多种来源造血干细胞移植治疗重型再生障碍性贫血

背景：造血干细胞移植是年轻重型再生障碍性贫血患者首选方法,但在中国多数重型再生障碍性贫血患者无合适的供者,单倍体相合或非血缘造血干细胞移植国内外目前还处于探索阶段,联合间充质干细胞移植报道少见。 目的：观察不同干细胞来源造血干细胞移植治疗重型再生障碍性贫血的疗效。 方法：10例(3~52岁)重型再生障碍性贫血患者,分别接受了亲缘HLA相合(2例),单倍体相合(5例),非血缘(3例)的外周血和/或骨髓造血干细胞移植,其中5例患者同时联合了间充质干细胞共移植。预处理方案主要为环磷酰胺、氟达拉滨和抗人胸腺球蛋白,以霉酚酸酯、环孢素A加短疗程的甲氨蝶呤预防移植物抗宿主病,单倍体相合移植的患者在此基础上加马利兰和CD25单克隆抗体;同基因的例5患者预处理方案为抗人胸腺球蛋白+甲基泼尼龙。输注间充质干细胞的量为(0.27~1.85)×10⁶/kg。接受和未接受间充质干细胞组的患者回输的造血干细胞有核细胞分别为(7.4~17.38)×10⁸/kg和(6.09~13.68)×10⁸/kg。 结果与结论：除1例单倍体相合患者移植未成功,+36 d死于并发症外,余患者移植后染色体及DNA指纹检测等说明造血干细胞移植完全供者植入。移植后中性粒细胞达到0.5×10⁹ L^-1,血小板计数≥20×10⁹ L^-1中位时间分别为12 d和13 d;其中造血功能恢复快慢的趋势是同基因移植>外周血或/和骨髓+间充质干细胞移植>单纯外周血或/和骨髓干细胞移植,而亲缘HLA全相合的52岁患者造血恢复最慢。非血缘移植例1、6患者发生了Ⅰ度急性移植物抗宿主病,单倍体相合移植的例2和例10患者发生了Ⅱ度急性移植物抗宿主病后出现了局限性的慢性移植物抗宿主病,余下患者移植后生活质量良好,无慢性移植物抗宿主病;除未接受间充质干细胞的例3患者移植后出现严重感染外,其余患者移植后再未出现严重的感染和出血。结果提示造血干细胞是安全,高效治疗重型再生障碍性贫血的方法,联合应用间充质造血干细胞者患者造血恢复快,移植并发症少。     

单倍体相合造血干细胞移植治疗儿童重型再生障碍性贫血

背景：目前治疗儿童再生障碍性贫血的主要方法为强化免疫抑制治疗或干细胞移植,后者由于供者来源少而受到限制,HLA单倍体相合的异基因造血干细胞在白血病治疗中常见应用,在再生障碍性贫血治疗中较少应用。目的：探讨单倍体相合的造血干细胞移植联合胎盘来源的间充质干细胞移植治疗重型儿童再生障碍性贫血的疗效。方法：患儿,女,7岁,确诊重型再生障碍性贫血1年半,2012-07-09接受HLA单倍体相合的异基因骨髓及外周血单个核细胞联合胎盘来源间充质干细胞移植,供者为母亲。预处理采用氟达拉滨联合环磷酰胺和抗胸腺细胞球蛋白方案。结果与结论：移植后+9 d中性粒细胞>0.5×10⁹ L^-1,+12 d完成造血重建,+100 d查STR提示植入完成。移植后+8个月停用免疫抑制药物,未发生急、慢性移植物抗宿主病。患儿随访18个月,无病生存。结果表明,HLA单倍体相合的造血干细胞联合胎盘来源间充质细胞移植治疗儿童重型再生障碍性贫血是一种安全有效、值得探索的方法。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

