大肠埃希菌耐药性的相关研究

目的 通过回顾性分析大肠埃希菌的耐药情况,对临床合理使用抗菌药物提供可靠的指导依据.方法 采用API系列鉴定菌群,K-B纸片法进行药敏实验.结果 产β-内酰胺酶(ESBL)的大肠埃希菌为19株,检出率31%.产ESBL的大肠埃希菌耐药率明显强于不产ESBL大肠埃希菌,差异有统计学意义(P＜0.05).大肠埃希菌对庆大霉素和氨苄西林有强耐药性,对亚胺培南则较敏感.结论 大肠埃希菌的耐药情况较普遍,临床用药若能积极配合药敏试验,则更有利于合理用药.     

73株大肠埃希菌耐药表型分析

目的 分析临床分离的大肠埃希菌的耐药性、产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)阳性率及耐药性之间的关系.方法 用微量肉汤稀释法检测2009年10月至2010年3月分离的73株大肠埃希菌的耐药性,用酶抑制剂增强实验纸片法检测产ESBLs菌株.结果 73株大肠埃希菌产ESBLs 20株,阳性率为27.4%.产ESBLs菌株对青霉素类和第一、第二代头孢菌素耐药率＞95%,对第三代头孢菌素中头孢哌酮、头孢噻肟和头孢曲松耐药率均为95%,但头孢他定耐药率为20%.对酶抑制剂哌拉西林/三唑巴坦、替卡西林/克拉维酸和头孢哌酮/舒巴坦的耐药率＜30%,耐药率低于30%的还有头孢西丁、阿米卡星,未检测到亚胺培南耐药株.非产ESBLs菌株耐药率明显低于产ESBLs菌株.结论 本医院分离的产ESBLs大肠埃希菌的比例低于国内其他地区,具有显著的耐药性.     

大肠埃希菌耐药性分析

目的分析产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的大肠埃希菌（EC）对抗菌药物的耐药性,为指导临床合理使用抗菌药物提供科学依据。方法用纸片扩散法（K—β法）对大肠埃希菌进行14种常规抗菌药物的敏感性试验,产超广谱β-内酰胺酶的筛选按美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）推荐的纸片确证法进行。结果2003～2006年从临床标本中共分离到大肠埃希菌153株,其中产ESBLs阳性51株（产酶率33．3％）,除亚胺培南外对其他13种抗生素均有不同程度耐药,头孢类药物耐药率较高。结论齐齐哈尔市EC的耐药睛况十分严重,应对EC进行耐药性动态监测,以指导临床科学使用抗菌药物。     

儿童大肠埃希菌的耐药性分析

目的了解年龄小于或等于12岁的儿童病患儿大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）发生率和耐药性，以便结合《抗菌药物临床应用指导原则》指导临床用药。方法采用纸片扩散法对2005年1月-2006年5月临床分离的，患者年龄小于或等于12岁儿童147株大肠埃希氏菌进行药敏试验，采用双纸片增效试验法按NCCLS2000年版标准检测出ESBLs株，分析其耐药性。结果27．2％（40／147）大肠埃希氏菌产ESBLs。结论治疗大肠埃希菌引起的感染，要充分了解菌株的耐药性，是否是产ESBLs菌株，对产ESBLs菌株应用亚胺培南、β-内酰胺类，β-内酰胺酶抑制剂复合物。结合《抗菌药物临床应用指导原则》指导临床用药。     

产ESBLs大肠埃希菌的耐药性分析及发展趋势

目的了解产ESBLs（超广谱β-内酰胺酶）大肠埃希菌的耐药情况及发展趋势,为产ESBLs菌的监控和治疗提供依据。方法收集我院三年来门诊及住院患者各类标本中分离的产ESBLs的大肠埃希菌（共144株）,采用纸片扩散（K-B）法进行药敏试验。结果产ESBLs菌耐药严重,并且有逐年上升趋势。结论定期进行细菌耐药性的检测,有助于指导临床合理应用抗生素。     

422株大肠埃希菌耐药性分析

目的了解南华大学附属第一医院大肠埃希菌对抗菌药物的耐药情况，指导临床合理用药。方法应用API半自动微生物鉴定系统和用K-B法进行细菌鉴定及药物敏感性测定，参照1999年NCCLS的标准进行结果判断。结果2006年1月～2007年12月共检测出大肠埃希菌422株，产超广谱13内酰胺酶（ESBk）的大肠埃希菌占33．4％，2007年比2006年有所增加，产ESBLs大肠埃希菌对青霉素类和头孢菌素类抗菌药物大多耐药，对亚胺培南和美洛培南敏感，对其它类抗菌药物耐药率也较不产ESBLs大肠埃希菌高。结论产ESBLs大肠埃希菌耐药率高，且有增加趋势，临床上应参照药敏结果，合理使用抗菌药物。     

