青蒿琥酯对迟发型超敏反应小鼠脾脏T淋巴细胞的免疫调节作用

背景：青蒿琥酯是青蒿素低毒、高效的衍生物,具有免疫调节功能,但其具体机制仍需研究阐明。目的：初步探讨青蒿琥酯对迟发型超敏反应小鼠脾脏T淋巴细胞的免疫调节作用。方法：建立迟发型超敏反应小鼠模型,40只小鼠随机数字表法均分正常对照组、青蒿琥酯干预组、p-38 MAPK抑制剂组、基质对照组进行实验观察。T淋巴细胞转化实验检测小鼠T淋巴细胞增殖水平;Western blot方法检测p38丝裂酶原激活蛋白激酶（p38 MAPK）蛋白的活性表达。结果与结论：局部给药后青蒿琥酯明显减轻迟发型超敏反应小鼠耳肿胀、降低脾指数、抑制刀豆蛋白A诱导的T淋巴细胞增殖;同时减弱p38MAPK的磷酸化活性表达。提示青蒿琥酯可以有效抑制小鼠迟发型超敏反应,其作用途径可能与抑制p38MAPK信号通路有关。     

青蒿琥酯对迟发型超敏反应小鼠脾脏T淋巴细胞的免疫调节作用

背景:青蒿琥酯是青蒿素低毒、高效的衍生物,具有免疫调节功能,但其具体机制仍需研究阐明。目的:初步探讨青蒿琥酯对迟发型超敏反应小鼠脾脏T淋巴细胞的免疫调节作用。方法:建立迟发型超敏反应小鼠模型,40只小鼠随机数字表法均分正常对照组、青蒿琥酯干预组、p-38 MAPK抑制剂组、基质对照组进行实验观察。T淋巴细胞转化实验检测小鼠T淋巴细胞增殖水平;Western blot方法检测p38丝裂酶原激活蛋白激酶(p38 MAPK)蛋白的活性表达。结果与结论:局部给药后青蒿琥酯明显减轻迟发型超敏反应小鼠耳肿胀、降低脾指数、抑制刀豆蛋白A诱导的T淋巴细胞增殖;同时减弱p38MAPK的磷酸化活性表达。提示青蒿琥酯可以有效抑制小鼠迟发型超敏反应,其作用途径可能与抑制p38MAPK信号通路有关。     

复方白鲜皮乳防治脱发作用机理研究

目的研究复方白鲜皮乳防治脱发的作用及其相关机制。方法通过环磷酰胺诱导大鼠脱发模型实验、石蜡松香混合物脱发模型实验、醋酸诱导小鼠腹腔通透性实验,以及2,4-二硝基氟苯(DNFB)迟发性超敏反应动物模型实验,探讨复方白鲜皮乳防止脱发、促进毛发生长、对毛细血管通透性的影响以及免疫抑制等作用。结果复方白鲜皮乳各剂量组不能减少环磷酰胺诱导大鼠脱发,对正常小鼠毛囊数无明显影响;大、中剂量可增加环磷酰胺大鼠皮肤毛囊数,各剂量可显著降低醋酸诱导小鼠腹腔通透性增高的作用,减少DNFB增加小鼠耳肿胀的程度及DNFB小鼠的胸腺指数,与赋形剂组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论复方白鲜皮乳各剂量组不能阻止环磷酰胺诱导大鼠脱发,但对环磷酰胺损伤毛囊的作用有一定的对抗作用,对正常小鼠的毛发生长有一定促进作用,这些作用可能与该药具有一定的抗炎和免疫抑制作用有关。     

