AMPK在肿瘤放射治疗中的作用

腺苷酸活化蛋白激酶（AMP activated protein kinase,AMPK）,是细胞能量代谢感受器,在维持细胞能量平衡中发挥重要作用,与肿瘤的发生发展有密切关系。活化的 AMPK 通过抑制哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mam-malian target of rapamycin,mTOR）抑制蛋白质合成、激活细胞周期检查点如激活 p53及周期依赖性蛋白激酶（CDK）的抑制因子 p21 cip1阻滞细胞周期进程,从而抑制细胞生长。近年研究发现,电离辐射在癌细胞中通过共济失调毛细血管扩张突变基因（ATM）激活 AMPK 并介导信号转导,活化 p53-p21 cip1信号并抑制 mTOR 通路。并且,联合 AMPK 激活剂可调节肿瘤细胞的辐射敏感性。本文就 AMPK 信号通路在肿瘤放疗方面的最新研究进展进行综述。     

NDR蛋白激酶家族调控肿瘤发生发展机制的研究进展

NDR（nuclear Dbf2-related）蛋白激酶家族是蛋白激酶AGC家族的一个亚家族,属于进化上高度保守的丝氨酸/苏氨酸(Ser／Thr)蛋白激酶家族成员,目前发现的人类NDR激酶家族包括NDR1/STK38(serine/threonine kinase 38)、NDR2/STK38L(serine/threonine kinase 38-like protein)、LATS1 (large tumor suppressor-1) 和LATS2四个成员。NDR蛋白激酶表达较为广泛,其主要通过激酶活性来调节细胞的功能,参与细胞增殖与分化。NDR蛋白激酶活化异常可导致其下游基因的异常活化,尤其调控一些原癌基因,如LATS1/2可通过经典HIPPO信号通路调控原癌基因Yorkie转录活性,发挥抑癌作用;NDR1/2一方面通过调控中心体复制、染色体校正参与稳定染色体组、凋亡信号等发挥抑癌作用,另一方面通过增强原癌基因C-myc的稳定性发挥促癌作用,值得关注的是NDR1/2亦可通过调节P21的稳定性而发挥抑癌和促癌的双重作用。本文主要综述近年来NDR蛋白激酶家族在肿瘤研究领域中的研究进展,以期为靶向蛋白激酶的抗肿瘤治疗策略提供新的靶标。     

宫颈癌中卵泡抑素样蛋白过表达对下游基因的影响及生物信息学分析

 目的 利用基因芯片技术对卵泡抑素样蛋白（FSTL1）下游基因及信号转导通路进行生物信息学分析，探讨FSTL1在宫颈癌中的调控机制。方法 采用基因芯片筛选转染FSTL1后HeLa细胞中的差异表达基因；运用生物信息学分析方法寻找FSTL1在宫颈癌中的差异表达基因及调控机制；用反转录实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）对29个差异表达基因加以验证。结果 与阴性对照组相比，实验组中有881个差异表达基因，这些差异表达基因主要富集在转录调控、细胞增殖、凋亡、黏附等生物学过程以及癌症的转录误调节、丝裂源活化的蛋白激酶（MAPK）、P53等信号通路；RTqPCR验证结果显示FSTL1上调PI3K/AKT/Bax/Bcl-2和P53信号相关通路因子，这与基因芯片结果基本符合。结论 FSTL1的差异基因富集于转录调控、细胞增殖、凋亡、黏附等生物学过程，可能通过调控PI3K/AKT/Bax/Bcl-2和P53信号通路来参与宫颈癌的发生发展。     