近6年产超广谱β内酰胺酶大肠埃希菌的耐药变迁

目的了解我院自2005年以来,近6年产超广谱β内酰胺酶大肠埃希菌的耐药变化情况,从而为临床合理使用抗生素提供指导。方法对2005～2010年,6年间临床分离的大肠埃希菌共计619株菌进行药敏分析,采用K-B法进行药敏试验,ESBLs筛选试验及确认试验按照美国CLSI相关标准进行,结果用WHONET 5.4软件进行数据统计分析。结果 6年来,大肠埃希菌产ESBLs阳性率从45.5%上升至68.4%。6年分离的大肠埃希菌合计产ESBLs率为56.1%。产ESBLs株对头孢菌素类、氟喹诺酮类等常用抗生素药物的耐药率明显高于非产ESBLs株,对碳青霉烯类抗菌药物敏感,氨基糖苷类抗生素在所有大肠埃希菌中耐药率呈增长趋势。结论 6年来,大肠埃希菌中ESBLs阳性率逐年升高,并呈现出多重耐药性,对产ESBLs菌株的治疗应首选碳青霉烯类抗生素药物。虽然这次监测没有发现耐碳青霉烯类的菌株,但是也应引起重视。氨基糖苷类抗生素在所有大肠埃希菌中耐药率呈增长趋势,这需要我们进一步研究是否有新的耐药机制存在。     

大肠埃希菌ESBLs检测及其耐药性分析

目的探讨本地区大肠埃希菌分离株中超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的阳性率及产酶株对β-内酰胺类抗生素的耐药性。方法采用双纸片协同法检测菌株的ESBLs，并用Kirby-Bauer法检测了415株产ESBLs的大肠埃希菌对16种β-内酰胺类抗生素的耐药性，并对其标本来源和病区分布进行了分析。结果ESBLs总检出率为50．8％，其中ESBLs检出率较高的科室为普外科、脑外科、肾内科、骨科、呼吸内科。所有大肠埃希菌分离株均对Imipenem和Meropenem敏感。产ESBLs株对其他14种β-内酰胺类抗生素的耐药性均高于非产酶株。结论本地区ESBLs检出率较高，分布科室有特殊性，产ESBLs株对抗生素的耐药性高于非产酶株。     

404株大肠埃希菌耐药性变迁分析

目的:监测我院3a间分离的大肠埃希菌的耐药情况,了解其耐药性的发展规律,以指导临床用药。方法:用VITEK-2全自动微生物鉴定药敏仪对我院2004年至2006年临床分离的404株大肠埃希菌进行监测分析。结果:大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)株检出率维持在很高的水平(49%～53%)。3a间分离的大肠埃希菌对广谱青霉素、第一、二代头孢菌素、复方新诺明及氟喹诺酮类的耐药率一直很高;对氨曲南、氨苄西林、三种加酶抑制剂复合青霉素和头孢噻肟耐药率逐年上升较快(P<0.05);对碳青酶烯类仍呈高度敏感。结论:大肠埃希菌对绝大部分抗生素的耐药率均逐年增加,积极加强耐药监测,合理、规范选用抗生素,才能控制耐药菌株的出现和传播。     

大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶产生及耐药分析

目的 探讨临床感染性标本中产超广谱β-内酰胺酶（ESBL）大肠埃希菌的阳性率及耐药性,以指导临床合理用药。方法 ESBL的检测和药敏试验均采用K-B法、E-test法和Vitek微生物自动分析仪进行。结果 大肠埃希菌124株产超广谱β-内酰胺酶21株,阳性率为16.9%。19种抗生素中,其对头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南耐药率分别为4.8%,9.6%;头孢他啶、头孢西汀和丁胺卡那均为23.8%;对其他抗生素的耐药率为66.0%～100.0%。结论 产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌株对大多数常用抗生素耐药均较高,值得重视,其治疗首选药物为头孢哌酮/舒巴坦和亚胺培南。     

左氧氟沙星与阿莫西林／克拉维酸钾联合克拉霉素治疗社区获得性肺炎的临床随机对照研究

目的比较左氧氟沙星与阿莫西林／克拉维酸钾联合克拉霉素治疗社区获得性肺炎（CAP）的临床疗效。方法60例CAP患者随机分为左氧氟沙星组（A组）和阿莫西林／克拉维酸钾联合克拉霉素组（B组）各30例。A组给予500mg左氧氟沙星静脉注射,1次／d;当病情好转时改为500mg口服,1次,d。B组给予阿莫西林／克拉维酸钾（500mg／100mg）静脉注射,3次,d,同时口服克拉霉素500mg,2次／d;当病情好转后,改为口服阿莫西林／克拉维酸钾（250mg／125mg）,3次,d,克拉霉素500mg,2次／d。治疗疗程为7～14d。结果A组和B组的临床总有效率分别为93.3％和96．7％,细菌清除率分别为73.3％和60．0％,差异均无统计学意义（P〉0．05）。两组不良反应轻微,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论左氧氟沙星与阿莫西林／克拉维酸钾联合克拉霉素治疗CAP均安全有效,均可以作为CAP的首选药物。     

