四逆汤对阿霉素性心衰大鼠心肌线粒体功能的影响

目的:探讨四逆汤对阿霉素(ADR)诱导的心力衰竭大鼠心肌细胞线粒体的保护机制.方法:SD大鼠随机分为对照组,心衰组和四逆汤组,心衰组和四逆汤组尾静脉注射ADR复制心衰模型,四逆汤组给予四逆汤煎剂灌胃(3.75 g生药/kg/d),3周后测定大鼠心功能,线粒体丙二醛(MDA)含量,Mn SOD活性,肿胀程度及Na K ATP酶和Ca2 ATP酶活力,RT-PCR法检测Mn SOD mRNA表达.结果:四逆汤组可以显著改善心衰大鼠心功能,提高Mn SOD的活性及其mRNA表达,减少心肌细胞线粒体MDA的含量及肿胀程度,提高ATP酶活力.结论:阿霉素性心力衰竭心肌细胞线粒体存在明显的氧化应激反应,四逆汤可以通过减轻氧化损伤,改善线粒体功能,保护心肌组织.     

强心颗粒对心气虚兼血瘀水肿证心衰大鼠心肌细胞线粒体凋亡的影响

目的探索强心颗粒对慢性心力衰竭心气虚兼血瘀水肿证大鼠心肌细胞线粒体凋亡的影响。方法 50只大鼠随机分为正常组、模型组、缬沙坦组(13.35 mg/kg)、强心颗粒组(9.26 g/kg),采用阿霉素联合丙基硫氧嘧啶双重因子攻击技术建立大鼠模型。灌胃给药4周后,检测大鼠的心肌细胞线粒体超微结构、线粒体跨膜电位、心肌组织ATP水平,Western blot法检测Cyto-C、Cleaved-caspase-3、Cleaved-caspase-9、 Bcl-2、Bax蛋白表达。结果与模型组比较,强心颗粒组大鼠心肌细胞线粒体超微结构改善,线粒体跨膜电位下降心肌细胞比例显著减少(P0.01),心肌组织ATP水平显著增加(P0.01),Cyto-C、Cleaved-caspase-3、Cleaved-caspase-9蛋白表达显著减低(P0.01),Bcl-2/Bax比率显著升高(P0.01),且显著优于缬沙坦组(P0.01)。结论强心颗粒可通过调控线粒体凋亡通路来改善慢性心力衰竭心气虚兼血瘀水肿证大鼠的心功能及预后。     

右归丸对肾阳虚证大鼠肾脏线粒体功能的影响

目的观察右归丸对肾阳虚证大鼠肾脏线粒体功能的影响,探讨其调节能量代谢的作用机制。方法 30只SD大鼠随机分为正常组(6只)和造模组(24只),造模组后肢肌注氢化可的松注射液,正常组注射2m L生理盐水。成模后将造模组随机分为模型组和右归丸高、中、低剂量组,每组6只。右归丸高、中、低剂量组给予相应剂量汤剂灌胃,正常组和模型组给予生理盐水灌胃。透射电镜观察肾脏线粒体超微结构,试剂盒检测线粒体三磷酸腺苷(ATP)含量,JC-1荧光探针检测线粒体膜电位,DCFH-DA法检测细胞内活性氧(ROS)水平。结果与正常组比较,模型组大鼠肾脏线粒体明显肿胀,部分出现空泡,线粒体嵴排列不规则,基质不均匀,核膜不明显,线粒体ATP含量减少、膜电位下降,细胞内ROS水平升高,差异有统计学意义(P0.01);与模型组比较,右归丸各剂量组大鼠肾脏线粒体结构均有改善,线粒体肿胀减轻,线粒体嵴排列较规则,基质均匀,核膜清晰,线粒体ATP含量增加、膜电位升高,细胞内ROS水平降低,其中右归丸高剂量组作用明显,差异有统计学意义(P0.01)。结论右归丸通过改善大鼠线粒体功能调节能量代谢异常。     

