氢生理盐水对梗阻性黄疸大鼠肝功能的保护作用

目的研究氢生理盐水对梗阻性黄疸大鼠肝功能的保护作用并探讨其可能机制。方法将雄性SD大鼠随机分为3组(n=14),除假手术组外,均采用双重结扎胆总管造成阻黄模型,不同组大鼠分别给予等量生理盐水和氢生理盐水(5ml/kg,i.p.),10天后检测血清肝功能、内毒素及HMGB1水平,肝组织MDA、HMGB1、TNF-α、IL-1β、IL-6含量及MPO活性,并用光镜观察肝细胞变性、死亡和炎细胞浸润情况。结果胆总管结扎后,对照组大鼠肝功能水平明显降低,血清内毒素、HMGB1及肝组织MDA、HMGB1、TNF-α、IL-1β、IL-6含量及MPO活性明显升高,光镜下肝细胞大量变性坏死伴炎性细胞浸润。氢生理盐水治疗组大鼠肝功能显著好转,各指标明显低于对照组(P0.01)。结论氢生理盐水能显著减轻梗阻性黄疸大鼠肝损伤,并能有效抑制氧化应激及炎性反应。     

氢生理盐水对对乙酰氨基酚致小鼠急性肝损伤的保护作用

目的观察氢生理盐水对对乙酰氨基酚致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法乙酰氨基酚500mg/kg腹腔内注射诱发小鼠急性肝损伤后,通过测定血浆谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)水平,肝匀浆丙二酫(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量,观察肝脏病理学改变,评价氢生理盐水对对乙酰氨基酚致小鼠急性肝损伤的保护作用。结果氢生理盐水能降低对乙酰氨基酚致小鼠急性肝损伤的血浆ALT、AST水平,显著抑制炎症因子TNF-α、IL-6的生成和脂质过氧化反应产物MDA的含量,并增加GSH储备,有效减轻肝细胞坏死的严重程度。结论氢生理盐水对对乙酰氨基酚致小鼠急性肝损伤具有明显的的保护作用。     

极化液对内毒素血症大鼠肝损伤的影响

目的研究葡萄糖-胰岛素-钾(极化液,GIK)对内毒素血症大鼠肝损伤的影响。方法雄性SD大鼠60只,体重200~250g,随机分为三组:对照组,脂多糖组(LPS组,LPS 8mg/kg),GIK组(LPS 8mg/kg+GIK 4ml·kg~(-1)·h~(-1))。采用全自动生化仪检测腹腔注射LPS后3d和5d大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)及天门冬氨酸氨基转移酶(AST)含量,ELISA法检测三组大鼠肝组织匀浆TNF-α含量,并行HE染色观察肝组织病理变化,TUNEL免疫荧光检测肝实质细胞凋亡情况。结果与注射后3d比较,注射后5dLPS组大鼠血清ALT、AST、肝组织匀浆TNF-α含量明显升高,而GIK组大鼠血清ALT、AST、肝组织匀浆TNF-α含量明显下降(P0.05)。与对照组比较,注射后3dLPS组和GIK组大鼠血清ALT、AST、注射后5dLPS组大鼠血清ALT、AST明显升高(P0.05),注射后3、5dLPS组和GIK组大鼠肝组织匀浆TNF-α含量、肝损伤等级评分、肝细胞凋亡指数明显升高(P0.05)。与LPS组比较,注射后3dGIK组大鼠肝组织匀浆TNF-α含量、肝细胞凋亡指数明显降低(P0.05),注射后5dGIK组大鼠血清ALT、AST、肝组织匀浆TNF-α含量、肝损伤等级评分、肝细胞凋亡指数明显降低(P0.05)。结论腹腔注射LPS可引起大鼠肝损伤,导致肝功能改变及肝细胞破坏;GIK可减轻LPS诱导的大鼠肝损伤。     

