大白鼠脑冰冻连续切片、细胞、纤维间片分染法若干问题的探讨

冰冻连续切片、细胞和髓鞘间片分染法是研究动物脑结构的一种很好的方法。采取这种方法,可以用一只动物的脑制成细胞染色和髓鞘染色两种连续切片标本,既可以分别观察核群和纤维,又可对比两者的配布,有独到的优点。1979年,我们用上海产半导体致冷器冰冻大白鼠脑块,在普通手摇切片机上作连续切片,隔片分组,分别按Nissl法与Spielmeyer法浸染神经元胞体和髓鞘。经过多次实践,初步获得成功,制出了一脑双染、连续对照的切片。不过,当时切染的质量不够高,如切得厚薄不一致,染得浓淡不均     

大白鼠组织冰冻切片制备

1 方法动物组织切片作为抗原底物检测自身抗体技术已被广泛应用,但抗原底物对实验结果影响很大,现就临床上常用作为抗原底物大白鼠组织切片制备作一探讨.取成年健康大白鼠,体重200g左右,断颈取心、肝、肾、胃、胰和骨骼肌等组织,生理盐水浸泡,去其脂肪、胃粘膜,心脏去掉心底、心尖留取中间部分并作纵向剖开.将经处理后的组织改切(?)2.0cm×0.5cm×0.5cm小块,用滤纸将     

冰冻切片2分钟快速染色法

冰冻切片检查是手术进行中最快、最重要的快速病理诊断方法,它的快与慢、好与坏直接影响着诊断速度和正确性.通过多年工作中的不断摸索和改进,使用冰冻切片2 min快速染色方法,获满意效果,报告如下.     

改良微波辐射冰冻切片免疫荧光染色法

将微波技术应用于免疫荧光染色并作玻片置育的改良创新，结果表明，反置玻片中低火档５－７ｍｉｎ染色效果最佳，且避免了干燥。该方法大大缩短了孵育时间，加快以进程，降低背景染色，提高阳性强度及阳性检出率，防止了脱片，染色质明显提高。     

冰冻切片应用SP免疫组化染色法的体会

链霉菌亲生物素蛋白-过氧化物酶连接法（streptavidin peroxidase conjugated method,SP法）是美国ZYMED公司于1986年首创的免疫组化方法。我们用SP法研究了SARS冠状病毒（SARS—CoV）S蛋白的功能性受体血管紧张索转换酶2（ACE2）在大鼠内脏尤其在胰腺内外分泌腺的表达,效果满意。现结合我们所做的实验对免疫组化程序中的一些主要技术问题总结如下。     

冰冻切片免疫酶染色法诊断血吸虫病的研究

用感染血吸虫鼠肝组织内虫卵冰冻切片作免疫酶染色试验,检测150例粪检阳性的血吸虫病人及150名健康人的血清,阳性率为96.7％,假阳性率为1.3‰;检测137例其它6种蠕虫病患者和50例内科疾病患者,交叉反应率为0～3.3％。该法的敏感性显著地高于用血吸虫成虫冰冻切片作免疫酶染色试验及环卵沉淀试验,而且方法简便,应用抗原经济,检测率高及获得结果较快,是一种较为理想的血吸虫病血清学诊断方法。     

冰冻切片苏木紫-伊红快速染色法探讨

探讨冰冻切片苏木紫-伊红快速染色法,为临床及时提供诊断信息。苏木紫-伊红快速染色方法制作出的标本,细胞形态和结构清晰,细胞核、细胞质显色良好,染色过程快,仅5 min后即可镜检,可及时为临床提供送检标本性质。     

神经组织冰冻连续切片技术的改进

本文介绍了我们实践中摸索和改进的两机(冰冻机与滑行切片机)联合切片法及其与温度、电压、组织块的大小等因素的相互关系。该方法具有设备简单、操作方便、经济实用、速度快,工效高、能保持切片的连续性与完整性,以及对组织结构保存良好等优点,特别适于大块组织的连续切片及大量切片时应用。     

