复方丹参对犬牙齿移植作用的免疫组织化学研究

目的:研究复方丹参在犬牙齿自体移植中的作用,对犬移植牙齿牙周组织的影响及可能的机制。方法:5只成年雄性杂种犬的移植牙齿分为实验组、对照组,对犬牙齿移植后1周、2周、3周、1个月共4个时间点的移植牙的牙体-牙周联合标本进行组织学HE染色;PV二步法检测TGF-β1和PCNA的表达情况。结果:实验组牙周组织改建活跃,TGF-β1和PCNA的阳性表达明显高于对照组,两组比较存在统计学差异(P<0.001)。结论:复方丹参可提高牙周组织中TGF-β1和PCNA的表达,这可能是其对犬移植牙作用的机制之一。     

环孢素A致牙龈增生与菌斑、胶原代谢的相关性研究

目的:探讨菌斑存在与否对环孢素A(CsA)所致牙龈增生(CIGO)的影响及其可能的发病机制。方法 :SD雄性大鼠40只,实验组、对照组各20只,均拔除左侧上颌磨牙,在同一SD大鼠口内建立有/无菌斑条件下的牙龈模型。实验组每天胃饲含CAS的橄榄油溶液(30 mg/kg),对照组胃饲等量纯橄榄油。定期观察两组大鼠牙龈增生情况,运用免疫组化和RT-PCR方法观察两组大鼠牙龈内CyPA、CD147、MMP-2的表达差异。结果:实验组上颌双侧牙龈增生明显,同一大鼠口内拔牙侧和非拔牙侧牙龈增生程度无显著差异;CyPA和MMP-2的蛋白和mRNA表达水平实验组较对照组均明显减少(P<0.01);CD147的蛋白质和mRMA表达水平在两组间均无显著差异(P>0.05);实验组和对照组中有牙侧和无牙侧CyPA、CD147和MMP-2的蛋白质和mRMA表达水平均无显著差异(P>0.05)。结论:即使无菌斑存在,仍有CIGO发生;CyPA与MMP-2表达的下降,可能是牙龈组织中胶原降解减少、牙龈增生的原因之一。     

环孢素A对大鼠牙龈结缔组织血管基膜层粘连蛋白表达的影响

目的：观察环孢素A（Cyclosporin A,CsA）对大鼠磨牙牙龈结缔组织面积,血管数量,血管面积以及层粘连蛋白（laminin,LN）表达的影响。方法：建立CsA大鼠牙龈增生模型。制备下颌第一磨牙石蜡切片,分别进行HE染色,LN免疫组织化学染色。定量分析牙龈结缔组织面积、血管面积、5个视野血管数量计数。观察牙龈结缔组织内血管基膜LN的表达。结果：①组织测量结果：实验组颊侧牙龈结缔组织面积大于对照组,实验组颊舌侧牙龈结缔组织血管数量总数和均数多于对照组,实验组颊舌侧牙龈结缔组织中的血管总面积占牙龈结缔组织总面积的百分比大于对照组（各组数据P﹤0.05）②免疫组化结果：LN阳性表达于血管基膜、上皮基膜等部位。对血管基膜上LN阳性的血管进行分区域计数,实验组的总数和均数均大于对照组（P﹤0.05）,且实验组血管基膜上LN表达强度上调。结论：①.CsA使大鼠牙龈结缔组织内血管化作用增强。②CsA使大鼠牙龈结缔组织内血管基底膜上LN表达增多。     

