透骨草体外抑制肺癌A_(549)细胞增殖有效部位研究

目的:筛选透骨草抑制肺癌A549细胞增殖的有效部位,为透骨草药效物质基础研究阐明并提供依据。方法:将透骨草分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,萃取后各部位分别在体外用MTT法检测透骨草对肺癌A549细胞的增殖影响,并根据实验结果确定透骨草的有效部位。结果:透骨草的各部位均有抑制肺癌A549细胞增长的作用,其中乙酸乙酯层提取物抑制肺癌A549细胞增殖的作用最为明显;而石油醚提取物的抑制作用最弱。结论:透骨草具有确切的抑制肺癌A549细胞增殖的作用,其乙酸乙酯层提取物为其有效成分集中部位。     

基于炎症细胞模型的草珊瑚抗炎活性部位筛选

目的 探讨草珊瑚不同萃取部位的抗炎作用.方法 采用系统溶剂法按极性由低到高分离得到草珊瑚石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物、水提取物4个部位,建立RAW264.7细胞炎症模型,对各部位抑制细胞炎症因子NO表达进行研究,通过MTT法测定各部位对RAW264.7细胞增殖的影响及评价细胞毒性分极.结果 通过RAW264.7炎症模型的筛选,草珊瑚乙酸乙酯部位(100～200μg/mL)和多搪部位(100～400 μg/mL)均可显著抑制模型细胞NO的表达(P＜0.01),并可显著抑制RAW264.7细胞增殖水平,且其细胞毒性分级均为1级或以下.结论 草珊瑚多糖和乙酸乙酯部位是草珊瑚抗炎作用的主要活性部位.     

蛞蝓有效提取物对人肺癌A549细胞增殖的影响

目的:筛选蛞蝓有效提取物,并观察蛞蝓有效提取物EL-3对人肺癌A549细胞增殖的抑制作用。方法:体外培养人肺癌A549细胞和中国仓鼠肺上皮CHL细胞;MTT比色法测定细胞活性;软琼脂集落形成法检测细胞锚定非依赖性生长能力。结果:以不同提取方式获得的6种蛞蝓提取物对人肺癌A549细胞增殖活性具有抑制作用,其中以EL-3抑制作用最强,其IC50值为9.4μg/mL,可作为蛞蝓有效提取物;EL-3选择性抑制A549细胞活性,其选择指数是43.6;EL-3能有效抑制A549细胞锚定非依赖性生长,呈浓度依赖性。结论:EL-3具有选择性抑制A549细胞增殖作用。     

野菊花抗肿瘤活性部位筛选研究

目的 筛选野菊花的抗肿瘤活性部位并初步探讨其机制。方法利用形态观察、CCK-8、Hoechst染色和划痕实验评价野菊花总提取物(CIE)及其石油醚部位(PEE)、乙酸乙酯部位(EAE)、正丁醇部位提取物(NAE)对人肺癌细胞A549、人慢性骨髓性白血病细胞K562、人乳腺癌细胞MCF-7和人肝癌细胞HepG2的抗肿瘤活性。结果CIE及PEE、EAE、NAE>150 μg/mL对A549、K562和MCF-7细胞形态影响明显且CIE及PEE、EAE、NAE(150~250 μg/mL)对上述三种细胞增殖抑制作用呈量效相关性,PEE对MCF-7细胞抑制效果最显著;EAE对MCF-7细胞的诱导凋亡作用和迁移抑制作用相对较好。结论野菊花具有抗肿瘤活性,抗肿瘤活性较强的部位为石油醚和乙酸乙酯部位,其抗肿瘤机制可能与抑制细胞增殖、迁移和诱导细胞凋亡有关,这为进一步研究开发野菊花提供基础。     

芭蕉花活性成分提取及其体外生物活性研究

目的 研究芭蕉花的活性成分及其体外生物活性.方法 通过硅胶柱色谱、大孔树脂、TLC分离等对芭蕉花提取物进行分离,并用高效液相色谱,结合质谱分析等方法,进行成分鉴定;采用体外MTT法进行芭蕉花活性组分对抑制肝癌BEL-7402细胞增殖作用的筛选,对抑制AngⅡ诱导的A7r5平滑肌细胞增殖作用进行活性筛选.结果 通过液-质分析,从芭蕉花乙酸乙酯提取物和石油醚提取物中发现其中有一种化合物可能为豆甾醇.MTT筛选发现芭蕉花石油醚提取物的4种萃取物组分中,乙酸乙酯相和石油醚相对肝癌BEL-7402细胞具有显著的增殖抑制作用(P<0.01),且呈一定的剂量和时间依赖性;芭蕉花的3种提取物组分中,乙酸乙酯相和石油醚相对AngⅡ诱导的A7r5平滑肌细胞增殖具有显著的抑制作用(P<0.01),且其抑制作用呈一定的剂量和时间依赖性.结论 芭蕉花石油醚提取物的石油醚萃取部位和乙酸乙酯萃取部位对肝癌BEL-7402细胞具有显著的增殖抑制作用,72 h的IC50分别为67.4μg/mL和34.5μg/mL,且石油醚提取物和乙酸乙酯提取物对AngⅡ诱导的A7r5平滑肌细胞增殖有抑制作用,72 h的IC50为55.5μg/mL.从芭蕉花提取物中分离出单体豆甾醇,为芭蕉花活性成分的深入研究提供了参考.     

