调补肺肾系列方药对PM 2.5致肺损伤大鼠炎症和氧化应激的影响

目的评价调补肺肾系列方药(补肺方、补肺健脾方、补肺益肾方、益气滋肾方)对PM 2. 5致肺损伤大鼠炎症和氧化应激的影响。方法 60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、补肺组、补肺健脾组、补肺益肾组、益气滋肾组,除空白组外其余各组采用大气PM 2. 5实时浓缩进行动物暴露。自暴露第1天起,空白组、模型组给予0. 9%氯化钠溶液2 ml/只灌胃,其余各组分别给予相应的补肺方5. 22 g/(kg·d)、补肺健脾方4. 84 g/(kg·d)、补肺益肾方4. 44 g/(kg·d)和益气滋肾方4. 84 g/(kg·d)灌胃,每日1次,连续给药14天后检测大鼠肺功能,观察肺组织病理改变,检测血清总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)水平,肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6 (IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)、黏蛋白5AC(MUC5AC)水平,肺组织中嗜酸性粒细胞主要碱性蛋白(MBP)、中性粒细胞弹性蛋白酶(ELA2)、IL-6、IL-1β表达水平。并采用R值综合评价法对各指标进行综合效果评价。结果与空白组比较,模型组大鼠肺功能下降,肺组织病理形态出现气道周围及肺泡腔炎性浸润增加,肺组织TNF-α、IL-6、IL-1β、MBP、ELA2水平升高,血清T-AOC降低、MDA升高(P 0. 05或P 0. 01)。补肺组、补肺健脾组、补肺益肾组、益气滋肾组对肺功能、肺组织病理均有一定改善,能降低肺组织TNF-α、IL-6、IL-1β、MBP、ELA2水平,使血清T-AOC升高、MDA降低(P 0. 05或P 0. 01)。R值综合评价结果显示,对肺功能综合纠正强度排序为:补肺健脾组补肺益肾组益气滋肾组补肺组,对炎症反应综合纠正强度排序为:补肺益肾组补肺健脾组补肺组益气滋肾组,对氧化应激综合纠正强度排序为:补肺益肾组补肺健脾组补肺组益气滋肾组,综合疗效优劣排序为:补肺益肾组补肺健脾组补肺组益气滋肾组。结论调补肺肾系列方药均可调节PM 2. 5暴露致肺损伤的炎症反应和氧化应激,其中补肺益肾方具有明显优势。     

基于“痹-虚”病机中药对肺纤维化大鼠TGF-β/Smads信号通路的影响

目的:研究通痹补肺方对肺纤维化大鼠的保护作用及可能的作用机制。方法:60只大鼠随机分为3组,空白组、模型组和中药组(通痹补肺方组),每组20只。除空白组外,其余各组用博来霉素气管内注射造成肺纤维化模型,造模28天后给药,中药组给予通痹补肺方12.4g/kg/d灌胃,空白组及模型组给予等体积生理盐水灌胃,连续给药28天。首先测定大鼠肺功能(FVC、FEV0.3/FVC、PEF、MVV、Cdyn),继之处死大鼠行肺组织病理学观察,同时应用免疫组化及免疫印迹法测定大鼠肺组织中TGF-β、Smad3、Smad7及Ⅰ、Ⅲ型胶原的含量。结果:光镜下显示,模型组大鼠正常肺泡结构破坏,多数肺泡壁增厚,可见纤维组织增生,伴有少许炎性细胞浸润,呈中重度纤维化样改变,中药组大鼠肺纤维化及肺泡炎性程度均较模型组明显减轻。各组大鼠肺功能比较,FVC、FEV0.3/FVC、PEF、MVV值各组之间比较均无差异(P0.05);与模型组比较,中药组及空白组Cdyn值明显升高(P0.05),中药组及空白组肺组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原含量明显降低(P0.05),TGF-β、Smad3含量明显下降(P0.05),Smad7含量明显上升(P0.05);与空白组比较,中药组及模型组Cdyn值明显降低(P0.05),中药组及模型组肺组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原含量明显降低(P0.05),TGF-β、Smad3含量明显下降(P0.05),Smad7含量明显上升(P0.05)。结论 :通痹补肺方能够通过抑制肺纤维化大鼠TGF-β及Smad3的异常增高,同时提高肺纤维化大鼠Smad7水平,达到抑制肺纤维化大鼠胶原异常增殖的作用。     