骨髓间充质干细胞关节腔注射治疗兔软骨缺损的最适浓度

文题释义： 骨髓间充质干细胞促进软骨再生修复：是一种具有多分化潜能的干细胞,能在分化成软骨细胞后保持一定的增殖能力,可通过归巢迁移至软骨损伤部位,抑制组织炎症,通过旁分泌功能传递信号分子,在软骨的再生修复中起到重要作用。 兔关节软骨缺损模型：兔是实验研究中常用小动物模型,且在小动物中兔具有较大的膝关节,有利于手术操作及结果观察。相比于猪、马、羊等大动物模型,兔模型具有实验周期短、更经济、易于操作及饲养等优点。 背景：骨髓间充质干细胞现已广泛用于动物实验及临床研究中,各研究所用的细胞浓度、治疗次数及研究结果存在明显差异,缺乏最适细胞浓度的标准。 目的：探讨骨髓间充质干细胞关节腔内注射治疗兔软骨缺损的最适细胞浓度。 方法：取6月龄雄性新西兰大白兔30只,按骨髓间充质干细胞关节腔注射浓度随机分为对照组、1×10⁸ L^-1,1×10⁹ L^-1,1×10¹⁰ L^-1,1×10¹¹ L^-1组。在大白兔双侧股骨滑车建立直径3.0 mm、深度2.0 mm的软骨缺损模型。建模成功1周后,对照组双侧膝关节腔内注射1 mL生理盐水,其他4组分别注射1 mL细胞浓度为1×    10⁸ L^-1,1×10⁹ L^-1,1×10¹⁰ L^-1,1×10¹¹ L^-1的骨髓间充质干细胞悬液。注射后6周及12周,大体观察股骨滑车标本,行苏木精-伊红染色、番红-O-固绿染色、Ⅰ型及Ⅱ型胶原免疫组化染色,评估软骨组织修复效果。 结果与结论：对照组术后缺损区域明显,软骨组织无明显再生;1×10⁸ L^-1,1×10⁹ L^-1,1×10¹⁰ L^-1组软骨缺损区域可见软骨组织再生,且修复效果随注射间充质干细胞浓度增加而增强。1×10¹¹ L^-1组软骨修复效果与1×10¹⁰ L^-1组相似(P > 0.05)。结果表明,1×10¹⁰ L^-1是骨髓间充质干细胞关节腔内注射治疗软骨缺损的最佳细胞浓度,浓度过高时并不能增强其修复效果。 ORCID: 0000-0002-4585-8321(陈钢泓) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

真性红细胞增多症患者骨髓单个核细胞植入再生障碍性贫血小鼠

背景：真性红细胞增多症患者骨髓的高增殖低凋亡特性使其造血干细胞植入NOD/SCID小鼠后成功分化出粒红系细胞,但其能否植入并改善再生障碍性贫血小鼠造血功能,目前国内外尚未有报道。 目的：探讨JAK2阳性真性红细胞增多症患者骨髓单个核细胞植入后对再生障碍性贫血小鼠造血重建的影响。 方法：应用注射用重组人γ-干扰素联合白消安的方法建立再生障碍性贫血小鼠模型,随机分为实验组(n=10)和对照组(n=10),给药结束后第5天实验组经尾静脉输注真性红细胞增多症患者骨髓单个核细胞悬液,对照组同法输注等容积生理盐水。输注后第14天检测小鼠外周血常规、骨髓细胞形态、骨髓组织病理变化以及小鼠外周血和骨髓内CD45+细胞的百分含量。 结果与结论：输注后第14天,实验组小鼠血细胞计数三系减少,骨髓涂片可见散在淋巴细胞和早期造血细胞,骨髓组织活检可见骨髓增生减低,少量粒系细胞及幼红细胞,未见巨核细胞,与对照组比较,造血功能无明显改善。对照组小鼠外周血及骨髓均未检测到CD45+细胞,实验组小鼠外周血及骨髓均可检测到人源化的CD45+细胞,且骨髓中CD45+细胞比外周血高,提示JAK2V617F阳性真性红细胞增多症患者骨髓单个核细胞能成功植入再生障碍性贫血小鼠体内,但血常规、骨髓涂片及活检结果显示未能明显改善骨髓造血功能。  中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

