Expression of cyclooxygenase-2 mRNA in drug-sensitive cell and drugresistant strains of ovarian cancer cell lines

Objective： To investigate the expression of cyclooxygenase-2 （COX-2） mRNA in drug-sensitive cell and drugresistant clones of ovarian cancer cell lines. Methods： RT-PCR and immunocytochemistry were used to investigate the expression of cyclooxygenase-2 in 3 clones drug-sensitive and 5 clones drug-resistant ovarian cancer cell. Results： Strong COX-2 mRNA expressions were detected in 3 clones of drug-sensitive cell and weak expressions were detected in 5 clones of drug-resistant cell. The protein expression of COX-2 in drug-sensitive cell was strongly positive reaction in immunocytochemistry stain and there was a weak positive reaction in 5 clones of drug-resistant cell. Conclusion： The expression of COX-2 mRNA in drug-sensitive cell strains is much higher than that in drugresistant strains of ovarian cancer cell lines, providing a basis of the chemoprevention for ovarian cancer.     

卵巢癌组织中环氧合酶-2的表达研究

目的探讨环氧化酶-2（COX-2）在卵巢癌组织中的表达及意义.方法应用原位杂交和RT-PCR技术检测正常卵巢和卵巢癌组织中COX-2 mRNA的表达情况.结果 38例卵巢癌组织,原位杂交检测COX-2 mRNA表达阳性23例,阳性表达率为61%;RT-PCR技术检测33例表达阳性,阳性表达率为87%;两种方法检测的20例正常卵巢组织COX-2 mRNA均呈阴性表达.结论 COX-2在卵巢癌组织高表达,并在其发生发展中起重要作用.     

Expression of MTA2 Gene in Ovarian Epithelial Cancer and Its Clinical Implication

Most members of metastasis-associated geneshave been identified since1994.Alot of evidenceshowed that the expression of MTA1were elevatedin human metastatic breast cell lines and metastaticcancer tissues,such as breast,colorectal,gastric,and esophageal carcinomas.MTA2,which is ho-mologous to MTA1,is a component of the NuRDATP-dependent chromatin remodeling and histonedeacetylase complex.Specifically,MTA2modu-lates the enzymatic activity of the histone deacety-lase core complext[1].Altho…     

环氧化酶2在乳腺癌中的表达及其与淋巴管生成的关系

目的:探讨环氧化酶2(COX-2)在乳腺癌组织中的表达及其与淋巴管生成的关系。方法:采用免疫组化S-P及SABC法检测87例乳腺癌组织COX-2和血管内皮生长因子受体3(VEGFR-3)表达,及20例癌旁组织COX-2的表达.计数肿瘤内淋巴管密度(LVD),并结合临床病理特征分析。结果:乳腺癌组织COX-2表达阳性率显著高于癌旁组织(P<0.05);淋巴结转移阳性组和阴性组的COX-2表达率有显著差异(P<0.01);淋巴管密度与COX-2表达呈正相关(P<0.01);且与淋巴结转移呈正相关(P<0.05)。结论:COX-2过表达可能参与肿瘤发生,并增强乳腺癌的淋巴浸润及转移潜能。     

卵巢癌紫杉醇耐药的蛋白质组学研究

目的：研究与卵巢癌紫杉醇耐药相关的蛋白质。方法：应用双向凝胶电泳（2-DE）和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）寻找紫杉醇耐药细胞和敏感细胞的差异表达蛋白质。使用Western印迹技术对其中2个蛋白质进行验证。结果：通过对2组细胞总蛋白质双向凝胶电脉图谱进行分析,找到差异蛋白质点40个;通过质谱分析,24个蛋白质得到鉴定。这些蛋白质包括增殖细胞核抗原（PCNA）、nm23蛋白、prohibitin（PHB）分子伴侣蛋白、脂皮质素（annexin）、α-烯醇化酶（α-enolase）以及热休克蛋白（HSP）等。结论：通过蛋白质组学技术,发现了卵巢癌紫杉醇耐药细胞系和敏感细胞系之间差异表达蛋白质24个,这些差异蛋白质可能参与卵巢癌细胞紫杉醇耐药过程。     