补肺益肾方对COPD大鼠气道黏液高分泌及肺组织Notch3，HES1的影响

目的:观察补肺益肾方对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道黏液高分泌及Notch信号通路相关蛋白Notch3,HES家族发状分裂相关增强子1(HES1)的影响,探讨其作用机制。方法:将48只SD大鼠随机分为空白组、模型组、补肺益肾方组和氨茶碱组,每组12只。第1~12周,采用香烟烟雾暴露联合反复细菌感染方法制备COPD稳定期大鼠模型;第13~20周,空白组和模型组给予生理盐水灌胃,治疗组给予相应药物灌胃(补肺益肾方组3.7 g·kg^-1·d-1,氨茶碱组54 mg·kg^-1·d-1)。第20周灌胃结束后取材,观察肺组织病理,检测大鼠肺功能,肺泡灌洗液肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6),黏蛋白5AC(MUC5AC)和肺组织Notch3,HES1,MUC5AC mRNA与蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠肺功能显著降低(P<0.05,P<0.01),平均肺泡数显著降低(P<0.01),肺泡平均截距显著升高(P<0.01),肺泡灌洗液TNF-α,IL-6和MUC5AC显著升高(P<0.01),肺组织Notch3,HES1和MUC5AC基因与蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,补肺益肾方组和APL组肺功能和肺病理损伤显著改善(P<0.05,P<0.01),肺泡灌洗液TNF-α,IL-6和MUC5AC显著降低(P<0.01),肺组织Notch3,HES1和MUC5AC基因与蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论:补肺益肾方抑制COPD大鼠气道黏液高分泌,其机制与调控Notch3,HES1蛋白有关。     

补肺颗粒对慢性阻塞性肺疾病稳定期模型小鼠肺组织炎症反应的影响

目的:观察补肺颗粒对慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期模型小鼠肺组织炎症反应的影响,从该角度初步阐释补肺颗粒治疗COPD稳定期的作用机制。方法:80只C57BL/6J小鼠随机分为两组,空白对照组20只和COPD造模组60只,后者采用香烟烟雾暴露制作COPD模型,造模后两组各随机抽取10只取材,而后将COPD造模组剩余50只小鼠随机分为5组,即空白治疗组、地塞米松组、补肺颗粒低剂量组、补肺颗粒中剂量组和补肺颗粒高剂量组,每组10只。空白对照组和空白治疗组给予蒸馏水灌胃,地塞米松组给予地塞米松水溶液灌服,补肺颗粒低、中、高剂量组分别给予含不同生药浓度的补肺颗粒水溶液灌胃,剂量均为10 mL/kg,1次/d,疗程4周。观察各组小鼠肺组织病理学变化(HE染色),肺组织炎症评分和肺泡平均内衬间隔,应用酶联免疫吸附法测定小鼠肺泡灌洗液肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-10(IL-10)表达水平。结果:造模后,与空白对照组比较,COPD造模组小鼠肺组织病理学切片光镜下观察可见明显炎症和肺气肿改变,肺组织炎症评分和肺泡平均内衬间隔明显增高(P 0. 05),肺泡灌洗液TNF-α和IL-1β表达水平显著增高(P 0. 05),而IL-4和IL-10表达水平明显降低(P 0. 05)。治疗后,与空白治疗组比较,地塞米松组、补肺颗粒中、高剂量组小鼠肺组织炎症和肺气肿病变程度减轻,肺组织炎症评分和肺泡平均内衬间隔降低(P 0. 05),肺泡灌洗液TNF-α和IL-1β表达水平显著下降(P 0. 05),IL-4和IL-10表达水平明显升高(P 0. 05)。补肺颗粒高剂量组效果与地塞米松组相似(P 0. 05),优于补肺颗粒中剂量组(P 0. 05)。结论:补肺颗粒通过下调肺泡灌洗液中促炎性细胞因子TNF-α和IL-1β水平,上调抗炎性细胞因子IL-4和IL-10表达,进而抑制肺组织炎症反应,可能是其治疗COPD稳定期的作用机制之一。     