人参皂苷对不同强度电离辐射损害人造血干细胞的缓解作用

背景：国内外诸多学者和机构都在研究如何缓解辐射损害,寻找最合适的药物,而人参皂苷作为名贵中药人参的主要药理成分,具有明显的抗氧化作用。 目的：探讨人参总皂苷对不同强度电离辐射损害人造血干细胞的缓解作用及其作用机制。 方法：采集健康人脐血,分离培养得到CD34⁺造血干细胞,分为未处理组和人参皂苷预处理组,之后分别用1,2,5 Gy的X射线对细胞照射24 h。MTT检测细胞增殖活性,应用流式细胞仪测定各组内的活性氧水平,AV/PI双染检测各组细胞的凋亡率,最后用Western blot和Real-time PCR对各组细胞内caspase-3和Nrf-2水平进行定量分析。 结果与结论：治疗剂量的电离辐射可以诱导CD34⁺细胞活性下降,同时诱导其发生凋亡,而且细胞内的活性氧活性也呈现进行性升高,这种作用与电离辐射的剂量相关,用人参皂苷进行预处理后,上述作用可得到明显缓解。Western blot和PCR检测结果显示人参皂苷Rb3可以有效抑制由电离辐射引起的caspase-3表达活性增强,另外还可以促进Nrf-2在CD34⁺细胞内的表达。结果表明人参皂苷可以有效抑制电离辐射诱导CD34⁺造血干细胞的损伤,这种保护作用很可能与其抗凋亡和抑制氧化应激作用相关。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

人骨骼肌源性血管外膜细胞对人脐血CD34+细胞的体外造血支持作用#br#

文题释义： 血管外膜细胞：是血管周围星状细胞,分布于全身的毛细血管和微血管的管壁,是血管周围微环境的重要核心组成成分。它们表达CD146、NG2、PDGFRβ、LepR、Nestin等标记物,而不表达内皮细胞标记物CD144、vWF、CD31及造血细胞标记物CD34、CD45、CD14。研究显示血管外膜细胞是间充质干细胞的前体细胞,其表达间充质干细胞表面标记物,具有多向分化潜能,并可支持造血。 造血干细胞微环境：是造血组织中造血干细胞赖以生存并进行自我更新、多向分化的场所。它由骨内膜微环境和血管微环境组成,前者维持造血干细胞的静止及自我更新,后者促进造血干细胞动员、增殖、分化。 背景：研究显示血管外膜细胞是间充质干细胞的前体细胞,其通过细胞接触或旁分泌效应调节造血干细胞的行为并支持造血,人骨骼肌源性血管外膜细胞对造血的支持作用有待于研究。 目的：从人骨骼肌中分离培养血管外膜细胞并进行生物学特性鉴定,研究其对脐血CD34⁺细胞的体外支持作用。 方法：①利用多参数流式细胞术从人骨骼肌中分选表型为CD146⁺CD56^-CD34^-CD144^-CD45^-的血管外膜细胞,并对其进行生物学鉴定;②建立以CD146⁺人骨骼肌源性血管外膜细胞为滋养层的脐血CD34⁺细胞体外培养体系(实验组),以人骨髓间充质干细胞为滋养层的脐血CD34⁺细胞体外培养体系为阳性对照组,共培养1,2,4周检测培养体系的细胞数量、集落形成能力及免疫表型并进行统计分析。 结果与结论：①通过多参数流式细胞术分选出CD146⁺人骨骼肌源性血管外膜细胞,回测纯度为(91.5±1.85)% (n=5);其表达间充质干细胞表面抗原CD73、CD90、CD105、CD44,不表达造血细胞及内皮细胞表面抗原CD45、CD34、CD31;经诱导培养可向骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞及肌细胞分化;②实验组与阳性对照组相比,在细胞数、集落形成能力及免疫表型方面(CD45⁺、CD34⁺CD33^-、CD14⁺、CD10⁺/CD19)差异均无显著性意义(P > 0.05,n=6);无滋养层的空白对照组培养1周时细胞数量明显减少,2周时几乎无细胞存活;③结果表明,CD146⁺人骨骼肌源性血管外膜细胞与人骨髓间充质干细胞一样对脐血CD34⁺细胞具有体外支持作用。 ORCID: 0000-0002-6768-5273(郑波) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

