呼和浩特地区腹泻患者艰难梭菌检测方法比较、临床分离株的毒素特征及药物敏感性分析

目的 了解呼和浩特地区艰难梭菌腹泻患者临床分离株的毒素特征及艰难梭菌药物敏感性，为艰难梭菌治疗和防控提供参考数据。 方法 收集2018年7月至2019年6月间本院疑似艰难梭菌感染的252例腹泻患者的粪便标本。同一样本分别检测：粪便艰难梭菌培养和鉴定、VIDAS酶联荧光法粪便直接检测艰难梭菌毒素A/B(CDAB)和艰难梭菌谷氨酸脱氢酶(GDH)。培养获得的艰难梭菌进行PCR扩增毒素基因和二元毒素基因(tcdA、tcdB、cdtA、cdtB)，以明确是否为产毒菌株；琼脂稀释法测定艰难梭菌对抗菌药物的敏感性。结果 艰难梭菌毒素A/B(CDAB)阳性7例，灰区5例；谷氨酸脱氢酶(GDH)阳性39例；培养出艰难梭菌37株；PCR扩增毒素基因检测30株为产毒株，毒素基因tcdA(-)/tcdB(+)型3株，tcdA(+)/tcdB(+)型27株，二元毒素基因检测均为阴性；克林霉素、头孢西丁耐药率较高，分别为100%和97.3%，莫西沙星耐药率54.1%。万古霉素、甲硝唑无耐药株检出。结论 GDH法具有较好的灵敏性，可作为艰难梭菌感染的筛查；CDAB检测特异性较高，但敏感性较低；毒素基因检测有较高的敏感性和特异性，tcdA(+)/tcdB(+)型艰难梭菌为我院主要流行株；96.7%的临床感染患者为I级；克林霉素、莫西沙星耐药率较高，需限制使用；全部菌株对甲硝唑、万古霉素敏感，可以经验用药。     

呼和浩特地区腹泻患者艰难梭菌检测方法比较、临床分离株的毒素特征及药物敏感性分析

目的 了解呼和浩特地区艰难梭菌腹泻患者临床分离株的毒素特征及艰难梭菌药物敏感性,为艰难梭菌治疗和防控提供参考数据。 方法 收集2018年7月至2019年6月间本院疑似艰难梭菌感染的252例腹泻患者的粪便标本。同一样本分别检测：粪便艰难梭菌培养和鉴定、VIDAS酶联荧光法粪便直接检测艰难梭菌毒素A/B(CDAB)和艰难梭菌谷氨酸脱氢酶(GDH)。培养获得的艰难梭菌进行PCR扩增毒素基因和二元毒素基因(tcdA、tcdB、cdtA、cdtB),以明确是否为产毒菌株;琼脂稀释法测定艰难梭菌对抗菌药物的敏感性。结果 艰难梭菌毒素A/B(CDAB)阳性7例,灰区5例;谷氨酸脱氢酶(GDH)阳性39例;培养出艰难梭菌37株;PCR扩增毒素基因检测30株为产毒株,毒素基因tcdA(-)/tcdB(+)型3株,tcdA(+)/tcdB(+)型27株,二元毒素基因检测均为阴性;克林霉素、头孢西丁耐药率较高,分别为100%和97.3%,莫西沙星耐药率54.1%。万古霉素、甲硝唑无耐药株检出。结论 GDH法具有较好的灵敏性,可作为艰难梭菌感染的筛查;CDAB检测特异性较高,但敏感性较低;毒素基因检测有较高的敏感性和特异性,tcdA(+)/tcdB(+)型艰难梭菌为我院主要流行株;96.7%的临床感染患者为I级;克林霉素、莫西沙星耐药率较高,需限制使用;全部菌株对甲硝唑、万古霉素敏感,可以经验用药。     

伤寒杆菌免疫原制剂和DNA载体用作防御伤寒杆菌、霍乱弧菌和大肠杆菌的菌苗

本文论述一种二价免疫原制剂,可用于制备菌苗防御伤寒杆菌、霍乱弧菌和具有不耐热毒素(LT)所致毒性的大肠杆菌株.伤寒杆菌Ty21a株是无毒力的活菌株,口服后能防御伤寒,用包含编码人体大肠杆菌LT-B亚单位的基因的DNA载体转化该菌株,大肠杆菌LT与霍乱毒素(CT)有80%相同.该亚单位可在伤寒杆菌中表     

