乳腺癌浸润淋巴结αT细胞受体谱型偏移分析

目的应用多重PCR方法扩增TCRα链全长序列,分析乳腺癌浸润淋巴结αT细胞受体谱型偏移。方法选取乳腺癌转移淋巴结,提取RNA后逆转录,多重PCR扩增TCRα链全长序列,构建重组质粒并澳4序,利用网上TCR资源分析序列。结果2例患者各扩增出3个α链序列。乳腺癌TCRα限制性取用AV1、AV12亚家族。CDR3区序列分析增生T细胞克隆具有不同的氨基酸序列。结论乳腺癌浸润淋巴结扩增的TCR家族存在限制性取用,克隆性增生T细胞CDR3序列不同。     

优化多重PCR扩增效果的实验研究

聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）是一种体外扩增特异DNA片段的技术,具有特异性高、敏感性强、产率高、操作简单、重复性好、快速、易自动化等突出优点,在生命科学研究及相关诸多领域已经得到了广泛应用。     

急性淋巴细胞性白血病T细胞受体γ链基因重排的检测及临床意义

近 2 0年来 ,随着化疗及造血干细胞移植技术的不断提高 ,急性淋巴细胞性白血病在治疗上取得了很大的进展。目前 ,90 %以上的儿童及 75 %以上的成人 AL L患者通过化疗可以获得完全缓解 (CR) ,甚至痊愈 [1] 。然而 ,仍然有 3 0 %的儿童 AL L 及 5 0 %以上的成人 AL L 患者 ,最终复发 ,死于白血病。复发的主要根源 ,是体内的微小残留病 (MRD) [2 ]。MRD指白血病患者经过现代治疗 ,按目前已制定的疗效标准获得 CR后体内残存微量白血病细胞的状态。这些细胞从形态学上无法辩认 ,只能通过免疫学、分子生物学及细胞遗传学等方法 ,采用灵敏…     

普通多重PCR和多重实时荧光PCR在检测致泻性大肠埃希氏菌的效果评价分析

目的 评价普通多重PCR和多重实时荧光PCR方法在检测致泻性大肠埃希氏菌的检测效果.方法 对样本进行培养,提取核酸,用普通多重PCR扩增,用毛细管凝胶电泳法检测,同时用实时荧光多重PCR进行检测.结果 毛细管凝胶电泳结果显示出一号质控品5个菌落均检测出了uidA (1487bp)基因所对应的条带,另外还具有elt(65...     

T细胞受体工程化T细胞的临床应用及肿瘤特异性抗原和T细胞受体的筛选策略

利用靶向具有免疫原性的肿瘤抗原的T细胞受体工程化T细胞（T cell receptor-engineered T cells,TCR-T）进行过继性细胞免疫治疗,可有效清除肿瘤且无明显副作用,实现令人欣喜的治疗效果。但该治疗领域还处在起步阶段,如何筛选肿瘤特异性抗原及其对应的T细胞受体（T cell receptor,TCR）极具挑战性。综述TCR-T临床试验项目研究进展,总结神经网络计算机学习在辅助发现潜在抗原和候选TCR方面的发展情况,并介绍近年来基于多学科综合搭建的针对肿瘤特异性抗原及其对应TCR的不同筛选平台,以期为TCR-T应用范围的扩展提供新思路。     

T细胞受体基因工程T细胞治疗的现状与未来

免疫治疗为肿瘤的治疗带来了新的契机和希望,其中免疫检查点抑制剂、治疗性抗体、肿瘤疫苗、免疫调节剂、过继细胞治疗等显著改善了肿瘤患者的预后,部分晚期肿瘤患者获得了长期生存。T细胞受体基因工程T细胞（T cell receptor-engineered T cell,TCR-T）治疗是将识别肿瘤抗原的T细胞受体（T cell receptor,TCR）导入到患者的外周T细胞中,制备能够特异性识别肿瘤抗原的T细胞,然后将这些基因工程T细胞回输患者的治疗方法。该疗法采用天然的TCR信号,具有更高的治疗潜力和更低的毒性或副作用,并且TCR能够识别更多的肿瘤抗原,因此具有广泛的应用前景。目前,多项TCR-T治疗的临床研究正在开展,现有结果表明TCR-T具有较好的治疗效果,但也存在副作用等问题亟需解决。综述TCR-T治疗的临床研究进展、目前面临的挑战以及未来发展的方向。     

