全氟辛烷磺酰基化合物致人肝L-02细胞的凋亡作用

目的 研究全氟辛烷磺酰基化合物(PFOS)致人肝L-02细胞的凋亡作用及凋亡相关基因bax、bcl-2、caspase-9和caspase-3 mRNA表达的变化. 方法 当L-02细胞处于对数生长期时,分别加入不同浓度(0、50、100、200、400 μmol/L)的PFOS处理24、48和72 h,MTT试验检测细胞的生存率;流式细胞仪检测细胞凋亡率;实时荧光定量PCR检测bax、bcl-2、caspase-9和caspase-3 mRNA的水平. 结果 PFOS能抑制L-02细胞的增长,诱导细胞凋亡,并伴随bax、caspase-9和caspase-3 mRNA水平的升高和bcl-2 mRNA水平的下降.当400 μmol/L PFOS处理L-02细胞48 h,bcl-2、bax、caspase-9和caspase-3分别是对照组的0.25、3.90、3.53和2.91倍,细胞凋亡率由对照组2.7%上升至24.3%. 结论 PFOS能抑制L-02细胞的生长,诱导细胞凋亡,其分子机制可能是上调bax、caspase-9、caspase-3基因和下调bcl-2基因的表达.     

全氟辛烷磺酸对SD大鼠的免疫损伤作用

目的观察全氟辛烷磺酸（PFOS）对SD大鼠的免疫损伤作用。方法健康成年SD大鼠24只,雌雄各半,随机等分为4组：溶剂对照组、低、中、高剂量PFOS染毒组;溶剂对照组进食2%Tween-80处理后的普通饲料,低、中、高PFOS染毒组分别进食5、25、125 mg/kg PFOS染毒饲料,连续染毒2个月。末次染毒24 h后,眼眶静脉丛取血后处死大鼠,测定各组大鼠的免疫功能指标的变化。结果中、高剂量PFOS染毒组脾脏、胸腺脏器系数比溶剂对照组降低（P〈0.05）;中、高剂量PFOS染毒组抗体形成细胞数、T淋巴细胞增殖功能、NK细胞的活性,及CD4＋细胞、CD8＋细胞、CD4＋/CD8＋比值及IFN-γ的分泌水平均低于溶剂对照组,差异均有显著性（P〈0.05）,并呈剂量—效应关系。与溶剂对照组比较,高剂量PFOS可降低大鼠对细胞的吞噬百分率和吞噬指数（P〈0.05）;脾脏组织出现不同程度的脾淋巴小结变小,边缘区变薄,白髓体积相对萎缩等病理损害,并随PFOS染毒浓度增加,病理损害越明显。结论全氟辛烷磺酸有致SD大鼠免疫功能损伤作用。     

5种全氟化合物暴露与慢性阻塞性肺病(COPD)的病例对照研究

目的 探讨全氟辛酸(PFOA)、全氟辛烷磺酸钾盐(PFOS)、全氟己烷磺酸(PFHxS)、全氟壬酸(PFHxS)及全氟癸酸(PFDA5)种全氟化合物暴露水平与慢性阻塞性肺病(COPD)的相关性.方法 收集喀什地区第一人民医院呼吸科178例COPD患者作为病例组,同时选择同期在本院体检的180例健康人群作为对照组.采用超...     

