长波紫外线对人真皮成纤维细胞线粒体损伤的研究

①目的　观察长波紫外线 (UVA)对人真皮成纤维细胞线粒体的损伤作用及其机制。②方法　用辐射强度 1.90 5× 10 -3 J/m2 UVA辐射人真皮成纤维细胞后 ,检测胞浆内活性氧 (ROS)含量、超氧化物歧化酶 (SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH px)活性、线粒体膜电位 (ΔΦM) ,同时观察成纤维细胞的超微结构。③结果　UVA辐射成纤维细胞后 ,细胞浆内ROS含量升高 (t=5 1.71,P <0 .0 1) ,SOD和GSH px活性降低 (t=93.0 0 ,3.87,P <0 .0 1) ,线粒体膜电位降低 ,与未辐射组相比差异有显著性 (t =14 .6 7,P <0 .0 1)。④结论　UVA对线粒体的损伤作用与氧自由基生成及其抑制细胞抗氧化能力有关     

中波紫外线诱导人真皮成纤维细胞凋亡的研究

①目的　探讨中波紫外线 (UVB)辐射所致人真皮成纤维细胞凋亡的机制。②方法　建立UVB(辐射强度为 1 .1 76× 1 0 - 4 J/cm2 )对体外培养人真皮成纤维细胞氧化损伤模型。用MTT法检测细胞增殖活性 ,酶法测定胞浆中超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH px)活性和活性氧 (ROS)的含量 ,流式细胞仪An nexinV FITC法检测细胞的凋亡率和死亡率。③结果　在离体条件下 ,UVB可显著抑制成纤维细胞的增殖活性 ;UVB可降低细胞内SOD ,GSH px活性 ,显著提高ROS的含量 (t =3.87～ 2 4 .4 1 ,P <0 .0 1 ) ;同时可显著提高细胞的凋亡率 (t =57.4 7,P <0 .0 1 )和死亡率 (t =1 3.2 7,P <0 .0 1 )。④结论　UVB所致人真皮成纤维细胞凋亡与其产生氧自由基、抑制细胞清除自由基能力有关。     

UCP2对紫外线诱导细胞凋亡的影响

研究表明,紫外线辐射诱导细胞内活性氧(ROS)过度累积是导致细胞氧化损伤的最直接因素之一。长波紫外线(UVA)或中波紫外线(UVB)照射角质形成细胞后均可引起DNA损伤,UVA主要是通过生成ROS间接损伤DNA,UVB则是直接损伤DNA[1-2]。线粒体是细胞中的膜性结     

辅酶Q10对UVB损伤人角质形成细胞的保护作用

目的　探讨辅酶Q10对中波紫外线(UVB)照射下人角质形成细胞氧化损伤的保护作用。方法　原代培养人角质形成细胞,建立UVB辐照人角质形成细胞氧化损伤模型,MTT法测定细胞活性;流式细胞仪测定细胞增殖指数;酶法测定脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的水平及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH -Px)等抗氧化物酶活性。结果　应用辅酶Q10后,受损细胞的活性及增殖指数均显著增高,细胞上清液中SOD ,GSH -Px的活性增高,丙二醛(MDA)含量降低,且呈量效正比关系。结论　辅酶Q10有对抗UVB氧化损伤,提高受损细胞的活性及增殖指数作用。其保护机制可能是通过清除氧自由基,提高抗氧化物酶活性来发挥的。     