TRAF6/c-fos在PTH加速兔下颌骨截骨术后正畸牙移动机制的初步研究

目的　研究外源性甲状旁腺激素（PTH）对下颌升支截骨术后正畸牙移动过程中肿瘤坏死因子受体相关因子6（TRAF6）和c-fos mRNA表达变化,探讨PTH加速截骨术后正畸牙移动的调控机制。方法：48只兔建立下颌升支截骨和下颌第一磨牙正畸移动模型,随机分成实验组和对照组。实验组术后间断性注射PTH 40 μg/kg,对照组皮下注射生理盐水,术后测量下颌第一磨牙近中移动速度。HE染色观察正畸牙压力侧组织形态学变化;TRAP染色计数压力侧牙周组织破骨细胞的数目;Real-time PCR检测下颌第一磨牙牙周组织中TRAF6和c-fos mRNA表达变化。结果：实验组下颌第一磨牙近中移动速度快于对照组,且实验组正畸牙压力侧破骨细胞数目较对照组多。实验组正畸牙压力侧牙周组织TRAF6和c-fos mRNA表达均高于对照组（P<0.05）。结论：外源性PTH可通过促进正畸牙压力侧牙周组织中TRAF6和c-fos mRNA表达,促进破骨细胞的成熟和分化,从而加速下颌升支截骨术后正畸牙的移动。     

环孢素A与牙龈卟啉菌内毒素对人牙龈成纤维细胞增殖及TGF-β1分泌影响的研究

目的 探讨环孢素A(CsA)与牙龈卟啉菌内毒素(Pg LPS)对人牙龈成纤维细胞增殖及分泌转化生长因子-β1(TGF-β1)的影响。方法 用组织块法原代培养健康人牙龈成纤维细胞,分别用800 ng/ml CsA、100 ng/ml LPS、800 ng/ml CsA+100 ng/ml LPS作用于生长良好的第4~8代细胞,用MTT法测定作用后第2、3、5天的吸光值。ELISA法检测第3天时细胞上清中的TGF-β1分泌的变化。结果 细胞经CsA或LPS作用后形态无明显变化,CsA能促进细胞增殖和分泌TGF-β1,LPS作用与其相反,二者联合作用能明显促进细胞的生长及TGF-β1分泌,比单纯使用CsA更明显。结论 CsA与LPS在人牙龈成纤维细胞增殖和TGF-β1分泌方面可能有协同作用。     

He-Ne激光对兔实验性牙移动牙周组织中TGF-β1表达的影响

目的:研究局部照射He-Ne激光后,兔实验性牙移动牙周组织中转化生长因子β1(transforminggrowthfactorbeta,TGF-β1)表达的变化,探讨弱激光对正畸牙周组织改建的影响。方法:35只健康日本大耳白兔,随机分为7组:未加力组及加力1、3、5、7、14、21d组,每组5只。于双侧上颌第一磨牙至切牙间拴结不锈钢螺簧,80g力拉上颌第一磨牙向近中移动。加力组动物采用自身对照,右侧为照射侧,左侧为对照侧。除1、3d组分别照射1次、3次外,其余各组连续照射5次,每天1次。制作以上颌第一磨牙为中心的近远中方向的组织切片,行TGF-β1免疫组化染色。镜下观察,并对图像分析的灰度积分应用统计学软件SPSS10.0进行两样本均数比较t检验。结果:未加力组与加力各组牙周组织的张力区和压力区中TGF-β1均有表达。压力区照射侧1d组牙周组织TGF-β1表达显著低于对照侧(P<0.05),而3～5d组照射侧TGF-β1表达则显著高于对照侧(P<0.05),高峰值出现在牙受力后第5天。张力区TGF-β1表达在加力3～7d组照射侧高于对照侧(P<0.05),高峰值也出现在牙受力后第5天。结论:He-Ne激光照射有效地促进了TGF-β1在兔实验性牙移动牙周组织中的表达。     