双参宁心胶囊通过调控线粒体ATP敏感性钾通道减轻大鼠心肌缺血/再灌注损伤

目的:观察双参宁心胶囊通过调控线粒体三磷酸腺苷(ATP)敏感性钾通道来减轻大鼠心肌缺血/再灌注损伤。方法:成年雄性SD大鼠56只,随机分为假手术组(sham),模型组(model),双参宁心组(SSNX)给予SSNX 90 mg·kg-1,线粒体ATP敏感性钾通道(MitoKATP)通道抑制剂组(SSNX+5-HD),给予SSNX 90 mg·kg-1和5-HD 5 mg·kg-1;每组各14只。除假手术组外其余3组均阻断冠状动脉左前降支(LAD)45 min,分别于再灌注后3 h后处死,氯化2,3,5-三苯基四氮唑(TTC)染色观察心肌缺血和梗死面积,苏木素-伊红(HE)染色观察心肌组织损伤程度。试剂盒检测血清乳酸盐脱氢酶(LDH),肌酸激酶(CK)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)的活性。透射电镜下观察心肌细胞线粒体及线粒体自噬超微结构变化,荧光探针法检测心肌细胞中线粒体膜电位水平的变化。结果:与sham组比较,model组心肌梗死面积与心肌缺血面积百分率明显增大,心肌组织排列紊乱,疏松,个别心肌纤维断裂,心肌细胞坏死,血清中CK,CK-MB,LDH活性显著升高(P0. 01),线粒体膜电位显著降低(P0. 01),透射电镜观察线粒体结构破坏明显。与model组比较,SSNX组心肌组织排列有序,少数区域细胞水肿轻度变性,心肌梗死面积与心肌缺血面积百分率显著降低,血清中CK,CK-MB,LDH活性显著降低(P0. 01),线粒体膜电位升高(P0. 01),SSNX+5-HD组心肌组织排列轻度无序,部分区域细胞水肿轻度变性,心肌梗死面积与心肌缺血面积百分率显著降低,血清中CK,CK-MB,LDH活性显著降低(P0. 01),线粒体膜电位升高(P0. 01)。而SSNX+5-HD组较SSNX组,血清中CK,CK-MB,LDH活性显著升高(P0. 01),心肌梗死面积与心肌缺血面积百分率显著增大,线粒体膜电位有所降低(P0. 05)。结论:双参宁心胶囊通过开放线粒体ATP敏感性钾通道来保护大鼠心肌缺血再灌注损伤。     

地黄饮子对AD大鼠中枢神经线粒体结构及功能的保护作用

目的:以侧脑室注射β-淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)致痴呆大鼠为阿尔茨海默病(AD)模型,探讨地黄饮子对AD大鼠中枢神经线粒体结构功能损伤的保护机制。方法:120只SD大鼠随机分为假手术组,模型组,阳性药(安理申,0.5 mg·kg~(-1))组,地黄饮子高、中、低剂量组(3,1.5,0.75 g·kg~(-1))。除假手术组外,其他大鼠均在左侧脑室注射老化的Aβ1-42建立AD大鼠模型。经灌胃给予地黄饮子30 d后,采用Morris水迷宫和跳台实验检测地黄饮子对AD大鼠学习记忆能力的影响,高效液相色谱法检测AD大鼠脑组织中三磷酸腺苷(ATP),二磷酸腺苷(ADP),单磷酸腺苷(AMP),磷酸肌酸(PCr),并计算能荷(EC)水平,光吸收法检测线粒体中丙酮酸脱氢酶(PDH)和α-酮戊二酸脱氢酶(KGDH)活性、线粒体肿胀度、膜电位等。结果:地黄饮子可以显著改善AD大鼠学习记忆能力,与模型组比较,地黄饮子升高大鼠脑组织ATP,ADP,PCr及EC水平(P0.05,P0.01),升高三羧酸循环关键酶PDH和KGDH活性(P0.05,P0.01),降低线粒体肿胀程度(P0.05,P0.01),升高线粒体膜电位(P0.05,P0.01)。结论:地黄饮子药能通过保护线粒体结构功能,改善能量代谢,提高AD大鼠学习记忆能力。     

氧自由基、HMGB1在脓毒症大鼠心肌组织中的动态表达及丹红注射液的干预影响

目的:观察丹红注射液对脓毒症大鼠心肌损伤的保护作用并探讨其可能机制。方法:雄性Wistar大鼠分为6组:正常组、假手术组、模型6 h组、模型24 h组、丹红6 h组和丹红24 h组,每组各8只。盲肠结扎并穿孔(CLP)法建立脓毒症大鼠动物模型,观察各组心肌组织超微结构改变,心肌组织丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)和高迁移率族蛋白1(HMGB1)含量的变化。结果:CLP术后,模型组大鼠心肌组织MDA含量、HMGB1蛋白合成进行性升高、SOD活力则持续降低,与假手术组比较有差异(P0.05),丹红组较模型组同时间点MDA、HMGB1及SOD均有改善,改善有统计学差异(P0.05);超微结构示模型组大鼠心肌细胞线粒体肿胀,部分肌纤维稀疏,至24 h时肿胀加重,部分空泡变性;丹红组心肌细胞损伤轻于模型组同时间点。结论:丹红注射液对脓毒症大鼠心肌损伤有一定程度的保护作用,其机制可能与清除氧自由基,降低HMGB1含量有关。     

