胞显著高于雌性、红细胞显著低于雌性（P＜0.01）,红细胞平均体积、血小板压积与雌性差异达到显著水平（P＜0.05）.②雄性碱性磷酸酶、肌酸激酶、天门冬氨酸氨基转移酶显著高于雌性（P＜0.01）,白蛋白显著高于雌性（P＜0.05）.③雄性体质量、肾、膀胱脏器重量显著高于雌性,差异达到极显著水平（P＜0.O1）,肝脏器重量显著高于雌性,差异达到显著水平（P＜0.05）雌雄裸小鼠脏器系数相比较,雄性裸鼠的心、脾脏器系数显著低于雌性,差异达极到显著水平（P＜0.01）,雄性肾的脏器系数显著高于雌性,肺、肾上腺的脏器系数显著低于雌性（P＜0.05）.结论 性别对SPF级BALB/c裸小鼠血液学参数、脏器重量和脏器系数有一定的影响.     

BALB/c裸小鼠血清胃泌素、胃动素含量测定

胃泌素和胃动素是具有生物活性的多肽类激素,能促进肠胃运动和消化液分泌［１］,测定其含量对诊断肿瘤及判断预后有一定意义［２,３］。供人类肿瘤异种移植的动物多选ＢＡＬＢ／ｃ裸小鼠,为此作者测定了ＢＡＬＢ／ｃ裸小鼠血清胃泌素和胃动素含量,以供有关动物实验参考。１．材料与方法（１）实验动物　ＢＡＬＢ／ｃ裸小鼠（上海市肿瘤研究所实验动物室生产）２０只,６～８周龄,体重２０ｇ左右,雌雄各半,动物饲养与实验在ＳＰＦ级动物实验室内进行。（２）测定方法　清晨空腹心脏采血２ｍｌ,注入干燥管内,１ｈ内４℃环境下２５０…     

BALB/c小鼠胸腺细胞发育模型的建立

目的建立胸腺细胞体外研究模型,为T细胞早期发育及相关实验提供有效技术平台。方法无菌摘取14.5天龄胚鼠胸腺,胸腺器官体外培养,FACS检测不同培养时间点细胞存活状况和表型变化,计数每个胸腺小叶的细胞数变化。结果胸腺体外培养显示:经过6d的培养,胸腺细胞存活率均在88.0%以上,由双阴性发育至双阳性细胞,CD4+CD8+双阳性细胞由培养第0天的0上升到第6天的89.07%;细胞数量随胸腺发育(培养时间的增加)而增多,每个胸腺小叶胸腺细胞数量也由培养0d的0.75×104个上升到第6天的1.38×106个。而体内数据显示:胸腺细胞由胚龄14.5d的双阴性阶段发育到新生鼠的双阳性阶段,每个胸腺小叶细胞数量由14.5d的0.75×104个上升到新生鼠的2.56×106个,同时间段CD4+CD8+双阳性细胞比例由0上升到91.22%。体内、外胸腺细胞表型、数量变化趋势一致。结论体外培养状态下胸腺细胞数量和表型变化与体内自然变化趋势一致,在体外培养可以模拟体内胸腺细胞由双阴性到双阳性的发育过程,这将为T细胞发育的研究提供简易、有效的技术平台。     

尾静脉注射M1细胞构建BALB/c裸鼠髓系白血病模型

目的应用BALB/c裸小鼠构建M1白血病模型。方法将12只5～6周龄的雌性BALB/c Nude小鼠随机分为低、中、高剂量组及空白组,每组3只,进行尾静脉注射。低、中、高三组分别接种对数生长期M1细胞悬液每只1×106个、每只5×106个及每只8×106个。观察小鼠的一般状况,于造模后第0、10、20、30天采集外周血,检测血常规、进行白细胞分类,第30天或濒死时处死取材,流式检测外周血及骨髓CD33CD117阳性细胞比例,制备组织病理切片。结果模型组小鼠在接种后第10～15天出现萎靡少动、脊背弓起等状况。实验第30天时,与空白组相比,高剂量组小鼠外周血白细胞数显著升高(P0.05);各组小鼠外周血白血病细胞比例较空白组显著增高(P0.05);各组小鼠骨髓中CD33+CD117+比例增高,高剂量组最为显著(P0.05);高剂量组脾脏中可见少量白血病细胞浸润。结论 BALB/c Nude小鼠经尾静脉注射8×106个小鼠白血病细胞M1后可构建急性髓系白血病模型,符合急性髓系白血病的生物学特点。     