上皮性卵巢癌组织金属基质蛋白酶MMP2的表达

目的探讨上皮性卵巢癌组织中MMP2蛋白的表达情况。方法应用免疫组织化学法检测78例上皮性卵巢癌组织中MMP2蛋白的表达。结果78例上皮性卵巢癌组织中MMP2蛋白阳性表达56例.MMP2蛋白的表达与上皮性卵巢癌组织学分型无关（P〉0．05）；与分化程度、临床分期和淋巴结转移有关（P〈0．05）。结论MMP2蛋白与上皮性卵巢瘤组织的发生、发展及转移有关，可作为判断卵巢癌预后不良的指标。     

小分子干扰RNA下调星形细胞上调基因1的表达对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨小分子干扰RNA(siRNA)下调星形细胞上调基因1(AEG-1)表达对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响。方法卵巢癌细胞株SKOV3分为3组:空白对照组(不做任何处理)、阴性对照组(对照siRNA转染)和观察组(AEG-1 siRNA转染)。用反转录聚合酶链反应观察AEG-1 siRNA对AEG-1基因表达的影响;甲基噻唑基四唑法观察AEG-1 siRNA对卵巢癌SKOV3细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测AEG-1 siRNA对卵巢癌SKOV3细胞凋亡和细胞周期的影响。结果空白对照组和阴性对照组AEG-1 mRNA表达、SKOV3细胞增殖、细胞凋亡率及在DNA合成前期(G0/G1期)、合成期(S期)、合成后期(G2/M期)的细胞比例差异均无统计学意义(P>0.05)。观察组SKOV3细胞AEG-1 mRNA表达显著低于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。观察组SKOV3细胞增殖在24、48、72 h较空白对照组和阴性对照组均显著减慢,差异有统计学意义(P<0.01)。观察组SKOV3细胞凋亡率显著高于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.01);观察组SKOV3细胞在DNA合成前期(G0/G1期)细胞比例显著高于空白对照组和阴性对照组(P<0.01),而合成期(S期)、合成后期(G2/M期)的细胞比例均显著低于空白对照组和阴性对照组(P<0.01),差异均有统计学意义。结论 siRNA可通过下调卵巢癌SKOV3细胞AEG-1基因的表达,抑制其增殖,促进其凋亡。     

卵巢上皮性肿瘤组织中EphA2和E-钙黏素测定

目的:探讨卵巢上皮性肿瘤组织中EphA2和E-钙黏素的表达及其与临床病理特性、预后的关系.方法:采用免疫组织化学SP法检测60例卵巢恶性上皮性肿瘤(浆液性乳头状囊腺癌36例,黏液性乳头状囊腺癌15例,子宫内膜样癌6例,透明细胞癌3例;FIGO分期Ⅰ期4例,Ⅱ期5例,Ⅲ期23例,Ⅳ28例;组织学分级G1 15例,G27例,G3 38例)、14例卵巢交界性上皮性肿瘤、25例卵巢良性上皮性肿瘤及10例正常卵巢组织中EphA2及E-钙黏素蛋白的表达情况.结果:在正常卵巢、卵巢上皮性良性肿瘤、卵巢交界性上皮性肿瘤和卵巢恶性上皮性肿瘤组织中,EphA2蛋白的阳性表达率分别为10.0%(1/10)、20.0%(5/25)、57.1%(8/14)、85.0%(51/60),差异有统计学意义(P＜0.01);E-钙黏素蛋白的阳性表达率分别为20.0%(2/10)、88.0%(22/25)、71.4%(10/14)、36.7%(22/60),差异有统计学意义(P＜0.001).随着卵巢肿瘤恶性程度的增高,EphA2的阳性表达率呈递增趋势,E-钙黏素的阳性表达率呈递减趋势,2者呈负相关(r=-0.396).EphA2和E-钙黏素的蛋白过表达均与卵巢恶性上皮性肿瘤FIGO分期、组织学分级及有无腹膜转移密切相关.结论:在卵巢恶性肿瘤的发生发展过程中EphA2起一定的作用,其过表达可导致细胞的恶性转化.E-钙黏素与EphA2的联合检测可作为评价卵巢恶性上皮性肿瘤患者生存及预后的指标.     

