Gadd45G基因在食管鳞癌组织中的异常甲基化及表达

目的:检测食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,本文中简称为食管鳞癌)中生长阻滞和DNA损伤诱导基因G(growth arrest and DNA-damage-inducible 45gamma,Gadd45G)的异常甲基化及表达,并探讨其临床意义。方法:分别应用亚硫酸氢盐转换-甲基化特异性PCR(bisul te conversion-methylation specific PCR,BS-MSP)、RT-PCR及免疫组织化学法检测Gadd45G基因在食管鳞癌组织及癌旁正常组织中的甲基化、mRNA及蛋白表达情况,并分析Gadd45G异常甲基化及表达水平与食管鳞癌患者临床病理特征的相关性。结果:食管鳞癌组织中Gadd45G远端启动子区(region1)的甲基化率为4.7%(6/128),与癌旁正常组织(0.0%,0/128)相比差异有统计学意义(P<0.05);Gadd45G此区域发生甲基化的食管鳞癌组织其mRNA和蛋白表达水平与未发生甲基化的食管鳞癌组织相比差异无统计学意义(P>0.05)。食管鳞癌组织Gadd45G第2个CpG岛的近端启动子区(region2)及第1外显子区(region3)的甲基化率相同,均为45.3%(58/128),与癌旁正常组织相比(0.0%,0/128),差异具有统计学意义(P<0.01);且食管鳞癌组织中此2个区域的甲基化与TNM分期及组织学分化程度密切相关(P<0.05)。食管鳞癌组织中Gadd45G的mRNA和蛋白表达水平显著低于癌旁正常组织(P<0.05),并与TNM分期和组织学分化程度密切相关(P<0.05),与其近端启动子区(region2)及第1外显子区(region3)的甲基化状态之间也有明显相关性(P<0.05)。结论:Gadd45G基因近端启动子区及第1外显子区的高甲基化导致其表达降低,这可能是食管鳞癌发生的机制之一。     

食管鳞癌组织Oct4表达临床意义的探讨

目的:探讨八聚体结合蛋白4(Oct4)在食管鳞癌组织中的表达及其与食管癌患者预后的关系。方法:免疫组织化学SP法检测58例食管鳞癌及21例癌旁正常黏膜组织中Oct4蛋白的表达,分析其与各临床病理指标的关系;并结合Oct4表达情况及患者最短为期8年的随访资料,Kaplan-Meier法和Log-Rank检验分析Oct4与食管癌患者生存的关系;Cox回归模型评估Oct4及各病理指标与患者预后的关系。结果:食管鳞癌组织中Oct4阳性表达率为60.3%(35/58),显著高于正常组织中的19.0%(4/21),χ2=10.519,P=0.001;Oct 4的表达与患者年龄(χ2=0.023,P=0.879)、性别(χ2=0.043,P=0.836)、淋巴结转移(χ2=0.551,P=0.458)、外膜浸润(χ2=0.364,P=0.546)及UICC分期(χ2=1.038,P=0.308)均无相关性,但与组织学分级明显相关,χ2=6.061,P=0.014。死亡患者的Oct4表达程度也明显高于生存患者,χ2=7.958,P=0.005;且Oct4阳性表达患者的生存时间明显短于阴性表达的患者,χ2=7.703,P=0.006。Oct4表达水平与食管癌患者预后明显相关,RR=2.243,P=0.001。结论:Oct4在食管鳞癌组织中的表达水平与组织学分级及患者生存期相关,Oct4是影响食管癌患者预后的独立因素。     

