Smads信息分子与肝星状细胞的活化

肝星状细胞 (ｈｅｐａｔｉｃｓｔｅｌｌａｔｅｃｅｌｌｓ ,ＨＳＣ)激活、转化为肌成纤维细胞 (ｍｙｍｙｏｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ)是肝纤维化形成的关键。转化生长因子 β1(ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ 1)是这一病理过程的必需的生物调节因子。ＴＧＦ β1激活ＨＳＣ的信息传导经过丝氨酸 /苏氨酸蛋白激酶受体及其下游效应信息分子 ,即Ｓｍａｄｓ蛋白家族 ,启动胶原基因表达[1] 。由于ＴＧＦ β1与ＨＳＣ、Ｓｍａｄｓ信息分子和肝纤维化的密切关系 ,有关Ｓｍａｄｓ信息分子家族对ＴＧＦ β1信息转导的调控和影响…     

肝星状细胞与凋亡

肝星状细胞 (ｈｅｐａｔｉｃｓｔｅｌｌａｔｅｃｅｌｌ,ＨＳＣ)在肝纤维化形成过程中起关键作用。近年来研究发现 ,活化的ＨＳＣ主要通过凋亡方式减少 ,且有多种途径影响其凋亡[1 11] 。一、自发凋亡Ｓａｉｌｅ等[7] 报道 ,培养的ＨＳＣ在 2ｄ时不发生凋亡 ;4ｄ时凋亡率为 8%± 5 % ;7ｄ后则为 18%± 8%。而胆道结扎术后 2 1ｄ ,ＨＳＣ的自发凋亡率为 1%～ 3% [2 ] 。体内研究表明 ,肝组织急性损伤阶段 ,ＨＳＣ出现激活、增殖而无凋亡迹象 ;恢复阶段ＨＳＣ的凋亡与组织中ＨＳＣ总量的减少相平行[7,10 ] 。由此显示 ,自发凋亡可能是机体清除…     

维生素E对肝星状细胞增殖及胶原合成的影响

动物实验研究表明维生素Ｅ(ＶｉｔＥ)具有抗肝纤维化作用[1] ,但其具体机制不明。目前认为肝星状细胞 (ＨＳＣ)在肝纤维化形成中起关键作用[2 ] 。为探讨ＶｉｔＥ抗肝纤维化的细胞学机制 ,我们以白细胞介素 2 (ＩＬ 2 )及肿瘤坏死因子α(ＴＮＦα)作为刺激因素观察了ＶｉｔＥ对大鼠ＨＳＣ增殖和胶原合成的调控作用。—、材料和方法1 实验动物 :雄性ＳＤ大鼠 ,体重 5 5 0ｇ。2 大鼠ＨＳＣ的分离和培养 :采用链酶蛋白酶和胶原酶液原位循环灌注消化肝脏 ,经 11%Ｍｅｔｒｉｚａｍｉｄｅ液一步密度梯度离心分离大鼠ＨＳＣ。将分离的ＨＳＣ按 2…     

花生四烯酸和亚油酸刺激的Kupffer细胞对肝星状细胞增殖的影响

近年来研究发现,在各种致病因素作用下,脂肪肝与肝纤维化常相继发生或同时存在,肝星状细胞（ｈｅｐａｔｉｃｓｔｅｌｌａｔｅｃｅｌｌ,ＨＳＣ）的激活增殖在其发生中有重要的作用。目前国内外有关必需脂肪酸对ＨＳＣ的增殖影响所见报道极少。本文观察了必需脂肪酸花生四烯酸（ａｒａｃｈｉｄｏｎｉｃａｃｉｄ）和亚油酸（ｌｉｎｏｌｅｉｃａｃｉｄ）及其刺激的Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞（ＫＣ）培养的上清液（Ｋｕｐｆｆｅｒｃｅｌｌｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄｍｅｄｉｕｍ,ＫＣＣＭ）对ＨＳＣ增殖的影响,以探讨必需脂肪酸在脂肪肝肝纤维化中…     