尿路感染大肠埃希菌耐药分析

目的:探讨尿路感染大肠埃希菌的耐药性变迁,为临床合理用药提供试验依据.方法:对2008～2010年度尿标本检出的234株大肠埃希菌进行超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检测和药敏试验,并对药敏结果进行分析.结果:大肠埃希菌的产酶率呈增高趋势;药敏结果显示大肠埃希菌除对亚胺培南耐药率为0外,对其他常用抗菌药物均出现了不同程...     

产ESBLs大肠埃希菌耐药基因分型研究

目的对本院分离的31株产ESBLs大肠埃希菌进行耐药基因分型研究。方法用PCR对根据CLSI标准进行产ESBLs大肠埃希菌的初筛确证实验得到的产ESBLs大肠埃希菌31株,进行耐药基因的分型研究。结果31株产ESBLs大肠埃希菌中,TEM型为15株,SHV型为3株,CTX-M型为6株,TEM型对氨苄西林100%耐药,而SHV和CTX-M型主要对三代头孢类抗生素耐药,其治疗的首选药物为亚胺培能。结论本院检出的产ESBLs大肠埃希菌主要型别为TEM型,耐药基因分型研究将为临床用药和医院感染监控提供较有价值的参考。     

尿路感染病原菌分布及耐药变化趋势分析

目的：分析2006—2011年尿路感染患者病原菌分布及耐药性变化趋势,为临床合理用药提供依据。方法：采用回顾性调查方法对2006～2011年尿培养分离出的668株病原菌分布进行分析,同时分析其中产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌（ESBLs大肠埃希菌）分布及耐药性变化。结果：2006—2011年尿培养标本2356份,分离出病原菌668株,分离率为28．4％。其中革兰阴性杆菌438株（65．6％）,革兰阳性球菌120株（18．0％）,假丝酵母菌110株（16．4％）。排名前3位的是：大肠埃希菌302株（45．2％）、白假丝酵母菌57株（8．5％）、肺炎克雷伯菌47株（7．0％）。产ESBLs大肠埃希菌分离率为54．3％（164／302）,各年份依次为50．0％（14／28）、51．9％（28／54）、45．6％（26／57）、45．8％（22／48）、53．1％（26／49）、72．7％（48／66）;尿路感染患者中女性多于男性（422：246）;以〉50岁为主（419／668）。结论：该地区尿路感染病原菌以大肠埃希菌为主,产ESBLs菌株分离率较高,且耐药情况严重;假丝酵母菌有较高的分离率。     

致病性大肠杆菌引发宿主细胞A/E损伤分析方法的建立

目的 建立一种能够对由致病性大肠杆菌引发的宿主细胞黏附及擦拭性损伤(A/E损伤)进行半定量分析的方法,为进一步研究其致病性提供评价手段.方法 以大肠杆菌黏附HeLa细胞作为感染模型.采用姬姆萨染色和荧光肌动蛋白染色实验,通过菌落计数及肌动蛋白聚集数量定量分析,统计学处理,比较EPEC 43095、EHEC 0157:H7 Sakai株和弱毒株EHEC 0157:H7 0013015以及E. coli DH5α对HeLa细胞的黏附能力,评价它们对细胞的损伤程度.结果 EPEC对细胞的黏附及擦拭性损伤程度大于EHEC(P<0.05).EHEC Sakai和00B015在黏附能力上差异不大(P>0.05),但是,Sakai在肌动蛋白聚集形成能力方面却明显强于00B015(P<0.05).结论 成功建立了一种能够对EPEC或EHEC所引发的宿主细胞黏附及擦拭性损伤进行半定量分析的方法.     

人心肌肌钙蛋白Ⅰ在大肠杆菌中的高效表达及纯化

目的:获得高纯度的人心肌肌钙重组蛋白,为临床上检测心肌损伤及预后提供新的诊断方法.方法:利用RT-PCR方法从人心肌细胞的cDNA文库中扩增编码人心肌肌钙蛋白Ⅰ的cDNA,并克隆到大肠杆菌表达载体中,表达含凝血酶识别序列的MS2-cTnI 融合蛋白,纯化后用Western-blot进行鉴定.结果:从人心肌cDNA文库中扩增出编码人cTnI的cDNA,克隆并在大肠杆菌中表达,表达量达30%以上.经离子交换柱纯化,最终产物纯度在95%以上.可与其特异性单克隆抗体反应.结论:cTnI能够在大肠杆菌中高效表达和纯化,为今后检测心血管疾病提供了一种高效快捷的方法.     