食管鳞癌组织Nanog表达临床意义分析

目的研究食管鳞癌组织中Nanog蛋白表达情况及其与食管癌患者预后的相关性。方法收集河北北方学院附属第一医院2000-01-01-2005-12-31手术切除的食管癌存档标本蜡块69例及正常食管黏膜组织（距肿瘤组织〉5cm）24例,应用免疫组化SP法检测食管鳞癌及癌旁正常黏膜组织中Nanog的表达,分析其与各临床病理因素的相关性;结合Nanog的表达情况及随访资料,Kaplan-Meier法和Log-rank检验分析Nanog与食管癌患者生存的相关性;并建立Cox回归模型评估Nanog及各临床病理因素与患者预后的相关性。结果食管鳞癌组织中Nanog表达阳性率为40.6%（28/69）,显著高于正常组织的8.3%（2/24）,χ^2=8.473,P=0.004。Nanog的表达与组织分化程度（χ^2=7.137,P=0.008）、淋巴结转移（χ^2=4.947,P=0.026）、外膜浸润（χ^2=11.110,P=0.001）和UICC分期（χ^2=5.301,P=0.021）明显相关,而与患者年龄（χ^2=0.238,P=0.626）和性别（χ^2=1.229,P=0.268）无相关性;死亡患者Nanog的表达程度为49.0%（25/51）,明显高于生存患者的16.7%（3/18）,χ^2=5.775,P=0.016;Nanog表达水平与食管癌患者预后明显相关,RR=1.913,P=0.002。结论 Nanog在食管鳞癌组织中呈高表达,与患者生存期相关,Nanog是影响食管癌患者预后的独立因素。     

CREB在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义

目的：研究环磷腺苷效应元件结合蛋白（CREB）在食管鳞状细胞癌（ESCC）组织中的表达及其与患者临床特征、预后之间的关系。方法：选取2010年1—12月在河北医科大学第四医院就诊的60例ESCC患者癌组织及癌旁组织,采用Western blot及免疫组化技术检测组织中CREB蛋白的表达水平,并分析其与临床病理指标及患者预后之间的关系。结果：ESCC组织中CREB表达水平较癌旁组织明显升高（P < 0.01）。组织中CREB高表达的患者往往瘤组织较大、临床分期较晚、更易发生淋巴结转移,同时患者5年总生存率较低而累积复发率较高（P < 0.05）。结论：ESCC组织中CREB表达水平明显升高,且高表达CREB的患者往往提示临床进展及较差预后。因此,CREB具有成为ESCC相关肿瘤标志物的潜力。     

CREB在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义

目的：研究环磷腺苷效应元件结合蛋白（CREB）在食管鳞状细胞癌（ESCC）组织中的表达及其与患者临床特征、预后之间的关系。方法：选取2010年1—12月在河北医科大学第四医院就诊的60例ESCC患者癌组织及癌旁组织，采用Western blot及免疫组化技术检测组织中CREB蛋白的表达水平，并分析其与临床病理指标及患者预后之间的关系。结果：ESCC组织中CREB表达水平较癌旁组织明显升高（P < 0.01）。组织中CREB高表达的患者往往瘤组织较大、临床分期较晚、更易发生淋巴结转移，同时患者5年总生存率较低而累积复发率较高（P < 0.05）。结论：ESCC组织中CREB表达水平明显升高，且高表达CREB的患者往往提示临床进展及较差预后。因此，CREB具有成为ESCC相关肿瘤标志物的潜力。     

食管鳞癌p27的表达及其临床意义

目的　p2 7可抑制细胞周期的向前推进 ,作用于细胞周期的分子更能较精确地反映肿瘤的生物学行为。即可为临床提供更为有价值的信息。本研究的目的是观察p2 7在食管癌的表达特性及阐明该分子标志物与临床病理因素之间的关系。方法　 89例 (5 6例男性、33例女性 )食管鳞癌行外科手术切除。其标本用p2 7抗体行免疫组织化学染色。p2 7表达程度以标记指数表示。结果　p2 7免疫染色在瘤与非瘤组织均固定于细胞核。p2 7的阳性免疫染色在高分化鳞癌 (4 7 3% ,14 /32 )多于其它类型 (35 5 % ,11/31;2 3 1% ,6 /2 6 ) ,有统计学意义 (P <0 0 5 )。结论　食管鳞癌细胞的增殖状况信息可由p2 7的表达程度提示 ,p2 7表达缺失提示食管鳞癌分化差     

p53蛋白在食管鳞癌中表达的研究

目的：研究ｐ５３蛋白在食管鳞癌中的表达，以及在食管鳞癌的发生、发展中所起的作用及其与预后的关系。方法：应用免疫组化ＬＳＡＢ法检测１８１例食管鳞癌组织，３０例出现转移性食管鳞癌的淋巴结及１０例正常官粘膜组织。结果：１０例正常食管粘膜未发现ｐ５３表达，１８１例食管鳞癌ｐ５３阳性率为４７％；ｐ５３阳性病例癌旁非典型增生上皮出现ｐ５３表达，而ｐ５３阴性病例癌六非典型增生上皮亦为ｐ５３阴性。３０例原发部位及     