扶正抑瘤汤通过PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制非小细胞肺癌增殖、凋亡及自噬

目的 探讨扶正抑瘤汤对非小细胞肺癌细胞增殖、侵袭、迁移、凋亡、自噬以及PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响。方法 采用不同浓度（12.5 mg/mL、25 mg/mL、50 mg/mL、100 mg/mL、200 mg/mL、400 mg/mL）扶正抑瘤汤体外培养非小细胞肺癌A549细胞, CCK-8法测定细胞增殖抑制率;Transwell小室侵袭实验检测细胞侵袭能力;划痕实验检测细胞迁移能力;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot检测细胞自噬相关蛋白以及PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白的表达水平;透射电镜下观察自噬溶酶体形成情况。结果 200 mg/mL和400 mg/mL扶正抑瘤汤作用后A549细胞增殖抑制率增加（均P<0.05）。200 mg/mL扶正抑瘤汤作用后A549细胞侵袭和迁移能力降低（均P<0.05）;细胞凋亡率增加（P<0.05）;Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白的表达水平升高（均P<0.05）,P62蛋白的表达水平降低（P<0.05）;A549细胞自噬溶酶体数量增加;p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt和p-mTOR/mTOR蛋白的表达降低（均P<0.05）。结论 扶正抑瘤汤可以抑制A549细胞增殖,并促进细胞凋亡和自噬,可能与PI3K/Akt/mTOR信号通路失活有关,是治疗非小细胞肺癌的潜在药物。     

丝裂原活化蛋白激酶信号通路与白血病的研究新进展

丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路可参与凋亡、分化、自噬等多种细胞活动,人类细胞中主要有细胞外信号调节激酶(Erk)、p38 MAPK、c-Jun N端激酶(JNK)3条通路,每条信号通路都具有高度特异性,有其独立的功能.MAPK信号通路与白血病的发生、发展密切相关,其对白血病细胞的作用主要通过与细胞凋亡、介导细胞耐药、调控细胞自噬分化等方面有关.现就MAPK信号通路与白血病的相关研究进展进行综述.     

Prucalopride通过促进自噬抑制胶质瘤细胞U251增殖

目的:研究Prucalopride对胶质瘤U251细胞增殖、自噬、凋亡的影响,并探讨其相关信号通路。方法:通过CCK8检测细胞增殖的变化;Transwell检测迁移和侵袭的变化;细胞流式实验、Western blot检测细胞凋亡的变化;Western blot检测自噬相关蛋白LC3、Beclin1、p62的表达;AKT/mTOR通路相关蛋白的变化。结果:CCK8显示Prucalopride显著抑制U251细胞的增殖（P＜0.05）;Transwell侵袭实验显示Prucalopride可以抑制脑胶质瘤细胞的迁移和侵袭（P＜0.05）;细胞流式实验显示Prucalopride促进U251细胞的凋亡（P＜0.05）,Prucalopride处理后细胞凋亡相关蛋白Bax、Active Caspase3水平升高,Bcl-2表达降低;自噬相关蛋LC3、Beclin1表达上调,p62表达下调;p-AKT蛋白和p-mTOR蛋白水平显著降低。结论:Prucalopride通过抑制AKT/mTOR信号通路激活自噬抑制U251细胞增殖和迁移,促进其凋亡。     

顺铂通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路诱导子宫内膜癌Ishikawa细胞自噬

目的：探讨顺铂对子宫内膜癌Ishikawa细胞自噬的影响,并初步探讨PI3K/AKT/mTOR信号通路在其中的作用。方法：透射电镜观察自噬泡形成,免疫荧光检测微管相关蛋白1轻链3融合蛋白II（microtubule-associated protein 1 light chain 3II,LC3II） 的荧光聚集情况。采用Westerblot检测mTOR通路中的PI3K、AKT及mTOR蛋白的表达。结果：顺铂（20μg/mL）能诱导Ishikawa细胞发生自噬,其中24h组明显高于12h组（P<0.05）;与对照组（20μg/mL-0h组）相比较,自噬相关蛋白-LC3的表达随着时间延长表达增加（P<0.05）。磷酸化AKT1、磷酸化mTOR及PI3Kp85蛋白表达水平随着时间延长表达下降。胰岛素样生长因子-1（insulin-like growth factors-1,IGF-1）与顺铂共培养组自噬小体及LC3蛋白表达少于顺铂组,但高于对照组。结论：顺铂可能通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路,从而诱导子宫内膜癌细胞发生自噬。     