补肺益肾方改善慢性阻塞性肺疾病模型大鼠气道重塑作用

目的 探讨补肺益肾方(Bufei Yishen Formular, BYF)对慢性阻塞性肺疾病(Chronic Obstructive Pulmonary Disease, COPD)模型大鼠气道重塑的抑制作用。方法 将24只SD大鼠随机分为空白(Control)组、模型(Model)组、BYF组及多索茶碱(Doxofylline, DOX)组，每组6只，采用香烟烟雾熏吸联合细菌感染8周制备COPD大鼠。第9～16周，Control组及Model组大鼠给予生理盐水灌胃，治疗组给予相应药物灌胃，于16周结束时取材。每4周测定肺功能，监测大鼠潮气量(tidal volume, TV)、每分钟呼吸量(minute volume, MV)、呼气峰流速(peak expiratory flow, PEF)、50%潮气量呼气流量(50%tidal volume expiratory flow, EF50)。采用苏木素—伊红(HE)、MASSON染色法观察大鼠肺组织病理改变及胶原沉积，免疫组织化学法检测肺组织中白细胞介素(interleukin, IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(tumor n...     

竹节参皂苷调控核因子κB信号通路对肺癌大鼠的影响

目的：探究竹节参皂苷调控核因子κB(NF-κB)信号通路对肺癌大鼠脑神经损伤、微血管密度(MVD)及肿瘤坏死因子-β(TNF-β)表达的影响。方法：选取40只无特定病原体(SPF)级斯泼累格·多雷(SD)雄性大鼠,随机分为正常组、模型组、白术多糖组、竹节参皂苷组,每组10只,对模型组、白术多糖组、竹节参皂苷组采用肺叶支气管内灌注致癌碘化油进行肺癌建模,建模成功后,对白术多糖组灌胃80 mg/kg的白术多糖,对竹节参皂苷组灌胃40 mg/kg的竹节参皂苷,正常组不建模,正常组、模型组同期给予灌胃同体积生理盐水。采用苏木精-伊红(HE)染色法检测肺组织病理形态,TUNEL法检测大鼠脑神经损伤,ELISA法检测大鼠血清中TNF-β水平,免疫组织化学法检测肺组织MVD,蛋白质免疫印迹法检测大鼠肺组织核因子κB蛋白表达。结果：正常组肺组织结构、肺泡正常完整,模型组可见明显病理改变,与模型组比较,白术多糖组、竹节参皂苷组病理结构明显改善,且竹节参皂苷组比白术多糖组改善明显;与正常组比较,模型组海马组织细胞凋亡、MVD、核因子κB蛋白表达明显增多(P<0.05),血清中TNF-β表达明显降低(...     

化纤方对肺纤维化模型大鼠的肺系数及炎症因子MCP-1、IL-1β的影响

目的:探讨化纤方对博莱霉素造模的肺纤维化模型大鼠肺系数及血清炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)及单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的影响。方法:SD大鼠雌雄各半,随机分成空白对照组,模型组,阳性对照泼尼松组,化纤方组。除空白对照组外,其余3组均予博莱霉素制作肺纤维化大鼠模型,造模第2天起泼尼松组和化纤方组给予每日灌胃给药,分别于给药后7、11、23 d取材,分离肺组织并计算肺指数。ELISA法测定肺组织中炎症因子IL-1β及MCP-1的含量。结果:与空白对照组相比,模型组大鼠肺系数明显增加(P0.05);与模型组比较,各给药组大鼠肺系数有不同程度的下降(P0.01);化纤方与泼尼松比较,有统计学意义(P0.05);模型组、泼尼松组和化纤方组血清中IL-1β含量较空白对照组明显升高(P0.05),化纤方组血清中IL-1β含量较模型组明显降低(P0.01);模型组和化纤方组血清中MCP-1含量较空白对照组明显增高(P0.01或P0.05),化纤方组血清MCP-1含量与模型组相比显著下降(P0.01),但与泼尼松组比较明显增高(P0.05)。结论:化纤方能够较好地控制模型大鼠肺系数的增长,并通过降低血清中IL-1β和MCP-1的含量抑制肺纤维化,对博莱霉素致大鼠肺损伤具有一定的保护作用。     