白细胞介素-10对内毒素血症大鼠肝损伤的影响

目的 评价白细胞介素-10(IL-10)对内毒素血症大鼠肝损伤的影响.方法 清洁级雄性Wistar大鼠100只,10 ～ 14周龄,体重250 ～ 300 g,采用随机数字表法,将其随机分为5组(n=20)∶对照组(C组)、内毒素血症组(LPS组)、1L-10组(IL-10组)、HO-1诱导剂钴原卟啉Ⅸ组(Co组)和HO-1抑制剂锌原卟啉Ⅸ组(Zn组).LPS组、IL-10组、Co组和Zn组腹腔注射脂多糖(LPS) 20 mg/kg,IL-10组、Co组和Zn组于给予LPS前3h腹腔注射重组人IL-10 1 μg,Co组和Zn组分别于给予重组人IL-10后2h腹腔注射钴原卟啉Ⅸ和锌原卟啉Ⅸ25 mg/kg.每组于注射LPS后24 h时取10只大鼠,采集心脏全血,测定血清谷草转氨酶(ALT)、谷丙转氨酶(AST)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)的水平;然后取肝组织,测定谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量和血红素氧合酶-1(HO-1)mRNA表达.每组取10只大鼠,记录给予LPS后72 h内大鼠生存情况.结果 与C组比较,LPS组、IL-10组、Co组和Zn组血清ALT、AST、TNF-α、IL-1β水平和肝组织MDA含量升高,肝组织GSH-Px、SOD活性和生存率降低(P＜0.05);与LPS组比较,IL-10组和Co组血清ALT、AST、TNF-α、IL-1β水平和肝组织MDA含量降低,肝组织GSH-Px、SOD活性、HO-1 mRNA表达和生存率升高(P＜0.05);与IL-10组比较,Zn组血清ALT、AST、TNF-α、IL-1β水平和肝组织MDA含量升高,肝组织GSH-Px、SOD活性和生存率降低(P＜0.05),Co组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 IL-10可减轻内毒素血症大鼠肝损伤,其机制与诱导HO-1表达有关.     

TNF-α McAb对急性失血性休克大鼠肝脏的作用

目的探讨肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)在急性失血性休克大鼠肝损伤中的作用及TNF-α单克隆抗体的保护作用。方法将24只雄性SD大鼠随机均分为三组:对照组(A组)、休克+乳酸林格氏液复苏组(B组)和休克+TNF-α单克隆抗体复苏组(C组)。B和C组大鼠通过股动脉放血,制作急性失血性休克动物模型;B组用乳酸林格氏液复苏,C组用含TNF-α单克隆抗体(3mg/kg)的乳酸林格氏液复苏,而A组在同等条件下不进行失血。分别检测各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、TNF-α水平和肝组织中MDA、SOD含量,并在光镜和电镜下观察各组大鼠肝组织的病理变化。结果 B、C组大鼠血清ALT、AST、TNF-α水平和肝组织中MDA含量较A组升高,SOD含量降低;C组ALT(343.63±35.61)U/L、AST(748.75±49.76)U/L、TNF-α(99.38±13.16)pg/mL、丙二醛(26.33±1.30)nmol/mgProt较B组ALT、AST、TNF-α、MDA含量降低,C组肝组织中SOD含量(510.14±47.44)U/mgProt较B组升高;在光镜、电镜下观察,C组肝组织损伤较B组减轻。结论 TNF-α可能是急性失血性休克肝损伤的重要因子之一,使用TNF-αMcAb复苏可以减轻失血性休克时大鼠肝损伤,具有一定的保护作用。     

