HPV16、HPV18感染及p53蛋白过度表达与肺癌的相关性研究

为研究人乳头瘤病毒１６和１８型（ＨＰＶ１６和ＨＰＶ１８）感染及ｐ５３基因突变与肺癌的关系，应用经病理学证实的肺癌活组织，行聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测癌组织中的ＨＰＶ１６、ＨＰＶ１８；并用ＬＳＡＢ免疫组化法检测相应蜡块标本中ｐ５３蛋白的过度表达。在４８例肺癌组织标本中未检出ＨＰＶ１６、ＨＰＶ１８；ｐ５３蛋白表达呈阳性，阳性率为５４．２％（２６／４８），其中鳞癌６６．７％（１８／２７），腺癌５７．１（４／７），小细胞癌３３．３％（１／３），大细胞癌３３．３％（２／６），类癌２０．０％（１／５）。提示肺癌的发生可能与ＨＰＶ１６、ＨＰＶ１８感染无关，而与ｐ５３基因突变有关，尤以与鳞癌和腺癌关系密切     

睑板腺癌P53基因和人乳头状瘤病毒HPV-16的检测

目的探讨睑板腺癌发生的分子生物学机制。②方法采用多聚酶链反应－限制性片段长度多态性方法，对３４例眼睑组织（睑板腺癌和霰粒肿各１７例）中Ｐ５３基因２４８位点进行检测，并用ＰＣＲ技术检测其中人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）致癌型ＨＰＶ－１６ＤＮＡ片段。③结果２９．５％的睑板腺癌中有Ｐ５３基因的突变，霰粒肿中则未检测到，两者比较差异有显著性（Ｐ＝０．０２２）。Ｐ５３基因突变与睑板腺癌临床病理特征无关（Ｐ＞０．０５）。睑板腺癌及霰粒肿中均未检测到ＨＰＶ－１６ＤＮＡ片段。④结论Ｐ５３基因突变可能在睑板腺癌发生的早期起一定作用，而与临床病理特征无关。     

宫颈癌人乳头状瘤病毒感染与P53蛋白表达的关系

采用聚合酶链反应对４９例宫颈癌组织石膜包埋标本中人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）６、１１、１６、１８型ＤＮＡ进行检测，并与本组研组增报导的同标本中Ｐ５３蛋白检测结果进行比较。结果表明：①ＨＰＶ－ＤＮＡ的检出（８７．７６％０分别与ＨＰＶ６、１１、１８－ＤＮＡ的检出（２７．５２％、３６．７３％、３８．７８％）相比有显著性差异（Ｐ〈０．００１）。②ＨＰＶ各型间有交叉感染，单独ＨＰＶ１６感染与各型间交叉感染相比有     

人乳头瘤病毒感染,p53基因突变与子宫颈癌的相关性研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）、单链构像多态性（ＳＳＣＰ）分析银染色法检测了６１例子宫颈癌、５例子宫颈间变、１４例慢性子宫颈炎组织中１６、１８型人乳头瘤病毒（ＨＰＶ１６、１８）感染及ｐ５３基因５、６、７、８外显子的变异。结果显示，子宫颈癌、子宫颈间变及慢性子宫颈炎组织中ＨＰＶ１６、１８阳性率分别为８２％、４０％及１４．３％（Ｐ〈０．０５），子宫颈癌组织中ｐ５３基因突变阳性率为２０％，而子宫颈间变及慢性     

人乳头瘤病毒感染、p53 基因突变与子宫颈癌的相关性研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）、单链构像多态性（ＳＳＣＰ）分析银染色法检测了６１例子宫颈癌、５例子宫颈间变、１４例慢性子宫颈炎组织中１６、１８型人乳头瘤病毒（ＨＰＶ１６、１８）感染及ｐ５３基因５、６、７、８外显子的变异。结果显示，子宫颈癌、子宫颈间变及慢性子宫颈炎组织中ＨＰＶ１６、１８阳性率分别为８２％、４０％及１４．３％（Ｐ＜０．０５），子宫颈癌组织中ｐ５３基因突变阳性率为２０％，而子宫颈间变及慢性子宫颈炎组织中未见有突变，其中１２例突变阳性的癌组织中９例呈ＨＰＶ阴性，３例呈ＨＰＶ阳性。提示ＨＰＶ１６、１８感染在子宫颈癌发生中起重要的病因学作用；ｐ５３基因变异可能是部分子宫颈癌变的一个重要原因；高危ＨＰＶ除了通过Ｅ６／ｐ５３蛋白复合物形成使ｐ５３蛋白失活的致癌途径外，可能还存在通过ｐ５３基因突变的致癌途径。     