细菌毒素菌苗

近年来,由于传染病持续威胁人类健康以及科技的发展,已有可能用新方法解决老问题.因而,重新激起人们对发展疫苗的兴趣与积极性,其中大部分工作是发展抗细菌毒素所致疾病的菌苗(应用经典的方法或新近发展的基因工程技术)和/或毒素亚单位(由基因工程、多肽合成或化学修饰所衍生).本文综述这些新方法,并说明它们在预防几种毒素所致细菌性疾病中的应用,     

霍乱毒素B亚单位与碱性磷酸酶作为口服菌苗载体的效果比较

有人发现霍乱毒素(Ctx)可起佐剂作用,是一种强粘膜免疫原。作者报道将霍乱毒素B亚单位(CtxB)作为一种口服菌苗的载体,以了解CtxB能否起佐剂作用,并与大肠杆菌碱性磷酸酶PhoA载体作比较。 作者将变形链球菌的葡糖基转移酶B基因(gtfB)的编码抗原决定基GtfB.1的低聚核苷酸用遗传学方法分别融合到CtxB基因及大肠杆菌碱性磷酸酶基因(phoA)的5′端,制备成GtfB.1∶∶CtxB及GtfB.1∶∶     

棉铃虫对Bt作物抗性新机制被发现

本报讯近日,从中国农业科学院植物保护研究所获悉,该所经济作物虫害监测与控制团队研究发现,棉铃虫苏云金芽孢杆菌(Bt)毒素受体基因ABCC2的变异可以导致其对Bt作物产生高水平的抗性,但这种变异显著增加了抗性棉铃虫对另外一种生物毒素阿维菌素的敏感性。据悉,苏云金芽孢杆菌(Bt)     

基因脱毒的PT与FHA、69KDa联合的百日咳无细胞菌苗Ⅰ期临床试验

脱毒的百日咳毒素(PT)在全菌体菌苗中是主要成份,对儿童具有保护性,PT菌苗用化学处理灭活,此过程既降低分子的免疫原性,而且不可能完全排除毒性逆转的危险性,为避免这些问题,作者系用基因诱变,得到自然脱毒的PT,并将其与丝状血凝素(FHA)、69KDa蛋白制成一种新的菌苗,并进行Ⅰ期临床试验。新菌苗基因脱毒PT-9K/129G和FHA由     

芋螺基因组DNA提取方法的优化

热带药用海洋生物芋螺产生的芋螺毒素(Conotoxin),已成为神经科学研究的有力工具药和新药开发的新来源。近来出现了从芋螺基因组DNA中克隆新型芋螺毒素基因的新方法．因而快速获得芋螺基因组DNA是分离多样性毒素基因、建立基因库及药用芋螺基因资源开发的前提。本研究采用不同的DNA提取方法．从6种芋螺的不同组织和器官中分离总DNA，经综合比较，建立了简便快速的提取芋螺总DNA的改良苯酚-SDS优化方法。     

交链孢霉毒素的危害评估

交链孢霉毒素是由交链孢霉产生的一类有毒代谢产物,种类繁多,化学结构复杂,在食物中污染范围较广。目前,研究者着重探索了交链孢酚(AOH)、交链孢酚单甲醚(AME)、交链孢毒素(ATXs)、交链孢烯(ALT)、交链孢菌酮酸(TeA)、腾毒素(TEN)和番茄交链孢菌毒素(AAL)这几种毒素的毒性,其中某些毒素可能具有遗传毒性和生殖发育毒性。本文从交链孢霉毒素的毒代动力学、急性毒性、遗传毒性、致癌性、生殖发育毒性和细胞毒性等方面对交链孢霉毒素进行了系统综述,以期为交链孢霉毒素的风险评估提供参考。     