紫外线对晶状体上皮细胞凋亡、水含量及SOD活性的影响

目的 :探讨紫外线对体外培养的晶状体上皮细胞凋亡作用以及对晶状体水含量和超氧化物歧化酶 (superoxidedismutase,SOD)活性的影响 .方法 :紫外线诱导离体牛晶状体白内障形成 ,以TUNEL技术检测紫外线照射后培养 3,6 ,12 ,2 4h的晶状体上皮凋亡细胞 ,并测定晶状体水含量和SOD活性 .结果 :TUNEL法显示 ,照射组晶状体上皮细胞经紫外线照射后培养 6h出现凋亡细胞 ,对照组晶状体上皮细胞中无明显的凋亡细胞 ;照射组 12h后水含量明显升高 (P <0 .0 1)及SOD活性明显降低 (P <0 .0 1) .对照组水含量和SOD活性无明显变化 .结论 :紫外线诱导晶状体上皮细胞发生凋亡 ,并使晶状体水含量和SOD活性发生改变 ,紫外线诱导的晶状体上皮细胞凋亡是白内障形成的早期机制之一     

黄芩对皮肤细胞紫外线辐射损伤的保护作用

目的 研究传统中药黄芩对紫外线(UVA、UVB)损伤皮肤细胞(角质形成细胞和成纤维细胞)的保护作用。方法 采用30、60、90ml／cm^2的UVB和4、8、12J／cm^2的UVA照射培养的原代角质形成细胞和成纤维细胞，加入中药黄芩进行干预处理，以MTT法检测细胞活性。结果 UVA、UVB照射可引起皮肤角质形成细胞和成纤维细胞损伤，而黄芩预处理后细胞活性可恢复8％～38％。结论 黄芩具有光保护性能，可减轻UVA、UVB对皮肤细胞的损伤作用。     

人参皂苷Rb1与红景天苷对抗皮肤光老化作用的研究

目的:观察人参皂苷Rb1与红景天苷对中波紫外线(ultraviolet B,UVB)辐照后人角质形成细胞光产物水平的影响及人参皂苷Rb1和红景天苷光保护作用机制。方法:使用含10%小牛血清的RMPI-1640培养液培养人角质形成细胞HaCaT,定量(60 J.cm-2)UVB照射细胞,MTT法检测细胞增殖活性;培养液中加入人参皂苷Rb1和红景天苷,测定UVB照射细胞后细胞中超氧化物岐化酶(SOD)、谷光甘肽(GSH)、氧化氢酶(CAT)活性以及丙二醛(MDA)含量的变化。结果:在暴露于UVB后,经人参皂苷Rb1和红景天苷处理,细胞内抗氧化酶SOD、GSH、CAT的活性提高,MDA的产生减少,与未用药组比较差异有统计学意义(均P<0.01)。结论:人参皂苷Rb1和红景天苷具有增加人角质形成细胞内抗氧化酶活性、抑制脂质过氧化反应及抗氧化作用,可以用于对抗皮肤光老化。     

白藜芦醇对UVA致HaCaT细胞氧化损伤的保护作用

目的：探讨白藜芦醇对UVA照射后HaCaT细胞的光保护作用及其可能机制。方法：采用5J／cm^2 UVA照射HaCaT细胞后,分别加入0．01mmol／L和0．1mmol／L的白藜芦醇进行干预．同时设正常对照组与UVA照射组,分别用MTT法检测细胞增殖能力,用羟胺法、比色法、TBA法检测细胞超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性及丙二醛（MDA）含量,电镜观察细胞超微结构的改变。结果：白藜芦醇能提高UVA照射后HaCaT细胞增殖能力、细胞SOD和GSH—Px活性,降低MDA含量,且呈剂量依赖性增加或降低（P〈0．05）。电镜结果显示白藜芦醇能减轻UVA对HaCaT细胞超微结构的损伤。结论：白藜芦醇能减轻UVA对HaCaT细胞增殖的抑制作用、超微结构和氧化功能的损伤,并有随剂量依赖性增加的保护作用,其机制可能与白藜芦醇提高氧化酶活性、清除自由基有关。     