喘可治口服液抗过敏作用的实验研究

[目的]研究喘可治口服液的抗过敏作用。[方法]观察不同剂量喘可治口服液对磷酸组胺所致豚鼠皮肤过敏反应的影响,计算过敏反应的致痒阈值。用2,4-二硝基氯苯（2,4-DNCB ）对昆明小鼠皮肤致敏和诱发制成迟发型超敏反应模型。将小鼠随机分为5组,即模型对照组、阳性对照组、高剂量组、中剂量组、低剂量组,连续灌胃10 d ,d9对小鼠右耳激发过敏。观察记录激发后各组小鼠左右耳耳郭肿胀度、肿胀率、抑制率、胸腺指数及脾脏指数。利用卵白蛋白做抗原,百日咳疫苗做佐剂,制取大鼠抗过敏血清。同种雄性大鼠随机分为5组,即模型对照组、阳性对照组、高剂量组、中剂量组、低剂量组。将抗血清皮内注射于各组大鼠背部皮肤,利用抗原攻击,同时尾静脉注射1％伊文思蓝溶液,剪下带蓝斑皮肤于丙酮-生理盐水（7∶3）溶液,检测吸光度值。[结果]高剂量能明显提高组胺所致豚鼠致痒阈值,与模型对照组相比阈值差异有显著性。与模型对照组比较,高、中、低三剂量组小鼠耳郭的肿胀度、肿胀率、抑制率以及胸腺指数和脾脏指数均有所下降。高剂量组、中剂量组均能明显地抑制同种大鼠的被动皮肤过敏反应。[结论]喘可治口服液具有一定抗过敏及抗迟发型超敏反应作用,其中高剂量组作用较显著。     

Hymenistatin-1及其类似物的免疫活性研究

目的 研究固相合成的Hymenistatin-1(以下简称HS-1,序列为cyclo-(-Pze-Pro- Tyr-Val-Pro-Leu-Ile-Ile)]及其四种statine类似物的免疫活性.方法 通过DNFB诱导小鼠迟发型超敏反应试验、体外淋巴细胞增殖试验和小鼠碳廓清试验,研究HS-1及其类似物对小鼠迟发型超敏反应、体外淋巴细胞增殖和巨噬细胞吞噬能力的影响.结果 HS-1及其四种类似物对淋巴细胞增殖都表现出抑制作用,且修饰后的HS-1类似物在低浓度时表现出比阳性对照和天然HS-1更强的免疫抑制作用;A3 HS1低浓度组(50 μg/ml)对淋巴细胞增殖的抑制作用最强,抑制率为28.4%.用statine修饰的HS-1类似物A2 HS1和A4 HS1能够抑制巨噬细胞的吞噬功能,但不能对小鼠迟发型超敏反应有很好的抑制作用.通过胸腺指数和肿胀度的比较可以得出,阳性对照在高浓度的时候对迟发型超敏反应有抑制作用,HS-1类似物的低浓度组比高浓度对小鼠迟发型超敏反应的抑制作用强.其中A1 HS1和A3 HS1的低浓度组已经表现出比天然HS-1组和阳性对照组强的免疫抑制活性.结论 HS-1类似物A2 HS1和A4 HS1对巨噬细胞吞噬能力的抑制作用和对淋巴细胞增殖的抑制作用比阳性对照组和天然HS-1组强;HS-1类似物A1 HS1和A3 HS1对小鼠迟发型超敏反应的抑制作用和对淋巴细胞增殖的抑制作用比阳性对照组和天然HS-1组强.由此可见,通过对天然HS-1进行statine修饰,能增强其免疫抑制作用.     

云南虫草菌粉对小鼠迟发型超敏反应影响的实验研究

目的：研究人工培养云南冬虫夏草菌粉（YNCS）对小鼠由环磷酰胺（CY）诱发的增强和降低的迟发型超敏反应（DTH）的影响。方法：小鼠随机分组,每日以受试药物灌胃,同时通过CY分别诱导增高和降低DTH,观察YNCS对增高和降低DTH的影响。结果：高剂量YNCS对CY所致增高和降低的的DTH反应有促进恢复作用（P〈0.05）。结论：提示YNCS对机体细胞免疫功能具有调节功能。     

白芍总苷对接触性皮炎小鼠核因子-κB、CD1a因子、肿瘤坏死因子的影响

目的探讨白芍总苷对小鼠变应性接触性皮炎（ACD）的治疗作用。方法以2,4-二硝基氟苯（DNFB）对小鼠进行皮肤致敏及激发,制成小鼠接触性皮炎模型,观察白芍总苷对小鼠耳肿胀度、组织病理改变及皮损处核因子-κB（NF-κB）、CD1a因子表达及血清肿瘤坏死因子（TNF-α）水平的影响。结果白芍总苷能显著抑制ACD小鼠的耳肿胀度,可降低诱发后的小鼠血清TNF-α水平,下调NF-κB、CD1a的表达。结论白芍总苷对小鼠ACD有治疗作用,这与其下调炎性细胞因子水平有关,也可能与下调NF-κB、CD1a的表达有关。     