靶向T细胞发育药物研究进展

T细胞是适应性免疫系统的主要组成部分,其发育和成熟在胸腺内完成。T细胞受体多样性是T细胞识别和应答多种抗原的重要基础,但胸腺在衰老过程中发生萎缩导致胸腺功能受损,初始T细胞输出减少。综述目前临床上使用的促进胸腺T细胞发育的药物的研究进展,以期为免疫功能受损患者恢复适应性免疫提供参考。     

多重PCR与恒温扩增芯片法在呼吸道病原体中的检测价值

目的 评估多重荧光定量PCR法在呼吸道病原体(包括铜绿假单胞菌、肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、结核分枝杆菌、流感嗜血杆菌)检测中的价值.方法 以恒温芯片法为参照检测方法,通过检测呼吸道病原体标准菌株以及临床样本,比较多重荧光定量PCR法和恒温芯片法的检出率.结果 与恒温芯片法相比多重荧光定量PCR法具有很高...     

儿童急性淋巴细胞白血病免疫球蛋白重链和T细胞受体δ基因分析

目的　研究儿童急性淋巴细胞白血病 (ALL)中免疫球蛋白重链 (IgH)基因、T细胞受体δ(TCRδ)基因重排的发生率及其临床特征。方法　 88例儿童ALL采用套式聚合酶链反应 (PCR)技术检测IgH、TCRδ 重排 ,结合流式细胞仪 (FCM )检测免疫表型和细胞形态学FAB分型。结果　IgH基因重排 2 8例 ,阳性率 31 81% ;TCRδ 基因重排 31例 ,阳性率 35 2 3%。两者均表达者 10例 ,阳性率 11 36 %。在 73例B系ALL中IgH基因重排 2 8例 ,阳性率 38 36 % ,TCRδ 表达 2 5例 ,阳性率 34 2 5 % ,两者均表达者 10例 ,阳性率 5 6 8%。在 15例T系ALL中未检出IgH基因重排 ,仅 5例为单纯表达TCRδ 基因重排 ,阳性率 33 33%。在B系ALL中IgH表达高水平与T系ALL中IgH未表达相比 ,( χ2 =13 74 ,P <0 0 0 5 ) ,有显著性差异。 88例儿童ALL中的 85例获完全缓解 (CR) ,缓解率 96 6 % ,对其中 5例患儿IgH基因重排PCR动态观察 ,结果分别在完全缓解 (CR) 15个月、18个月、2 0个月、2 4个月时转阴。结论　 ( 1)TCRδ 基因重排在儿童ALL中为高表达 ,在B系与T系ALL中表达相比 ,( χ2 =1 0 7,P >0 0 5 ) ,无显著性差异。 ( 2 )IgH、TCRδ 基因重排是儿童急性淋巴细胞白血病的特异性基因重排 ,该项检测有助于ALL克隆性诊断和基因分型。 ( 3)监     

T细胞受体信号转导机制

T细胞作为机体适应性免疫的主力军,可以攻击病原体感染细胞和肿瘤细胞,在维持机体稳态中发挥作用。其表面存在的T细胞受体（T cell receptor,TCR）能够识别主要组织相容性复合体（major histocompatibility complex,MHC）呈递的抗原多肽,并将抗原结合信号转换为胞内酪氨酸磷酸化信号,引发下游信号通路来激活T细胞。在临床上,T细胞受体工程化T细胞（T cell receptor-engineered T cell,TCR-T）疗法有望在实体瘤的治疗中取得突破。简要阐述TCR的信号转导机制及其与嵌合抗原受体（chimeric antigen receptor,CAR）的异同,以便更好地理解TCR-T的工作原理,从而为设计更好的T细胞治疗产品提出新的策略,以求其在实体瘤临床治疗中得到进一步应用。     