UVB对HaCaT细胞凋亡的影响

①目的　探讨紫外线B(UVB)对HaCaT细胞凋亡的影响及其作用机制。②方法　取培养的HaCaT细胞 ,用 30mJ/cm2 的UVB照射后继续培养 18h ,以流式细胞术检测细胞的凋亡率、线粒体膜电位和细胞内游离Ca2 +水平 ,用透射电镜观察细胞的超微结构。③结果　UVB照射增加了HaCaT细胞的凋亡率 (t =5 .2 36 ,P <0 .0 1) ,降低了线粒体膜电位 (t=6 .897,P <0 .0 1) ,升高了细胞内游离Ca2 + 水平 (t =6 .0 4 6 ,P <0 .0 1)。细胞的超微结构因UVB照射而遭到严重破坏 ,胞浆内的细胞器大量减少 ,线粒体严重空泡化 ,髓样小体形成 ,核内染色质成块并边聚。④结论　线粒体膜电位的下降和胞内游离Ca2 + 的升高可能参与了UVB诱发HaCaT细胞凋亡的过程     

选择性环氧化酶-2抑制剂对紫外线照射诱导的HaCaT细胞凋亡的影响

目的 研究选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂NS398对长波紫外线/中波紫外线(UVA/UVB)联合照射诱导的HaCaT细胞凋亡的影响.方法 人永生化角质形成细胞株HaCaT 细胞传代培养,以含不同浓度NS398的培养液孵育2 h 后接受UVA/UVB 照射,流式细胞术PI单染法检测细胞凋亡率.结果 紫外线照射能显著诱导HaCaT细胞凋亡(P<0.01), NS398预处理则能有效抵抗紫外线诱导的HaCaT细胞凋亡,且呈浓度依赖性(P<0.05).结论 NS398能抑制紫外线照射诱导的HaCaT细胞凋亡,从而发挥防护紫外线损伤的作用.     

α-硫辛酸对Ⅱ型糖尿病大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的 探讨α-硫辛酸对Ⅱ型糖尿病心肌细胞凋亡的影响.方法 SD大鼠随机分为5组:正常对照组,糖尿病模型组,α-硫辛酸低,中,高量剂量组(n=8).对照组大鼠给予普通饮食,实验组大鼠给予高脂高糖饮食1个月后腹腔注射小剂量的链尿佐菌素30 mg/kg,建立Ⅱ型糖尿病模型[1].α-硫辛酸低,中,高量剂量组,并分别按15、30、60 mg/(kg·d)灌胃12周.检测血糖及血脂;测定超氧化物歧化酶(SOD)及谷光胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性,原位末端转移酶标记技术(TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)检测细胞凋亡.结果 与对照组比较,糖尿病模型组大鼠血糖及甘油三脂(TG)、胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)明显增高(P＜0.01),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)明显降低(P＜0.01),血清和心肌组织中的SOD,和GSH-PX的活性降低,心肌细胞凋亡率增加.与糖尿病模型组比较,α-硫辛酸干预组各指标得到改善.尤以中剂量组改善最明显,血糖及TG,TC,LDL-C明显降低(P＜ 0.05),HDL-C显著提高(P＜0.05);SOD和GSH-PX的活性有所改善,细胞凋亡率减少(P＜0.05).结论 α-硫辛酸对Ⅱ型糖尿病大鼠心肌组织具有保护作用,其机制可能与其降低血糖,血脂水平,抑制氧化应激,进而降低细胞凋亡率有关.     

西维因致男性工人精子DNA损伤的机制初探

目的:探讨西维因农药暴露与男性工人精子DNA损伤的关系,并探讨其可能的机制?方法:选择某农药厂西维因生产男工31名为暴露组;该厂行政区男性员工36名为内对照组;同地区男性行政人员22名为外对照组?检测3组人群精子DNA损伤?精浆超氧化物歧化酶(SOD)活性及精子活性氧(ROS)含量?选用培养的小鼠精母细胞(GC2-spd细胞)进行体外功能学验证,在不同浓度西维因染毒条件下,分析细胞存活率?凋亡及SOD活性,ROS含量的变化?结果:与内?外对照组相比,暴露组男性精子DNA断裂损伤显著增加(P < 0.05)?精浆SOD活性降低及精子ROS增加(P < 0.05)?相关性分析的结果显示,精子DNA损伤与精浆SOD的活性负相关(r=-0.53,P < 0.001),与精子ROS水平呈正相关(r=0.32,P=0.002)?小鼠精母细胞随西维因染毒剂量增加细胞存活率显著下降,凋亡增多并且细胞SOD减少及ROS增加(P < 0.05)?结论:西维因可影响男性精液质量,其可能的机制是通过氧化应激导致精子DNA的损伤?     