胰腺癌中Hedgehog通路与其他通路间相互作用的研究进展

Hedgehog（HH）通路不仅在胰腺发育过程中起重要作用,而且在胰腺导管细胞癌（pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC）发生、发展过程中也出现异常活化。其转录因子Glis蛋白家族的活化,尤其是Gli1的活化可启动下游基因表达,主要起到促进癌细胞增殖、迁移、侵袭等作用。HH通路可以和包括核因子-κB（nuclear factor-κB,NF-κB）、K-RAS、表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor, EGFR）、Wnt通路、转化生长因子 β（transforming growth factor β,TGF-β）、丝裂原活化蛋白激酶3K10（mitogen-activated protein kinase kinase kinase 10,MAP3K10）和P53等在内的信号通路因子,通过不尽相同的机制相互作用,共同促进胰腺癌的发生和发展。本文就近年来对胰腺癌中的Hedgehog通路及其与其他通路相互作用的研究进展进行综述。     

PTEN信号转导通路与肿瘤的多药耐药

基因调控、信号转导通路异常均可引起细胞增殖失控,导致肿瘤发生。肿瘤细胞对化疗药物耐药是肿瘤患者死亡的主要原因。细胞内药物有效浓度的降低、DNA损伤的修复障碍、基因的突变及异常表达、信号转导通路的异常等均参与了肿瘤细胞的多药耐药。张力蛋白同源10号染色体缺失的磷酸酶基因（phosphatase and tension homology deleted on chromosome ten gene,PTEN）是具有磷酸酶活性的抑癌基因,在多种肿瘤细胞中异常表达,主要通过抑制PI3K/Akt/mTOR（mammalian target of rapamycin, mTOR）等多种信号转导通路参与细胞的增殖、凋亡及化疗耐药。因此,上调野生型PTEN的表达,或使用PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制剂,可逆转肿瘤细胞的多药耐药,提高传统化疗的疗效。     

PI3K/Akt通路与肿瘤治疗

磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶B (phosphoinositide 3kinase /protein kinase B,PI3K/Akt)信号通路参与很多重要生物学过程的调控，但其过度激活可导致肿瘤的发生。在正常组织中PI3K/Akt信号转导途径处于活化状态，但是该通路如果被过度激活则可通过下调肿瘤抑制蛋白p53、刺激蛋     

丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)信号转导通路与卵巢上皮癌

丝裂原激活的蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）是一组可以被多种细胞外信号激活的丝／苏氨酸激酶，其参与细胞的多种生物学行为，包括基因的转录、细胞的分化及增殖、细胞周期调控、诱导细胞凋亡和维持细胞生存以及细胞的恶性化等。在信号转导过程中，3种MAPK（ERK、JNK和p38）信号通路所调节的细胞反应有所不同，持续活化的ERKI／2途径有助于肿瘤细胞的生长、增强抗凋亡能力；而JNK和p38的活化则可引起肿瘤抑制，诱导肿瘤细胞的凋亡。在卵巢癌细胞中MAPK级联可以被顺铂、TNF（肿瘤坏死因子）和GnRH促性腺激素释放激素等激活和调节。本文将对激素、生长因子和化疗药物作用于卵巢上皮细胞及肿瘤细胞后引起MAPK通路的变化情况作一综述。     

氟奋乃静通过自噬诱导U87胶质瘤细胞死亡及其机制探讨

目的：观察氟奋乃静（FPZ）通过自噬诱导U87胶质瘤细胞死亡的机制。方法体外培养U87胶质瘤细胞并经FPZ处理,采用细胞活力和集落形成方法分析细胞的生存率,采用Western blot检测自噬相关蛋白及PI3K/AKT/mTOR通路蛋白的表达。结果 FPZ处理后,U87胶质瘤细胞活力显著降低（P﹤0.05）,菌落数显著降低（P﹤0.05）;微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ型（LC3-Ⅱ）显著增加,并呈时间和剂量依赖性;p-AKT水平及其下游p-mTOR水平显著下降,并呈时间依赖性。采用PI3K抑制剂LY294002处理U87胶质瘤细胞后,LC3-Ⅱ生成明显增加。结论 FPZ可通过抑制PI3K/AKT/mTOR通路调节自噬,发挥细胞毒性作用。     