当归、川芎联合应用对肺纤维化模型大鼠TGF-β1/Smad信号通路的影响

目的筛选当归、川芎治疗肺纤维化模型大鼠的最佳配比,并观察其对TGF-β1/Smad信号通路的影响。方法 SD大鼠分为8组,即正常对照组,肺纤维化模型组,强的松组,当归组,川芎组,当归、川芎不同配比组,复制肺纤维化大鼠模型并给予相应药物治疗,每天1次,共4周。给药结束后,检测大鼠肺功能,ELISA测定肺泡灌洗液中TNF-α(肿瘤坏死因子-α)、IL-1β(白介素-1β)、IL-6(白介素-6)、NF-κB(核因子-κB)水平。取肺组织测定羟脯氨酸水平,HE、Masson染色后观察其形态。采用免疫组化及RT-PCR技术检测肺组织TGF-β1/Smad信号通路关键分子的表达。结果当归、川芎配伍使用可不同程度改善肺纤维化模型大鼠肺功能,降低炎症因子及羟脯胺酸水平,减轻肺组织病理形态学,以1∶2组作用更明显,并可降低肺纤维化模型大鼠肺组织TGF-β1(转化生长因子-β1)、Smad2、Smad3、α-SMA(α-平滑肌肌动蛋白)的mRNA及蛋白表达。结论当归、川芎1∶2配伍对肺纤维化模型大鼠肺功能有一定改善作用,其机制可能与抑制TGF-β1/Smad信号通路有关。     

水飞蓟素通过调控TLR/NF-κB信号通路改善急性肺损伤大鼠肺功能作用研究

目的观察水飞蓟素对急性肺损伤(ALI)大鼠肺功能的保护作用并探讨其机制。方法采用脂多糖制备ALI模型大鼠,随机分为ALI组、地塞米松(0.9 mg/kg)组、低(15 mg/kg)、中(30 mg/kg)、高(60 mg/kg)剂量水飞蓟素组、TLR4抑制剂TAK-242(0.5 mg/kg)组,对照组(等体积生理盐水)及ALI组(等体积生理盐水)。灌胃给药24 h后,分析各组大鼠动脉血气指标;苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织形态;酶联免疫吸附(ELISA)法检测肺泡灌洗液中单核细胞趋化因子(MCP-1)、白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;蛋白印迹(WB)法检测肺组织Toll样受体4(TLR4)、核转录因子-κB(NF-κB)表达情况。结果与对照组比较,ALI组大鼠W/D、Pa CO_2水平增高、Pa O_2水平明显下降(P 0.05);肺组织现细胞破碎等病变;肺泡灌洗液中SOD、MPO活性降低(P 0.05),MCP-1、IL-1β、TNF-α水平增高(P 0.05);肺组织TLR4表达上调、NF-κB核移位增加(P 0.05)。与ALI组比较,低、中、高剂量水飞蓟素组和TAK-242组大鼠大鼠W/D、PaCO_2水平降低、Pa O_2水平明显增高(P 0.05),肺组织病变减轻,肺泡灌洗液中SOD、MPO活性升高(P 0.05),MCP-1、IL-1β、TNF-α水平降低;肺组织TLR4表达下调、NF-κB核移位减少(P 0.05)。结论水飞蓟素可能通过调控TLR4/NF-κB通路抑制氧化应激反应和炎症反应,保护急性肺损伤大鼠肺功能。     