自体骨髓间充质干细胞联合外周血干细胞移植治疗非霍奇金淋巴瘤2例

背景：为了解决造血微环境受损导致造血重建延迟或失败这一常见难题,国内外研究开始尝试外周血干细胞移植联合骨髓间充质干细胞治疗。 目的：探讨自体骨髓间充质干细胞联合外周血干细胞移植治疗非霍奇金淋巴瘤的安全性和疗效。 方法：对2例确诊为非霍奇金淋巴瘤的患者,采用R-CHOP方案(利妥昔单抗、环磷酰胺、长春新碱、泼尼松)化疗5或6个周期。在自体外周血干细胞动员前取自体骨髓培养骨髓间充质干细胞。动员方案为环磷酰胺、粒细胞集落刺激因子或利妥昔单抗、环磷酰胺、粒细胞集落刺激因子。预处理方案为利妥昔单抗、环磷酰胺、足叶乙甙或利妥昔单抗、环磷酰胺、脂质体阿霉素、地塞米松。回输单个核细胞2.98×10⁶/kg,3.84×10⁸/kg,骨髓间充质干细胞为3.8×10⁶/kg,3.96×10⁶/kg。 结果与结论：例1移植后10 d白细胞下降至最低值,为0.1×10⁹ L^-1,中性粒细胞为0×10⁹ L^-1,移植后12 d 血小板下降至最低值45×10⁹ L^-1,外周血象恢复正常时间为移植后15 d。例2移植后白细胞和血小板低谷时间为移植后5 d,外周血象恢复正常时间为移植后9 d。移植相关并发症为急性上呼吸道感染,外痔感染,经过相应处理感染控制。结果说明自体骨髓间充质干细胞联合外周血干细胞移植治疗后造血重建快,肿块或肿大淋巴结消失,近期疗效可,长期疗效有待进一步观察。     

CTLA4Ig基因修饰骨髓基质细胞诱导HLA单倍型供者T细胞的免疫耐受

背景：CTLA4Ig作为免疫耐受诱导剂是目前预防移植物抗宿主病很有潜力的策略之一。 目的：体外研究腺病毒介导CTLA4Ig基因修饰的骨髓基质细胞诱导HLA单倍型供者T细胞免疫耐受的有效性。 方法：自HLA单倍型相合供者骨髓分离培养骨髓基质细胞,用CTLA4Ig-重组腺病毒按感染复数50转染骨髓基质细胞72 h,免疫荧光法检测CTLA4Ig在骨髓基质细胞中的表达、定位。分别将2×10⁴,4×10⁴及8×10⁴ CTLA4Ig基因修饰的骨髓基质细胞与10⁵个HLA单倍型相合的供者外周血T细胞及10⁵个受者外周血单个核细胞行混合淋巴细胞培养,MTT法测定T细胞增殖抑制率,收集培养上清以ELISA法检测白细胞介素2水平。构建CTLA4Ig基因修饰的骨髓基质细胞层于6孔板,每孔接种骨髓单个核细胞1×10⁵,于培养第5天计数扩增后的单个核细胞数及CFU-GM集落数。 结果与结论：按感染复数50转染的骨髓基质细胞中CTLA4Ig表达阳性率为85%,荧光信号在细胞浆中呈不均匀分布。2×10⁴,4×10⁴及8×10⁴ CTLA4Ig基因修饰的骨髓基质细胞对供者T细胞增殖的抑制率高于未转染基质细胞组,而白细胞介素2水平低于未转染基质细胞组,差异均有显著性意义(P < 0.05)。培养第5天,CTLA4Ig基因修饰的骨髓基质细胞组单个核细胞数及CFU-GM集落数与未转染骨髓基质细胞组比较差异均无显著性意义(P > 0.05)。结果表明腺病毒介导CTLA4Ig基因修饰的骨髓基质细胞在体外能诱导HLA单倍型相合供者T细胞的免疫耐受。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

miR-486对胶质瘤干细胞的抑制作用

背景：既往研究发现,miR-486在胶质瘤干细胞(CD133⁺)中的表达水平显著低于其在胶质瘤非干细胞(CD133^-)中的表达水平,但是miR-486对CD133⁺细胞的影响尚不明确。 目的：探索miR-486对CD133⁺细胞的作用。 方法：利用流式细胞分选将U87胶质瘤细胞中分为CD133⁺和CD133^-细胞。通过脂质体转染构建miR-486过表达的胶质瘤干细胞。 结果与结论：流式细胞分选和纯化获得高比率的CD133⁺胶质瘤干细胞。实时反转录PCR检测发现miR-486在CD133⁺胶质瘤干细胞的表达水平比CD133^-胶质瘤细胞明显下降。脂质体转染成功构建miR-486过表达的胶质瘤干细胞,体外实验发现miR-486高表达抑制胶质瘤干细胞的增殖,将其阻滞于G₁/S期,并促进凋亡。提示miR-486对胶质瘤干细胞具有抑制作用。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