用多聚酶链反应探讨宫颈人乳头瘤病毒感染

目的了解温州地区ＨＰＶ感染与宫颈炎的关系，为防治该病提供依据。方法用多聚酶链反应（ＰＣＲ）检测１２８例慢性宫颈炎及４８例正常宫颈标本组织中的人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）ＤＮＡ，并对ＨＰＶ进行１６、１８型别分析。结果慢性宫颈炎组ＨＰＶ检出率为３２．９％（４２／１２８），ＨＰＶ１６、１８及双重感染（１６＋１８）各占其中的５４％（２３／４８）、１１．９％（５／２４）、１１．９％（５／２４），对照组．ＨＰＶ的检出率为６．３％（３／４８）。两组ＨＰＶ阳性检出率有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。结论ＨＰＶ感染，尤其ＨＰＶＩ６感染与慢性宫颈炎相关，但与年龄大小无关。     

睑板腺癌P53基因和人乳头状瘤病毒HPV—16的检测

目的 探讨睑板腺癌发生的分子生物学机制，方法 采用多取酶链反应－限制性片段长度多态性方法，对３４例眼睑组织（睑板腺癌和霰粒肿各１７例）中Ｐ５３基因２４８位点进行检测，并用ＰＣＲ技术检测其中人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）致癌型ＨＰＶ－１６ＤＮＡ片段。结果 ２９．５％的睑板腺癌中有Ｐ５３基因的突变，粒肿中则未检测到，两者比较差异有显著性（Ｐ＝０．０２２），Ｐ５３基因突变与睑板腺癌临床病理特征无关（Ｐ〉０．０     

HPV16,HPV18感染及p53蛋白过度表达与肺癌的相关性研究

为研究人乳头瘤病毒１６和１８型感染及ｐ５３基因突变与肺癌的关系，应用经病理学证实的肺癌活组织，行聚合酶链反应检测癌组织中的ＰＶ１６，ＨＰＶ１８，并用ＬＳＡＢ免疫组化法检测相应蜡块标本中ｐ５３蛋白的过度表达。     

食管癌组织中 HPV 原位杂交及 E_6、P~(21ras)和 P~(53)免疫组化的研究

采用分子原位杂交和ＳＰ法免疫组化技术对柳州地区４０例食管鳞状细胞癌和２０例食管粘膜慢性炎的材料进行地高辛标记的ＨＰＶ６Ｂ／１１、１６、１８ＤＮＡ及ＨＰＶ１６、１８早期蛋白Ｅ６、Ｐ２１ｒａｓ和Ｐ５３癌基因产物检测，结果显示：食管癌中ＨＰＶ１６、１８ＤＮＡ及Ｅ６蛋白的阳性率分别为２５％（１０／４０）和６５％（２６／４０），与对照组对比差异均有高度显著性（Ｐ＜０．０１）。Ｅ６、和Ｐ５３蛋白呈双阳性者为５２．５０％（２１／４０），其中９０．４８％（１９／２１）阳性表达出现在同一区域同一癌细胞核内，似表达Ｅ６、可与Ｐ５３结合形成复合物，从而导致野生型Ｐ５３的降解或突变。本组鳞癌组织中Ｐ２１ｒａｓ与Ｐ５３、Ｐ５３与Ｅ６的阳性表达均具有显著相关性（Ｐ＜０．０５）。提示高危ＨＰＶ１６、１８感染与多癌基因协同在本地区食管癌病因学中起着十分重要的作用。     

子宫颈组织中人乳头状瘤病毒的PCR检测

①目的探讨人乳头状瘤病毒１６，１８型（ＨＰＶ－１６，ＨＰＶ－１８）感染与慢性宫颈炎、宫颈癌的关系。②方法聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测２２例正常宫颈、５５例慢性宫颈炎、３０例宫颈癌的子宫颈组织。③结果正常宫颈组织中ＨＰＶ－１６，１８的检出率均为０．００％，慢性宫颈炎分别为１８．１８％和７．２７％，宫颈癌分别为５６．６７％和３．３３％．统计学处理表明，宫颈癌组织中ＨＰＶ－１６的检出率明显高于宫颈炎组织（χ２＝１３．６２４，Ｐ＜０．０１），而且Ⅲ度宫颈糜烂组织中ＨＰＶ－１６的检出率也较Ⅰ，Ⅱ度的检出率高，两者比较差异有显著意义（χ２＝１０．５５０，Ｐ＜０．０１），但不同宫颈疾患组织中ＨＰＶ－１８的检出率无统计学意义。④结论子宫颈癌的发生与ＨＰＶ感染密切相关，以ＨＰＶ－１６尤为明显，ＰＣＲ技术是检测组织中ＨＰＶ－ＤＮＡ的敏感、特异的方法     