PDK／Akt通路与肿瘤治疗

磷酸肌醇-3激酶／蛋白激酶B（phosphoinositide 3-kinase／protein kinaseB，P13K／Akt）信号通路参与很多重要生物学过程的调控，但其过度激活可导致肿瘤的发生。在正常组织中P13K／Akt信号转导途径处于活化状态，但是该通路如果被过度激活则可通过下调肿瘤抑制蛋白p53、刺激蛋白质合成、抑制细胞凋亡等导致肿瘤细胞的无限增殖，成为肿瘤预后不好的标志，因此抑制该通路的激活有利于肿瘤治疗。目前已发现肿瘤抑制基因PTEN、PHLPP和蛋白磷酸酶2A等均可通过不同的机制抑制该通路的激活。同时，针对该通路的抑制剂作为抗肿瘤药物得到了广泛研究并在临床上取得了预期的进展，如wtPTEN的转基因研究、P13K抑制剂LY294002和渥曼青霉素、PDK-1抑制剂星孢菌素和塞来昔布、Akt抑制剂哌立福新、雷帕霉素靶蛋白（mTOR）抑制剂西罗莫司等，期望这些抑制剂能达到靶向治疗肿瘤的目的。     

苹果多酚通过激活AMPK/SIRT1信号通路对LPS诱导的肺上皮细胞自噬反应的影响

目的:探讨苹果多酚通过调节腺苷酸活化蛋白激酶/沉默信息调节因子1（AMP-activated protein kinase/Sirtuin1,AMPK/SIRT1)信号通路对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的人肺泡上皮细胞（A549）自噬反应的影响。方法:使用不同浓度的苹果多酚提取物（apple polyphenol extract,APE）预处理A549细胞2 h后,LPS诱导A549细胞培养24 h,MTT法检测增殖活性,筛选APE最佳预处理浓度;将A549细胞分为对照组、LPS组（3 mg/L LPS）、LPS+APE组（3 mg/L LPS+20 μg/mL APE）、APE+Compound C组（3 mg/L LPS+20 μg/mL APE+50 μmol/L Compound C）,免疫荧光染色观察A549细胞自噬;流式细胞术检测A549细胞凋亡;Western blot法检测细胞中自噬相关蛋白及AMPK/SIRT1通路相关蛋白表达水平。结果:与对照组比较,经LPS诱导的A549细胞增殖活性、自噬水平、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1、SIRT1、p-ULK1/ULK1、p-AMPK/AMPK蛋白表达降低,p62蛋白表达及细胞凋亡率升高（P＜0.05）;与LPS组比较,LPS+APE组细胞增殖活性、自噬水平、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1、SIRT1、p-ULK1/ULK1、p-AMPK/AMPK蛋白表达水平显著升高,p62蛋白表达及细胞凋亡率显著降低（P＜0.05）;与LPS+APE组比较,APE+Compound C组A549细胞增殖活性、自噬水平、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1、SIRT1、p-ULK1/ULK1、p-AMPK/AMPK蛋白表达水平显著降低,p62蛋白表达及细胞凋亡率显著升高（P＜0.05）。结论:苹果多酚通过激活AMPK/SIRT1 信号通路提高LPS诱导的肺上皮细胞自噬,降低细胞凋亡。     