环氧化酶2在肾癌中表达的意义

目的:研究肾癌组织中环氧化酶2(COX-2)蛋白的表达,探讨COX-2表达与肾癌可能的相关性.方法:应用免疫组织化学S-P法,对46例肾癌及其25例癌旁组织COX-2蛋白表达进行检测.结果:COX-2在46例肾癌组织中的表达阳性百分比为71.74%,癌旁组织中为32.00%.肾癌组织中COX-2表达与癌旁组织相比差异具有统计学意义(P＜0.01);结论:COX-2在肾癌组织中表达明显增高,与肾癌的发生、发展可能相关,有可能作为肾癌诊断的辅助指标之一.     

尼美舒利、阿司匹林对COX-2不同表达水平的食管鳞癌细胞株的抑制作用

目的比较选择性和非选择性环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂对不同COX-2表达水平的食管鳞癌细胞的抑制作用。方法选取食管鳞癌细胞株EC109和TE-1,采用Western blotting法测定COX-2蛋白表达、MTT法检测细胞增生以及流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡(PI标记),观察阿司匹林及尼美舒利对2株细胞增生、凋亡的作用。结果 Westernblotting结果显示,EC109细胞表达COX-2,TE-1细胞不表达COX-2。选择性COX-2抑制剂———尼美舒利可抑制EC109细胞的增生,抑制率为(17.5±3.3)%~(80.1±3.9)%。尼美舒利仅在0.4 mmol/L时对TE-1细胞有抑制作用,抑制率为(16.2±7.0)%。尼美舒利可使EC109细胞的细胞周期阻滞于G0/G1期,并诱导细胞凋亡,但对TE-1细胞无上述作用。非选择性COX-2抑制剂———阿司匹林在0~4 mmol/L浓度区间对EC109和TE-1均有抑制作用,并呈剂量依赖关系。阿司匹林作用后,EC109与TE-1的细胞周期均被阻滞于G0/G1期,细胞凋亡率分别为(10.55±0.01)%及(8.52±6.65)%。结论食管鳞癌(esophagealsquamous cell carcinoma,ESCC)细胞株中COX-2的表达水平影响了选择性COX-2抑制剂的抑制作用,而对非选择性COX-2抑制剂影响较小。阿司匹林可能通过非COX-2依赖途径从而发挥对肿瘤的抑制作用。     

白介素32在胃癌细胞中的表达及意义

目的观察白介素32(IL-32)在胃癌细胞株中的表达情况,探讨其在胃癌发生、发展中的意义。方法采用逆转录PCR、real-time PCR及Western blot法分别从基因和蛋白水平上检测IL-32在正常胃上皮细胞GES-1以及胃癌细胞株MKN-45、KATO中的表达情况。结果逆转录PCR及real-time PCR结果均显示胃癌细胞IL-32 mRNA表达水平明显高于正常胃上皮细胞,逆转录PCR灰度比值(目的 /内参)为:GES-1(0.34±0.09)、MKN-45(0.79±0.11)、KATO(0.90±0.17),差异有统计学意义(P<0.05)。real-time PCR Ct值显示:MKN-45的IL-32基因表达量是GES-1的(5.34±1.09)倍,KATO是GES-1的(4.07±1.69)倍,差异均有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示IL-32在蛋白表达水平的结果与前一致,灰度比值(目的 /内参)为:GES-1(0.30±0.10)、MKN-45(0.92±0.32)、KATO(0.86±0.15),差异有统计学意义(P<0.05)。结论IL-32在胃癌细胞株中呈高表达,推测其可能在胃癌的发生、发展中起一定作用。     