电针内关穴预处理对心肌缺血再灌注损伤大鼠NO、NOS及线粒体膜电位的影响

目的通过测定心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)及线粒体膜电位,探讨电针内关穴预处理对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠NO、NOS及线粒体膜电位的影响。方法将40只SD雄性大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组(模型组)、电针内关穴组和电针环跳穴组,每组10只。采用冠脉结扎法造模,电针内关组和电针环跳组在造模前,分别给予电针刺激20 min/d,共7 d。记录造模前后心电图Ⅱ导联T波电压值,HE染色检测心肌病理形态学的变化,采用硝酸还原酶化学比色法检测血清NO、NOS的含量,荧光技术法测心肌细胞线粒体膜电位的变化。结果模型组血清NO、NOS含量及线粒体膜电位较假手术组明显下降(P0.01,P0.05);电针内关穴组血清NO、NOS含量较模型组、假手术组和电针环跳组明显升高(P0.01,P0.05);电针内关穴组线粒体膜电位较模型组、电针环跳穴组和假手术组明显升高(P0.05);模型组与电针环跳穴组间无明显差异(P0.05)。结论电针内关穴预处理对MIRI大鼠具有预保护作用,可以通过提高NO含量、增强NOS活性,减少心肌细胞线粒体膜电位下降,抑制细胞凋亡,从而对心肌产生保护作用。     

四逆汤对脓毒症中晚期大鼠心肌细胞的保护作用

目的观察四逆汤对脓毒症中晚期大鼠心肌损伤的保护作用。方法雄性SPF级大鼠70只,随机分为正常对照组、脓毒症模型组、四逆汤低剂量组和高剂量组。采用盲肠结扎穿孔制作脓毒症中晚期大鼠模型。治疗组在造模后72 h进行干预,观察各组大鼠造模后第7日存活率,对存活大鼠进行腹主动脉取血,测定血清TNF-α、IL-10及c Tn T水平,处死大鼠后采集心肌组织,应用TUNEL法进行心肌细胞凋亡检测。结果经四逆汤干预治疗后,模型组与四逆汤高、低剂量治疗组第7日存活率差异无显著意义(P0.05),但治疗组大鼠血清TNF-α、IL-10及c Tn T较正常对照组出现不同程度下降。四逆汤高、低剂量治疗组心肌细胞凋亡率较模型组明显下降(P0.05),但高剂量组与低剂量组之间心肌细胞凋亡率无显著差异(P0.05)。结论四逆汤可减轻心肌细胞损伤,延缓心肌细胞凋亡,其机制可能与改善脓毒症晚期大鼠免疫功能状态,抑制炎症介质的释放有关。     

电针对心肌缺血大鼠细胞凋亡指数及miRNAs表达影响的研究

目的:探讨电针内关穴(电针组)对心肌缺血大鼠细胞凋亡相关微小核糖核酸(miRNA)表达的影响,以期探讨其作用机制。方法:30只Wistar雄性大鼠随机分为正常组、模型组和电针组,每组10只。模型组和电针组以盐酸异丙肾上腺素2 mg/(kg·d)背部皮下注射14 d的方法制备心肌缺血大鼠模型;正常组注射等量生理盐水。电针组在造模后选取内关穴进行电针,每天1次,共21 d。运用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠血清CK、CK-MB及VCAM-1的表达量;TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数(AI)值;Real time PCR法检测心肌细胞miRNA-133a、miRNA-133b、miRNA-208、miRNA-499的表达量。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清CK、CK-MB、VCAM-1表达升高;心肌细胞凋亡指数增多;心肌细胞miRNA-133a、miRNA-133b表达降低,miRNA-208、miRNA-499表达升高,差异均有统计学意义(P0.01)。电针组上述指标均明显低于模型组,差异有统计学意义(P0.01)。结论:电针内关穴可有效防治心肌缺血,其保护作用可能与上调心肌miRNA-133a、miRNA-133b的表达,抑制miRNA-208、miRNA-499的表达有关。     