环孢素A引发牙龈过度生长过程中IL-6的表达

目的:对体外培养的牙龈上皮细胞和成纤维细胞施加环孢素A(cyclosporin,CsA)刺激,应用免疫组化方法探讨CsA引发药物性牙龈过度生长(gingival overgrowth,GO)的病理机制。方法:对体外培养的牙龈上皮细胞和成纤维细胞分别施加浓度为600、800和1000ng/mL,作用时间为48、72h的CsA刺激。在观察细胞生长曲线及其变化的基础上,通过对细胞铺片的免疫酶染色(ABC法)定量分析和对细胞培养液的酶联免疫吸附检测(ELISA法),分别对牙龈组织细胞IL-6的表达和分泌进行测定,应用SAS 6.0软件包对数据进行统计学分析。结果:牙龈上皮细胞接受CsA刺激后,细胞数量明显增加,与对照组相比具有显著差异(P<0.05)。在接受相同条件CsA刺激下,牙龈上皮细胞和成纤维细胞胞内IL-6表达无显著差异,细胞胞内IL-6表达量与CsA作用时间、浓度间相关。接受CsA刺激的最初24h内,牙龈成纤维细胞分泌IL-6的总量在各CsA浓度实验组及对照组间均无显著差异(P>0.05);牙龈成纤维细胞接受刺激超过24h后,CsA浓度为1000ng/mL的实验组与对照组间在细胞分泌IL-6总量上有显著增加...     

菌斑在环孢素A导致牙龈过度生长中的作用

目的：探讨菌斑在环孢素A导致牙龈过度生长中的作用。方法：20只SD大鼠,拔除单侧下颌磨牙后随机分为实验组（环孢素A,10mg/k&#183;d皮下注射）和对照组（等量生理盐水皮下注射）,4周后切取下颌牙龈,体视显微镜下测量牙龈宽度。牙龈组织切片后镜检,并以Image Pro-plus 6.0图像分析软件对上皮和结缔组织进行线性测量。以SAS6.12软件包进行数据分析。结果：实验组用药后4周有（无）牙侧牙龈宽度均显著高于对照组（P〈0.05）。结论：菌斑虽非环孢素A导致牙龈病理性过度生长的始动因素,但对牙龈病理性生长有一定促进作用。     

隐性TGF-β结合蛋白-3在小鼠下颌第一磨牙牙囊中的表达及意义

目的:研究小鼠牙萌出过程中隐性TGF-β结合蛋白-3(LTBP-3)在下颌第一磨牙牙囊中的表达情况,探讨其在牙萌出过程中的作用.方法:取不同天数的新生昆明小鼠下颌第一磨牙牙胚,剥离牙胚外层的牙囊组织,采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,检测牙囊中LTBP-3 mRNA的表达,应用凝胶成像系统定量软件和SPSS13.0软件包,通过单因素方差分析,比较基因表达的差异.结果:LTBP-3 mRNA在牙囊组织中有表达,且表达随牙胚发育的时期不同而变化:随鼠龄增长,在牙囊中呈递增表达,其中出生后第9.5天和第7.5天表达量高于出生后第1.5天(P分别＜0.05和＜0.01),出生后第9.5天表达量高于第3.5天(P＜0.05),其余时间点问的表达水平无统计学差异.结论:LTBP-3参与了牙囊分化过程的调节,其mRNA在小鼠下颌第一磨牙牙囊中于出生后第1.5天至第9.5天呈递增表达,提示可能在小鼠牙萌出中发挥作用.     