汉坦病毒灭活疫苗免疫小鼠后特异性细胞毒性T细胞克隆的研究

目的 探讨细胞毒性T细胞(Tc)在汉坦病毒灭活疫苗免疫保护机理中的作用。方法 采用T细胞克隆技术。结果 从用汉坦病毒L_(99)株灭活疫苗免疫的H-2~dBalb/C纯系小鼠脾细胞,获得6株病毒抗原特异性T细胞克隆,其表型为CD_3~+、CD_4~-、CD_8~+。体外杀伤试验表明,T细胞克隆可杀伤汉坦病毒感染的同基因型小鼠腹腔巨噬细胞。结论 灭活疫苗能诱导免疫小鼠产生特异性细胞毒性T细胞,这是重要的细胞免疫保护性机制之一。     

皮肤T细胞淋巴瘤皮损和外周血T细胞受体γ基因重排的研究

为探讨T细胞受体γ基因重排在皮肤T细胞淋巴瘤皮损及外周血中的存在情况及与疾病的相关性。采用巢式聚合酶链反应技术对14例蕈样肉芽肿、(MF)17例可疑蕈样肉芽肿、8例神经性皮炎、8例湿疹、2例淋巴瘤样丘疹病、1例红皮病患者皮损及外周血进行T细胞受体γ基因重排的检测,同时取5例正常皮损及健康人血作为对照。结果:MF患者皮损TCR-γ基因重排总阳性率为78.6%;外周血总阳性率为35.7%;MF患者皮损和血液中有3例患者同时出现TCR-γ基因重排,2例在皮损中无基因重排的情况下血液单独出现TCR-γ基因重排。可疑MF皮损总阳性率为41.2%,血液总阳性率为17.6%。神经性皮炎、湿疹、淋巴瘤样丘疹病、红皮病患者皮损和外周血及正常皮损和健康人血中无TCR-γ基因重排。结论:皮损TCR-γ基因重排可作为辅助诊断的手段之一,血液中的TCR-γ基因重排与MF疾病进展关系有待于进一步研究。     

高通量测序分析自身免疫性疾病T细胞受体β链CDR3组库的特征

自身免疫性疾病是机体对自身抗原发生免疫反应而导致自身组织损害所引起的疾病。导致其发病的基本因素可能是自身免疫耐受的破坏。T细胞在自身免疫病的适应性免疫应答过程中起着至关重要的作用。每一个成熟的T细胞表面表达一种特定的T细胞受体(TCR),互补决定区3(CDR3)最能直接反应TCR多样性。T细胞对众多抗原的识别依赖于CDR3区的多样性,故对TCR CDR3区序列的     

靶向肿瘤驱动抗原的T细胞受体工程化T细胞治疗策略

肿瘤临床治疗手段日新月异,除临床手术、放射治疗、化学药物治疗和靶向药物治疗外,近年来肿瘤免疫疗法也显示出强大的抗肿瘤疗效,成为肿瘤临床研究的热点之一。基于最近对肿瘤突变抗原的深入研究,一些关键性肿瘤驱动突变抗原以及靶向这些抗原的T细胞得以发现。同时,这些肿瘤驱动突变抗原特异性T细胞高效诱导了抗肿瘤应答,提示了以T细胞-肿瘤驱动突变抗原识别为基础的T细胞受体工程化T细胞（T cell receptor-engineered T cells,TCR-T）肿瘤免疫疗法在肿瘤免疫治疗中的巨大潜力。对近年肿瘤驱动突变抗原与TCR-T肿瘤治疗的研究进展和方法进行综述,以期为TCR-T肿瘤免疫治疗的临床研究提供理论基础。     

麻杏石甘汤辅助西医治疗对老年多重耐药菌医院获得性肺炎患者外周血辅助性T细胞17/调节性T细胞平衡的影响

目的 探讨麻杏石甘汤辅助西医治疗对老年多重耐药菌(multi drug resistant organisms,MDROs)医院获得性肺炎(hospital-acquired pneumonia,HAP)患者外周血辅助性T细胞17(T helper cell 17,Th17)/调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)平衡的影响,为其临床应用提供强有力的循证医学支持。方法 选取2019年7月至2021年4月我院呼吸急诊科和重症监护病房130例老年MDROs-HAPs患者作为研究对象,随机分为研究组和对照组,每组各65例。对照组给予标准西医治疗,研究组在标准西药治疗的基础上辅以麻杏石甘汤。检测两组患者治疗前后Th17比例(Th17%)、Treg比例(Treg%)及Th17/Treg比值、血清白介素(interleukin,IL)-17、IL-6、IL-10、C反应蛋白及降钙素(procalcitonin,PCT)水平。比较两组临床疗效及不良反应发生率。结果 治疗后,研究组患者血清PCT、IL-6、IL-17水平,Th17%、Th17/Treg比值,中医证候总积分、急性生...     