食管鳞状细胞癌组织中KiSS-1的表达及其临床意义

目的 探讨食管鳞状细胞癌（ESCC）组织中肿瘤转移抑制基因（KiSS-1）的表达并分析其临床意义。方法 采用实时定量PCR方法检测65例ESCC组织和同一患者的邻近正常食管组织中KiSS-1的表达及分析其与各种临床病理因数的关系。结果 KiSS-1在肿瘤组织中的表达明显低于正常食管组织(P=0.017)。同时,KiSS-1的表达缺失与肿瘤的大小、分化程度与浸润程度之间无明显的相关性(P=0.480,P=0.827,P=0.823),而与肿瘤淋巴结的转移相关。另外, KiSS-1表达缺失的患者五年生存率相对更差(P=0.009)。结论 KiSS-1表达缺失可作为ESCC发生淋巴结转移的一个指标,KiSS-1也是判断ESCC患者预后的一个指标。     

AHNAK2蛋白在食管鳞癌中的表达及其临床意义

目的： 探讨AHNAK2蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达情况及其对预后判断的意义。方法：应用组织微阵列免疫组织化学技术(TMA-IHC)研究129例食管鳞状细胞癌中AHNAK2蛋白的表达情况及其与临床病理指标之间的相关性。结果：AHNAK2蛋白在食管鳞癌组织中的表达率显著高于癌旁组织(P = 0.023),不表达、弱表达、中度表达和强表达的肿瘤比例分别为24.8% (32/129)、28.7%(37/129)、17.0%(22/129)和29.5%(38/129),且随着分化程度的升高,该蛋白的表达率也随之增高(P = 0.004)。Kaplan-Meier生存分析显示,AHNAK2蛋白表达阴性患者术后生存时间短于表达阳性的患者(P = 0.027)。通过多因素回归分析发现,AHNAK2蛋白是一个独立预后因素(P = 0.018,HR = 0.461,95% CI：0.243～0.877)。结论：AHNAK2蛋白在食管鳞癌中表达上调,且与分化程度相关,有可能作为食管鳞癌预后判断的分子标志物。     

食管鳞癌组织中结肠腺瘤息肉蛋白的表达及其临床意义

本研究探讨食管鳞状细胞癌组织及正常食管黏膜组织中结肠腺瘤息肉蛋白（APC）表达情况,并分析其与食管鳞状细胞癌临床病理及5年生存率的关系。方法：236例食管癌患者来自河南林州市。利用组织微阵列技术制作组织芯片,采用免疫组化ABC法,分析236例食管鳞癌组织和相应正常食管黏膜组织中APC蛋白的表达情况,探讨其与食管鳞癌患者年龄、性别、肿瘤细胞分化程度、淋巴结转移、TMN分期、大体分型和5年生存率的关系。结果：APC蛋白表达主要表现在胞浆中出现黄棕色颗粒,食管鳞癌组织中APC蛋白阳性表达率明显低于正常食管黏膜组织中的阳性表达率（32.2% vs 92.9%,P<0.05）;APC蛋白低表达与TMN分期相关（P=0.002）,与年龄、性别、肿瘤细胞分化程度、淋巴结转移、和大体分型无关（P>0.05）;APC蛋白低表达食管鳞癌患者的5年生存率明显低于APC蛋白正常表达的食管鳞癌患者（P<0.001）。结论：APC基因表达缺失可能与食管鳞癌的发生、发展相关,导致5年生存率下降,因此上调APC可能是治疗食管鳞状细胞癌（ESCC）患者的新方向,检测APC可能为食管癌预后判断提供依据。     