舌神经至不同磨牙牙龈缘距离的相关性研究

目的:研究舌神经至不同磨牙牙龈缘的距离,并分析其相关性,为临床手术提供解剖学依据.方法:随机选用1980～2006年收集的30具成人头部防腐固定标本进行解剖,测量左、右舌神经至下颌第一、二、三磨牙远中龈缘水平方向、远中舌侧牙龈角向下后45°方向、舌侧龈缘中点垂直向下方向的距离,SPSS 13.0统计软件进行统计学处理及相关性分析.结果:左、右舌神经至下颌第一、二、三磨牙牙龈远中龈缘水平方向、远中舌侧牙龈角向下后45°方向、舌侧龈缘中点垂直向下方向的距离,无统计学意义(P>0.05).舌神经至下颌第三磨牙远中舌侧牙龈角向下后45°方向与舌侧龈缘中点垂直向下方向的距离有相关性(P=0.023<0.05,r=0.293);舌神经至下颌第一磨牙与第二磨牙牙龈缘远中龈缘水平方向的距离存在相关性(P=0.00<0.05,r=0.637).结论:左、右舌神经具有相同的解剖结构及特点;舌神经至下颌第三磨牙远中舌侧牙龈角向下后45°方向与舌侧龈缘中点垂直向下方向的距离存在相关性,但相关程度一般;舌神经至下颌第一磨牙与第二磨牙牙龈远中龈缘水平方向的距离存在相关性,并且相关程度好.     

小型猪腭瓣游离移植修复牙龈缺损的组织学观察

目的 :探究腭瓣游离移植在牙龈缺损修复中的应用。方法 :选择12～16个月的雌性巴马小型猪9只,于双侧下颌尖牙远中牙槽嵴顶建立10 mm×10 mm牙龈缺损,下颌右侧采用自体同侧上颌前磨牙腭侧游离腭瓣移植修复牙龈缺损(A组),左侧采用明胶海绵覆盖创面(B组)。术后3、7、14、28 d观察创区牙龈愈合情况,并于术后7、14、28 d取创区牙龈组织,HE染色观察创区组织结构,增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)免疫组化染色观察创区组织细胞内PCNA表达情况。结果:HE染色显示自体游离腭瓣移植组(A组)较明胶海绵组(B组)上皮层更厚,PCNA免疫组化染色显示A组上皮基底层细胞PCNA表达量较B组更高,且差异具有统计学意义。结论:自体腭瓣游离移植修复牙龈缺损,能够促进牙龈角化及上皮生长,实现软组织增量,是修复牙龈缺损的有效方法。     

犬下颌骨牵张成骨后恒牙胚牙周组织TGF-β1、BMP-2的表达

目的：观察犬下颌骨牵张术后BMP-2、TGF-β1在截骨线附近的恒牙胚牙囊、牙周膜及牙槽骨组织中的表达。方法：建立幼年犬下颌牵张成骨模型,对标本采取组织学及免疫组织化学染色,观察犬下颁骨牵张术后BMP-2、TGF-β1在截骨线附近的恒牙胚牙囊、牙周膜及牙槽骨中的表达。结果：牙胚在截骨间隙牵引扩大后可以移至牵引间隙中,并且正常萌出。与对照组相比,实验组BMP-2在各时间段于乳磨牙牙根近中牙周膜及牙槽骨以及恒牙胚近中牙囊牙周膜及牙槽骨中的表达增强;而TGF-β1在乳磨牙牙根远中牙周膜及牙槽骨以及恒牙胚远中牙囊牙周膜及牙槽骨中的表达增强。结论：在牵张作用下乳磨牙及恒牙胚有向截骨间隙内移动的趋势,即通过颌骨牵引延长术可以解决因下颁发育不足造成的牙列拥挤,使本来可能阻生的前磨牙有了萌出空间。     

第三磨牙伸长对下颌各牙根尖应力分布规律影响的光弹实验研究

目的 :探讨单侧上颌或下颌第三磨牙伸长对下颌各牙根尖应力传导规律的影响。方法 :采用透明环氧树脂复制以相同牙列而排成的正常牙合、单侧上颌或下颌第三磨牙伸长的咬合模型各 1副 ,2 .0kg垂直加载 ,切片后投影式光弹仪上观测各牙根尖主应力的大小与方向 ,及其与下颌牙根轴倾角间的关系。结果 :所建 3个 (种 )模型下颌牙根轴倾角无显著差异 ,上颌第三磨牙伸长对侧及下颌第三磨牙伸长侧磨牙的根尖主应力较正常牙合者更偏向远中颊侧 ,应力水平显著升高 (P <0 .0 5 )。而相应另一侧的磨牙根尖主应力方向更偏向近中舌侧。上颌第三磨牙伸长对侧及下颌第三磨牙伸长侧的应力水平均高于正常牙合 (P <0 .0 5 )。结论 :单侧第三磨牙伸长可致牙根尖应力发生改变。     