豚鼠颞骨三维重建的冰冻连续切片技术

本文介绍了一种改进的豚鼠鼠颞骨冰冻连续切片技术，将颞骨标本用甲酸脱钙，在标本两侧放置定位线，然后将定位线与标本一起用明胶包埋，此技术具有切片薄，制片周期短，定位准确等优点，所得图像既具备切片的细节性，又能反映颞骨的空间特性，对颞骨解剖研究具有重要意义。     

豚鼠颞骨三维重建的冰冻连续切片技术

本文介绍了一种改进的豚鼠颞骨冰冻连续切片技术。将颞骨标本用甲酸脱钙,在标本两侧放置定位线,然后将定位线与标本一起用明胶包埋。此技术具有切片薄、制片周期短、定位准确等优点,所得图像既具备切片的细节性,又能反映颞骨的空间特性,对颞骨解剖研究具有重要意义。     

冷冻保存连续冰冻切片在免疫组化染色中的应用

[目的]探讨科研工作中使用连续冰冻切片进行免疫组化染色时切片的保存方法。[方法]将不能马上完成染色的连续冰冻切片采用干燥、密封的方法置于-80℃保存,需要时取出自然干燥后进行常规免疫组化染色。[结果]使用冷冻保存的冰冻切片进行免疫组化染色,组织结构清晰完整,细胞境界分明,染色对比度好,特异性抗原标记明显,与未经冷冻的新鲜切片比较各项观察指标无明显差异。[结论]-80℃冷冻保存冰冻切片的方法是可行的。     

冰冻切片革兰氏染色法在烧伤创面感染早期诊断中的应用

本文介绍冰冻切片革兰氏染色法对烧伤病人创面细菌和真菌感染早期诊断的临床实用价值。 1 材料与方法 共取128份烧伤病人术中痂下组织,0.3g～0.5g,一部分即刻冰冻切片;另一部分匀浆做血液琼脂平板细菌定量培养,并计算菌量。前者在-20℃～-25℃条件下对组织进行连续冰冻切片(KRYOMAT-1700型,Leitz microtone),切片厚度为6μ,风干后进行组织革兰氏染色处理。每张切片在油镜下连续观察20个视野以上,如发现真菌,切片再经PAS染色确认。结果与细菌培养和石蜡切片观察的结果进行比较。     

大脑冰冻连续切片细胞染色新方法-改良的Pischinger缓冲美蓝法

脑神经细胞染色方法甚多,如硫堇、甲苯胺蓝、美蓝、焦油紫、核酸菁蓝等,其中以P·Mayer氏硫堇法,Nissl氏甲苯胺蓝法,Bielschowsky——pal氏焦油紫法和pischinger氏缓冲美蓝法,至今仍为脑神经学研究工作者沿用.上述神经细胞染色法程序虽不复杂,但稍有不当往往难获满意结果,且染色保存性不稳定,极易褪色,尤以硫堇、美蓝、甲苯胺蓝最为突出.焦油紫和棓酸菁蓝的保存性虽较好,但这两种试剂目前在我国尚靠进口供应,价格贵且不易购得,不便于进行大量脑连续切片作脑神经细胞染色观察研究工作.1985年以来我们为制     

冰冻切片免疫酶染色法测定抗日本血吸虫成虫单克隆抗体的活性

<正> 在研究日本血吸虫病免疫酶染色试验(IEST)的影响因子中,曾应用感染血吸虫鼠肝组织内虫卵及日本血吸虫成虫冰冻切片抗原IEST对酶标记抗日本血吸虫成虫单克隆抗体的活性测定,现将试验结果报道如下。一、材料和方法 (一)冰冻切片抗原按苏州医学院寄生虫学教研室(1984)的方法,将感染30条血吸虫尾蚴后6周、7周及8周的小鼠解剖,取左叶肝组织及门静脉处成虫,经0.01M、pH7.2 PBS充分洗涤后,用甲基纤维素     