麦粒灸对肺炎链球菌肺炎大鼠肺泡巨噬细胞的免疫调节作用

目的:观察麦粒灸对肺炎链球菌肺炎大鼠肺泡巨噬细胞(AM)的免疫调节作用。方法:将30只SD大鼠随机分为正常组、模型组、麦粒灸组,每组10只。除正常组外,其余组大鼠制备肺炎链球菌肺炎模型。造模成功后,麦粒灸组大鼠于大椎、关元及双侧足三里、肺俞穴行7 d麦粒灸治疗。观察各组大鼠一般情况,血常规检测外周血白细胞计数,ELISA检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-10(IL-10)含量,HE染色观察肺组织病理学变化,中性红法检测AM吞噬功能,qRT-PCR及Western blot分别检测M1、M2型AM标记物CD86、CD206 mRNA及蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠精神懈怠,皮毛晦暗,外周血白细胞计数和血清TNF-α、IL-10含量均升高,肺组织出现病理损伤,AM吞噬OD值降低,CD86 mRNA及蛋白水平升高,CD206 mRNA及蛋白水平降低(P<0.05)。与模型组比较,麦粒灸组大鼠精神及皮毛状态改善,外周血白细胞计数降低,血清TNF-α、IL-10含量降低,肺组织病理损伤改善,AM吞噬OD值升高,CD86 mRNA及蛋白水平降低,CD206 mRNA及...     

补肺健脾益肾方对COPD模型大鼠TLR4/MyD88/NF-κB通路相关因子的影响

目的:研究补肺健脾益肾方对大鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核转录因子κB(NF-κB)通路的影响。方法:采用随机数字表法将40只大鼠随机分为模型组、常规组、实验组、正常组,每组10只。取其干预12周后肺组织和支气管肺泡灌洗液,比较各组大鼠干预期间一般情况,比较各组大鼠TLR4 mRNA、MyD88 mRNA、NF-κB mRNA水平及肺组织形态学评分。结果:正常组大鼠在干预期间皮毛、活动度、饮水进食、体重增长趋势均优于其余三组,常规组及实验组上述表现均优于模型组。与正常组比较,模型组大鼠TLR4 mRNA、MyD88 mRNA、NF-κB mRNA水平均升高; 与模型组比较,常规组、实验组以上指标均低,且实验组低于常规组,差异有统计学意义(均P<0.05)。与正常组比较,模型组大鼠肺组织上皮细胞变性坏死糜烂脱落、气道管壁黏膜充血水肿、气道管壁中性粒细胞浸润评分均升高,与模型组比较,常规组、实验组以上指标均降低,且实验组低于常规组,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:补肺健脾益肾方可通过抑制大鼠TLR4/MyD88/NF-κB通路相关因子表达改善COPD的气道炎症反应,提高治疗效果。     

基于自噬探究补肺活血胶囊对博来霉素诱发小鼠肺纤维化的抑制作用

目的 基于自噬与上皮间质转化(EMT)角度探究补肺活血胶囊对肺纤维化(PF)小鼠的作用。方法 105只C57BL/6J小鼠随机分为正常组,模型组,雷帕霉素组(2 mg/kg,腹腔注射),低、中、高剂量补肺活血组(0.32、0.63、1.62 g/kg补肺活血胶囊,灌胃)和补肺活血+3-MA组(1.62 g/kg补肺活血胶囊,灌胃;30 mg/kg 3-MA,腹腔注射)。通过对小鼠气管内单次注射2.5 mg/kg博来霉素(BLM)来诱导PF,造模成功后1 d开始给药,持续21 d。统计小鼠存活率与体质量,采集肺泡灌洗液(BALF)并测定总细胞与总蛋白,测定肺组织湿干重比与羟脯氨酸水平,苏木精和伊红(HE)染色和Masson三色染色观察肺组织病理学变化,RT-qPCR法检测肺组织EMT相关因子(E-cad、Vim、α-SMA、TGF-β1)mRNA表达,Western blot法检测肺组织EMT相关蛋白以及自噬相关蛋白(p-mTOR、mTOR、P62、LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ、Beclin1)表达。结果 与模型组比较,雷帕霉素与补肺活血胶囊干预后PF小鼠生存率提高,体质量增加,肺组织湿干重比...     