肝纤维化过程中肝星状细胞的研究进展

肝星状细胞 (ｈｅｐａｔｉｃｓｔｅｌｌａｔｅｃｅｌｌ,ＨＳＣ ;以前称为贮脂细胞、Ｉｔｏ细胞等 )位于肝窦Ｄｉｓｓｅ间隙内 ,在肝损伤过程中被激活经表型转化而成为肌成纤维细胞 (ｍｙｏｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｅｒ,ＭＦＢ) ,产生大量细胞外基质 (ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｍａｔｒｉｘ ,ＥＣＭ )促进肝纤维化的形成 ,是肝纤维化形成的中心环节。一、ＨＳＣ的活化(一 )ＨＳＣ活化的启动与持续ＨＳＣ的活化是由静止的ＨＳＣ向ＭＦＢ转化的过程。涉及到细胞—细胞间、间质—细胞间相互作用。有学者提出了三步级联活化模式 ,把ＨＳＣ活化分…     

肝星状细胞凋亡与肝纤维化

近十年来对肝纤维化形成的机理研究取得了令人鼓舞的进展。越来越多的临床及实验证据表明,肝纤维化是可以逆转的［１］,这一观点逐渐被广泛接受。肝星状细胞（ｈｏｐａｔｉｃｓｔｅｌｌａｔｅｃｅｌｌ,ＨＳＣ）的激活是肝纤维化形成的中心环节［２］,ＨＳＣ在肝纤维化逆转过程中的作用也成为研究热点之一。Ｂｕｒｔ［３］认为,肝纤维化逆转时ＨＳＣ的减少是由于激活状态的ＨＳＣ转化为静止状态。但最新的研究表明,肝纤维化恢复期,激活状态的ＨＳＣ减少主要通过凋亡机制,而不是表型的转化［４］。几位学者分别对ＨＳＣ凋亡的机制进行…     

氧化应激在肝星状细胞活化中的作用

肝纤维化是肝脏对各种慢性损伤的一种修复应答反应，其病理中心环节是肝星状细胞（ｈｅｐａｔｉｃ ｓｔｅｌｌａｔｅ　ｃｅｌｌ，ＨＳＣ）由静止状态转变为活化状态，成为肝纤维化形成的细胞学基础。ＨＳＣ的活化具体表现在：（１）细胞体积增大，伸出伪足，含维生素Ａ的脂滴减少，表型向肌成纤维细胞样细胞（ｍｙｏｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ—ｌｉｋｅ ｃｅｌｌ）转化。（２）细胞获得增殖能力。（３）纤维化能力增强，大量生成细胞外基质。（４）表达平滑肌细胞骨架蛋白如α－平滑Ｌ动蛋白。许多因素如炎性因子、细胞外基质的改变、生长因子以…     

丹参单体IH764-3诱导肝星状细胞凋亡

活血化淤中药丹参具有多种药理学作用 ,ＩＨ764 3是其有效成分之一。研究表明丹参具有明显的抗肝纤维化作用 ,但丹参是否能够诱导肝星状细胞 (ＨＳＣ)凋亡及其作用机制尚未见报道。黏着斑激酶 (ＦＡＫ)是一种非受体型酪氨酸激酶 ,对细胞的迁移、增殖及凋亡具有重要影响[1 ] 。我们拟在大鼠ＨＳＣ上 ,观察ＩＨ764 3诱导ＨＳＣ凋亡时ＦＡＫ的变化。一、材料和方法1 细胞株及细胞培养 :肝星状细胞株ＣＦＳＣ由美国Ｇｒｅｅｎｗｅｌ教授惠赠。复苏后接种于ＲＭＰＩ 1 640培养液 ,37℃、5 %ＣＯ2 条件下培养。细胞同步化于Ｇ0 期后进行分组 ,分…     