熟地黄对ADHD模型大鼠前额叶皮质线粒体的保护作用

目的探讨熟地黄对ADHD模型大鼠前额叶皮质线粒体保护作用。方法将30只SHR大鼠随机分为模型组、MPH组(2 mg/kg)、熟地黄组(2.4 g/kg),另设WKY大鼠为正常组,每组10只,灌胃给药4周。采用透射电镜观察大鼠前额叶皮质线粒体超微结构;JC-1染色法和DCFH-DA荧光探针分别检测线粒体膜电位(MMP)和细胞内活性氧簇(ROS)水平;比色法检测超SOD、CAT水平;TUNEL染色检测神经元凋亡。结果与正常组比较,模型组线粒体呈现出肿胀、嵴减少等异常,MPH组上述异常加重,熟地黄组则有所缓解。与模型组比较,MPH组前额叶皮质MMP、SOD水平降低(P0.05,P0.01),ROS水平及神经元凋亡升高(P0.05,P0.01);而熟地黄组前额叶皮质MMP及SOD、CAT水平升高(P0.05,P0.01),ROS水平及神经元凋亡降低(P0.01)。结论熟地黄对ADHD模型SHR前额叶皮质线粒体结构和功能损伤有保护作用,并可减少神经元凋亡,其机制可能与抗氧化应激损伤有关。     

冠心平对H_2O_2致乳大鼠心肌细胞损伤的保护作用

目的:观察冠心平对过氧化氢(H2O2)所致乳鼠培养心肌细胞损伤的保护作用。方法:原代培养的新生SD乳大鼠,随机分为正常组、模型组、维拉帕米组、和冠心平3个剂量组。用比色法观察乳鼠心肌细胞培养液的乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌酸激酶(CK)、脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性,并用光镜观察心肌细胞形态学改变。结果:损伤组乳鼠心肌细胞培养液中LDH、CK-MB、CK和MDA含量非常显著增高,SOD活性非常显著降低(与对照组相比,P0.01),心肌细胞损伤严重;冠心平保护组与H2O2损伤组相比,LDH、CK-MB、CK和MDA明显降低,SOD活性显著升高(P0.01,P0.05),心肌细胞形态学变化减轻。结论:冠心平对H2O2诱导的乳鼠心肌细胞损伤有保护作用,其机制可能与清除氧自由基、抗脂质过氧化损伤有关。     

四逆汤及不同组方配伍对大鼠心肌缺血影响的对比研究

目的研究四逆汤及其不同组方配伍对垂体后叶素(Pit)所致大鼠心肌缺血模型的影响。方法建立大鼠心肌缺血模型,观察四逆汤、附子甘草合煎液、附子干姜合煎液、甘草干姜合煎液、附子单煎液、干姜单煎液、甘草单煎液对大鼠心肌梗死范围、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、天冬氨酸转氨酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、乳酸的影响。结果四逆汤组、附子甘草组、附子干姜组、附子组能显著减少心肌梗死范围(P0.01)、减少心肌MDA、乳酸释放(P0.05、0.01)、降低血清LDH、CK、AST水平(P0.05、0.01);四逆汤组、附子干姜组能提高心肌SOD活性(P0.05);四逆汤组能显著提高心肌GSH-Px活性(P0.01);四逆汤组在心肌LDH水平上低于附子组(P0.05)。结论对大鼠缺血心肌的保护程度依次为四逆汤组附子干姜组附子甘草组附子组,从药效的角度揭示了四逆汤配伍的科学性,体现了四逆汤遣方用药之精准。     

脾气虚大鼠股四头肌线粒体蛋白质控的研究

目的:主要通过检测线粒体蛋白质控(mitochondrial protein quality control, MPQC)网络主要成分的表达,初步探讨脾气虚骨骼肌线粒体损伤的可能机制。方法:16只雄性SD大鼠随机分为正常组和脾气虚模型组(模型组),每组8只;透射电镜观察股四头肌线粒体超微结构;提取股四头肌线粒体,ELISA法检测内ATP、反应性氧簇(reactive oxygen species, ROS)和超氧化物岐化酶(superoxide dismutase, SOD)水平,比色法检测谷胱甘肽(glutathion peroxidase, GSH-Px)活性;Western Blotting法检测股四头肌线粒体内热休克蛋白70(hot shock protein 70, Hsp70)、Lon蛋白酶(Lon protease, LonP)和ClpXP复合物表达。结果:与正常组比较,模型组线粒体较小,数量减少,嵴减少;ATP和SOD水平下降(均P0.01),ROS水平升高(P0.05);LonP表达下降(P0.05),ClpP表达上升(P0.05)。结论:MPQC网络异常与脾气虚骨骼肌线粒体损伤有关。     