miR-98前体转染卵巢癌细胞的效率检测及增殖抑制检测

目的 pre-hsa-miR-98转染卵巢癌SKOV3、HO8910和A2780细胞,观察转染率并研究转染后对卵巢癌细胞的增殖抑制作用,为卵巢癌新治疗方法研究提供实验依据。方法利用构建的pre-hsa-miR-98质粒HmiR和连接随机序列的质粒CmiR转染人卵巢癌细胞SKOV3、HO8910和A2780细胞,荧光显微镜观察和流式细胞仪计数计算转染率,MTT法检测转染对卵巢癌细胞的增殖抑制作用。结果 HmiR转染后24 h,荧光显微镜下观察,SKOV3、HO8910、A2780细胞的转染率分别为61.50%、68.59%、63.40%;流式细胞术计数,转染HmiR后SKOV3、HO8910、A2780细胞的转染率分别为57.93%、66.73%、58.59%。转染HmiR后,MTT法检测SKOV3、HO8910、A2780细胞的增殖抑制率随转染时间延长而增加,72 h达到49.54%、53.25%、46.09%。结论三种卵巢癌细胞的转染率均接近或超过60%,HmiR转染后可抑制卵巢癌细胞增殖,其抑制作用随转染时间延长而增强。     

Difference in Expression of Bcl-2 and Bcl-xl Genes in Cisplatin- sensitive and Cisplatin-resistant Human in Ovarian Cancer Cell Lines

Apoptosisisthemainmechanismofcelldeathandisregulatedbyalargenumberofgenes.Amongthem ,theBcl 2familiesareconsideredtoplayakeyroleintheexecutionorpreventionofapoptosisinducedbygenotoxicstressthroughthealterationofapoptoticsignals.Epithe lialovariancancerist…     

膀胱移行细胞癌COX-2的表达及其意义

目的 研究环氧合酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）在膀胱移行细胞癌（transitional cell carcinonla，TCC）组织中的表达及其意义。方法 采用免疫组化技术，对49例膀胱TCC石蜡切片和18例正常膀胱黏膜组织进行COX-2蛋白检测。对阳性表达率与肿瘤分级及侵袭性间的相关性与TCC分级及侵袭性进行分析。结果 COX-2蛋白在膀胱TCC中表达率为63．2％，正常膀胱黏膜无表达（P〈0．01）。低分级TCC阳性率36．4‰高分级为92．8％（P〈0．05）。表浅TCC阳性表达率38．9％，浸润TCC为77．4％（P〈0．05）。结论 COX-2在高分级和侵袭性膀胱TCC中阳性表达率显著上升，可能会成为膀胱肿瘤患者恶性度和判断预后的重要生物学指标，并有可能成为治疗人类TCC的作用靶点。     

Effect of Mad2 on paclitaxel-induced cell death in ovarian cancer cells

In this article, the status of spindle assembly checkpoint and the alteration of its major component, Mad2 protein level were examined in A2780 and SKOV3 ovarian cancer cell lines.Recombinant eukaryotic expression plasmid pEGFP-Mad2 was transfected into paclitaxel-resistant SKOV3 cells and Mad2 protein was knocked down by Mad2-specific siRNA in paclitaxel-sensitive A2780 cells.Then the expression level of Mad2 gene was detected by Western blotting.Flow cytometry revealed that SKOV3 cells were not fully arrested in G2/M phase in contrast to A2780 cells in the presence of paclitaxel.However, paclitaxel sensitivity assay showed that sensitivity to paclitaxel was reversed after the transfection in both cell lines in terms of number of cells arrested at G2/M phase and the expression of Bcl-2 was significantly changed.These results suggest that weakened spindle checkpoint with reduced expression of Mad2 is associated with resistance to paclitaxel in ovarian cells and Bcl-2 may be involved in this process.     

肺癌组织中环氧化酶-2表达和临床病理特征关系的研究

目的:研究肺癌组织中环氧化酶-2(COX-2)的表达及其与临床病理特征、预后的关系.方法:采用免疫组化SABC法检测58例肺癌组织及9例癌远旁正常肺组织中COX-2表达.结果:肺癌组织COX-2阳性表达为60.34%(35/58)较正常肺组织11.11%(1/9)差异有统计学意义(P＜0.01);COX-2的表达与患者的TNM分期、淋巴结浸润显著相关(P＜0.05),与患者的年龄、性别、吸烟状况、组织类型无关(P＞0.05).COX-2阳性表达组的生存率低于阴性表达组(P=0.001).结论:COX-2在肺癌的发展、转移过程中有一定作用,COX-2可以作为肺癌的预后指标.     