细胞因子与脂肪性肝炎

脂肪性肝炎 (ｓｔｅａｔｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ)是一种继发于肝脂肪变性和细胞损伤的炎症和纤维化状态。按其病因分为非酒精性脂肪性肝炎 (ｎｏｎａｌｃｏｈｏｌｉｃｓｔｅａｔｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ ,ＮＡＳＨ)和酒精性肝炎 (ａｌｃｏｈｏｌｉｃｈｅｐａｔｉｔｉｓ ,ＡＨ)。其病因及发病机制比较复杂 ,至今尚未完全阐明。近来细胞因子 (ＣＫ )在肝脏疾病中的作用已受到密切关注 ,从肝细胞脂肪变性到脂肪性肝炎、肝纤维化及肝硬化的进展中 ,细胞因子都起重要作用[1] 。参与肝脏疾病的细胞因子主要有 :①致炎ＣＫ ,如ＴＮＦ α、ＩＬ 1、ＩＬ 1…     

奥曲肽对肝星状细胞钙离子浓度的影响及其意义

奥曲肽 (善宁 ,诺华公司生产 )能降低门静脉压力及门脉血流量 ,其机制仍不完全清楚[1] 。目前的研究表明 ,活化的肝星状细胞 (ＨＳＣ)的收缩和舒张在调节肝内阻力及血流量中具有重要作用[2 ,3 ] 。我们研究奥曲肽对活化的肝星状细胞(ＨＳＣ Ｔ6)Ｃａ2 + 的影响 ,旨在探讨奥曲肽防治肝硬化门脉高压并发症可能的机制。一、材料与方法1.ＨＳＣ Ｔ6细胞系的复苏与培养 :ＨＳＣ Ｔ6(美国旧金山总医院肝病研究中心Ｆｒｉｅｄｍａｎ教授惠赠 )为ＳＶ4 0转染ＳＤ大鼠肝星状细胞 (ＨＳＣ)。细胞于常温下复苏 ,以含 10 %小牛血清的ＤＭＥＭ (Ｇｉｂｃ…     

反转录—聚合酶链反应法研究肝星状细胞与细胞间粘附分子—1表达？…

目的 研究肝星状细胞（ＨＳＣ）与细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）表达的关系。方法 用链酶蛋白和原酶原位灌流,Ｎｙｃｏｄｅｎｚ密度梯度离心分别分离正常大鼠及四氯化碳实验性大鼠肝纤维化模型中的ＨＳＣ,并进行体外培养,应用免疫组织化学方法和反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术分别观察不同培养时期的ＨＳＣ、正常及造模型肝组织中ＨＳＣＲ ＩＣＡＭ－１的表达。结果 正常大鼠新分离的ＨＳＣ中,ＩＣＡＭ－１     

细胞凋亡、增殖与肝硬化和肝纤维化

正常肝和各种肝病中均存在不同程度的细胞凋亡 (ａｐｏｐｔｏｓｉｓ)和增殖。复习国外文献将细胞凋亡、增殖与肝硬化和肝纤维化的关系综述如下 :1　肝硬化和肝纤维化中的细胞凋亡1.1肝硬化　Ｋｕｒｏｋｉ等[1] 用断端标记法对 2 1例原发性胆汁性肝硬化 (ＰＢＣ)伴慢性非化脓性破坏性胆管炎 (ＣＮＳＤＣ)病人研究认为ＰＢＣ病人中存在细胞凋亡。Ｈａｒａｄａ等[2 ] 的研究结果表明生理和病理情况下肝胆管细胞调节主要是由ＣＤ95/ＣＤ95Ｌ介导细胞凋亡增加引起的细胞增殖和衰亡失衡诱导的ＰＢＣ小叶间胆管进一步丧失所致。对 16例ＰＢＣ病人进…     