A-超家族芋螺毒素基因的克隆及其内含子遗传进化分析

目的从中国南海独特芋螺中克隆新的A-超家族芋螺毒素基因,并分析其内含子的遗传进化关系。方法以独特芋螺基因组DNA为模板,根据A-超家族芋螺毒素基因的信号肽保守序列和3’-非翻译区(3’-UTR)保守序列设计特异性引物,通过PCR方法扩增出目的基因片段,并将其连接到pMDTM19-T载体,转化到DH5α感受态细胞并测序,同时对新的A-超家族芋螺毒素基因内含子进行遗传进化分析。结果从海南产独特芋螺基因组DNA中克隆到4条新的完整A-超家族芋螺毒素基因。CaI-M1a,CaI-M1b,CaI-M1c是编码同一种芋螺毒素CaI-M1的3个基因,它们的内含子序列存在较大的差异,特别是其中的GT重复不同。CaXXVII-M2编码产生的成熟肽含有5个半胱氨酸,与传统的属于A-超家族的α-芋螺毒素含有4个半胱氨酸的模式不同。结论首次在独特芋螺中克隆到4个新的含有完整内含子的A-超家族芋螺毒素基因,并表明其内含子的多样性与物种进化和捕食习性有一定的联系。     

5-FC/CD∷UPRT联合基因对大鼠脑胶质瘤的治疗作用

目的探讨5-氟胞嘧啶(5-FC)/CD∷UPRT联合基因系统对大鼠脑胶质瘤的治疗作用。方法以逆转录病毒介导构建C6-CD∷UPRT细胞系,应用立体定向技术移植C6-CD∷UPRT细胞至SD大鼠尾状核,设立C6-pLXSN和C6细胞为对照组,建立脑胶质瘤荷瘤鼠模型,应用5-FC腹腔注射治疗,观察肿瘤大小、大鼠存活期、电镜观察细胞形态和流式细胞术检测肿瘤细胞的凋亡指标的变化。结果5-FC/CD∷UPRT治疗组(A组)与各对照组相比,A组肿瘤直径平均为(4.2±0.7)mm,远小于对照组的(8.3±1.3)mm,(P<0.01);对照组平均存活期(32±3)d,A组为(85±2)d(P<0.01);A组电镜显示核染色质分裂明显,并见典型的凋亡小体;A组肿瘤细胞中凋亡细胞所占百分率为19.36%。结论5-FC/CD∷UPRT联合基因对大鼠脑胶质瘤有显著的治疗效果。     

药物诱导的自身免疫性肝损害

有遗传和免疫特异质的个体,在环境因素(感染或毒素等)诱导下可发生自身免疫性肝病。许多基因相互影响构成"允许基因原(permissive gene pool),     

百日咳杆菌不耐热毒素的产生和性质

百日咳杆菌至少能产生三种不同的毒素,即不耐热皮肤坏死毒素(HLT)、脂多糖(LPS)内毒素和百日咳毒素[具有白细胞增多促进因子(LPF)、组胺致敏因子(MSF)和胰岛激活蛋白(IAP)等活性]。近年来,对LPS和百日咳毒素进行了广泛的提纯和鉴定,但对HLT的研究却很少。作者对影响HLT产生的因素、HLT的稳定性、精制和解毒以及解毒的HLT对小鼠和家兔的免疫原性进行了研究。     

孟加拉腹泻病研究国际中心部分研究工作进展

一项重要的技术突破于1980年在实验室中得到证实。采用了一种用同位素标记的化学探头,能特异地鉴别产生致腹泻毒素[不耐热(LT)或耐热(ST)]的大肠杆菌集落。已经分离到产生 LT 或 ST 编码基因的 DNA,并使成单链。这些 DNA“基因探头”是以~(32)p 标     

一种可同时诱导抗白喉毒素和百日咳毒素中和抗体应答的融合蛋白DTA-C180的构建

作者用遗传工程方法将白喉毒素(DT)A链无毒肽(DTA)基因与百日咳毒素(PT)S1亚单位的C180肽基因重组。构建分4步完成:首先将DTA基因通过质粒M13制成单链,通过定向诱变技术将其F2基因的第208     

用鱼苗、绿豆、紫露草观察T-2毒素的生物学效应

本文报告T-2毒素对鱼苗和绿豆的毒性和紫露草微核试验结果。观察到T-2毒素对鲤鱼苗、日本锦鲤鱼苗、野生河鱼苗的LC_(50)为0.04～0.09ppm(96小时),中毒鱼苗死亡百分率及死亡时间,随其浓度增高而上升和前移。经T-2毒素处理8小时的绿豆,发芽抑制率与其浓度有关,当T-2毒素的度浓为1、2.5、5、7.5ppm时,发芽抑制率为     