FBN2基因与肺癌细胞关系的初步探讨

目的:探讨FBN2基因在肺癌细胞中的表达及其受甲基化的调控.方法:培养肺癌细胞株HCC366、H1299、H2195和人正常支气管上皮细胞(NHBEC),并用5-Aza-cdR干预.用逆转录方法观察FBN2基因的表达,并用MSP检测是否存在FBN2的异常甲基化状态.结果:①FBN2基因在HCC366、H1299不表达,但在NHBEC、H2195中表达.②经过5-Aza-cdR处理后,FBN2基因在HCC366、H1299可以重新表达.③HCC366、H1299细胞存在FBN2基因的异常甲基化表现现象.结论:FBN2基因在HCC366、H1299细胞中不表达,但5-Aza-cdR能使其重新表达.FBN2基因沉默可能是受启动子异常甲基化调控的影响.     

体外培养的皮层神经元和胶质细胞上COX-2的表达

目的观察环氧合酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）在体外培养的皮层神经元和胶质细胞上的表达。方法在体外培养鼠的皮层神经元和神经胶质细胞,神经元培养第6、10、12d时收获细胞,神经胶质细胞传代后培养待细胞密度约为每毫升5×105时和6×105时收获细胞,然后进行免疫染色以观察神经元和胶质细胞上COX-2的表达。同时用免疫荧光双标记法对COX-2阳性的细胞类型进行了鉴定。结果体外培养6、10和12d时的胚鼠皮层神经元细胞均呈现OX-2免疫阳性,但不同时间点免疫染色强度不同,10d时免疫染色最强;而体外培养的新生鼠的皮层神经胶质细胞只有极个别细胞呈现COX-2免疫阳性;双标记结果表明这些胶质细胞既有星形胶质细胞,又有小胶质细胞。结论离体条件下COX-2主要在神经元上表达,而神经胶质细胞则很少表达,与在体研究结果基本一致。     

上皮性卵巢肿瘤组织中环氧合酶-2的表达

目的 :探讨卵巢上皮性肿瘤组织中环氧合酶 - 2 (Cox- 2 )的表达情况。方法 :应用SABC免疫组化技术 ,检测 4 2例卵巢上皮性癌 (浆液性 2 4例 ,粘液性 18例 ;Ⅰ～Ⅱ期 14例 ,Ⅲ～Ⅳ期 2 8例 ;G1、G2 31例 ,G3 11例 ;有淋巴结转移 18例 ,无转移 2 4例 ;存活时间≥ 3a 16例 ,<3a 2 6例 )、16例卵巢交界性上皮性肿瘤、2 0例卵巢良性上皮性肿瘤和 2 0例正常卵巢组织中Cox - 2的表达。结果 :在卵巢上皮性癌、卵巢交界性上皮性肿瘤组织中Cox - 2阳性表达率明显高于卵巢良性上皮性肿瘤及正常卵巢组织 (P <0 .0 5 ) ;与卵巢上皮性癌组织分型、临床分期、有无淋巴结转移和存活时间无关 (P >0 .0 5 )。结论 :Cox- 2表达上调可能与卵巢上皮性癌的发生有关     

正常成年大鼠脑内环氧合酶-2的表达

目的:观察正常大鼠脑内环氧合酶-2(COX-2)的表达. 方法:用自行制备的COX-2多抗采用免疫组织化学ABC法观察了COX-2蛋白在正常成年大鼠脑内的表达. 结果:在正常成年大鼠脑内COX-2蛋白主要表达于皮层、海马、齿状回、视上核、杏仁核、小脑和脑干等部位,阳性细胞主要为神经元,神经胶质细胞染色很少. 结论:COX-2蛋白在脑内广泛分布.