全氟辛烷磺酸和番茄红素对大鼠肝脏毒性的影响

目的观察全氟辛烷磺酸（PFOS）和番茄红素（LP）对大鼠肝脏毒性的影响。方法将成年SD大鼠48只随机分为8组：溶剂对照组、低、中、高剂量PFOS染毒组、LP组、LP保护低、中、高剂量PFOS染毒组;溶剂对照组进食2%Tween-80处理后的普通饲料,低、中、高PFOS染毒组分别进食5、25、125 mg/kg PFOS染毒饲料,LP组和LP保护低、中、高剂量PFOS染毒组灌胃LP（20 mg/kg）,每天一次,每周连续5天,连续2个月;末次染毒24 h后,眼眶静脉丛取血后处死大鼠,测定各组大鼠的肝脏功能指标的变化。结果中、高剂量PFOS组大鼠肝脏脏器系数高于溶剂对照组（P〈0.05）,LP保护中、高剂量PFOS组肝脏脏器系数与相同剂量PFOS染毒组相比降低（P〈0.05）;中、高剂量PFOS染毒组肝组织出现明显的肝细胞水肿和弥漫性脂肪变性,经LP保护后肝组织仅出现轻度的气球样变和胞浆疏松化;与溶剂对照组比较,中、高剂量的PFOS染毒大鼠血清的ALT、ASP、AST增高,LP保护中、高剂量PFOS染毒组大鼠血清的ALT、ASP、AST均低于相同剂量PFOS染毒组（P〈0.05）;中、高剂量的PFOS染毒大鼠肝组织中MDA、GSH含量增高,GSH-Px、SOD活力下降,LP保护PFOS染毒组大鼠肝中的MDA、GSH含量降低,GSH-Px、SOD活力增高。结论全氟辛烷磺酸可致SD大鼠肝组织损伤,番茄红素可拮抗PFOS所致肝脏损伤;抗氧化损伤是LP拮抗PFOS致肝损伤的重要机制。     

丹参水溶性成分对H_2O_2氧化损伤牛肝动脉内皮细胞的保护作用

目的 :研究丹参水溶性成分对H2O2氧化损伤牛肝动脉内皮细胞的保护作用。方法:体外培养牛肝动脉内皮细胞,建立H2O2氧化损伤模型,给予丹参水溶性成分治疗后,动态观察细胞的生长状态、形态变化和凋亡情况,检查细胞存活率,测定细胞培养上清液中组织型纤溶酶原激活物(PA)的含量。结果:牛肝动脉内皮细胞被H2O2氧化损伤后,随损伤程度出现不同形态变化,细胞边缘变圆、皱缩,凋亡;细胞培养上清液PA含量明显下降;给予丹参水溶性成分治疗后,细胞形态基本恢复正常,PA含量明显上升,基本接近正常组水平。结论:丹参水溶性成分对H2O2氧化损伤的牛肝动脉内皮细胞具有显著的保护作用。     

纤维蛋白调节大鼠脑内皮细胞基质金属蛋白酶9的实验研究

目的 观察纤维蛋白与大鼠脑血管内皮细胞共培养对(matrix metalloproteinases9,MMP9)蛋白及转录水平表达的动态变化.方法 大鼠脑血管内皮细胞分离后培养,融合良好后.与不同溶度的纤维蛋白共培养,应用酶联免疫方法(ELISA)定量检测MMP9抗原浓度和Real-time PCR半定量检测MMP9 mKNA.结果 纤维蛋白可以特异性诱导大鼠脑血管内皮细胞表达MMP9;不同浓度的纤维蛋白与大鼠脑血管内皮细胞共培养24 h,1.0 mg/mL上清液组的MMP9抗原浓度显著增高(P<0.001);1.0 mg/mL纤维蛋白与大鼠脑血管内皮细胞分别培养0、2、4、8、24和48 h,MMP9浓度在共培养2 h已经升高,8 h时显著升高,在24 h仍然保持在显著升高表达水平(P<0.005),48 h有所下降;不同浓度的胶原蛋白与大鼠脑血管内皮细胞共培养24 h引起MMP9抗原浓度轻度增高,但是在高浓度组明显低于对应浓度的纤维蛋白组引起的MMP9抗原浓度增高(P<0.05);纤维蛋白与大鼠脑血管内皮细胞共培养,转录水平检测提示,MMP9 mRNA的上调呈现出剂量和时间依赖性模式.结论 纤维蛋白是大鼠脑血管内皮细胞特异性激活剂,可以特异性的上调MMP9表达,在转录水平和蛋白水平均呈现为剂量和时间依赖性模式.     