丙泊酚对大鼠全肝缺血-再灌注后肺损伤的影响

目的 探讨丙泊酚对大鼠全肝缺血-再灌注(I-R)后肺损伤的影响及可能机制.方法 32只SD大鼠随机均分为四组,Ⅰ组:全肝缺血前10 min腹腔注射丙泊酚50 mg/kg,再灌注前10min腹腔注射生理盐水50 ml/kg; Ⅱ组:缺血前10 min注射生理盐水50 ml/kg,再灌注前10 min注射丙泊酚50 mg/kg;Ⅲ组:I-R前10 min均注射生理盐水50 ml/kg;Ⅳ组:假手术后在对应时点注射生理盐水50 ml/kg.I-R 1 h后取肺组织,测定肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性及W/D比值;在光镜下观察肺组织形态学及细胞凋亡情况.结果 与Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ组比较,Ⅲ组大鼠肺W/D比值、MDA含量、MPO活性与细胞凋亡指数均增高(P<0.05或P<0.01),SOD活性降低(P<0.01);光镜检查示Ⅲ组大鼠肺组织损伤严重,大量炎性细胞浸润.结论 丙泊酚对大鼠肝I-R后肺损伤具有保护作用,其机制可能与抗氧化、抗炎及抗细胞凋亡有关.     

膦甲酸钠对卡介苗联合脂多糖诱导的大鼠肝损伤的干预作用

目的观察膦甲酸钠(PFA)对卡介苗联合脂多糖(LPS)诱导的大鼠肝损伤干预作用,并探讨其对大鼠体液免疫和细胞免疫的影响.方法予以大鼠腹腔内接种卡介苗(BCG)5&#215;107活菌/鼠,次日始分别予不同剂量PFA腹腔内注射.在接种BCG后第11天,予以大鼠腹腔内LPS,2h后球后采血,检测血清TNFα、IL-6及IL-10水平.8～10h后采血处死,检测血清ALT、AST水平及T细胞亚群,统一取肝右叶病理检查.结果BCG对大鼠致敏后第11天,予以小剂量LPS可以诱发大鼠急性肝损伤,血清ALT明显升高,大于正常对照10倍以上,AST也较正常对照升高2倍以上.肝组织病理显示肝细胞坏死广泛伴出血,病变占小叶1/3以上,伴有片状炎细胞浸润.在接种BCG后10d期间,腹腔内给予PFA(600mg&#183;kg-1&#183;d-1),可明显降低大鼠血清ALT及AST水平,大鼠血清TNFα水平也有明显下降,而IL-6则有升高,CD3+、CD4+细胞百分比明显高于模型组,CD8+百分比明显低于模型对照组.在肝组织病理上PAF(150～600mg,kg-1&#183;d-1)可减轻肝脏炎性损害.结论PFA对卡介苗联合LPS诱发的大鼠急性免疫性肝损伤有防护作用;在较大剂量下,PFA对大鼠细胞免疫及炎性细胞因子水平有一定影响.     

氢生理盐水对对乙酰氨基酚致小鼠急性肝损伤的保护作用

目的 观察氢生理盐水对对乙酰氨基酚致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法 30只雄性BALB/C 小鼠随机分成3组：对照组、模型组和治疗组,每组10只。治疗组和模型组同时给予对乙酰氨基酚500 mg/kg 腹腔内注射诱发小鼠急性肝损伤,1 h后治疗组每3 h腹腔注射氢生理盐水6 mL/kg,模型组给予相同剂量的生理盐水;对照组各时间点均腹腔注射相同剂量的生理盐水。所有动物在给予对乙酰氨基酚后24 h处死,测定血浆谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）水平,以及肝组织匀浆丙二醛（MDA）和还原型谷胱甘肽（GSH）含量,TUNEL法检测肝细胞凋亡指数,观察肝组织病理学改变和肝细胞坏死程度。结果 氢生理盐水能显著降低对乙酰氨基酚致小鼠急性肝损伤的血浆ALT [（816.3±300.2）U/L vs （3 933.0±1 112.0）U/L,P＜0.01]、AST[（403.8±83.6）U/L vs （2851.0±992.9）U/L,P＜0.01]水平,显著抑制炎症因子TNF-α[（3.54±0.42）pg/mL vs（6.58±0.72）pg/mL,P＜0.01]、IL-6[（350.20±66.67）pg/mL vs （553.10±67.73）pg/mL,P＜0.05]的生成和MDA[（5.89±0.81）nmol/mL vs  （8.26±0.60）nmol/mL,P＜0.05]的含量,并增加GSH[（362.8±37.9）μg/mL vs （230.8±53.1）μg/mL,P＜0.05]储备,明显降低肝细胞凋亡指数[（5.67%±2.28%） vs （1.93%±0.82%）,P＜0.01],显著改善肝组织病理学变化和降低肝细胞坏死的严重程度[（2.9±0.74） vs （1.7±0.82）,P＜0.01]。结论 氢生理盐水对对乙酰氨基酚致小鼠急性肝损伤具有明显的保护作用。     