补肺汤对肺纤维化大鼠肺组织TGF-β_1表达影响的研究

目的:观察补肺汤对博莱霉素致肺纤维化大鼠肺组织中转化生长因子(TGF-β1)表达的影响。方法:SD大鼠96只,随机分成正常组、模型组、补肺汤治疗组和强的松组,每组24只。除正常对照组给予生理盐水外,其余各组均予气管内注射博莱霉素诱导肺纤维化。各组在造模后第2天分别予生理盐水、生理盐水、补肺汤流浸膏、强的松混悬液灌胃,并于造模后第7、14、28天分批分组处死8只大鼠。取右肺行HE染色,观察肺组织形态学变化,免疫组化观察各组大鼠肺组织中TGF-β1蛋白的表达。结果:与模型组比较,补肺汤组和强的松组的病理形态学变化明显减轻,肺泡炎及纤维化积分明显降低;肺组织TGF-β1蛋白表达明显降低(P0.01)。结论:抑制肺组织TGF-β1的表达可能是补肺汤抗肺纤维化作用的机制之一。     

基于白细胞介素8/黏蛋白5ac信号探讨益气活血化痰方对慢性阻塞性肺疾病大鼠气道重塑及平滑肌厚度的影响

目的 观察益气活血化痰方通过调控白细胞介素8(IL-8)/黏蛋白5ac(MUC5ac)信号通路对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道重塑及平滑肌厚度的影响。方法 选取53只SPF级SD雄性大鼠，随机抽取10只作为健康组，剩余43只大鼠建立COPD模型，40只采用数字随机表法分为模型组、中药组、抑制剂组、联合组，每组10只。中药组大鼠给予益气活血化痰方32 g/kg灌胃，抑制剂组大鼠予腹腔注射吡咯烷二硫代甲酸铵(PDTC)100 mg/kg,联合组予益气活血化痰方灌胃后腹腔注射PDTC 100 mg/kg。健康组、模型组正常饲养，不予干预。采用动物肺功能检测仪测定各组大鼠肺功能[用力肺活量(FVC)、呼气峰值流速(PEF)、第1 s用力呼气容积(FEV₁)],酶联免疫吸附法检测肺泡灌洗液中IL-8、IL-17、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平，蛋白免疫印迹法检测肺组织IKB激酶2(IKK2)、磷酸化IKB激酶α(p-IKBα)、核转录因子κB(NF-κB)、MUC5ac蛋白表达，苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理形态。结果 与健康组比较，模型组、中药组、抑制剂组...     

利金方对慢性阻塞性肺疾病肺气虚证大鼠IL-8及TNF-α表达的影响

目的 观察利金方对慢性阻塞性肺疾病(COPD)肺气虚证大鼠血清和支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响.方法 将50只SPF级wistar大鼠随机分为空白组、模型组、补肺汤组、利金方高剂量组及利金方低剂量组,每组10只.采用复合因素造模法建立COPD大鼠模型.各药物组分别以相应剂量连续给药14d,检测各组大鼠血清和BALF中IL-8、TNF-α的含量,并通过HE染色和光镜观察气管、支气管及肺组织病理形态学改变.结果 模型组大鼠支气管内有明显慢性支气管炎特征性病理学改变,肺组织显示肺泡结构紊乱,肺泡壁变薄或破裂,肺泡呈囊状扩张,部分融合成肺大疱,符合COPD形态学诊断指标,大鼠血清及BALF中IL-8、TNF-α的含量明显升高;与模型组比较,利金方高、低剂量组和补肺汤组COPD大鼠气管、支气管及肺组织病理学改变均有所减轻,血清及BALF中IL-8、TNF-α的含量均明显下降;利金方高剂量组的病理学减轻程度优于利金方低剂量组和补肺汤组;利金方高剂量组血清及BALF中IL-8、TNF-α的含量较补肺汤组均明显下降.结论 利金方可以降低血及BALF中IL-8、TNF-α的表达,抑制气道炎症,从而达到治疗COPD的目的 .     