太子参胶囊增强免疫作用实验研究

目的:研究太子参胶囊对小鼠的免疫调节作用;方法:将小鼠分为低,中,高剂量组,模型组,空白组等,剂量组分别灌胃0.25g/kg.d-1,0.5g/kg.d-1,1g/kg.d-1的太子参胶囊粉配置液,灌胃给药30d后,用氢化可的松造成免疫功能低下动物模型和DNFB溶液致敏,取耳片观察左右耳重量之差(耳肿胀度)迟发型变态反应实验的程度,取肝脏,胸腺和脾脏统计胸腺/体重比值,脾脏/体重比值,测吞噬指数观察小鼠碳廓清的能力;摘眼球采血计数外周血白细胞总数和淋巴细胞数。结果:太子参胶囊粉中,高剂量组耳肿胀度明显低于模型组,降低迟发型变态反应;增强小鼠单核—巨噬细胞免疫功能;提高胸腺指数。结论:证实太子参胶囊粉对免疫功能低下小鼠具有增强免疫力作用。     

扬子鳄肌肉组织蛋白水解液的药效学研究

目的：观察扬子鳄肌肉组织蛋白水解液的抗应激作用及对细胞免疫功能的影响。方法：观察执应激作用采用缺氧和疲劳等方法,观察对细胞免疫功能的影响采用环磷酰胺诱导免疫功能低下小鼠迟发型超敏反应法。结果：扬子鳄肌肉组织蛋白水解液可延长小鼠负重游泳时间以及延长亚硝酸钠和氰化钾中毒性缺氧小鼠的存活时间,同时可使小鼠降低的耳片肿胀度和胸腺指数升高。结论：扬子鳄肌肉组织蛋白水解液有明显的抗应激作用,同时对小鼠实验性细胞免疫功能低下有一定的改善作用。     

脊髓背角细胞外信号调节激酶磷酸化参与调控2,4-二硝基氟苯诱导的小鼠慢性痒

目的：探讨脊髓背角细胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulated kinase,ERK）磷酸化对2,4-二硝基氟苯（2,4-dinitrofluorobenzene,DNFB）诱导的小鼠慢性痒的调控作用。方法：8～12周ICR雄性小鼠随机分为DNFB诱导组和丙酮对照组。DNFB组小鼠分别于面颊部和背部反复涂抹1.5% DNFB溶液,建立类似特异性皮炎的慢性痒模型。分别观察慢性痒模型建立后小鼠的自发性行为,以及鞘内注射MEK抑制剂U0126后小鼠自发性慢性痒行为的变化。免疫组织化学染色法分析小鼠脊髓组织磷酸化ERK（phosphrylated ERK,pERK）的表达情况。结果：面颊部诱导模型中,DNFB组小鼠的搔抓次数明显高于丙酮对照组（P<0.05）,而擦涂行为无差异,证实DNFB诱发的是痒觉;颈背部诱导模型中,DNFB组小鼠表现出剧烈的搔抓行为,而丙酮对照组的搔抓行为不明显。背部慢性痒模型建立后,分别在第1、3、7和14天鞘内注射MEK抑制剂U0126,小鼠的搔抓行为受到明显抑制（P<0.05）,且脊髓背角pERK的表达水平也明显降低（P<0.05）。pERK活化主要表达于小鼠脊髓背角Ⅰ～Ⅱ层,且与神经元标志物NeuN共标,与星形胶质细胞标志物GFAP和小胶质细胞标志物Iba1不共标。结论：脊髓背角浅层神经元ERK磷酸化可能参与调控DNFB诱导的慢性痒。     