椰子壳挥发油对心肌损伤大鼠生物化学标志物的影响及分析

目的观察椰子壳挥发油对急性心肌损伤大鼠生物化学标志物的影响。方法将肢体Ⅱ导联心电图正常的40只雄性Wistar大鼠,随机分为4组,即正常组、模型组、椰子壳挥发油组、复方丹参滴丸组,每组10只,连续给药7 d,在实验的第6、7 d,除正常组外,各组大鼠颈部皮下注射盐酸异丙肾上腺素,建立急性心肌损伤模型。实验第8 d检测各组大鼠血清和心肌组织中以下心肌损伤标志物的含量:天冬氨酸氨基转移酶(AST)、α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)、血清肌酸激酶(CK)、肌酸激酶MB同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、乳酸脱氢酶同工酶1(LDH1)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)、心肌肌钙蛋白I(cTnⅠ)、肌红蛋白(Mb)。结果与正常组比较,模型组大鼠血清中AST、CK、CK-MB、LDH、LDH1、α-HBDH、cTnT、cTnⅠ、Mb升高(P0.01),复方丹参滴丸组大鼠血清中CK-MB、LDH、LDH1、α-HBDH、cTnⅠ升高(P0.01,P0.05),椰子壳挥发油组大鼠血清中AST、CK-MB、LDH、LDH1、α-HBDH、cTnⅠ升高(P0.01,P0.05)。与模型组比较,复方丹参滴丸组大鼠血清中AST、CK、CK-MB、LDH、LDH1、α-HBDH、cTnT、cTnⅠ、Mb降低(P0.01),椰子壳挥发油组大鼠血清中CK、CK-MB、LDH、LDH1、α-HBDH、cTnT、cTnⅠ、Mb降低(P0.01)。与复方丹参滴丸组比较,椰子壳挥发油组大鼠血清中AST、LDH升高(P0.01)。与正常组比较,模型组心肌组织中AST、CK、CK-MB、LDH、α-HBDH、cTnT、cTnⅠ、Mb升高(P0.01),复方丹参滴丸组心肌组织中AST、CK-MB、α-HBDH升高(P0.01),椰子壳挥发油组心肌组织中AST、CK、CK-MB、α-HBDH升高(P0.01,P0.05)。与模型组比较,复方丹参滴丸组、椰子壳挥发油组心肌组织中AST、CK、CK-MB、LDH、α-HBDH、cTnT、cTnⅠ、Mb均降低(P0.01)。与复方丹参滴丸组比较,椰子壳挥发油组心肌组织中Mb降低(P0.01)。结论椰子壳挥发油可以降低心肌损伤时多种酶类、蛋白质类标志物的释放,在一定程度上抑制心肌损伤的发生。     

藏红花素预处理对缺血性脑损伤大鼠海马线粒体保护作用的研究

目的探讨藏红花素预处理对缺血性脑损伤大鼠海马线粒体的保护作用。方法将120只SD大鼠随机分为6组,每组20只。于术前7 d开始,藏红花素低、中、高剂量组分别腹腔注射10,20,40 mg/kg藏红花素,尼莫地平组腹腔注射1 mg/kg尼莫地平注射液,假手术组、模型组注射等体积生理盐水,均1次/d。干预结束后,除假手术组外,其余组均采用改良线栓法闭塞大脑中动脉的方法复制缺血性脑损伤大鼠模型。造模24 h后,透射电子显微镜观察海马线粒体超微形态结构变化,比色法测定线粒体膜肿胀程度,荧光偏振度法测定线粒体膜流动性,Trinder酶试剂盒测定线粒体膜总磷脂含量,荧光酶标仪测定线粒体膜通透性转换孔(MPTP)开放度和膜电位(△ψm),改良Clark氧电极法测定线粒体呼吸功能和呼吸酶(NADH脱氢酶、琥珀酸脱氢酶和细胞色素C氧化酶)活性,比色法测定线粒体ATP含量,原子化学发光法测定线粒体游离Ca~(2+)浓度。结果藏红花素中、高剂量组和尼莫地平组缺血性脑损伤大鼠海马线粒体超微形态结构病变明显轻于模型组(P均0.05),线粒体膜肿胀度明显轻于模型组(P均0.05),膜流动性、膜磷脂含量、△ψm、线粒体呼吸功能和呼吸酶活性、ATP含量均明显高于模型组(P均0.05),MPTP开放度、游离Ca~(2+)浓度均明显低于模型组(P均0.05)。结论藏红花素预处理对缺血性脑损伤大鼠海马线粒体结构和功能具有保护作用。     