活血温通方对缺氧心肌细胞氧化应激和凋亡的影响

[目的] 观察活血温通方对缺氧诱导H9c2心肌细胞损伤的保护作用。[方法] 采用H9c2心肌细胞进行缺氧无血清刺激,同时加入活血温通方含药血清和空白血清处理4 h后,检测细胞活力、Caspase 3和Caspase 8活性、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶 （CAT）、丙二醛（MDA）含量,并进行二氢乙啶（DHE）染色观察活性氧（ROS）变化,以及Hoechst染色观察细胞凋亡情况,对比分析各组之间差异。[结果] 与对照组比较,缺氧组H9c2心肌细胞活力、SOD和CAT活性显著下降（P<0.01）,Caspase 3和Caspase 8活性、MDA含量明显升高（P<0.01）,同时累积的ROS含量和细胞凋亡数量增多（P<0.01）。活血温通方含药血清能提升细胞活力、增加SOD、CAT活性（P<0.01）,明显降低MDA水平、Caspase 3和Caspase 8活性（P<0.01）,同时减少ROS累积,抑制心肌细胞凋亡（P<0.01）。[结论] 通过抑制细胞凋亡、减轻氧化应激,活血温通方一定程度上可以保护心肌细胞免受缺氧损伤。     

Overweight and Obesity——Induced Oxidative Stress in Children

Objective To investigate whether overweight and obesity might cause oxidative stress and potential oxidative damage in overweight and obese children, and to explore its possible mechanism. Methods Eighty-five overweight and obese children （OOC）, and eighty-five age-matched healthy children （HC） were recruited in this case-control study. The present study analyzed spectrophotometrically vitamin C （VC）, vitamin E （VE）, and β-carotene （β-CAR） in plasma, as well as the activities of superoxide dismutase （SOD）, catalase （CAT）, and the level of malondialdehyde （MDA） in erythrocytes. Results Compared with those of VC, VE, β-CAR, SOD, CAT and MDA in the HC group, the average values of VC, VE, β-CAR, SOD, and CAT in the OOC group were significantly decreased （P〈0.001）, while the average value of MDA in the OOC group was significantly increased （P〈0.001）. The regression analysis demonstrated that VC, VE, β-CAR, SOD, and CAT were negatively correlated （P〈0.05-0.01）, and MDA was positively correlated with BMI （P〈0.05）. Fitting to the model of multiple stepwise regression of BMI on VC, VE, β-CAR, SOD, CAT, and MDA in 85 OOC was Y = 27.0041 ＋ 0,2541MDA - 2.1448β-CAR -- 0.0090CAr, where F = 43.8088, P〈0.001, r = 0.7866, r^2= 0.6187, adjusted r^2= 0.6046. The findings from the reliability analysis for VC, VE, β-CAR, SOD, CAT, and MDA used to reflect increased oxidative stress and potential oxidative damage in the OOC showed that the reliability coefficients （alpha, 6 items） = 0.7231, P〈0.0001, and that the standardized item alpha = 0.9207, P〈0.0001, Conclusion The present study suggests that there exists an increased oxidative stress in overweight and obese children.     

miR-211对高糖诱导下晶状体上皮细胞氧化应激反应的调控作用

目的 探讨miR-211对高糖诱导下晶状体上皮细胞氧化应激反应的调控作用及其可能存在的作用机制.方法 将HLEC-B3细胞在含不同浓度(0、10、20、40 mmol/L)葡萄糖的培养基中培养48 h,RT-PCR检测细胞miR-211表达,Western blot检测细胞SIRT1蛋白表达,试剂盒检测总抗氧化能力(T...     