脂联素预先给药对内毒素血症大鼠肝损伤的影响

目的 评价脂联素预先给药对内毒素血症大鼠肝损伤的影响.方法 雄性Wistar大鼠80只,10～ 14周龄,体重250 ～ 300 g,采用随机数字表法,将其分为4组(n=20):对照组(C组)、内毒素血症组(LPS组)、脂联素预先给药组(APN组)和白细胞介素-10(IL-10)中和抗体干预组(IL-10抗体组).LPS组、APN组和IL-10抗体组腹腔注射脂多糖(LPS)20 mg/kg,APN组和IL-10抗体组于给予LPS前12 h腹腔注射基因重组脂联素6 mg/kg,IL-10抗体组于给予基因重组脂联素前30 min腹腔注射IL-10中和抗体3 mg.每组于注射LPS后2h时取10只大鼠,采集心脏全血,检测血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-10(IL-10)水平;每组于注射LPS后2h另取10只大鼠,取肝组织,检测丙二醛(MDA)含量、髓过氧化物酶(MPO)活性、IL-10 mRNA以及血红素氧化酶-1(HO-1) mRNA表达.结果 与C组比较,LPS组、APN组和IL-10抗体组血清AST、ALT及TNF-α、IL-1β、IL-10水平、肝组织MDA含量和MPO活性升高,肝组织HO-1 mRNA表达上调,LPS组和APN组IL-10 mRNA表达上调(P＜0.05);与LPS组比较,APN组和IL-10抗体组血清AST、ALT及TNF-α 、IL-1β水平、肝组织MDA含量和MPO活性降低,肝组织HO-l mRNA表达上调,APN组肝组织IL-10 mRNA表达上调(P＜0.05);与APN组比较,IL-10抗体组血清AST、ALT及TNF-α、IL-1β水平、肝组织MDA含量和MPO活性升高,血清IL-10浓度降低,肝组织HO-1 mRNA表达下调(P＜0.05).结论 脂联素预先给药可减轻内毒素血症大鼠肝损伤,其机制与诱导IL-10生成有关.     

虎杖苷对脓毒症急性肾损伤大鼠炎症反应和氧化应激的影响

目的观察虎杖苷在脓毒症急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)大鼠中的抗炎和抗氧化应激作用。方法 SD大鼠72只,体重180~220g,随机分为四组:假手术对照组(Sham组);盲肠结扎穿刺术(CLP)+生理盐水组(CN组);CLP+溶媒组(CV组);CLP+虎杖苷组(CD组),每组18只。对CN、CV和CD组大鼠施行CLP,模拟脓毒症AKI动物模型,Sham组大鼠盲肠既不被结扎也不被穿孔,余步骤则与CLP组相同,未行其他任何处理。CLP术后6、12、18h,CN、CV和CD组经大鼠尾静脉分别注射生理盐水、溶媒、虎杖苷30 mg/kg。在CLP术后24h记录血清肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)等肾功能指标,观察肾脏组织病理形态改变并进行肾小管损伤评分,检测血清TNF-α、IL-1β和IL-6浓度,测定肾组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)浓度。结果与Sham组比较,CN组和CV组血清Cr、BUN、TNF-α、IL-1β和IL-6浓度、肾小管损伤评分和肾组织MDA浓度明显升高(P0.01),肾组织SOD活性、GSH浓度明显降低(P0.01)。与CN组和CV组比较,CD组血清Cr、BUN、IL-1β和IL-6浓度、肾小管损伤评分和肾组织MDA浓度明显降低(P0.05),肾组织SOD活性、GSH浓度明显升高(P0.05)。结论盲肠结扎穿刺术导致的脓毒症可引起急性肾损伤,虎杖苷可通过显著的抗炎和抗氧化应激作用,减轻肾组织损伤,改善肾功能。     