牙周炎和健康人牙周组织中细胞焦亡水平的比较研究

目的:研究慢性牙周炎和健康人的牙周组织中细胞焦亡水平是否存在差异。方法:分别纳入全身健康、无牙周病史、牙列完整的患者9例作为健康对照组，慢性牙周炎III～IV期患者9例作为牙周炎组。收集患者的牙周组织，免疫组化染色对牙龈组织中消皮素D(GSDMD)、半胱天冬酶-1(caspase-1)、NLRP3炎症小体、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)的表达水平及分布进行定性分析；实时定量PCR检测牙龈组织和牙周膜组织中GSDMD、caspase-1、NLRP3、IL-1β及IL-18 mRNA的表达差异。结果:免疫组化染色显示牙周炎组的牙龈组织中GSDMD、caspase-1、NLRP3、IL-1β、IL-18的阳染色面积均大于健康组(P<0.05)。实时定量PCR检测显示，牙周炎组牙龈组织和牙周膜组织中GSDMD、caspase-1、NLRP3、IL-1β、IL-18 mRNA的表达量明显高于健康组(P<0.05)。结论:慢性牙周炎牙周组织的细胞焦亡水平高于健康人，提示细胞焦亡可能参与了牙周炎的发生发展。     

下颌骨几个变量与第三磨牙阻生的关系

目的:分析下颌骨几个变量与第三磨牙阻生的关系,以了解下颌第三磨牙阻生的发病机理.方法:曲面断层X线片83张,将146侧无缺牙、无多生牙且牙列无明显拥挤者测量下颌第三磨牙倾斜角(θ)、下颌角(a)、下颌骨嵴缘夹角(β)、磨牙后间隙长度(BX)、下颌骨牙槽长度(OB)和第三磨牙牙冠宽度(MD)并将结果进行分析.结果:磨牙后间隙长度、下颌骨牙槽长度和第三磨牙牙冠宽度与第三磨牙阻生相关,下颌角和嵴缘夹角角度与阻生牙无关.结论:下颌第三磨牙阻生与下颌骨发育相关,磨牙后间隙的长度、磨牙后间隙长度与第三磨牙牙冠宽度比值是主要的影响因素.     

环孢素A诱导牙龈增生动物模型的建立及其病理学表现

目的:建立环孢素A(CyclosporinACsA)诱导的牙龈增生小鼠动物模型,观察其病理学表现,并进行组织测量,确定其可靠性。方法:将CsA溶于橄榄油中,按 30mgCsA/kg体重 /d胃饲远交群ICR雄性小鼠,分别在给药 2、4、6、8周时,随机取实验组小鼠下颌前部标本,体视显微镜下测量其下颌前牙龈体积;制作切片,光镜下观察其牙龈病理表现,并利用图象分析系统测量舌侧牙龈缘上皮厚度。结果:小鼠经胃饲 30mg/kg体重 /d的CsA,①4周后,肉眼见部分下颌前牙舌侧牙龈球形肥大;②体视显微镜下牙龈体积测量显示下颌前牙舌侧牙龈 4周至 8周明显增大(P<0. 01);③此时光镜下开始出现明显的牙龈增生病理表现:上皮增厚,上皮钉突明显且变宽,牙龈结缔组织增厚,基质和成纤维细胞增生,血管扩张等。④龈缘上皮厚度测量 2周时上皮增厚(P<0. 01), 4周增厚更明显(P<0. 001),持续至 8周。结论:胃饲小鼠CsA可诱导牙龈增生,其病理表现与其他动物模型和临床病理一致,该模型有一定可靠性,可用于进一步研究CsA诱导的牙龈增生的发病机理。     