CLINICAL SIGNIFICANCE OF VITAMIN C TO AMELIORATE LIPID PEROXIDATION DAMAGE IN CORONARY ARTERY DISEASE

ＣＬＩＮＩＣＡＬＳＩＧＮＩＦＩＣＡＮＣＥＯＦＶＩＴＡＭＩＮＣＴＯＡＭＥＬＩＯＲＡＴＥＬＩＰＩＤＰＥＲＯＸＩＤＡＴＩＯＮＤＡＭＡＧＥＩＮＣＯＲＯＮＡＲＹＡＲＴＥＲＹＤＩＳＥＡＳＥＬｕＢａｑｉｎｇ（吕宝经）；ＲｏｎｇＹｅｚｈｉ（荣烨之）；ＺｈｕＸｉａｎｇ...     

珠子参总皂苷通过促进Nrf2转位拮抗新生大鼠心肌细胞氧化应激损伤

目的观察珠子参总皂苷H2O2所致氧化应激损伤保护效应并探讨其机制。方法 Wistar乳鼠心肌细胞原代培养,用H2O2建立氧化应激损伤模型,然后用珠子参总皂苷(100、200μg/ml)孵育24 h后,观察细胞搏动频率,MTT法检测珠子参总皂苷对细胞活力的影响,流式细胞仪和Hoechst33258染色检测珠子参总皂苷对氧化应激诱导细胞凋亡及胞内ROS含量的影响,比色法测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)含量,同时检测培养液中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性及丙二醛(MDA)含量,实时定量PCR技术检测珠子参总皂苷对SOD/GPX/CAT反应系统SOD1、SOD2、SOD3、CAT和GPX1基因表达的影响,Western blot检测珠子参总皂苷对细胞质和细胞核Nrf2蛋白表达的影响。结果 H2O2明显影响细胞活力和诱导凋亡(IC50为500μmol/L),珠子参总皂苷(100、200μg/ml)处理能显著增加心肌细胞搏动频率和存活率(P<0.01),抑制心肌细胞凋亡和改善细胞形态,降低细胞内ROS含量(P<0.01);减轻H2O2所致乳鼠心肌细胞培养液中LDH、CK释放量,同时能够升高SOD、CAT和GSH-Px活性,降低MDA含量(P<0.05,P<0.01);上调SOD/GPX/CAT反应系统基因表达水平和促进Nrf2核移位,增加心肌细胞核内Nrf2的表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论珠子参总皂苷抑制心肌细胞氧化应激损伤,与Nrf2抗氧化途径的激活和清除ROS有关。     

急性胆源性肝损害时氧自由基作用的研究

动态检测兔胆道严重感染和单纯梗阻模型肝组织中LPO、VE、SOD、GSH-PX含量变化和肝功能、肝组织显微结构变化,发现随时间延长,肝LPO含量显著高于对照组(P<0.01),而抗氧化成分VE、SOD、GSH-PX含量明显减少(P<0.05),与肝功能和肝显微结构改变的程度和性质有密切关系,提示在急性胆源性肝损害时,氧自由基介导的肝细胞脂质过氧化反应起重要作用;LPO等指标的动态检测可准确而敏感地反映肝脏损害情况。     