诱导性一氧化氮合酶在大鼠肝缺血再灌注损伤中的作用

目的 探讨诱导性一氧化氮合酶（iNOS）在大鼠部分肝缺血再灌注损伤中的作用.方法 选取雄性Sprague-Dawley大鼠30只,体重225～250 g,随机分成氨基胍（AG）组、脂多糖（LPS）组、对照组.每组均按相同方法建立70%的肝缺血再灌注损伤模型（缺血1 h,再灌注6 h）,取再灌注大鼠肝组织及血清样本.氨基胍（AG）组（n=10）：术前30 min尾静脉注射AG 100 mg/kg（质量浓度10 kg/L）;脂多糖（LPS）组（n=10）：术前30 min尾静脉注射LPS 10 mg/kg（质量浓度1 kg/L）;对照组（n=10）：术前30 min尾静脉注射生理盐水（10 μL/kg）.检测血清谷氨酸转氨酶（ALT）水平,实时荧光定量PCR测定肝组织iNOS mRNA的表达,Western blot测定肝组织iNOS蛋白的表达,考马斯法测定肝组织匀浆丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性,HE染色光镜下组织学观察等.结果 AG组与对照组相比,肝组织中iNOS mRNA表达量明显下降（P〈0.05）,iNOS蛋白表达量明显下降（P〈0.05）;ALT和MDA明显下降（P〈0.05）;SOD明显升高（P〈0.05）;肝细胞水肿较轻,排列相对整齐.LPS组与对照组相比,肝组织中iNOS mRNA表达量明显升高（P〈0.05）,iNOS蛋白表达量明显升高（P〈0.01）;ALT和MDA明显升高（P〈0.05）;SOD则明显降低（P〈0.05）;肝细胞水肿,排列紊乱,并且出现水样变性.结论 iNOS 升高会加重缺血再灌注损伤,这一过程可能通过改变氧化还原状态实现.     

姜黄素对内毒素所致肾脏炎症的抑制作用

目的：肾脏的急慢性炎症与肾脏疾病的进展密切相关,本研究拟探讨姜黄素对内毒素（LPS）所致肾脏炎症的抑制作用。方法：SPF级昆明种小鼠40只,鼠龄6～8周,体重20～25g。小鼠分为3组：（1）正常对照组：腹腔注射生理盐水;（2）模型组（LPS组）：腹腔注射LPS（1mg/kg和5mg/kg）;（3）治疗组（LPS＋姜黄素）：动物先腹腔注射姜黄素（1mg/kg或5mg/kg）3d,然后腹腔注射LPS1mg/kg或5mg/kg。于处理后6h取材,切取部分肾组织用10%甲醛固定,HE染色,进行病理学观察。部分肾组织用于MCP-1mRNA检测。将肾小管上皮细胞（HK-2细胞）培养于KSF培养液中,设正常对照组给予正常培养液,LPS刺激组（1ng/ml,100ng/ml和10μg/ml）,LPS刺激＋姜黄素（5μmol/L和50μmol/L）处理组,分别培养4h和24h后收集细胞,应用Real-timePCR检测各组细胞MCP-1的表达。ELISA检测细胞培养上清液中MCP-1的表达。EMSA检测肾小管上皮细胞NF-κB的活性。结果：腹腔注射LPS（1mg/kg和5mg/kg）虽未引起光镜下肾脏组织的病理改变,但可显著增加小鼠肾脏MCP-1 mRNA的表达,分别增加20倍和26倍,而姜黄素处理可降低LPS所诱导的肾脏MCP-1 mRNA的表达,尤以LPS（1mg/kg）＋姜黄素（1mg/kg）为明显（下降至基础值的2.5倍）。应用不同浓度的LPS刺激HK-2细胞4h,HK-2细胞MCP-1 mRNA表达量显著增加,且呈剂量依赖的效应（分别增加1.60、2.15和14.7倍）。而以100ng/ml的LPS刺激HK-2细胞4h,观察姜黄素的干预作用,可见不同浓度的姜黄素（5μmol/L和50μmol/L）可显著抑制LPS所诱导的HK-2细胞MCP-1 mRNA的表达,且以50μmol/L姜黄素干预组为明显。同时ELSA检测细胞上清液中MCP-1的表达结果相似。EMSA结果显示NF-κB的DNA结合活性随LPS的浓度增加而增加,而应用姜黄素预处理后,由LPS所诱导的增高的NF-κB的DNA结合活性随之下降。结论：早期给予姜黄素治疗,能明显改善LPS诱导的小鼠肾脏趋化因子MCP-1的表达,从而发挥其肾脏损伤的保护功能;而体外研究表明姜黄素可抑制LPS所诱导的肾小管上皮细胞MCP-1表达,其作用可能与抑制细胞NF-κB的活性有关。     