围术期心血管危险因素对骨髓祖细胞的影响

背景：移植自体骨髓干细胞治疗缺血性心脏病已进行了10余年的临床试验,但试验结果在不同的患者中存在差异。因此,有必要鉴定哪些心血管病患者的危险因素影响骨髓干细胞的水平和功能。目的：观察冠心病患者围术期危险因素对骨髓祖细胞数量及功能的影响。方法：选择44例拟行冠状动脉旁路移植的冠心病患者,采集实验室和临床资料;术中经胸骨穿刺采集骨髓,应用Ficoll淋巴细胞分离液密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞,计数并应用锥虫蓝拒染法检测其活性;应用流式细胞仪分析检测CD34⁺、CD133⁺和CD34⁺CD133⁺细胞的水平;应用集落形成试验和细胞迁移试验评价骨髓祖细胞功能。结果与结论：术中经胸骨抽取20 mL骨髓可获得(10-89)×10⁶个骨髓单个核细胞,活性在95%以上,等量的骨髓血获得的骨髓单个核细胞的量与患者年龄之间存在明显负相关关系(n=44,r=-0.788,P=0.001);流式细胞仪检测CD34⁺细胞占(0.94±0.39)%,CD133⁺细胞占(0.46±0.28)%,CD34⁺CD133⁺细胞占(0.53±0.26)%;糖尿病患者骨髓CD34⁺和CD133⁺细胞水平明显低于非糖尿病患者;高龄、女性和心功能较差与骨髓祖细胞集落形成能力降低有关;CD34⁺细胞水平与骨髓单个核细胞的迁移能力存在明显的正相关。结果表明经胸骨应用密度梯度离心法可获得足够数量的骨髓单个核细胞作为缺血性心脏病治疗的供体细胞,年龄、性别、糖尿病、心功能与骨髓单个核细胞数量和功能有关。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

Genomic insult oriented mitochondrial instability and proliferative hindrance in the bone marrow of aplastic mice including stem/progenitor population

Aplastic anemia is the bone marrow failure condition characterized by the development of hypocellularity in both marrow and peripheral blood compartments. Anti-tumor chemotherapeutic agents often exert secondary effect on hematopoietic system leading to aplastic anemia by marrow failure. The precise mechanisms behind the marrow ablative effects of the drugs remain yet to be established. The present study holds a mechanistic approach to unveil the mystery. Aplastic anemia was generated in mice with the administration of busulfan and cyclophosphamide followed by the characterization of the disease with peripheral blood hemogram, histopathological and cytochemical examinations of bone marrow. To gain deep knowledge about the molecular mechanisms of the hematopoietic disruption, cytotoxicity assay, DNA damage measurement, apoptosis study, replicative senescence analysis, redox balance study, mitochondrial membrane potential change assessment, flowcytometric expressional analysis of p21, p53, ATM, Chk-2, Necdin, Gfi-1, c-myc, KU-80 and Sod-2 were done with marrow hematopoietic stem/ progenitor cells (HSPCs). Severe blood pancytopenia and marrow hypocellularity was found in aplastic mice. Proliferative hindrance and apoptosis of marrow cells were identified as the cause behind the hematopoietic catastrophe. The genotoxic effects of the drugs triggered chromatin damage and induced replicative senescence in aplastic HSPCs by upregulating p21 in a p53 independent manner. Moreover, accumulation of genomic insults also caused apoptotic elimination of marrow cells due to disruption of mitochondrial membrane potential by generating redox imbalance. The study established the underlying mechanisms behind hematopoietic disruption during drug induced marrow aplasia. Outcome of the study may be helpful in successful designing of therapeutic strategies for the disease concerned.     