电针不同腧穴对心肌缺血模型大鼠细胞凋亡及心肌细胞miRNAs表达的影响

目的:观察电针不同组腧穴对心肌缺血大鼠细胞凋亡相关血清、微小核糖核酸(microRNA,miRNA)表达的影响,探讨其作用机制。方法:48只Wistar雄性大鼠随机分为正常组、模型组、内关电针组(内关组)及标本配穴电针组(配穴组),每组12只。模型组、内关组和配穴组大鼠以盐酸异丙肾上腺素(isoprenaline hydrochloride,ISO)2mg/(kg·d)背部皮下注射14d的方法制备心肌缺血模型;正常组注射等量0.9%NaCl溶液。造模后,内关组选取"内关",配穴组选取"关元""足三里""内关"分别进行电针治疗;正常组、模型组大鼠只抓取固定,每天1次,共21d。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠血清肌酸激酶同工酶(creatine phosphate enzyme isozyme,CK-MB)、血管内皮细胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule,VCAM-1)及内皮素1(ET-1)的含量;DNA断裂的原位末端标记法(TUNEL法)检测心肌细胞凋亡指数(apoptosisindex,AI);实时定量荧光PCR法检测心肌细胞miRNA-1、miRNA-133、miRNA-208、miRNA-499的表达量。结果:与正常组比较,模型组、内关组、配穴组大鼠血清CK-MB、VCAM-1、ET-1升高(均P0.01),心肌细胞凋亡指数增多(均P0.01);内关组、配穴组CK-MB、VCAM-1、ET-1均明显低于模型组(均P0.01),心肌细胞凋亡指数下降(均P0.01),且配穴组低于内关组(P0.05)。与正常组比较,模型组心肌细胞miRNA-133表达降低(P0.01),miRNA-208、miRNA-1、miRNA-499表达升高(均P0.01);与模型组比较,内关组、配穴组心肌细胞miRNA-133表达增加(均P0.01),miRNA-208、miRNA-1、miRNA-499表达降低(均P0.01);与内关组比较,配穴组miRNA-133表达增加(P0.01),miRNA-208、miRNA-1、miRNA-499表达降低(P0.01,P0.05)。结论:电针腧穴尤其是配穴组可有效防治心肌缺血,其保护机制可能与上调miRNA-133的表达,抑制心肌miRNA-1、miRNA-208、miRNA-499表达的双重调控作用有关。     

白芍总苷预处理对缺血性脑损伤大鼠海马线粒体病变的影响

目的研究白芍总苷(TGP)预处理对缺血性脑损伤大鼠海马线粒体病变的影响。方法采用阻断大脑右侧中动脉的方法复制缺血性脑损伤大鼠模型。大鼠随机分为假手术组,模型组,TGP低[50 mg/(kg·d)]、中[100 mg/(kg·d)]、高[200 mg/(kg·d)]剂量预处理组和尼莫地平1 mg/(kg·d)预处理组,术前7 d开始灌胃给药。术后24 h取海马组织,透射电子显微镜(TEM)观察海马区线粒体超微结构;比色法测定海马区线粒体肿胀程度,荧光偏振度法测定线粒体膜流动性,测定膜总磷脂含量、膜通透性转换孔(MPTP)开放度、膜电位(△ψm),改良Clark氧电极法测定呼吸酶活性,测定ATP含量、原子化学发光法测定游离Ca~(2+)浓度。结果经TGP中、高剂量或尼莫地平预处理7 d能够明显抑制缺血性脑损伤大鼠海马线粒体超微结构病变,缓解线粒体肿胀,抑制膜流动性和膜总磷脂含量降低,抑制MPTP开放和△ψm降低,抑制呼吸酶NADH脱氢酶、琥珀酸脱氢酶和细胞色素C氧化酶活性降低,抑制ATP含量降低和游离Ca~(2+)浓度升高,与模型组比较差异均具有统计学意义(P 0.05或P 0.01)。结论 TGP预处理对缺血性脑损伤大鼠海马线粒体超微结构病变及功能损伤均具有一定的保护作用,其机制可能与TGP维持△ψm和MPTP开放度正常有关。     