PCNA和EMMPRIN在食管鳞癌中的表达及其临床意义

目的:探讨增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)及细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(extracellular matrix metalloproteinase inducer,EMMPRIN)在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学法检测PCNA和EMMPRIN在食管鳞癌组织和正常食管上皮组织中的表达水平,并结合临床病理资料进行统计学分析。结果:PCNA在食管鳞癌组织及癌旁正常组织中的表达率分别为61.25%和23.75%,EMMPRIN蛋白在食管鳞癌组织和癌旁正常组织中的表达率分别为57.5%和25.0%,差异均具有统计学意义(P=0.000)。PCNA和EMMPRIN蛋白的表达与食管鳞癌浸润深度、淋巴结转移、TNM分期、分化程度及患者生存时间有显著相关性(P<0.05)。PCNA和EMMPRIN高表达的食管鳞癌患者预后较差。结论:PCNA和EMMPRIN蛋白的表达与食管鳞癌的临床病理学特征密切相关,在食管鳞癌的发生、发展和淋巴结转移中发挥了一定的作用。     

食管鳞癌组织hPOT1和hTERT的表达及其相关因素的研究

目的:探讨人端粒保护蛋白(hPOT1)、端粒酶逆转录酶(hTERT)在食管病变中的表达及其临床意义.方法:采用免疫组化ABC法检测60例食管鳞状细胞癌、30例食管上皮内瘤变和20例食管正常组织中hPOT1和hTERT的表达.分析其间的相关性,并探讨与食管癌,临床病理特征之间的关系.结果:食管鳞癌组织中,hPOT1和hTERT的阳性率分别为93.3%和83.3%,较上皮内瘤变组(23.3%,40%)及正常上皮组(40%,0)显著增加,P=0.00.hPOT1和hTERT的表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移和TNM分期呈正相关,且hPOT1和hTERT在食管鳞状细胞癌的表达呈一定的正相关,P=0.003.结论:hPOT1和hTERT在食管癌组织中表达异常增高,提示hPOT1和hTERT与食管癌的发生、发展有密切的关系.     

RUNX3与OPN在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义

目的研究RUNX3与OPN在食管鳞癌发生、发展、浸润和转移中的作用以及临床意义。方法免疫组化检测60例食管鳞癌病人的食管正常黏膜组织、癌旁不典型增生组织及鳞癌组织中RUNX3蛋白和OPN蛋白的表达情况。结果RUNX3在正常食管黏膜组织、癌旁不典型增生组织及食管癌组织中分别为78．33％（47／60）、43．48％（10／23）、31．67％（19／60）。RUNX3的表达与食管鳞癌浸润深度和分期均明显相关（P〈0．05）。OPN在正常食管黏膜组织、癌旁不典型增生组织及食管癌组织中分别为0％（0／60）、34．78％（8／23）及76．67％（46／60）,OPN的表达与食管鳞癌浸润深度、淋巴结转移和分期均明显相关（P〈0．05）。RUNX3和OPN在食管鳞癌组织、癌旁不典型增生及正常食管黏膜组织中的表达呈明显的负相关（P〈0．05）。结论两者联合检测对探讨食管鳞癌的发生、发展、浸润、淋巴结转移及预后判断可能会有更大的意义。     

喉癌组织HMGA2表达及其临床意义的探讨

目的:探讨喉癌组织中HMGA2的作用及其临床意义.方法:采用实时荧光定量PCR (RQ-PCR)检测HM-GA2基因在20例喉癌组织和癌旁正常黏膜上皮组织中mRNA的水平,同时制作组织芯片应用免疫组化检测其在50例喉癌组织和癌旁正常黏膜上皮组织中蛋白水平的表达.结果:喉癌组织和癌旁正常黏膜上皮组织HMGA2 mRNA的相对表达量分别为0.358±0.261和0.203±0.151,HMGA2蛋白的阳性率分别为86.0％ (43/50)和27.3％(12/44),两组比较差异有统计学意义,P值均＜0.05;HMGA2的表达与与患者性别、年龄无显著相关性,P＞0.05;与TNM分期和淋巴结转移有显著相关性,P＜0.05.结论:HMGA2在喉癌组织中的表达与肿瘤的发生、侵袭和转移密切相关,可能成为喉癌新的肿瘤标志或预后因子.     