肝星状细胞提取方法

肝星状细胞 (ＨＳＣ)作为致肝纤维化的主要细胞而成为目前研究热点。但由于ＨＳＣ比重与枯否氏细胞、淋巴细胞等有交叉 ,且易与肝细胞相吸附 ,导致分离及纯化较难。 1982年Ｋｎｏｃｋ[1] 等人成功分离出ＨＳＣ后 ,迄今为止已出现多种改良的ＨＳＣ提取方法 ,但国内尚未见有关ＨＳＣ提取方法的综述性报道 ,现综述如下 :一、原理在用循环灌注法去除肝胶原组织后 ,根据ＨＳＣ内含脂滴 ,密度较轻 ,它与肝脏内其它细胞在不同密度的离心液中有不同的浮密度的原理 ,采用密度梯度离心方法 (连续性和非连续性两种 )使ＨＳＣ存在于一高度提纯的区带中而…     

辛伐他汀对大鼠肝贮脂细胞血小板衍生生长因子效应的影响

血小板衍生生长因子 (ＰＤＧＦ)在肝贮脂细胞 (ＦＳＣ)激活和增殖中起重要作用[1] 。研究显示 ,3 羟基 3 甲基戊二烯辅酶Ａ(ＨＭＧ ＣｏＡ)还原酶抑制剂能抑制多种细胞增殖 ,阻断生长因子对细胞的促进作用[2 ] 。因此 ,我们选用一种脂溶性ＨＭＧ ＣｏＡ还原酶抑制剂辛伐他汀 ,观察其对ＰＤＧＦ诱导培养大鼠肝ＦＳＣ增殖、胶原合成和细胞内Ｃａ2 + 变化的影响。一、材料和方法1.药物和试剂 :辛伐他汀 (默沙东公司 ) ;链酶蛋白酶Ｎｙｃｏｄｅｎｚ、甲羟戊酸 (ＭＶＡ)、碘化丙啶 (ＰＩ)、ＰＤＧＦ ＢＢ和Ｆｕ ｒａ 2 /ＡＭ (Ｓｉｇｍａ公司 ) …     

甘油三酯和极低密度脂蛋白对肝星状细胞增殖的影响

目的探讨甘油三酯（ｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ，ＴＧ）和极低密度脂蛋白（ｖｅｒｙｌｏｗ－ｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｉｏｎ，ＶＬＤＬ）对大鼠肝星状细胞（ｈｅｐａｔｉｃｓｔｅｌａｔｅｃｅｌ，ＨＳＣ）增殖的影响。方法用链霉蛋白酶和胶原酶原位灌流，Ｎｙｃｏｄｅｎｚ密度梯度离心分离大鼠ＨＳＣ，并以ＭＴＴ比色法观察ＴＧ和ＶＬＤＬ对ＨＳＣ增殖效应。结果ＴＧ和ＶＬＤＬ可影响ＨＳＣ的增殖，ＴＧ和ＶＬＤＬ浓度分别在１２５ｍｇ／Ｌ和（２５～１００）ｍｇ／Ｌ时对ＨＳＣ增殖有促进作用（Ｐ＜００５或Ｐ＜００１）。结论体外细胞培养表明，ＴＧ和ＶＬＤＬ可促进ＨＳＣ增殖，其与脂肪肝肝纤维化的发生可能有关。     

肝纤维化的研究进展--2000年美国肝病学会年会报道

在 2 0 0 0年美国肝病学会年会上 ,有关肝纤维化的报道多集中在发病机制研究及实验性肝纤维化的治疗方面。除报道了拉米夫定及多不饱和磷脂的初步临床疗效外 ,临床治疗学的进展不大。一、肝纤维化机制的研究比利时学者Ｈｅｌｌｅｍａｎｓ等发现肝星状细胞 (ＨＳＣ)在体内外均表达过氧化小体增殖因子激活的受体 (ＰＰＡＲ) β ｍＲＮＡ及蛋白 ,而且在ＨＳＣ激活的早期 ( 0～ 7ｄ)ＰＰＡＲ的表达大幅度上调 ,在时间上与维甲酸类储存减少、维生素Ａ结合蛋白变化及增殖能力最强的阶段同步。但是 ,一旦ＨＳＣ完全激活 ,则ＰＰＡＲ表达减少。这一…     