鬼箭羽抗心肌缺血作用的实验研究

目的:探讨鬼箭羽抗大鼠急性心肌缺血损伤的作用机制。方法:将健康Wistar大鼠经ECG筛选后随机分为鬼箭羽高、中、低剂量组,模型组,假手术组,阳性对照组,每组10只。采用冠状动脉结扎法建立大鼠急性心肌缺血模型,检测血清中肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、血清丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)、一氧化氮(NO)等指标。结果:鬼箭羽高、中剂量组能降低模型大鼠血清CK、CK-MB、AST、LDH和MDA水平,提高模型大鼠血清SOD、NO含量,与模型组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:鬼箭羽对急性心肌缺血大鼠的心肌细胞具有一定的保护作用,有一定防治心肌缺血的作用。     

附子理中汤对失血性低血压大鼠心率及心肌酶的影响

目的:探讨不同剂量的附子理中汤对失血性低血压大鼠心率及心肌酶的影响。方法:将大鼠随机分为正常组,模型组,附子理中汤高、中、低剂量组,每组10只,除正常组外,其余4组均建立失血性低血压的大鼠模型,采用多通道生理信号采集系统采集全程心率的变化;酶联免疫试剂盒检测天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)的水平,观察不同浓度的附子理中汤对大鼠心率和相关心功能指标的影响。结果:与正常组比较,模型组大鼠心率减缓(P0.01);与模型组比较,附子理中汤高、中剂量组大鼠心率均增快(P0.01),以高剂量组最为明显,而低剂量组对心率无影响;模型组AST、LDH、CK、CK-MB水平均较正常组升高(P0.01);与模型组比较,附子理中汤中、低剂量组AST、LDH、CK、CK-MB水平均显著降低(P0.01),附子理中汤高剂量组与模型组相比差异无统计学意义(P0.05)。结论:附子理中汤在一定剂量下对失血性低血压模型大鼠的心率与心功能有改善作用,可降低AST、LDH、CK、CK-MB的活性,但随着剂量的加大,会对心脏产生一定的毒副作用。     

温和灸预处理对幼鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

目的观察温和灸预处理对幼鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的影响,探讨其作用机制。方法将40只SD幼鼠采用随机数字表法分为模型组、假手术组、缺血预适应组、温和灸预处理组,每组10只。模型组、假手术组、缺血预适应组每日捆绑20 min,温和灸预处理组灸内关、足三里、关元,每日1次,连续7 d。第8天,通过可逆性左冠状动脉前降支结扎法复制心肌缺血再灌注模型,假手术组仅穿线不结扎,缺血预适应组予心肌缺血预适应处理。造模结束后取材,检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)、三磷酸腺苷(ATP)和超氧化物歧化酶(SOD)水平,HE染色法和透射电镜观察缺血区心肌组织病理形态和超微结构改变。结果与假手术组比较,模型组血清CK-MB、cTnT浓度上升(P0.05),ATP含量和SOD活性下降(P0.05);与模型组比较,缺血预适应组和温和灸预处理组血清CK-MB、cTnT浓度显著降低(P0.05),ATP含量和SOD活性显著增加(P0.05);温和灸预处理组和缺血预适应组比较,差异无统计学意义(P0.05)。HE染色和透射电镜结果显示,假手术组心肌纤维轻微肿胀,细胞结构无明显异常;模型组心肌肌纤维溶解断裂,结构缺损,线粒体嵴不规则,自噬空泡较多;与模型组相比,缺血预适应组和温和灸预处理组心肌肿胀、坏死较轻,细胞核和线粒体结构基本完整,自噬空泡减少。结论温和灸预处理能保护MIRI幼鼠的心功能,并产生与心肌缺血预适应相似的减轻MIRI的效应,作用机制可能与减轻心肌细胞线粒体自噬,维持心肌能量供应,增强心肌抗氧化能力有关。