大鼠正畸牙槽骨改建初期转化生长因子β1的表达及意义

目的观察大鼠正畸牙齿移动过程中转化生长因子(TGF-β1)在牙槽骨的表达,探讨其在牙槽骨改建中的调控作用.方法选用25只雄性SD大鼠采用别针簧推上颌切牙向两侧移动的方法,建立牙齿移动及牙槽骨改建模型,并于加力后1d、3d、5d、7d、处死动物取材.用HE染色方法观察牙槽骨的组织学变化,用免疫组织化学方法系列观察牙槽骨中TGF-β1的表达,并检测牙槽骨中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.结果正常牙槽骨组织中,TGF-β1在骨细胞和骨髓组织呈弱阳性表达.牙齿移动3d,压力测牙周膜中前体破骨细胞数量增多,TGF-β1呈阳性表达;张力侧骨髓组织中的TGF-β1免疫反应增强.牙齿移动5d,压力侧的骨吸收陷窝内可见多核破骨细胞,张力侧的牙槽边缘也出现成骨细胞,TGF-β1均呈阳性表达.牙齿移动7d时,张力侧出现少量PCNA呈阳性表达.结论正畸牙齿移动初期,压力侧破骨细胞功能活跃,张力侧面骨细胞的增殖活性随时间逐渐增强.TGF-β1参与了正畸牙槽骨改建初期破骨细胞和成骨细胞的分化形成过程,它是正畸牙槽骨改建中一种重要的局部调控因子.     

转化生长因子β1 mRNA在鼠磨牙形态发生过程中表达的研究

目的 探讨转化生长因子β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）mRNA在鼠磨牙形态发生过程中的表达及其意义。方法 制备鼠磨牙各发育阶段标本,用原位杂交法分析TGF-β1mRNA在牙胚中的表达与分布。结果 TGF-β1 mRNA在鼠磨牙形态发生过程中以时间和空间上特异的模式来表达。TGF-β1 mRNA在成釉细胞层和牙乳头细胞中很丰富,TGF-β1在成牙本质细胞和成釉细胞层的表达随这些细胞的分化程度而增高。结论 TGF-β1在牙形成过程中通过旁分泌和自分泌机制发挥重要作用。     

TGF-β1在氟中毒大鼠切牙牙髓中的表达

目的:研究过量氟对大鼠牙髓细胞TGF-β1表达的影响。方法:20只Wister大鼠,随机分为对照组和实验组。对照组用等量蒸馏水灌胃,实验组以20mg.kg-1.d-1氟化钠水灌胃。8周后处死动物,利用磨片、HE染色、免疫组化染色技术观察过量氟对大鼠切牙形态及TGF-β1表达的影响。采用SPSS10.0软件对数据进行t检验。结果:实验组大鼠切牙釉质牙本质生长线明显,球间牙本质增多,牙髓细胞及髓腔内侧牙本质TGF-β1表达显著弱于对照组,差异有显著性(P<0.01)。结论:过量氟可抑制牙髓细胞表达TGF-β1,影响牙体硬组织的结构。     

偏侧咀嚼对大鼠颞下颌关节滑膜VEGF表达影响的研究

目的:研究偏侧咀嚼对大鼠颞下颌关节(TMJ)滑膜血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的影响。方法:30只大白鼠随机分为6组,实验组间断磨除右侧上、下颌磨牙牙冠至龈下,对照组未做处理,饲养条件相同。实验1组磨除牙冠后4周末、实验2、3组磨除牙冠后10、16周末处死动物,取其双侧TMJ切片免疫组化检测。结果:实验1、2、3组双侧颞下颌关节滑膜VEGF表达较对照组增强。结论:偏侧咀嚼可引起颞下颌关节滑膜损伤,VEGF参与了其病理过程。