百癣夏塔热胶囊对小鼠接触性皮炎的作用及机制研究

目的研究百癣夏塔热胶囊对小鼠变应性接触性皮炎的治疗作用及可能机制。方法以2,4-二硝基氟苯(DNFB)对小鼠进行皮肤致敏及激发,建立小鼠变应性接触性皮炎模型,观察百癣夏塔热胶囊对小鼠耳肿胀度、组织病理改变及皮损处核因子-κB(NF-κB)及血清肿瘤坏死因子(TNF-α)水平的影响。结果百癣夏塔热胶囊能显著抑制ACD小鼠的耳肿胀度,可降低诱发后小鼠血清TNF-α水平,下调皮肤组织中NF-κB的表达。结论百癣夏塔热胶囊通过下调炎性细胞因子水平和NF-κB的表达,对小鼠ACD有治疗作用。     

维生素A对动物器官影响的实验研究

通过对实验兔口服维生素Ａ８００Ｕ／日共服７天，并与正常健康兔作对照，二组处死后分别测胸腺、脾脏重量及其指数，并对胸腺脾脏及肝脏进行组织学检查，结果：实验组肝脾１胸腺比对照组重量增加，脾脏重量和脾脏指数比对照组有明显差异性Ｐ〈０．０５。组织学检查结果，脾脏淋巴组织区域比对照组明显增大，说明维生素Ａ对机体淋巴细胞有增殖，分化及成熟的作用，促进周围免疫器官的免疫功能。胸腺仅有重量的增加，没有差异性，光镜     

白芍总苷对接触性皮炎小鼠核因子-κB、CD1a因子、肿瘤坏死因子的影响

目的探讨白芍总苷对小鼠变应性接触性皮炎(ACD)的治疗作用。方法以2,4-二硝基氟苯(DNFB)对小鼠进行皮肤致敏及激发,制成小鼠接触性皮炎模型,观察白芍总苷对小鼠耳肿胀度、组织病理改变及皮损处核因子-κB(NF-κB)、CD1a因子表达及血清肿瘤坏死因子(TNF-α)水平的影响。结果白芍总苷能显著抑制ACD小鼠的耳肿胀度,可降低诱发后的小鼠血清TNF-α水平,下调NF-κB、CD1a的表达。结论白芍总苷对小鼠ACD有治疗作用,这与其下调炎性细胞因子水平有关,也可能与下调NF-κB、CD1a的表达有关。     

糖尿病小鼠免疫指数、胰腺线粒体自由基的变化及半枝莲黄酮的干预作用

目的观察糖尿病小鼠免疫指数、胰腺线粒体自由基的变化及半枝莲黄酮（SBF）对这些变化的干预作用。方法利用四氧嘧啶诱导糖尿病小鼠模型,观察SBF对糖尿病小鼠血糖、体质量、胸腺指数、脾脏指数以及胰腺线粒体超氧化物歧化酶（SOD）、还原型谷胱甘肽（GSH-Px）活力和丙二醛（MDA）含量的影响。结果与正常组相比,四氧嘧啶诱导糖尿病小鼠血糖明显升高,体质量、胸腺指数、脾脏指数明显降低,胰腺线粒体SOD、GSH—Px活力均显著降低,MDA含量明显升高。而SBF17．5、35、70mg／kg对四氧嘧啶诱导糖尿病小鼠上述异常变化均有不同程度的改善。结论SBF对糖尿病小鼠有显著的降血糖作用,作用机制可能与其提高免疫力和抗氧化作用密切相关。     