大鼠视网膜、视神经冰冻切片适宜厚度探索

目的 针对大鼠眼球冰冻切片难度高,各研究对眼球冰冻切片厚度差异较大的问题,探索大鼠视网膜、视神经冰冻切片适宜的厚度.方法 将24只SD大鼠随机分为3组,使用传统的石蜡切片行HE染色做对照,分别对不同厚度的冰冻切片做HE染色和FITC-lectin荧光染色进行观察（5μm、6μm、8μm、10μm、12μm、15 μm,n=8）.结果 视网膜冰冻切片HE染色显示6μm和8μm的大鼠视网膜各层细胞可看到完整细胞,密疏适宜,胞核清楚,核膜光滑完整,神经纤维层厚度均匀;6μm视神经冰冻切片HE染色显示视神经纤维排列密集、规则,染色均匀;免疫组化染色结果显示5μm、6μm和8μm的大鼠视网膜冰冻切片FITC-lectin荧光染色后层次清晰,lectin阳性细胞呈绿色分枝状,在神经节细胞及内网状层清晰可见,亦可在外网状层看到少量绿色lectin阳性细胞,10 μm及15 μm的大鼠视网膜由于各层细胞重叠严重,无法看到绿色lectin阳性细胞.6μm的视神经冰冻切片FITC-lectin荧光染色显示清晰可见的活化小胶质细胞,胞体变肥大,突起缩短,呈阿米巴样变化.结论 6 μm的视神经冰冻切片以及6～8 μm的视网膜冰冻切片,可以得到重复性切片,也可以达到理想的免疫组化染色效果。     

应用人胰腺石蜡切片代替冰冻切片检测胰岛细胞抗体的比较研究

胰岛细胞抗体（ＩＣＡ）是胰岛素依赖型糖尿病（ＩＤＤＭ）的免疫学标志之一，ＩＣＡ在ＩＤＤＭ发病前多年已经存在［１］，因此ＩＣＡ对ＩＤＤＭ有预报价值，可藉以鉴定ＩＤＤＭ高危个人及早予以免疫干预，以期延缓或防止糖尿病的发生。此外，ＩＣＡ检测有助于糖尿病分...     

连续切片加免疫组化染色法在乳腺癌微灶转移检测中的应用

目的：推荐一种检测恶性肿瘤微灶转移的方法。方法：应用连续切片的免疫组化法回顾研究50例乳腺癌的淋巴结微灶转移情况，将结果与常规病理切片法进行配对资料的卡方检验，并统计微灶转移率。结果：常规病理切片法的转移灶检出率为30％，连续切片的抗细胞角蛋白免疫组化法的转移灶检出率为50％，二者间差异有显著性。连续切片法发现的微灶转移率为28．5％。结论：对于肿瘤的微灶转移的发现，连续切片的的免疫组化法更有优势，它是一种敏感的检测微灶转移的方法。     

基于正交设计大鼠脑动脉血管分叉冠状冰冻切片制备方法研究

目的 针对大鼠脑血管分叉部冠状切面,优化冰冻切片的实验条件. 方法 选择冷冻温度、切片厚度和液氮表面速冻时间三因素、三水平设计正交实验,将实验结果输入SPSS 13.0软件,分析得到正交实验方差分析表和单因素统计表,并对实验数据进行统计分析,得到实验的优化条件. 结果 大鼠脑血管分叉部冠状面冰冻切片的最优条件是:冷冻温度-25℃,切片厚度4μm,液氮表面速冻时间15 s. 结论 应用SPSS 13.0软件进行正交实验设计和分析,可以快速获得大鼠脑血管分叉部冠状面冰冻切片优化实验条件,节省实验标本制备和人工劳动成本.     

182例乳腺病变印片、冰冻切片及石蜡切片诊断的对比分析

１８２例乳腺病变印片、冰冻切片及石蜡切片诊断的对比分析银川市第一医院病理科（７５０００１）姜汉国陈利萍近二十年来，乳腺癌的发生率呈明显上升趋势。目前，我国乳腺癌的发生率及死亡率已跃居妇女恶性肿瘤的第一位〔１〕。在外科送检的标本中，乳腺病变非常多见且种...