MMP-2与TIMP-1在食管鳞癌细胞中的表达及临床意义

目的：检测食管鳞癌（ESCC）及癌旁正常组织中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）以及组织抑制因子（TIMP-1）的表达,研究其与临床特征的关系,为临床ESCC恶性程度和预后判断提供新的依据。方法应用组织芯片技术及免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连接法（S-P法）对60例ESCC组织及癌旁正常食管组织中MMP-2、TIMP-1蛋白表达进行检测,分析其阳性表达与性别、年龄、组织学分级、浸润深度、淋巴结转移及肿瘤分期之间的关系。结果 MMP-2、TIMP-1在癌旁正常上皮组织不表达;MMP-2主要在癌细胞中表达, TIMP-1主要在间质细胞中表达,二者在食管鳞状细胞癌中表达阳性率分别为38.3%和46.7%,高于正常组织（P﹤0.05）。MMP-2与ESCC的浸润深度、淋巴结转移和TNM临床分期有关,差异有统计学意义（P﹤0.05）,肿瘤浸润程度深者MMP-2阳性表达率高;无淋巴结转移者的MMP-2阳性表达率低于有淋巴结转移者;临床病理分期为Ⅰ、Ⅱ期患者的阳性表达率低于Ⅲ期者。TIMP-1的表达与ESCC性别、年龄、组织学分级、浸润深度、淋巴结转移及临床病理分期无关（P﹥0.05）。结论 MMP-2能在ESCC的侵袭、转移中起重要作用,TIMP-1可能与早期ES-CC的生物学性状有关,MMP-2与浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关,二者有助于判断ESCC的生物学行为。     

食管鳞癌组织Survivin mRNA和蛋白表达的临床意义

目的:研究食管鳞癌组织中SurvivinmRNA与蛋白表达的相互关系,探讨两者在食管鳞癌发生和发展中的作用.方法:采用原位杂交技术检测30例食管鳞癌及相应的癌旁组织中Survivin mRNA的表达,同时采用免疫组织化学SP法检测相应标本中Sur-vivin蛋白的表达.结果:在食管鳞癌和相应的癌旁组织中Survivin mRNA表达的阳性率分别为66.7%和10.0%,Survivin蛋白表达的阳性率分别为76.7%和16.0%.食管鳞癌组远高于癌旁组,差异有统计学意义,P<0.01.Survivin mRNA与蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达具有一致性(P>0.05),其阳性率高低与性别、年龄、肿瘤大小无关,而与组织学分级、淋巴结转移、TNM分期有关.结论:Sur-vivin基因的异常表达可能对食管鳞癌的发生和发展起重要作用.     

贲门腺癌组织中Smad基因家族不同成员的表达及其临床意义

目的:检测贲门腺癌(gastric cardia adenocarcinoma,GCA)中Smad基因家族不同成员的表达水平及其相关性,并探讨其临床意义。方法:收集河北医科大学第四医院2004至2009年间病理确证的贲门腺癌患者110例,RT-PCR检测贲门腺癌和癌旁组织中Smad2、Smad3、Smad4和Smad7 mRNA的表达,免疫组织化学方法检测贲门腺癌组织和癌旁组织中p-Smad2/3、Smad4和Smad7蛋白的表达并分析其相关性,分析p-Smad2/3、Smad4和Smad7蛋白表达与贲门腺癌临床病理特征的关系。结果:贲门腺癌组织中Smad2、Smad3和Smad4 mRNA表达水平均显著低于相应癌旁组织[(0.4956±0.1862)vs(0.8611±0.2914),P<0.01;(0.4713±0.1712)vs(0.8314±0.2811),P<0.01;(0.5145±0.1987)vs(0.8954±0.2856),P<0.01],而Smad7 mRNA表达水平显著高于癌旁组织[(0.5114±0.1962)vs(0.2012±0.1006),P<0.01]。贲门腺癌组织p-Smad2/3、Smad4蛋白表达的阳性率显著低于癌旁组织(42.7%vs 93.6%,P<0.01;45.5%vs 95.5%,P<0.01),且与肿瘤TNM分期和组织分化程度密切相关(P<0.05)。贲门腺癌组织Smad7蛋白表达阳性率显著高于癌旁组织(48.2%vs 3.6%,P<0.01),且与肿瘤组织分化程度密切相关(P<0.05)。贲门腺癌中p-Smad2/3与Smad4蛋白的表达呈正相关,但它们均与Smad7蛋白表达无明显的相关性。结论:贲门腺癌组织低表达Smad2、Smad3和Smad4,高表达Smad7,Smad基因的异常表达可能参与贲门腺癌的发生、发展。     