褪黑激素对严重烧伤大鼠迟发型超敏反应的影响

目的：观察褪黑激素对30％Ⅲ度烧伤大鼠迟发型超敏反应的影响，估计它在严重烧伤中的免疫调节作用。 方法：实验于2005-07／12在青岛大学医学院完成。24只SD大鼠数字表法随机分为对照组、烧伤组及褪黑激素组，每组8只。烧伤组及褪黑激素组麻醉状态下将动物背部皮肤置于沸水中15S制备烧伤模型，对照组大鼠背部皮肤置于37℃水中15S。对照组和烧伤组伤后立即腹腔注射溶剂（体积分数为0．01的乙醇生理盐水），而褪黑激素组注射剂量为10mg／kg的褪黑激素，烧伤当天下午4点补充注射一次药物或溶剂，此后按同法每天注射一次至伤后第7天。末次注射后立即将5异／L二硝基氟苯溶液100μL涂抹于大鼠腹部，次日同法强化一次，以诱导迟发型超敏反应。致敏后第5天，测定大鼠右耳肿胀百分率（对照组定义为100％）代表迟发型超敏反应强度。此外，还测定烧伤前后外周血白细胞计数，估计动物的一般免疫反应状态。 结果：24只大鼠全部进入结果分析。①右耳肿胀百分率：烧伤组大鼠显著低于对照组[（41．2&;#177;8．2）％，（100&;#177;7．6）％，P〈0．001]，褪黑激素组高于烧伤组[（73．0&;#177;10．1）％，P〈0．01]，但仍低于对照组水平（P〈0．05）。②外周血白细胞计数：烧伤组及褪黑激素组大鼠在烧伤后12h内均明显升高（P〈0．05），伤后72h和120h，两实验组白细胞再次出现升高（P〈0．05），褪黑激素组白细胞数值在这两个时间点均明显低于烧伤组水平俨〈0．05，0．01）。 结论：褪黑激素治疗能明显改善烧伤大鼠严重受抑的迟发型超敏反应，提示它在烧伤中可能具有免疫调节作用。     

大鼠→小鼠异种骨髓移植耐受诱导的研究

目的 探索适合临床应用的有效诱导异种骨髓移植耐受的方案。方法 给亚致死照射（５Ｇｙ） 的Ｃ５７ＢＬ／ ６ （Ｂ６） 小鼠尾静脉注射４ ×１０７ Ｌｅｗｉｓ 大鼠骨髓细胞,２ 天后腹腔注射环磷酰胺１５０ｍｇ／ｋｇ 。分别于骨髓移植后３０ 天、６０ 天、９０ 天,对受体小鼠外周血、脾脏及胸腺中的淋巴细胞进行间接免疫荧光染色, 作ＦＡＣＳ 分析, 检测大鼠源性的骨髓细胞在小鼠体内植活情况,并于３０ 天后,对受体小鼠作混合淋巴细胞反应（ ＭＬＲ） 及迟发超敏反应（ＤＴＨ） 检查。结果 经处理的Ｂ６ 小鼠外周血、脾脏及胸腺中检测出了大鼠源性的骨髓嵌合体, 嵌合体可长期存在（ ＞ ３ 个月） 。ＭＬＲ 及ＤＴＨ 检查证明Ｂ６ 小鼠对Ｌｅｗｉｓ 大鼠的脾细胞产生特异性耐受, 对无关第３ 者ＤＡ 大鼠及ＢＡＬＢ／ ｃ 小鼠的脾细胞仍表现出强烈的免疫应答。结论 在Ｂ６ 小鼠体内成功地诱导出了供者特异性的大鼠→小鼠异种骨髓移植耐受。     

特应性皮炎小鼠模型建立方法的研究

目的通过外用2,4-二硝基氟苯（DNFB）丙酮／橄榄油溶液致敏与激发BALB／c小鼠,探索特应性皮炎（atopic dermatitis,AD）模型的建立方法。方法将16只小鼠随机分为模型组及对照组各8只。实验第1天和第2天在模型组和对照组小鼠背部脱毛区分别涂搽一次DNFB丙酮／橄榄油溶液及丙酮／橄榄油,第7天开始每隔2天涂搽一次,共涂搽10次。观察小鼠皮肤的生理和病理改变。结果外用DNFB致敏与激发小鼠完成后,小鼠搔抓频率增加,小鼠皮肤可见慢性皮损改变,镜下可见慢性炎细胞浸润,ELISA血清检查发现Ign、IL-4及IFN-γ在血清中高表达。结论外用DNFB致敏与激发BALB／c小鼠产生的皮肤生理和病理改变与AD患者一致,可作为研究AD的发病机理及探索其治疗手段的有效的动物模型。     