降钙素基因相关肽对急性肝损伤小鼠肝脏微循环的干预

目的：研究降钙素基因相关肽（CGRP）对刀豆蛋白A（ConA）诱导的小鼠肝损伤模型肝脏微循环的影响。方法：昆明种小鼠60只,随机分为ConA损伤组、CGRP干预组和空白对照组（n=20）,空白对照组注射生理盐水,ConA损伤组用ConA诱导建立小鼠急性肝损伤模型,CGRP干预组在用ConA诱导建模前体外注射CGRP,各组中10只于处理后用激光多普勒血流仪测肝脏的平均血流灌注量,另10只活体观察肝脏微循环流速,最后处死,全部HE染色观察肝脏病理变化。结果：CGRP干预组肝脏的平均血流灌注量和血液流速较ConA损伤组明显增加（P〈0.01）,病理学改变明显减轻。2组的血细胞浓度差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：CGRP能够通过改变肝脏组织的灌注影响急性肝损伤时肝脏微循环障碍的程度和病理改变。     

Influence of hydroxyethyl starch on lipopolysaccharide-induced tissue nuclear factor kappa B activation and systemic TNF-alpha expression

BACKGROUND: Several studies have shown beneficial effects of hydroxyethyl starch (HES) on organ damage in the treatment of severe inflammatory situations, but the mechanisms remain unclear. Nuclear factor-kappa B (NF-kappaB) activation is known to contribute to many aspects of inflammatory injury and organ dysfunction in critical illness, and tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha) is considered the most important pro-inflammatory cytokine. The present study was undertaken to test whether HES (200/0.5) has some effects on tissue NF-kappaB activity and systemic TNF-alpha expression induced by lipopolysaccharide in order to define a possible mechanism of the beneficial effects of HES. METHODS: Male Wistar rats were randomly divided into seven groups treated with saline, lipopolysaccharide (LPS, 6 mg/kg), LPS plus HES (3.75, 7.5, 15, 30 ml/kg), or HES (30 ml/kg) alone. Two hours after LPS challenge, NF-kappaB activation in the lungs, hearts, livers, and kidneys were examined with an electrophoretic mobility shift assay. Four hours after LPS challenge, plasma TNF-alpha concentrations were measured using an enzyme-linked immunosorbance assay. RESULTS: 3.75 and 7.5 ml/kg HES suppressed LPS-induced NF-kappaB activation in the four tissues and decreased plasma TNF-alpha elevation. The effects of 15 ml/kg HES was only significant in inhibiting NF-kappaB activity in the lung and liver. No effect of 30 ml/kg HES was revealed in all the cases. CONCLUSION: Lower doses of HES may inhibit tissue NF-kappaB activation and systemic TNF-alpha elevation after LPS challenge, which might be helpful during sepsis.     