p53和ras基因突变及HPV感染与喉鳞癌的关系

①目的　探讨人乳头瘤病毒 16 ,18型 (HPV16 ,18)感染 ,抑癌基因p5 3和癌基因ras突变与喉鳞癌的关系 ,并初步分析 3种致癌因素的相互关系。②方法　应用聚合酶链反应 (PCR)和限制性片段长度多态性 (RFLP)分析技术 ,检测 40例喉鳞状细胞癌组织中 p5 3基因第 5 ,7外显子及ras基因 (N ras ,K ras,H ras)第 12密码子的突变情况 ,同时用PCR技术检测 40例标本中HPV16 ,18的感染情况。③结果　 40例标本检出HPV16阳性标本 14例 ,HPV18阳性标本 4例。 4例标本 p5 3基因第 5外显子第 143密码子发生突变 ,其中 1例HPV16阳性 ,p5 3基因第 7外显子未发现突变。 9例标本ras基因发生突变 (N ras 6例 ,K ras 2例 ,H ras 1例 ) ,其中 2例HPV16阳性 ,但未见 p5 3与ras基因同时发生突变者。HPV阳性和阴性标本中p5 3基因突变率、ras基因突变率的差异均无显著性(χ2 =0 .10 1,1.392 ,P >0 .0 5 )。④结论　HPV感染、p5 3和ras基因突变与喉鳞癌的发生密切相关 ,三者之间的关系尚待进一步探讨。     

宫颈癌组织中乳头瘤病毒感染及抑癌基因p53突变的检测

探讨人乳头瘤病毒１６，１８型感染及抑癌基因Ｐ５３突变与宫颈癌发生的关系。方法：应用ＰＣＲ及其单链构象多态性方法，对６０例宫颈癌组织ＤＮＡ进行检测，同时选择宫颈糜烂及正常宫颈各５０例作为对照。结果：宫颈癌组织中ＨＰＶ１６感染呈明显梯度关系，且鳞癌组织中ＨＰＶ１６的检出率远比腺癌高，并高于ＣＩＮ和正常宫颈组织；相反，腺癌中ＨＰＶ１８的检出率比鳞癌高。     

PCR法检测宫颈癌细胞中人乳头瘤病毒

采用ＰＣＲ（聚合酶链反应）技术对宫颈癌细胞中ＨＰＶ（人乳头瘤病毒）和ＨＰＶ１６、１８型的感染状况分别进行了研究。在新鲜组织中，宫颈癌细胞内ＨＰＶ和ＨＰＶ１６、１８型的感染率分别达８０％和７５％。但石蜡标本中ＨＰＶ和ＨＰＶ１６、１８型的感染率则为３３．３％和２６．７％。说明宫颈癌细胞中ＨＰＶ的感染率极高，且主要系ＨＰＶ１６、１８型的感染。ＰＣＲ技术检测宫颈癌细胞中的ＨＰＶ方法简便快速，灵敏度高。可广泛用于流行病学调查和高危致癌ＨＰＶ感染妇女的追踪观察。对宫颈癌的早期发现和早期诊断有重要意义     

胃癌组织中HPV16感染与 P21基因失活的相关研究

目的:研究胃癌组织中HPV16的感染及P21基因突变是否存在协同致癌作用及其与胃癌患者预后的关系。方法:采用PCR技术,检测46例胃癌组织标本中HPV16型感染,并采用免疫组化SP法对胃癌P21基因突变进行检测,经近3年门诊或书信定期随访。结果:HPV 16感染19例(41.30%),P21阳性表达24例(52.17%)。随访发现46例有21例出现复发或远处转移,其中HPV 16阳性者复发率为73.68%(14/19),P21基因阳性表达者复发率为66.6%(16/24)。值得提出的是两项同时阳性者8例中有6例出现复发或远处转移。结论:HPV16与胃癌发生有关,P21基因失活具有协同致癌作用,亦可作为判断胃癌预后的指标之一。     

肺鳞癌抗癌基因P53突变与人孔头状瘤病毒感染的分析

本实验收集经病理确诊为肺鳞癌的标本67例，应用免疫组织化学技术检测到P53蛋白的阳性率为61．2％。同时结合聚合酶链反应检测人乳头状瘤病毒（HPV）感染，检出感染标本10例（14．9％），其中4例伴有P53蛋白阳性。表明肺鳞癌中存在着HPV感染。本文结果也提示，P53基因突变与肺鳞癌的分化程度无联系。     