遗传修饰的毒素用于疫苗和佐剂

迄今 ,疫苗的研制仍以传统的方法进行 ,例如 ,细菌毒素用传统的化学方法脱毒。生物技术和分子生物学的发展使人们对几种细菌毒素的结构 -功能关系有了很好的认识。有赖于此 ,细菌毒素的遗传减毒成为可能。依此方法 ,已产生了遗传脱毒的百日咳毒素 ( PT)。这种分子在婴儿中有高度的免疫原性和效力 ,现已成为百日咳无细胞菌苗 ( Pa)的组分。相同的细菌毒素分子脱毒策略已应用于霍乱毒素 ( CT)和大肠杆菌不耐热肠毒素 ( L T)。当去除毒性的毒素突变体与几种抗原结合接种于粘膜部位时 ,突变体表现出高度的免疫原性和强烈的佐剂性。这些成功的结果表明 ,研制更强有力、更安全的疫苗是可行的     

2006—2011年60株血感染的金黄色葡萄球菌毒素及耐药基因分析

【摘要】目的 了解2006-2011年临床分离的60株血感染金黄色葡萄球菌的耐药情况及毒素基因和耐药基因的流行情况。方法 VITEK 2-compact全自动细菌鉴定仪及配套鉴定卡、药敏卡对细菌进行鉴定及药敏试验;头孢西丁纸片扩散法筛选耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）;应用聚合酶链反应（PCR）检测mecA、耐消毒剂基因（qacA）、杀白细胞素基因(pvl)、肠毒素基因（sea、seb、sec1、sed、see）及中毒休克综合征毒素-1基因( tst)。结果 60株金黄色葡萄球菌对青霉素的耐药率最高（91.7%）,其次为红霉素（65.0%）、克林霉素（65.0%）、庆大霉素（40.0%）。未发现万古霉素、利奈唑胺、替加环素耐药菌株。其中携带耐药基因mecA 13株（21.7%）、qacA 3株（5.0%）、检出毒素基因pvl 4株（6.7%）、肠毒素基因sea 20株（33.3%）、seb 3株（5.0%）、sec 9株（15.0%）及sed 7株（11.7%）,未检出see 及tst。结论 血感染的金黄色葡萄球菌对青霉素、红霉素、克林霉素、庆大霉素耐药率高,同时携带多种毒素及耐药基因,临床应加强毒素及耐药基因检测。     

几种重要的海洋生物毒素

海洋生物毒素是海洋生物活性物质中研究进展最为迅速的领域。随着海洋生物资源的开发利用、生物工程和基因工程技术的发展 ,海洋生物毒素的研究更趋活跃 ,尤以聚醚类毒素和肽类毒素进展最快。一些海洋生物毒素具有毒性强烈 ,结构新颖 ,毒理作用特殊 ,较易合成等特点 ,具备了第三代化学战剂的某些条件 ,具有潜在军事意义。本文介绍了河豚毒素、箭毒蛙毒素、岩沙海葵毒素、芋螺毒素、刺尾鱼毒素等几种重要海洋生物毒素的生物来源、分子结构和理化性质、毒理作用等内容     

贵阳地区幽门螺杆菌毒力基因型与上消化道疾病的相关性

目的研究贵阳地区幽门螺杆菌(HP)中空泡毒素基因(vacA)和毒素相关基因A(cagA)与上消化道疾病间的关系。方法用特异的16SrRNA PCR进行临床分离HP的菌种鉴定,对经过鉴定的152株HP菌株应用PCR进行vacA及其基因亚型、cagA的检测。结果 152株HP中,cagA和vacA阳性率分别为39.5%和100%,vacA sla-m2组合的基因型明显多于s1a-m1、s1b-m2基因型(76.3%vs.15.8%、5.3%)(P<0.05)。不同vacA亚型与慢性胃炎、消化性溃疡及胃癌间未见明显相关性(P>0.05)。结论贵阳地区的HP以cagA阴性、vacA s1a-m2亚型占优势,不同基因型菌株与胃黏膜病变类型无关。