新型冠状病毒疫苗免疫BALB/c小鼠后的T细胞表位鉴定

目的 鉴定携带新型冠状病毒S、N和M基因的疫苗在BALB/c小鼠上的T细胞表位。方法 用携带新型冠状病毒S、N和M基因的DNA疫苗和痘病毒载体疫苗免疫6~8周龄雌性BALB/c小鼠,末次免疫1个月内取小鼠脾细胞,用ELISPOT法检测其对新型冠状病毒特异性多肽的T细胞免疫反应,筛选出具有阳性反应的多肽片段,并对其表位进行预测分析。结果 S、N、M基因分别鉴定出12、2、17条阳性多肽。S基因中多肽S49、S50、S100、S101、S102、S103阳性反应率为100%,且免疫刺激指数最高;覆盖M蛋白全长的41条多肽中有7条能刺激50%以上的小鼠产生阳性反应。预测分析结果显示,S、N、M基因分别有10、1、16个MHC-1 H-2限制性表位,主要位于S基因的RBD区、N基因RBD区以及M基因的跨膜区。这些表位在SARS-CoV-2及其变异株、SARS-CoV中高度保守。结论 新型冠状病毒DNA疫苗和痘病毒载体疫苗诱导了针对多个基因、多个表位的特异性T细胞应答,未来通用型疫苗设计应包含能诱导细胞免疫的多个抗原,特别是包含保守表位的结构抗原。     

SPF级BALB/c裸小鼠的生产管理与质量控制

SPF级裸小鼠的饲养及质量控制涉及多方面的环节和工作。生产管理及质量控制效果,直接影响动物的数量和质量。我中心2007年开始,逐步建立了规范的SPF级BALB/c裸小鼠生产繁育体系。裸小鼠生产繁育至今,数量和质量得到较好的保证。本文通过介绍我中心SPF级BALB/c裸小鼠的设施、种群、饲养管理及质量控制的具体做法和经验体会,为SPF级BALB/c裸小鼠相关繁育和研究提供参考和借鉴。     

BALB/c突变卷毛小鼠肝癌移植模型对比分析

目的探讨BALB/c突变卷毛小鼠与正常BALB/c小鼠应用两种肝癌移植方式建立肝癌模型存在的差异。方法将制备好的H22细胞注射于两组小鼠右侧下肢根部皮下,每只注射0.2 m L,7 d后摘取皮下肿瘤。选取皮下肿瘤边缘质地较好的部分,切割成组织微块(直径0.5～1 mm),移植于肝原位,15 d后摘取肝肿瘤。用游标卡尺测量皮下和肝肿瘤长短径计算肿瘤体积,并对两组小鼠的结果进行对比分析。将两组肿瘤组织进行HE染色,光镜下观察其形态学改变。结果卷毛小鼠的皮下移植和原位移植肿瘤不仅体积均显著大于正常小鼠(P0.05),而且肿瘤大小较均匀,肿瘤更加立体,多呈三维状态。卷毛小鼠肝原位肿瘤与周边的正常肝组织浸润关系更密切。病理结果显示:卷毛小鼠皮下肿瘤与肌肉组织之间没有清晰的界线,侵蚀性较强;卷毛小鼠肝原位肿瘤的视野内肿瘤组织几乎侵蚀了整个肝组织。结论 BALB/c突变卷毛小鼠在形成肝癌皮下移植肿瘤和肝原位移植肿瘤的能力显著优于正常BALB/c小鼠,预期为肝癌动物模型各项研究提供优质的动物模型平台。     