银杏外种皮多糖对小鼠T淋巴细胞的作用

银杏外种皮多糖（GBEP）体外加药可促进ConA诱导的正常小鼠及荷瘤小鼠脾脏T淋巴细胞增殖；对抗HC对小鼠脾脏T淋巴细胞增殖的抑制。整体给药时．GBEP可提高小鼠脾脏总T淋巴细胞百分率，并能对抗cy抑制的DNCB所致小鼠DCH反应。     

微囊化儿茶素对环磷酰胺致免疫低下小鼠的免疫调节作用

背景:儿茶素具有强抗氧化活性已成共识,但其对免疫调节作用报道甚少;同时,儿茶素存在不稳定性及脂溶性差等缺陷,微胶囊技术是解决这一问题的一种有效途径.目的:观察微囊化儿茶素与儿茶素对环磷酰胺致免疫低下小鼠特异性细胞免疫、特异性体液免疫、非特异性体液免疫及胸腺与脾脏脏器系数的影响.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-1 1/12在中南大学湘雅二医院医学实验动物中心完成.材料:安化小叶种儿茶素由湖南会农生物资源股份有限公司提供;儿茶素的微囊化由中南大学湘雅二医院小儿肾脏病研究室完成.环磷酰胺由上海华联制药有限公司生产.方法:600只昆明种小鼠随机分生理盐水组,儿茶素500,250,125 mg/kg组,乙基纤维素500,250,125 mg/kg组;微胶囊化儿茶素500,250,125 mg/kg组,环磷酰胺组,环磷酰胺+微胶囊化儿茶素500,250,125 mg/kg组,环磷酰胺+儿茶素500,250,125 mg/kg组:环磷酰胺+乙基纤维素500,250,125 mg/kg组共20组.生理盐水、儿茶素、乙基纤维素、微胶囊化儿茶素均灌胃给药,连续给药14 d;环磷酰胺自第11天起腹腔注射给药80 mg/kg,连续4 d.主要观察指标:利用小鼠迟发型超敏反应测定特异性细胞免疫功能,血清溶血素实验测定特异性体液免疫功能,小鼠碳粒廓清指数测定非特异性体液免疫功能以及脾指数与胸腺指数衡量机体免疫功能.结果:与生理盐水组比较,微胶囊化儿茶素与儿茶素500,250 mg/kg组的耳肿胀度明显增加:微胶囊化儿茶素500,250,125 mg/kg组半数溶血值、碳粒廓清指数和吞噬指数、脾指数、胸腺指数均明显增高(P＜0.01,P＜0.05);儿茶素500 mg/kg组小鼠的半数溶血值有一定的提高,儿茶素500,250,125 mg/kg组小鼠的碳粒廓清指数和吞噬指数、脾指数、胸腺指数均明显提高(P＜0.05,P＜0.01).与环磷酰胺模型组小鼠比较,环磷酰胺+儿茶素500,250 mg/kg组及环磷酰胺+微胶囊化儿茶素500,250 mg/kg组小鼠耳片肿胀度、半数溶血值、碳粒廓清指数、吞噬指数、脾指数、胸腺指数均显著增加(P＜0.05,P＜0.01).各微胶囊化儿茶素组耳片肿胀度、半数溶血值、小鼠脾指数、胸腺指数、碳粒廓清指数和吞噬指数均高于其对应的儿茶素组.结论:儿茶素可显著提高正常小鼠及环磷酰胺致免疫低下型小鼠的特异性细胞免疫、特异性体液免疫、非特异性体液免疫、胸腺与脾脏的脏器系数,微囊化儿茶素效应强丁游离儿茶素.     

睾丸扭转后激发细胞介导的自身免疫反应

目的 :观察大鼠睾丸扭转后能否激发迟发型超敏反应 (Delayedtypehypersensitivity ,DTH) ,以此来探讨睾丸扭转后机体的自身免疫反应。方法 :通过建立大鼠睾丸扭转模型 ,观察足垫反应来评估睾丸扭转后DTH。结果 :大鼠睾丸扭转后能诱导出足垫反应 ,但是 ,环孢素A和切除扭转的睾丸能够明显抑制大鼠睾丸扭转后的足垫反应。结论 :睾丸扭转后睾丸抗原的持续存在能诱导DTH ,激发了针对睾丸抗原的细胞介导的自身免疫反应。