扶正祛邪方对慢性阻塞性肺疾病稳定期模型大鼠肺组织细菌菌落的影响

目的探讨扶正祛邪方治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期的可能作用机制。方法将56只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、扶正祛邪组和抗生素组,每组14只。除对照组外,其余各组均采用气管内滴注弹性蛋白酶和细菌建立COPD稳定期大鼠模型。造模后对照组、模型组采用灭菌生理盐水2 ml灌胃;扶正祛邪组给予扶正祛邪方0.95 g/(kg·d)灌胃,各组均每日1次,连续1个月;抗生素组给予盐酸莫西沙星片40 mg/(kg·d)灌胃,每天1次,连续3天,每周重复1次,共4次。治疗前后分别观察肺组织病理、肺组织细菌菌落计数,检测大鼠血清Toll样受体4(TLR4)、核因子κB(NF-κB)、β防御素-2(h BD-2)含量。结果病理结果显示,模型组镜下可见支气管上皮细胞部分变形坏死,部分脱落,肺泡腔增大,肺泡壁变薄,周围多处可见大量炎性细胞浸润;各药物干预组镜下均见不同程度肺泡结构紊乱,肺泡腔增大,肺泡壁变薄,肺泡融合,周围可见少量炎性细胞。治疗前后对照组大鼠肺组织匀浆未分离出细菌,模型组及各治疗组均不同程度分离出细菌,且各治疗组细菌菌落计数较本组治疗前有下降趋势。与对照组比较,模型组大鼠给药前后血清中TLR4、NF-κB、h BD-2均明显升高(P0.05);扶正祛邪组、抗生素组给药前血清中TLR4、NF-κB、h BD-2亦明显高于对照组,而给药后血清中TLR4、NF-κB、h BD-2含量较模型组给药后及本组给药前明显降低(P0.05)。结论扶正祛邪方治疗COPD稳定期可能是通过调节TLR4/NF-κB/h BD-2信号转导通路,调节免疫炎症反应,相对提高下呼吸道细菌负荷阈值,进而减轻病原体的损害。     

苗药金乌健骨方对CIA模型大鼠关节滑膜细胞NF-κB调控作用研究

目的观察苗药金乌健骨方对胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠滑膜细胞核因子-κB(NF-κB)表达的影响。方法将60只Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、苗药金乌健骨方高、中、低剂量组和雷公藤多苷对照组各10只,除空白对照组外,其余各组建立CIA大鼠模型,致炎第7天开始灌胃治疗,4周后处死大鼠,分离关节滑膜,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测滑膜组织中NF-κB/P65、NF-κB/P50、IκBα的表达。结果金乌健骨方高中剂量组和雷公藤多苷对照组NF-κB/P65、NF-κB/P50、IκBα蛋白活性均低对于模型对照组(P0.05),金乌健骨方高剂量组最明显,低于雷公藤多苷对照组(P0.05)。结论苗药金乌健骨方对CIA大鼠关节滑膜细胞NF-κB/P65、NF-κB/P50、IκBα的蛋白活性有抑制作用。     