β-咔啉类衍生物对BALB/c裸小鼠肝癌皮下移植瘤生长的影响

目的 观察β-咔啉类衍生物(HMD)对人肝癌裸小鼠皮下移植瘤生长的影响.方法 雄性BALB/c裸小鼠每只以2×107个活细胞/ml(0.2 ml)建立人肝癌的裸小鼠模型,随机分为HMD低剂量组(0.22 mg/kg); HMD中剂量组(0.44 mg/kg); HMD高剂量组(0.87 mg/kg);5-氟尿嘧啶注射液组(5-Fu)和生理盐水对照组.各组连续给药15d.观察HMD对裸小鼠人肝癌移植瘤生长的影响及对裸小鼠主要脏器的毒性.结果 HMD低、中、高剂量组及阳性组对裸小鼠人肝癌移植瘤体重的影响与阴性对照组比较均有极显著性差异(P＜0.01).HMD中、高剂量组及阳性组对裸小鼠体质量增加影响与阴性对照组比较有极显著性差异(P＜0.01).对肝脏重量及肝脏系数的影响,HMD低、中、高剂量组及阳性组与阴性对照组比较有显著性差异(P＜0.05),肾脏及肾脏系数各组间差异不显著(P＞0.05).结论 HMD对人肝癌HepG2裸小鼠皮下移植瘤生长有明显的抑制作用,未见有异常毒性症状出现.     

Friend鼠白血病病毒对BALB/c小鼠和KM小鼠的影响

目的：探讨Friend鼠白血病病毒（FLV）对BALB/c和KM小鼠体质量、胸腺和脾脏的影响。方法：以齐多夫定片（AZT）作为阳性药物,用FLV攻击BALB/c和KM小鼠,观察各鼠系的体质量、胸腺和脾脏变化情况。结果：FLV能引起BALB/c和KM小鼠脾肿大,各鼠系脾指数与正常鼠脾指数差异有统计学意义（P〈0.01）。AZT对BALB/c和KM小鼠具有明显的抑制脾肿大作用（P〈0.05）。各鼠系小鼠的体质量和胸腺变化差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：FLV对KM小鼠体质量、胸腺和脾脏的影响程度相当于BALB/c小鼠。     

BALB/c小鼠黑色素瘤B 16移植肿瘤模型的建立

[目的]建立宜于进行早期观察及测量的小鼠黑色素瘤模型.[方法]将不同数量的处于对数生长期的B16细胞株黑色素瘤细胞接种于BALB/c小鼠背部及足垫皮下,建立移植肿瘤动物模型.观察小鼠肿瘤的生长特点,应用病理学和免疫组织化学染色方法进行鉴定,归纳总结接种细胞数与肿瘤发生率的关系及肿瘤生长对小鼠生活状态的影响.[结果]接种5d后BALB/c小鼠皮肤浅表部位相继出现黑色的点或线状改变,发展为结节状改变直至肿瘤破溃、出血、死亡或破溃、出血、结痂、愈合,部分小鼠出现肿瘤消退.在接种细胞数大于5×105个时BALB/c小鼠的肿瘤模型全部建立成功.[结论]B16细胞株黑色素瘤细胞接种于BALB/c小鼠的肿瘤模型成功率与接种细胞数成正比,它具有建立肿瘤模型成功率高,观察及测量方便等优点,接种部位以背部皮下为宜.     

BALB/c小鼠原位移植肝癌模型的建立及鉴定

目的利用小鼠肝癌细胞株H22细胞肝脏原位种植法建立BALB/c小鼠原位移植肝癌模型,为研究肝脏肿瘤奠定基础。方法取新鲜小鼠腹腔传代的H22细胞,生理盐水洗涤2次,调细胞浓度为1×10~7/ml,与Matrigel按4:1比例混合,用10μl微量进样针在开腹直视下沿肝叶长轴种植于BALB/c小鼠的肝左叶,每只5μl,逐层关腹,常规饲养2周后,处死小鼠观察肿瘤形成情况,检测小鼠肝脏原住癌的形成率及小鼠存活率,形态学和病理学方法鉴定造模效果。结果肉眼可见小鼠肝脏出现单个灰白肿瘤结节,病理学方法证实为肝癌,小鼠存活率和成瘤率均为95%,肿瘤大小均匀。结论成功建立了一种稳定、简单可行的BALB/c小鼠原位移植肝癌模型。     