氯甲基苯甲酰氨标记骨髓间充质干细胞在免疫介导骨髓衰竭小鼠模型体内的归巢

背景：再生障碍性贫血是T淋巴细胞免疫亢进破坏造血干祖细胞的一种异常免疫反应性疾病。骨髓间充质干细胞具有支持造血功能同时具有免疫调控作用。 目的：观察骨髓间充质干细胞移植骨髓衰竭模型小鼠体内的归巢情况。 方法：将BALB/c小鼠随机分成正常对照组、骨髓衰竭模型组和骨髓间充质干细胞移植组,于第6天将已标记氯甲基苯甲酰氨的BALB/c小鼠骨髓间充质干细胞经尾静脉注射途径移植给骨髓衰竭模型小鼠,采用流式细胞术和组织学荧光显微镜观察标记细胞在不同组织的动态分布。造模第14 天,观察各组小鼠的平均生存时间、外周血血象和骨髓形态学特征。 结果与结论：骨髓间充质干细胞经尾静脉输注后24 h在受体小鼠骨髓中可发现氯甲基苯甲酰氨阳性标记细胞,72 h时阳性标记细胞数量增多(P < 0.05)。骨髓间充质干细胞移植组小鼠濒死或处死前的白细胞、血红蛋白、血小板、骨髓单个核细胞数与模型组小鼠濒死时相比显著升高(P < 0.01)。骨髓衰竭模型组比骨髓间充质干细胞移植组平均生存时间短(P < 0.05)。结果证实,骨髓间充质干细胞输入骨髓衰竭模型体内能归巢至骨髓,促进造血恢复,减轻骨髓衰竭程度,显著延长生存时间。       

荧光定量聚合酶链反应检测GATA-1、GATA-2、过氧化物酶体增殖物激活受体γ和干细胞因子基因在再生障碍性贫血患者及正常人骨髓间充质干细胞中的表达

背景：GATA-1、GATA-2、过氧化物酶体增殖物激活受体γ和干细胞因子基因在骨髓造血及成脂调控机制中起重要作用。 目的：观察GATA-1、GATA-2、过氧化物酶体增殖物激活受体γ和干细胞因子基因在再生障碍性贫血患者及正常人间充质干细胞中的表达。 方法：收集6例再生障碍性贫血患者及6位正常人骨髓液各10 mL,Ficoll贴壁法分离培养骨髓单个核细胞,达70%~80%融合后扩增传代。取传至第3代的间充质干细胞,应用流式细胞仪进行鉴定。提取总RNA,比较各组基因与内参基因之间的差别。荧光定量聚合酶链反应检测GATA-1、GATA-2、过氧化物酶体增殖物激活受体γ和干细胞因子基因在再生障碍性贫血患者及正常人间充质干细胞中的表达量。 结果与结论：与正常人间充质干细胞相比,再生障碍性贫血患者间充质干细胞的GATA-2和干细胞因子基因表达量降低(P=0.012,0.039),过氧化物酶体增殖物激活受体γ基因表达量升高(P=0.035);两组GATA-1基因表达量差异无显著性意义。提示GATA-2、干细胞因子基因的异常表达可能影响AA患者骨髓微环境的造血调控作用;过氧化物酶体增殖物激活受体γ基因的异常表达可能解释再生障碍性贫血患者骨髓易成脂的原因。     

Impaired functionality and homing of Fancg-deficient hematopoietic stem cells

Fanconi anemia (FA) is a human rare genetic disorder characterized by congenital defects, bone marrow (BM) failure and predisposition to leukemia. The progressive aplastic anemia suggests a defect in the ability of hematopoietic stem cells (HSC) to sustain hematopoieis. We have examined the role of the nuclear FA core complex gene Fancg in the functionality of HSC. In Fancg-/- mice, we observed a decay of long-term HSC and multipotent progenitors that account for the reduction in the LSK compartment containing primitive hematopoietic cells. Fancg-/- lymphoid and myeloid progenitor cells were also affected, and myeloid progenitors show compromised in vitro functionality. HSC from Fancg-/- mice failed to engraft and to reconstitute at short and long term the hematopoiesis in a competitive transplantation assay. Fancg-/- LSK cells showed a loss of quiescence, an impaired migration in vitro in response to the chemokine CXCL12 and a defective homing to the BM after transplantation. Finally, the expression of several key genes involved in self-renewal, quiescence and migration of HSC was dysregulated in Fancg-deficient LSK subset. Collectively, our data reveal that Fancg should play a role in the regulation of physiological functions of HSC.     