益气化瘀解毒方对急性呼吸窘迫综合征大鼠NF-κB/p38MAPK通路的影响

目的观察益气化瘀解毒方对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)所致大鼠急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)的保护作用并探讨其作用机制。方法 30只SD大鼠随机分为空白组、模型组及益气化瘀解毒方低、中、高剂量组5组,每组6只。尾静脉注射LPS建立ARDS模型。治疗组益气化瘀解毒方灌胃,造模后16小时处死大鼠收集标本,测定大鼠肺系数、肺通透指数、核转录因子-κB p50、IκBα、p38的蛋白表达及光镜下观察肺组织病理学改变。结果益气化瘀解毒方减少肺损伤大鼠肺泡结构破坏、肺水肿及炎性细胞浸润,降低肺系数(P0.05)与肺通透指数(P0.01),并在一定程度减少核转录因子-κB p50、丝裂原活化蛋白激酶p38,增加抑制因子IκBα的蛋白表达。结论益气化瘀解毒方对LPS诱导的ARDS有一定的保护作用,其机制与抑制NF-κB/p38MAPK炎性反应信号通路有关。     

益气化瘀化痰法制剂对CCL_4所致肝纤维化大鼠肝组织KLF15、NF-κB及下游炎症因子的影响

目的观察益气化瘀化痰法制剂对四氯化碳(CCL_4)所致肝纤维化大鼠模型的治疗作用及其可能机理。方法 105只雄性SD大鼠,随机选取10只为空白对照组,其余大鼠采用腹腔注射40%CCL4玉米油溶液联合高脂低蛋白饮食建立肝纤维化大鼠模型,成模后随机分为模型组(10只)、秋水仙碱组、益气组、化瘀组、化痰组及益气化瘀化痰合剂组(各9只),分别给予相应药物制剂灌胃治疗,模型组及空白对照组以等量生理盐水灌胃,连续用药12周后处死大鼠。苏木素-伊红(HE)、马松(Masson)、天狼猩红(Sirius Red)染色观察肝组织形态学变化,RT-q PCR法检测肝组织KLF15、核因子κB(NF-κB)、白介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、纤维连接蛋白(FN m RNA)表达水平,Western Blot检测肝组织NF-κB、IL-1β蛋白表达水平。结果与空白对照组比较,模型组大鼠肝组织大量胶原纤维沉积,纤维化明显;NF-κB、IL-1β、TNF-α、Col-Ⅰ、FN m RNA表达显著上调(P0.01),KLF15 m RNA表达显著下调(P0.01);NF-κB、IL-1β蛋白表达显著上调(P0.05)。与模型组相比,各药物干预组肝纤维化程度减轻,NF-κB、IL-1β、TNF-α、Col-Ⅰ、FN m RNA表达下调(P0.05),KLF15 m RNA表达上调(P0.05),NF-κB、IL-1β蛋白表达显著下调(P0.05),其中益气化瘀化痰合剂组各项指标改善最明显(P0.05)。结论益气、化瘀、化痰法和秋水仙碱均可以降低肝组织内纤维化程度,改善部分纤维化指标,其作用机制可能与上调肝组织KLF15表达,抑制NF-κB等炎症相关因子的表达有关。其中益气化瘀化痰法合剂优于单法治疗和秋水仙碱治疗。     

调补肺肾三法治疗慢性阻塞性肺疾病大鼠疗效及远后效应

目的:评价调补肺肾(补肺健脾、补肺益肾、益气滋肾)三法治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期大鼠的疗效和远后效应。方法:大鼠随机分为对照组、模型组、补肺健脾组、补肺益肾组、益气滋肾组和氨茶碱组,采用香烟熏吸联合细菌感染法制作COPD稳定期模型,于第9周起分别给予补肺健脾方、补肺益肾方、益气滋肾方及氨茶碱至第20周。于第20、32周分批取材,观察大鼠肺功能和肺组织形态学变化。结果:模型组潮气量(TV)、呼气峰流速(PEF)和50%潮气量呼气流量(EF50)较对照组显著降低(P0.01),病理损伤严重。第20、32周时,3个中药组上述指标均较模型组明显改善(P0.05,P0.01)。第20周时,3个中药可明显减轻肺组织病理损伤,表现在改善大鼠支气管壁增厚、支气管狭窄、肺泡破裂和融合、肺小动脉壁增厚(P0.05,P0.01),并在32周仍有显著疗效(P0.05,P0.01)。结论:调补肺肾三法治疗COPD稳定期大鼠具有良好的疗效和远后效应。