胃癌组织中Runx3的变化机制及其与 p53突变的对比

目的：探讨胃癌组织中runx3的变化机制及胃癌中runx3甲基化改变和p53突变的区别及意义。方法：采用聚合酶链反应－单链多态性（PCR-SSCP）检测runx3的2～4外显子及p53基因5～8外显子在胃癌中的突变情况，采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）技术对30例胃癌组织甲基化状态进行检测，对runx3甲基化率和p53突变率进行分析。结果：2例胃 癌标本在runx3的第3外显子发现突变，第2、4外显子未发现突变改变。 87％（26/30）胃癌 标本runx3基因检测到甲基化改变， 53.3％（16/30）胃癌标本p53基因发现突变，runx3甲 基化率高于p53突变率（P<0.05）。结论：runx3突变不是胃癌的遗传易感因素，runx3启动子区CpG岛的高甲基化是胃癌中runx3的主要改变机制。与p53突变率比较，runx3高频甲基化改变更具有胃癌的遗传学特异性，可能是引起胃癌的关键性基因。     

人乳头状瘤病毒和p53基因及H-ras基因在喉癌细胞中的表达

目的：研究喉癌细胞p53基因、H－ras基因突变及其与人乳头瘤病毒（HPV）感染的关系，探讨其在喉癌发生发展中可能起的作用。方法：采用分子生物学技术，包括聚合酶链反应、单链构型多态性分析、限制性内切酶长度多态性分析，及DNA序列分析等方法，对28例喉癌进行人乳头状瘤病毒、p53基因及H－ras基因检测。结果：28例喉癌中有50％在p53基因的第7－8外显子有突变，其中4例行DNA序列分析表明均有碱基替换、插入或丢失；而H－ras基因第12密码子的突变率仅3．57％；高危型HPV（HPV－16或－18）感染在喉癌细胞中有一定的特异性，且与p53基因突变有一定的相关性。结论：在喉癌的发生发展过程中高危型HPV感染和p53基因突变起着重要的作用，且两者之间可能存在某种内在的联系。     

胃癌组织HPV16、EB病毒及HBV感染的检测与分析

目的：探讨肿瘤相关病毒HPV16、EB病毒及HBV感染与胃癌的相关性。方法：选择临床病理确诊的胃癌组织及其癌旁正常胃黏膜组织标本各40份，用PCR方法检测标本中HPV16、EB病毒及HBV DNA。结果：胃癌及癌旁正常胃黏膜组织标本中，HPV16DNA阳性检出率分别为25％（10／40）和0（0／40），EB病毒DNA阳性检出率分别为17．5％（7／40）和0（0／40），差异均有显性（P＜0．05）；HPV16、EB病毒DNA同时呈阳性的检出率为5％（2／40）；HBV DNA在胃癌组织和癌旁正常胃黏膜组织中的检出率均为0。结论：HPV16、EB病毒感染可能与胃癌的发生相关。     

喉部肿瘤HPV感染与p53基因变异的研究

应用PCR－SSCP及Southern杂交技术检测了56例喉鳞癌和35例喉乳头状瘤组织中HPV16／18的DNA及p53基因点突变。结果显示24例喉部肿瘤组织p53基因点突变；35例喉癌及24例喉乳头状瘤组织中检出了HPV－DNA。在13例喉癌组织和3例喉乳头状瘤组织中同时检出p53点突变和HPV－DNA。提示HPV感染和p53变异与喉部肿瘤发生有关，其内在联系有待深入研究。     

宫颈癌组织中P53基因5～6外显子的检测及分析

应用ＧＰ ＰＣＲ 技术对４０ 例宫颈癌活检组织进行ＨＰＶ 感染的检测，发现有３５ 例为阳性（ 阳性率为８７％ ），同时利用ＰＣＲ ＳＳＣＰ（单纯ＤＮＡ构象多态性）分析技术，对３５ 例ＨＰＶ 阳性的宫颈癌组织进行Ｐ５３ 基因５ ～６外显子的检测，其突变率仅为２－８５ ％（１／３５），而在５ 例ＨＰＶ 阴性的宫颈癌组织中未检测到Ｐ５３ 基因突变，结果表明：Ｐ５３ 基因的突变在宫颈癌的发生过程中不起主要作用，并且与ＨＰＶ的感染无相关性。