乙酰苯肼、X射线和环磷酰胺联合复制小鼠再生障碍性贫血模型

目的以乙酰苯肼、X射线、环磷酰胺联合应用的方法建立小鼠再生障碍性贫血动物模型。方法BALB/c小鼠,采用皮下注射乙酰苯肼100mg/kg,次日X射线2.0Gy照射后,于试验第5天环磷酰胺80 mg/kg腹腔注射,第15天重复以上步骤但不给予射线处理。观察试验小鼠的血象、骨髓象、造血细胞内的线粒体、造血干细胞集落的形成及肝脏、脾脏的病理变化。结果与正常对照组相比,再障模型组小鼠外周血象三系细胞均有显著降低:促红细胞生成素(EPO)含量升高;骨髓有核细胞数显著降低,造血干细胞集落的形成减低,肝脾出现再障的病理改变。结论本方法建立的再生障碍性贫血小鼠模型,简便,成功率高,外周血和骨髓的病理变化持续、稳定,符合再生障碍性贫血的临床表现。     

乳酸链球菌素诱导氧化应激促进人骨肉瘤MG63细胞凋亡

目的:探讨乳酸链球菌素(nisin)对人骨肉瘤MG63细胞凋亡及其相关的氧化应激机制.方法:乳酸链球菌素单独或联合抗氧化剂N-乙酰-L-半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)处理MG63细胞后,采用CCK-8法检测细胞活力;annexin-V/PI双染法检测细胞凋亡;2',7'-二氯荧光素二乙酸酯(...     

骨髓间充质干细胞对再生障碍性贫血患者T细胞的免疫抑制

背景：骨髓间充质干细胞对再生障碍性贫血患者T细胞增殖的影响国内报道较少,而骨髓间充质干细胞是否通过抑制T细胞增殖实现对再生障碍性贫血患者的免疫调节目前尚无定论。 目的：观察人骨髓间充质干细胞对再生障碍性贫血患者T细胞的免疫调节作用。 方法：体外分离培养、扩增人骨髓间充质干细胞并通过形态学特征以及流式细胞术进行表面标志鉴定,将骨髓间充质干细胞分别与正常人和再生障碍性贫血患者外周血提取的T淋巴细胞共培养7 d。应用ELISA法检测各培养上清液中T淋巴细胞分泌的白细胞介素2、γ-干扰素、白细胞介素4及白细胞介素10水平。 结果与结论：再生障碍性贫血组患者培养上清液中T淋巴细胞分泌的白细胞介素2、γ-干扰素水平明显高于正常人(P < 0.05),白细胞介素4、白细胞介素10低于正常人(P < 0.05)。骨髓间充质干细胞可下调白细胞介素2、γ-干扰素表达,同时上调白细胞介素4、白细胞介素10表达,从而调节再生障碍性贫血患者的免疫紊乱。     

Circulating hematopoietic progenitors with T lineage potential

The thymus is seeded via the blood, but the identity of hematopoietic progenitors with access to the circulation in adult mice is unknown. We report here that the only progenitors in blood with efficient T lineage potential were lineage negative with high expression of stem cell antigen 1 and c-Kit (LSK cells). The blood LSK population, like its counterpart in the bone marrow, contained hematopoietic stem cells and nonrenewing, multipotent progenitors, including early lymphoid progenitors and CD62L(+) cells previously described as efficient T lineage progenitors. Common lymphoid progenitors could not be identified in the circulation, suggesting they are not physiological T lineage precursors. We conclude that blood LSK cells are the principal circulating progenitors with T lineage potential.     

Histological differences between sternal and iliac bone marrow in various hematological diseases

Even in normal state, hematopoietic activity is different in terms of the site of bone marrow as well as age. The activity may also differ with bone marrow site in various hematological diseases. We chose 32 cases with various hematological diseases and examined their bone marrow histologically at two different sites (sternum and posterior iliac crest) at almost the same time. We studied the histological differences in 5 cases of malignant lymphoma, 15 cases of aplastic anemia, 8 cases of myelodysplastic syndrome, 2 cases of myeloproliferative syndrome and 2 cases of acute leukemia. In malignant lymphoma, the iliac marrow was slightly hypoplastic compared with sternal marrow but there were no differences in the components of hematopoietic cells, that were thought to reflect normal hematopoietic activity for their respective ages. In 5 among 15 cases of aplastic anemia, nodular hyperplastic areas were observed in sternal marrow even though iliac marrow was severely hypoplastic. The presence of a nodular hyperplastic area is useful for differential diagnosis between aplastic anemia and refractory anemia, because such a histological change was not observed in the cases of refractory anemia. In myeloproliferative syndrome and acute leukemia, there were no differences between sternal and iliac marrow. They were hyperplastic and had almost the same hematopoietic components.