反转录-聚合酶链反应法研究肝星状细胞与细胞间粘附分子-1表达的关系

目的研究肝星状细胞（ＨＳＣ）与细胞间粘附分子１（ＩＣＡＭ１）表达的关系。方法用链酶蛋白酶和胶原酶原位灌流,Ｎｙｃｏｄｅｎｚ密度梯度离心分别分离正常大鼠及四氯化碳实验性大鼠肝纤维化模型中的ＨＳＣ,并进行体外培养,应用免疫组织化学方法和反转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）技术分别观察不同培养时期的ＨＳＣ、正常及造模肝组织中ＨＳＣ的ＩＣＡＭ１的表达。结果正常大鼠新分离的ＨＳＣ中,ＩＣＡＭ１不表达;原代培养第１０天及传代培养第７天的ＨＳＣ表达ＩＣＡＭ１,且随着培养时间的延长ＩＣＡＭ１表达量逐渐增加。四氯化碳实验性大鼠肝纤维化模型中,新分离的ＨＳＣ中即可见ＩＣＡＭ１表达。结论体内动物实验和体外细胞培养表明,ＩＣＡＭ１表达可能与ＨＳＣ活化、肝脏炎性损伤及肝纤维化的发生有关。     

肝星状细胞表达的受体及其生物学意义

肝星状细胞（ｈｅｐａｔｉｃ　ｓｔｅｌｌａｔｅ　ｃｅｌｌ,ＨＳＣ）被认为是介导肝纤维化发生的关键细胞,其激活后不仅参与肝损伤的调控,对细胞因子网络平衡,肝脏微生态重建等也具有决定性作用,显然,其生物学功能的复杂性由其表达受体的复杂性所决定。 一、增殖调控受体 血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）受体：静止期ＨＳＣ并不表达ＰＤＧＦ受体。激活的ＨＳＣ表达ＰＤＧＦ受体,并对ＨＳＣ具有强有力的丝裂原活性,在参与肝组织慢性炎症过程中的多肽生长因子中,双链ＰＤＧＦ是ＨＳＣ最强的有丝分裂原,是诱导ＨＳＣ激活及增殖最强的细…     

肝星状细胞与肝纤维化的研究进展

一、ＨＳＣ的增殖活化及凋亡 当肝脏受到物理、化学及生物因素的刺激时,ＨＳＣ增殖并激活,转变为“肌成纤维细胞（ｍｙｏｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ, ＭＦＢ）”,表达ａ－平滑肌动蛋白（ａ－ｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅａｃｔｉｎ, ａ—ＳＭＡ）、合成ＥＣＭ等。Ｇｒｅｓｓ一ｆｉｅｒ等［１］根据已有的研究结果,提出了ＨＳＣ激活的“三步级联反应”模式。（１）炎症前期阶段,肝细胞受损后释放丝裂原,旁分泌作用于ＨＳＣ从而引起ＨＳＣ增殖,且肝细胞丧失接触抑制。（２）炎症阶段,活化的ｋｕｐｆｆｅｒ细胞、巨噬细胞及血小板释放细胞因…     

胰岛素对体外培养的高血压病人血管平滑肌细胞c-fos表达的影响

为了探讨高血压时血管平滑肌细胞（ａｒｔｅｒｙｓｍｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｓ，ＡＳＭＣ）的病理特征，我们用胰岛素对高血压病人的ＡＳＭＣ和正常血压人的ＡＳＭＣ干预后，观察胰岛素刺激后ＡＳＭＣ的增殖情况和ｃｆｏｓ表达量的变化。一、材料与方法１高血压病人...