T细胞抗原受体Vβ7阳性T细胞检测在乙型肝炎患者中的临床应用

目的分析在乙型肝炎患者中应用T细胞抗原受体Vβ7阳性(TCR Vβ7+)T细胞检测的应用价值。方法选取我院体检正常的18例健康体检者作为正常组,选取同期体检为急性乙型肝炎患者15例为急性乙型肝炎组,同期体检为慢性乙型肝炎患者35例作为慢性乙型肝炎组,应用流式细胞仪对CD_4~+TCR Vβ7+T细胞、CD_8~+TCR Vβ7+T细胞含量进行检测。结果正常组、急性乙型肝炎组CD_4~+TCR Vβ7+T细胞含量结果与慢性乙型肝炎组之间比较,有统计学差异(P<0.05),正常组、急性乙型肝炎组与慢性乙型肝组CD_8~+TCR Vβ7+T细胞含量比较,有统计学意义(P<0.05)。结论 TCR Vβ7阳性T细胞增殖活性减低可以使乙型肝炎患者感染慢性化。     

T细胞受体信号转导通路的动力学分析

目的:建立T细胞受体信号转导途径的动力学模型,通过模型仿真揭示T细胞受体信号途径各分子间的动态调控过程,简要分析模型的动力学特性。方法:根据数据库KEGG及相关中英文文献,提取T细胞受体信号转导各条通路相关分子作用的方式及数量关系,利用Matlab7.0的Simulink工具箱构建信号途径的动力学模型并仿真。结果:模型仿真结果与文献符合得较好,能够从数量上反映T细胞受体信号转导途径中各分子间复杂的调控关系,并能通过模型仿真发现和验证该信号途径中的关键节点分子。结论:模型基本反映了T细胞受体信号转导途径的动力学特征,可以作为后续的精确定量关系研究的基础。     

T细胞受体基因修饰在过继免疫治疗中的应用

T细胞过继性转移可以增强免疫系统介导的对肿瘤细胞的消除,是近年来获得较高关注的一种特异性、无毒性的癌症新疗法,此方法对于治疗血液性和实体恶性肿瘤具有一定效果。对T细胞进行基因修饰能够增强其免疫能力,保持T细胞的持久活性,同时也可以克服肿瘤自身的免疫逃避机制,潜在提高免疫治疗应用于多种肿瘤疾病的成功率。在T细胞过继转移中,T细胞受体(TCR)基因转移作为一种发展迅速的免疫治疗方法,可以在体外产生大量的具有已知抗原特异性和功能亲和性的T细胞,应用于病毒感染或病毒相关恶性肿瘤的过继细胞免疫治疗。TCR基因转移利用逆转录病毒或慢病毒作为载体,其中包含了从所需抗体特异性T细胞群中克隆得到的TCR-α和TCR-β链基因序列,然后应用TCR编码载体转导体外的原始T细胞。为产生带有所需功能特异性的转导T细胞,引入的TCR-α和TCR-β链必须形成异源二聚体,与CD3复合体结合从而在T细胞表面稳定表达。     

乳腺癌患者外周血调节性T细胞的检测及临床意义

<正>乳腺癌是严重威胁女性健康的恶性肿瘤,占女性肿瘤发病的首位,其发病率占全身各种恶性肿瘤的7%～10%,在肿瘤类疾病中其病死率仅次于肺癌。乳腺癌的病因复杂,它确切的发病机制,医学界尚不完全清楚。近年来随着肿瘤免疫学研究的不断深入,已经明确细胞免疫是机体抗肿瘤免疫的