PFOS对BV-2细胞的炎性损伤及机制研究

目的：探讨环境内分泌干扰物全氟辛磺酸(perfluorooctane suifonate,PFOS)对小鼠小胶质瘤细胞BV-2的损伤作用及其炎性反应。方法：利用体外培养的小胶质细胞,给予不同浓度和作用时间的PFOS进行染毒,通过MTT法检测BV-2细胞活力;实时定量PCR的方法观察诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthesis,iNOS）、白介素（interleukin,IL）-6 和肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）-α mRNA的表达。ELISA法检测炎性因子IL-6,免疫蛋白印迹法检测核转录因子kappa B(nuclear factor-kappa B,NF-κB)等信号蛋白表达情况。结果：不同浓度PFOS对BV-2细胞染毒12、24 h后,细胞活力下降,引起明显的细胞损伤。ELISA结果显示, PFOS作用BV-2 24 h后,细胞炎性因子IL-6分泌增加。此外,PFOS还可引起iNOS、IL-6基因表达上调,而TNF-α表达有下降趋势。PFOS与细胞孵育后,炎性通路NF-κB明显激活,表现为磷酸化程度升高。且随染毒浓度的增加,p-NF-κB的表达有上升趋势;此外,随染毒时间的增加,p-NF-κB的表达亦有上升趋势。结论：PFOS可引起BV-2细胞活力降低,激活NF-κB通路,促进炎性因子的释放,该途径可为阐明PFOS引起的神经系统损伤的分子机制提供理论依据。     

PFOS致SH-SY5Y细胞凋亡及可能机制

目的探讨全氟辛烷磺酸盐(PFOS)对成人神经母瘤细胞(SH-SY5Y)的凋亡效应及可能的机制。方法实验中PFOS剂量设置为200、150、100、50、10、1μmol/L和DMSO(对照组)。体外培养SH-SY5Y细胞,以不同浓度PFOS(1、10、50、100、150、200μmol/L)处理细胞。染毒24 h和48 h后用CCK8法检测SH-SY5Y细胞活性,应用Annexin-V FITC/PI双染法结合流式细胞术检测细胞凋亡,紫外和荧光分光光度法检测SH-SY5Y细胞超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽还原酶(GSH)、总活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)的影响。结果 PFOS暴露降低了SH-SY5Y细胞活性,并呈明显的剂量效应关系;PFOS导致SH-SY5Y细胞凋亡;紫外和荧光分光光度法结果显示PFOS引起SH-SY5Y细胞中SOD和GSH水平下降,与对照组相比,最高剂量组PFOS引起GSH含量从8.00±0.12 nmol/mg蛋白降至5.89±0.90 nmol/mg蛋白;同时引起总活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)水平上升,与对照组相比,最高剂量组PFOS引起MDA含量从1.92±0.17 nmol/mg蛋白显著上升至6.95±0.26 nmol/mg蛋白。结论PFOS可能通过对SH-SY5Y细胞产生氧化应激损伤从而对SH-SY5Y细胞产生毒性效应。     

全氟辛烷磺酸对雄性秀丽隐杆线虫的生殖毒性

目的探讨全氟辛烷磺酸(PFOS)对雄性秀丽隐杆线虫的生殖毒性,寻找评价PFOS生殖毒性的替代模型。方法 PFOS设3个染毒剂量(0.1、0.01、0.001mmol/L)组和对照组,同步化后L1期him5幼虫染毒48 h,显微镜下观察精子的大小,计算精子畸形率,挑取him5雄虫与fog2雌虫杂交8h后,计数雌虫产生的后代数目。结果与对照组比较,PFOS 3个剂量组him-5雄虫后代数目差异均有统计学意义(P0.05),后代数目随浓度增大呈现减少趋势;PFOS高、中剂量组精子大小差异均有统计学意义(P0.05),PFOS浓度越高,精子直径越小;3个剂量组非圆形精细胞比例差异均有统计学意义(P0.05),浓度越高,非圆形精细胞比例越大,且呈剂量反应关系(R~2=0.9693,P0.05)。结论线虫后代数目和精子畸形率是评价PFOS生殖毒性的敏感指标,线虫可能成为评价PFOS生殖毒性的替代模型。     

疏血通注射液对慢性脑缺血大鼠的保护机制实验研究

目的 观察疏血通注射液对慢性脑缺血大鼠的神经血管单元主要成分神经元、星形胶质细胞以及脑血管内皮细胞的保护作用.方法 100只雄性SD大鼠制作慢性脑缺血动物模型,随机分为生理盐水、疏血通注射液治疗组.采用TUNEL法结合免疫荧光标记检测神经元、星形胶质细胞以及脑血管内皮细胞的凋亡情况.结果 疏血通注射液能显著改善慢性脑缺血损伤大鼠的神经功能缺损,减少神经元、胶质细胞、脑血管内皮细胞的凋亡.结论 疏血通注射液能保护慢性脑缺血大鼠的神经血管单元,促进神经功能的改善.