促红细胞生成素对脂多糖所致大鼠肾脏损伤的保护作用

目的利用脂多糖（LPS）建立大鼠内毒素血症导致肾脏损伤模型,探讨促红细胞生成素（EPO）对肾脏损伤的保护作用及可能机制,为防治内毒素引起的肾脏损伤提供依据。方法将40只成年Wistar大鼠随机分成空白对照组、EPO对照组、LPS组和LPS＋EPO组。LPS组和LPS＋EPO组大鼠尾静脉注射LPS（10 mg/kg）建立肾脏损伤模型,对照组给予同等量生理盐水,30 min后,EPO对照组和LPS＋EPO组给予rh EPO（5 000 U/kg）经尾静脉注射。其余两组大鼠给予生理盐水。在LPS注射后的6 h和24 h每组分别处死5只大鼠,生化分析仪测定大鼠血清尿素氮（BUN）和肌酐（Cr）水平,放射免疫方法测定大鼠血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平。注射后24 h处死大鼠制备肾组织切片,HE染色后光镜下观察大鼠肾脏病理结构改变,透射电子显微镜观察大鼠肾脏超微结构改变。应用免疫印记方法检测大鼠肾脏丙氨酸氨基转移酶（AKT）、磷酸化丙氨酸氨基转移酶（p-AKT）以及核因子-κB（NF-κB）表达水平。结果与对照组比较,LPS组和LPS＋EPO组大鼠血清BUN、Cr和TNF-α水平升高（P均〈0.05）;LPS组以上3个指标升高程度显著高于LPS＋EPO组（P均〈0.05）。与对照组比较,LPS组p-AKT和p-AKT/AKT表达增强（p-AKTP=0.000、p-AKT/AKTP=0.000）、NF-κB表达增强（P=0.012）;与LPS组比较,LPS＋EPO组p-AKT和p-AKT/AKT表达下降（p-AKTP=0.002、p-AKT/AKTP=0.005）,NF-κB表达下降（P=0.066）。光镜下LPS组肾小管上皮细胞坏死、间质水肿和淋巴细胞浸润;LPS＋EPO组亦可见间质水肿和淋巴细胞浸润,但较LPS组减轻。电镜下LPS组肾小管上皮细胞空泡化,线粒体固缩和内皮细胞增生;LPS＋EPO组肾小球滤过膜增厚,远曲小管上皮细胞内线粒体轻度肿胀和溶酶体增多,损伤较LPS组减轻。结论 EPO可通过减轻炎症反应、减轻组织损伤有效的保护LPS导致的肾损伤,其机制可能与磷脂酰肌醇3-激酶?     

Ketamine attenuates liver injury attributed to endotoxemia: role of cyclooxygenase-2

BACKGROUND: Endotoxic shock can cause end-organ dysfunction and liver injury. Critically ill patients frequently require surgical intervention under general anesthesia for source control. However, the effects of anesthetics on organ function during sepsis and their influence on inflammatory mediators such as cyclooxygenase-2 (COX-2) and inducible nitric oxide synthase (iNOS) remain to be fully elucidated. Because ketamine anesthesia has anti-inflammatory effects in some tissues, we hypothesized that it would attenuate lipopolysaccharide (LPS)-induced liver injury. METHODS: Adult rats were given no anesthesia (saline), continuous isoflurane inhalation, or intraperitoneal (i.p.) injection of ketamine 70 mg/kg. One hour later, the rats received saline or LPS (20 mg/kg i.p.) for 5 hours. The rats were killed, and serum hepatocellular enzymes, liver COX-2, iNOS protein (Western immunoblot), and nuclear factor kappa B (NF-kappaB)-binding activity (electrophoretic mobility shift assay) determined. In a separate study, the role of COX-2 in LPS-induced liver injury was examined by pretreating rats with the selective COX-2 inhibitor NS-398 (3 mg/kg, i.p.) and the role of iNOS examined with the use of the selective inhibitor aminoguanidine (45 mg/kg, i.p.) 1 hour before LPS. RESULTS: LPS increased serum aspartate aminotransferase and alanine aminotransferase levels, hepatic iNOS and COX-2 protein, and nuclear factor NF-kappaB. Ketamine, but not isoflurane, attenuated these effects caused by LPS. COX-2 inhibition with NS-398 as well as iNOS inhibition with aminoguanidine diminished LPS-induced changes in aspartate aminotransferase and alanine aminotransferase levels. CONCLUSIONS: These data indicate that anesthetics differ in their effects on liver injury caused by LPS. Ketamine has hepatoprotective effects, while isoflurane does not. Moreover, the protective effects of ketamine are mediated, at least in part, through a reduction in COX-2 and iNOS protein that could be regulated via changes in NF-kappaB-binding activity.     