ADAMTS1、ADAMTS18基因在食管鳞癌中的表达及其临床意义

目的:分析食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)组织中含凝血酶敏感素1型基序的解聚素样金属蛋白酶(a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 1,ADAMTS1)及ADAMTS18基因的表达,探讨ADAMTS1和ADAMTS18基因在ESCC发生、发展中的作用。方法:收集2008年6月至2011年8月河北医科大学第四医院手术切除的72例ESCC组织及癌旁组织,应用RT-PCR及免疫组化S-P法分别检测ESCC组织及癌旁组织中ADAMTS1、ADAMTS18 mRNA及其蛋白的表达。结果:1 ESCC组织中ADAMTS1 mRNA的表达显著低于相应的癌旁组织[(0.394±0.123)vs(0.895±0.276),P<0.01],有淋巴结转移组ADAMTS1 mRNA表达显著高于无淋巴结转移组[(0.482±0.157)vs(0.298±0.102),P<0.05];2ESCC组织中ADAMTS18 mRNA表达显著低于相应的癌旁组织[(0.361±0.115)vs(0.879±0.265),P<0.01),高、中分化鳞癌组ADAMTS18 mRNA表达显著高于低分化鳞癌组[(0.496±0.153)vs(0.232±0.088),P<0.05];3ESCC组织中ADAMTS1和ADAMTS18蛋白阳性表达率显著低于癌旁组织[38.9%(28/72)、34.7%(25/72)vs94.4%(68/72)、93.1%(67/72),均P<0.01],高、中分化组ADAMTS18蛋白阳性表达率显著高于低分化鳞癌组[45.4%(20/44)vs 17.8%(5/28),P<0.05];4ESCC组织中ADAMTS1与ADAMTS18的蛋白表达无明显相关性(χ2=1.338,P>0.05)。结论:ADAMTS1基因在ESCC中的异常表达可能与ESCC的发生及有无淋巴结转移有关;ADAMTS18基因在ESCC中的异常表达可能与ESCC的发生及组织分化程度有关;两种基因在ESCC组织中蛋白的表达不存在明显的相关性。     

p53和VEGF在食管鳞癌中的表达及其临床意义

背景与目的:实验研究证明p53和血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)协同表达在肿瘤血管生成中有重要作用。本研究的目的是探讨p53如何参与血管生成,以及p53和血管内皮生长因子的表达与食管鳞癌(esophagealsquamouscellcarcinoma,ESCC)临床病理参数和预后的关系。方法:采用免疫组织化学方法,检测76例食管鳞癌患者手术切除标本p53和VEGF的表达,并用FⅧ因子抗体标记癌组织血管内皮细胞,计数肿瘤内微血管密度(microvesseldensity,MVD)。结果:p53和VEGF的阳性表达率分别为60.5%和56.6%,两者共同表达率为42.1%。p53和VEGF阳性表达率与食管鳞癌的远处转移和血管浸润具有显著相关性(P<0.05;P<0.01)。远处转移和血管浸润最常发生于突变型p53和VEGF均阳性表达的患者。p53(+)或VEGF(+)组MVD(31.7±11.5;33.8±11.7)均显著高于p53(-)或VEGF(-)组(22.4±10.6;21.2±9.3,P<0.05),p53和VEGF均阳性表达时MVD最大(35.2±11.9,P<0.05)。结论:突变型p53表达与食管鳞癌的血管生成和远处转移密切相关;p53和VEGF的表达可作为评估食管鳞癌恶性程度的重要生物学指标,联合检测p53和VEGF表达具有重要的临床应用价值。