某院大肠埃希菌分布及耐药性分析

目的：了解某院大肠埃希菌的分布特点及其耐药性,指导临床合理应用抗菌药物。方法对766株大肠埃希菌的分布及耐药率进行回顾性分析。采用法国生物梅里埃公司全自动细菌鉴定仪 VITEK2 compact进行菌株鉴定,采用K-B法进行药敏试验,按美国临床实验室标准化委员会2014年标准判读结果。结果766株大肠埃希菌主要分离自尿液和痰液标本,分别占52．87%和13．84%;其中鉴定出产超广谱β-内酰胺酶( ESBLs)大肠埃希菌366株,占大肠埃希菌总数的47．78%。产ESBLs大肠埃希菌对常用抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBLs大肠埃希菌(P<0．05)。结论大肠埃希菌是泌尿道和呼吸道感染的常见病原菌,产ESBLs大肠埃希菌的耐药率高,临床上应根据药敏合理使用抗菌药物。     

大肠埃希菌临床分离株耐药性变迁

目的了解大肠埃希菌对抗生素耐药性变迁,为临床治疗提供参考。方法菌株鉴定和药敏试验采用ATB全自动微生物分析仪进行测定,超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）采用双纸片协同法。结果从2001-2005年检出的大肠埃希菌对青霉素类药物耐药率最高,对亚胺培南耐药率最低,氨基糖苷类和第三代头孢菌素药物具有较好的体外抗菌活性,大肠埃希菌超广谱β-内酰氨酶（ESBLs）的发生率呈逐年上升的趋势,分别是8.5%、16.4%、19.3%、25.4%、27.8%。结论随着抗生素的广泛使用,大肠埃希菌的耐药性逐渐上升,要加强对其的耐药性监测,指导临床合理用药。     

DinB基因的超表达短期内可显著降低大肠杆菌的死亡率

[目的]探讨大肠杆菌dinB基因在进化上的选择优势.[方法]应用竞争共培养和超表达的策略,测定共培养后含dinB基因的目的菌株和对照菌株的生长优势.第1组为含质粒pUC-dinB-rrnb的E.coli AB1157＋含质粒pUC-dinBR-rrnb的E.coli YG7207;第2组为含质粒pUC-dinB-rrnb的E..coli AB1157＋含质粒pUC-phoE-rrnb的E.coli YG7207;第3组为含质粒pUC-phoE-rrnb的E.coli AB1157＋含质粒pUC-dinBR-rrnb的E.coli YG7207;第4组为卡那霉素抗性（K^＋）菌株YG7207与无卡那霉素抗性菌株AB1157.[结果]第4组中,卡那霉素抗性菌株YG7207与无卡那霉素抗性菌株AB1157在培养物中的比例保持着良好的稳定.第1组和第2组混合培养中,K^＋抗性的菌株在培养物中的比例急剧下降,并很快接近或等于0;第3组培养物中,K^＋菌株（YG7207）的比例呈明显上升.[结论]超表达dinB基因的大肠杆菌菌株的生长优势不是由于对数期的生长速率提高所造成,对数后期细胞死亡率降低应该是超表达dinB基因的大肠杆菌菌株的生长优势的主要原因.     

网状分枝扩增技术快速检测大肠埃希菌O157∶H7及其他产志贺样毒素大肠埃希菌

目的：建立一种简便、快速、灵敏和特异的检测食品和临床标本中大肠埃希菌O157∶H7及其他产志贺样毒大肠埃希菌(STEC)的方法。方法：设计并合成了检测志贺毒素2(stx2)基因特异的环形探针和捕获探针，确定网状分枝扩增方法（RAM）的灵敏度；含有stx2基因的不同血清型的菌株包括O46∶H38、O22∶H8 、O111∶NM，用于RAM特异度的测定。用RAM检测所有分离的菌株，并进一步对瞬时RAM进行研究。结果：RAM最低能检测10个拷贝的stx2合成靶基因和临床分离的菌株，表明RAM与PCR具有一样的灵敏度。特异度的测定结果表明不同血清型的大肠埃希菌均为stx2阳性，而非致病性大肠埃希菌ATCC23716则为阴性。在32株菌株中，28株细菌含有stx2基因，其余则为阴性， 与PCR检测结果100%一致。瞬时RAM结果也表明最低能检测10个细菌，检测信号的出现依赖于样品的浓度。 结论：RAM的简便和等温扩增特点可替代PCR检测各种标本中大肠埃希菌O157∶H7和STEC。