日本血吸虫感染BALB/c小鼠脾脏细胞学的变化

目的观察BALB/c小鼠感染日本血吸虫(Schistosoma japonicum,Sj)6～8周后脾脏细胞学的改变情况。方法用日本血吸虫尾蚴腹贴法建立日本血吸虫感染的小鼠模型。6～8周后观察肝脏、脾脏大小,称重;做脾脏淋巴细胞计数;用流式细胞仪检测脾脏淋巴细胞的大小、密度和T、B细胞分类以及Th细胞亚群情况;用酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中可溶性虫卵抗原(soluble egg antigen,SEA)所诱导的特异性抗体IgG的产生情况。结果日本血吸虫感染BALB/c小鼠6～8周后,脾脏体积明显增大,重量增加,细胞数量明显增多。流式细胞仪检测发现脾脏中出现一群体积明显增大的细胞群,该群细胞表达少量的CD4、CD8、CD19和DX-5分子;Th1/Th2轴发生偏移,Th17细胞数量增多;ELISA结果表明血清中SEA特异性抗体IgG水平明显升高。结论日本血吸虫感染的BALB/c小鼠脾脏出现明显的细胞学改变,尤其是Th1细胞数目下降,浆细胞、Th2细胞及Th17细胞数目增多,为研究日本血吸虫感染后期虫卵肉芽肿形成的免疫病理机制奠定了基...     

汽车运输对BALB/c系小鼠游泳耐力的影响

BALB/c系小鼠100只,雌雄各半,体重18.2±1.4g。分运输(实验)和未运输(对照)两组。运输组行程250km,间歇运时12h。运时内均不供应饮水和饲料。按体重的10％在鼠尾中部加负荷,秒表记录900s内沉入水中不再冲起的死亡时间为疲劳耐力时间。测定时间为运后即刻、20、70和166h,两组同时进行。结果两组疲劳耐力时间的差异极显著(P<0.01)。实验组和对     

人源间变性大细胞淋巴瘤BALB/c小鼠建模的免疫学机制

目的 建立人源间变性大细胞淋巴瘤（ALCL） BALB/c小鼠模型,探讨成瘤的免疫学机制.方法 BALB/c小鼠环磷酰胺（CTX）预处理,Karpas-299细胞右腋下注射;流式细胞术检测各组小鼠外周血淋巴细胞亚群比例.结果 ①成功建立人源间变性大细胞淋巴瘤BALB/c小鼠模型.②成瘤组与CTX组相比,CD3＋、CD8＋和CD19＋细胞减少（P＜0.05）;未成瘤组与CTX组相比,CD8＋、CD19＋细胞减少,CD20＋细胞增多（P＜0.05）;成瘤组CD3＋、CD8＋细胞较CTX组和未成瘤组均减少（P＜0.05）;未成瘤组CD20＋细胞较CTX组和成瘤组均增多（P＜0.05）.③注射CTX第3天,BALB/c小鼠CD3＋细胞增多,CD19＋细胞减少（P＜0.05）;第10天CD8＋、CD19＋、CD20＋细胞较注射CTX前减少（P＜0.05）;第17天和第24天,CD8＋、CD19＋、CD20＋细胞仍低于注射CTX前（P＜0.05）,但较第10天有逐渐回升趋势（P＞0.05）.结论 CTX所致机体免疫抑制在ALCL成瘤起始阶段起决定性作用,ALCL的生长可能与CD3＋、CD8＋细胞减少有关.     

腺病毒免疫体外培养BALB/c小鼠脾细胞的研究

本文报道用两种体外免疫及体外强化的方法,对7型腺病毒(7—AV)诱导BALB/c小鼠B淋巴细胞活化进行了研究。结果表明:活7—AV免疫后使培养的脾细胞存活率下降,适当浓度的灭活7—AV免疫可以使培养细胞增生并能在离体培养条件下存活2周,细胞存活率可达90％以上。巨噬细胞预先处理抗原的体外免疫方法的免疫效果较好,如采用体外强化方法可以诱生较明显的特异性抗体反应。