褪黑素对精神分裂症模型大鼠海马神经元氧化应激损伤的保护作用

目的：研究褪黑素（MT）对精神分裂症模型大鼠海马神经元氧化应激损伤的保护作用及机制。方法：60只雄性SD大鼠被分为5组：对照组、模型组、模型+MT低剂量组（12.5 mg/kg）、模型+MT高剂量组（25 mg/kg）、模型+MT受体阻断剂组（Luzindole,1 mg/kg）,每组12只。采用腹腔注射MK-801的方法建立精神分裂症大鼠模型,造模成功后,模型+MT低剂量组、模型+MT高剂量组以及模型+MT受体阻断剂组均腹腔注射相应药物,对照组及模型组注射10%无水乙醇溶液,持续21 d。采用Morris水迷宫实验检测大鼠的学习记忆功能,试剂盒法检测海马组织匀浆液中氧化应激相关因子ROS、SOD、MDA含量,免疫组织化学法检测神经元标记蛋白NeuN的表达,Western blot法检测海马核因子E2相关因子2（Nrf2）、血红素加氧酶-1（HO-1）蛋白水平。结果：与对照组比,模型组大鼠学习记忆功能受损,海马ROS、MDA含量显著增加,SOD活性下降,NeuN阳性细胞数明显减少,海马Nrf2、HO-1蛋白表达显著升高（均P＜0.05）;与模型组比,模型+MT高剂量组大鼠学习与记忆功能均有较明显的改善,海马ROS、MDA含量均下降,SOD活性升高,NeuN阳性表达增加,Nrf2、HO-1蛋白表达显著升高（均P＜0.01）。与模型+MT高剂量组比,模型+MT受体阻断剂组大鼠学习记忆功能受损,海马ROS含量上升,NeuN阳性表达下降,Nrf2、HO-1蛋白表达下降（P＜0.05）。结论：MT具有保护精神分裂症大鼠海马神经元氧化应激损伤的作用,其机制与调控Nrf2/HO-1信号通路有关。     

骨膜素通过p38 MAPK信号通路抑制缺氧诱导的人牙周膜成纤 维细胞的氧化应激和细胞凋亡

目的 探讨骨膜素对缺氧诱导的人牙周膜成纤维细胞氧化应激与细胞凋亡的影响及其分子机制。方法 体外培养人牙周膜成纤维细胞,厌氧产气袋内缺氧处理48 h。采用不同浓度（25、50、100 ng/mL）的骨膜素处理细胞,随机分为空白组、缺氧组、骨膜素低浓度组、骨膜素中浓度组、骨膜素高浓度组。甲基噻唑基四唑（MTT）检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡率;夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）测定炎症因子白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的含量;应用荧光酶标仪检测细胞活性氧（ROS）水平;ELISA检测细胞内超氧化物歧化酶（SOD）活性;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测HIF-1α、P21、CyclinD1、Bax、Cleaved caspase-3、Bcl-2、P38MAPK、p-p38 MAPK蛋白表达量。结果 缺氧处理后可明显降低细胞存活率（P<0.05）,提高P21、Bax、Cleaved caspase-3蛋白水平（P<0.05）,促进细胞凋亡（P<0.05）,降低CyclinD1、Bcl-2蛋白水平（P<0.05）;与缺氧组相比,骨膜素不同浓度组细胞存活率升高（P<0.05）,细胞凋亡率降低（P<0.05）,P21、Bax、Cleaved caspase-3蛋白水平降低（P<0.05）,CyclinD1、Bcl-2蛋白水平升高（P<0.05）。与空白组相比,缺氧组HIF-1α、p-p38 MAPK蛋白表达水平升高（P<0.05）,IL-1β、IL-6、TNF-α、ROS水平升高（P<0.05）,SOD活性降低（P<0.05）;与缺氧组相比,骨膜素不同浓度组HIF-1α、p-p38 MAPK蛋白水平降低（P<0.05）,IL-1β、IL-6、TNF-α、ROS水平降低（P<0.05）,SOD活性升高（P<0.05）。结论 骨膜素可促进缺氧诱导的人牙周膜成纤维细胞增殖,抑制细胞凋亡,增强细胞抗氧化能力,减轻炎症损伤,其可能通过抑制p38 MAPK信号通路的活化而发挥作用。