再灌注期间给予富氢液对大鼠全脑缺血再灌注损伤的影响

目的 评价再灌注期间给予富氢液对大鼠全脑缺血再灌注损伤的影响.方法 成年雄性SD大鼠72只,月龄2.0～2.5个月,体重260～300 g,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n＝24):假手术组(S组)、脑缺血再灌注组(I/R组)和富氢液组(H组).I/R组和H组采用四血管阻塞法(缺血15 min)制备全脑缺血再灌注损伤模型.H组于再灌注6h时腹腔注射0.6 mmol/L富氢液5ml/kg,I/R组给予等容量生理盐水.再灌注24h时,每组处死18只大鼠,取海马组织,测定丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)含量、NF-κB活性、活化的caspase-3表达;再灌注72 h时,处死6只大鼠,取脑组织,HE染色,光镜下观察海马CA1区病理学结果,进行海马CA1区正常锥体细胞计数.结果 与S组比较,I/R组海马组织MDA、TNF-α、IL-6含量和NF-κB活性升高,活化caspase-3表达上调,正常锥体细胞计数减少(P<0.05);与I/R组比较,H组海马组织MDA、TNF-α、IL-6含量和NF-κB活性降低,活化caspase-3表达下调,正常锥体细胞计数增多(P<0.05).H组脑组织海马CA1区病理学损伤程度轻于I/R组.结论 再灌注期间给予富氢液可减轻大鼠全脑缺血再灌注损伤,其机制与抑制脂质过氧化反应、炎性反应和细胞凋亡有关.     

雾化吸入氯胺酮对机械通气致肺损伤家兔TNF—α、IL-6、IL-10的影响

目的探讨氯胺酮雾化吸入对呼吸机所致肺损伤（ventilator—induced lung injury,VILI）家兔模型的影响。方法48只家兔,随机均分为对照组（C组）、机械通气损伤模型组（V组）、生理盐水对照组（NS组）和不同浓度氯胺酮处理组（分别为K1组、K2组和K3组）。除C组外,其他组均给予大潮气量通气（VT=40mL／kg）4小时,K1、K2、K3、NS组在给予大潮气量通气同时间断雾化吸人容量为4ml／kg／h、浓度为12．5mg／ml、25mg／ml、50mg／ml的氯胺酮持续10min／h或等量生理盐水。4小时后测定肺湿／干重比、肺泡灌洗液（BALF）中肿瘤坏死因子-Ⅱ（TNF—α）、白介素-6（IL-6）、白介素-10（IL-10）变化。结果与C组比较,V组和NS组肺W／D比值和BALF中IL-6、TNF—d含量明显升高（P〈0．05）。与V组比较,K3组肺W／D比值和BALF中TNF—α和IL-6含量减少的同时,IL—10含量增高,且改变有显著性差异。结论氯胺酮雾化吸入对机械通气所致兔肺损伤有保护作用,高浓度氯胺酮则保护作用更显著,该作用与氯胺酮雾化吸入减少炎性介质的释放有关。