mTOR信号通路调控CD133阳性胶质瘤干细胞自我更新的分子机制

背景与目的：mTOR（mammalian target of rapamycin）信号通路异常活化和高级别胶质瘤患者的预后不良相关。本研究探讨mTOR信号通路调控胶质瘤干细胞（GSCs）自我更新相关的分子机制。方法：采用CD133免疫磁珠分选CD133阳性胶质瘤干细胞。Western blot检测mTOR信号通路组分p-S6K、p-S6和干细胞自我更新相关基因Bmi-1的表达水平;Rapamycin（RPA）阻断mTOR信号通路后,用肿瘤球形成实验评价干预mTOR信号通路对胶质瘤干细胞自我更新的影响;统计学处理采用SPSS11.0统计分析软件分析。结果：CD133阳性胶质瘤干细胞表达较高水平的mTOR信号通路组分p-S6K、p-S6和干细胞自我更新相关分子Bmi-1。通过rapamycin阻断mTOR信号通路,可诱导胶质瘤干细胞谱系分化,同时显著降低肿瘤球形成能力（P〈0.05）,而自噬抑制剂3-MA处理不能逆转rapamycin的效应。结论：mTOR信号通路能够调控胶质瘤干细胞自我更新,阻断mTOR通路下调胶质瘤干细胞自我更新潜能。     

EGFR介导的自噬在肿瘤发生发展及治疗抵抗中的作用

细胞表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)是调节细胞周期的关键因子,EGFR突变或过表达与多种肿瘤的发生、发展密切相关.EGFR也是外源信号介导细胞内信号通路级联反应的关键衔接蛋白,EGFR介导的细胞下游信号通路广泛参与调控细胞的增殖、凋亡与自噬.本文就有关EGFR介导的自噬在肿瘤发生、发展与治疗抵抗中的作用的最新研究进展作一综述,以期为以EGFR为靶点的抗肿瘤治疗与新药研发提供参考.     

自噬调节因子Ambra1在肿瘤中的研究进展

Ambra1作为自噬调节因子，在自噬体的形成过程中扮演了重要角色，其介导的自噬参与细胞增殖、分化、发育、凋亡等生物学过程，与肿瘤进展密切相关。目前研究发现Ambra1介导的自噬对肿瘤细胞具有保护作用，但亦可能通过调控其他信号通路发挥抑制肿瘤作用。本文就自噬调节因子Ambra1在肿瘤中的研究进展作一综述。     

MicroRNA-653靶向调控OIP5基因介导mTOR信号通路对非小细胞肺癌细胞生物学特性的影响

目的:探讨microRNA-653（miR-653）靶向调控OIP5基因介导mTOR信号通路对非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）细胞生物学特性的影响。方法:选取人正常内皮细胞BEAS-2B和4种NSCLC细胞系（H1650、H1975、A549和H292）,分为control组、mimics组、mimics-NC组、inhibitor组和inhibitor-NC组进行瞬时转染,利用荧光定量PCR、蛋白印迹、MTT、划痕实验、Transwell侵袭实验、流式细胞术等方法分析miR-653对NSCLC细胞中OIP5、mTOR信号通路相关基因表达及增殖、迁移、侵袭、凋亡和细胞周期分布的影响。结果:与control组、mimics-NC组和inhibitor-NC组相比,mimics组mTOR信号通路被抑制,细胞增殖、迁移、侵袭能力明显降低,凋亡率明显增加,细胞多停滞于G1期（均P＜0.05）;然而,inhibitor组mTOR信号通路被激活,细胞增殖、迁移、侵袭能力明显升高,而凋亡率明显降低,G1期细胞数量较少（均P＜0.05）。结论:miR-653可通过负调控OIP5基因抑制mTOR通路激活,从而阻止NSCLC的发生与发展。     

TRIM家族蛋白在肿瘤中的研究进展

近年来，三结构域(tripartite motif，TRIM)家族蛋白逐渐成为国内外肿瘤研究领域的热门研究方向。该家族蛋白可调控肿瘤细胞的增殖、转移、凋亡和自噬等多种生物学行为，介导泛素化、染色体异位和转录、p53信号通路和NF-κB信号通路等分子调控机制。本文对TRIM家族蛋白在肿瘤发生发展过程中发挥的功能和参与的分子调控机制进行总结，并对TRIM家族蛋白的研究前景进行展望。