槐耳醇提物抑制人胃癌细胞MKN-45增殖的实验研究

目的观察槐耳不同提取部位对人胃癌MKN-45细胞增殖的影响,并筛选其有效部位。方法用系统溶剂法将槐耳提取为石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇、水五个部位后,用CCK-8显色法,检测不同部位不同浓度的槐耳醇提取物对MKN-45增殖的作用。结果槐耳石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇部位为抗肿瘤有效部位,其中以正丁醇部位效果最佳,其对MKN-45细胞半数抑制率(IC50)为56.142μg·m L-1。结论槐耳醇提物能抑制人胃癌MKN-45细胞增殖,其最有效部位为槐耳正丁醇部位。     

天花粉降糖作用有效部位的研究

目的:观察天花粉的降糖作用并筛选其有效部位。方法:天花粉乙醇提取物用水分散后分别用石油醚、乙酸乙酯,正丁醇萃取得到3个提取物;天花粉水提物用硫酸铵沉淀,蒸馏水透析得到凝集素粗品。检测天花粉4种提取物对人肝癌细胞HepG2的葡萄糖消耗量的影响;建立四氧嘧啶糖尿病小鼠模型,对各提取物进行降血糖研究,确定天花粉降糖有效部位。结果:乙酸乙酯部位和凝集素粗品具有较强的降糖作用,其中以凝集素部位为佳。结论:凝集素为天花粉降糖的主要有效部位。为进一步开发天花粉降糖有效成分提供了理论依据。     

刺山柑果实醇提物及不同萃取部位的抗炎与镇痛活性研究

目的：对刺山柑果实乙醇提取物及不同萃取部位的抗炎与镇痛活性部位进行筛选。方法：采用乙醇对刺山柑进行提取制备总提取物,用水溶解后分别用石油醚、乙酸乙酯进行萃取得到石油醚部位、乙酸乙酯部位和水溶性部位。以阿斯匹林为阳性对照药,分别采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验、小鼠腹腔毛细血管通透性实验、热板法镇痛实验和醋酸扭体镇痛实验进行抗炎镇痛活性部位进行筛选。结果：结果显示乙酸乙酯部位和水溶性部位对二甲苯致小鼠耳肿胀有明显抑制作用;乙酸乙酯部位对小鼠毛细血管通透性有明显抑制作用;乙酸乙酯部位和石油醚部位可显著提高小鼠热板痛阈值,而乙酸乙酯部位和水溶性部位则能明显减少醋酸所致小鼠扭体次数。结论：刺山柑果实具有潜在的抗炎和镇痛作用。     

COX-2抑制剂Nimesulide抗肺癌作用及其机制研究

目的：流行病学资料显示,非甾体类抗炎药物阿司匹林能降低肺癌的发病率。我们的目的是探讨Nimesulide-一种选择性COX-2抑制剂对肺癌A549细胞增殖的影响及其机制。方法：采用MTT比色法观察Nimesulide对A549细胞生长的影响,采用放射免疫法（ELISA）测定Nimesulide对肺癌A549细胞上清液中前列腺E2（PGE2）释放的影响,免疫细胞化学法测定肺癌A549细胞中COX-2、PCNA、bcl-2基因蛋白表达水平。结果：Nimesulide呈时间、剂量依赖性抑制A549细胞增殖,抑制率最低22.73%,最高72.04%;以剂量依赖性方式抑制A549细胞PGE2释放;Nimesulide可抑制A549细胞PCNA、bcl-2的蛋白表达,而对COX-2蛋白表达无影响。结论：Nimesulide以时间、剂量依赖性方式抑制肺癌A549细胞增殖,其机制可能与抑制肺癌A549细胞PGE2释放,并下调A549细胞PCNA、bcl-2的蛋白表达有关,而对COX-2的蛋白表达无影响。选择性COX-2抑制剂Nimesulide有可能在肺癌防治中发挥重要作用。     

黄花败酱草提取物镇静活性部位的研究

目的建立黄花败酱草各部位的分离方法,并确定黄花败酱草镇静作用的活性部位。方法黄花败酱全草先用70%的乙醇提取,得到的提取物进一步用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇依次萃取,得到极性由小到大的3个提取部位。活性筛选采用常规的镇静催眠实验,观察黄花败酱3个不同极性提取物在戊巴比妥钠协同下对小鼠睡眠时间的影响。结果 3个不同极性的提取物中,以正丁醇萃取部分的镇静作用最明显。结论黄花败酱的正丁醇萃取部分是镇静作用的主要有效部位。     

凤尾蕨属6种植物不同部位体外抗肿瘤作用研究

目的：对凤尾蕨属6种药用植物不同部位抗肿瘤作用进行筛选。方法：以人鼻咽癌细胞CNE-2Z为筛选模型,采用MTT法对凤尾蕨属6种药用植物不同溶剂萃取部位进行体外抗肿瘤活性测试。结果：半边旗的乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物,刺齿半边旗的石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物,剑叶凤尾蕨的乙酸乙酯萃取物,线羽凤尾蕨的正丁醇萃取物对人鼻咽癌细胞CNE-2Z增殖有明显的抑制作用。结论：上述凤尾蕨属4种药用植物的萃取物具有较好的体外抗肿瘤活性,是其抗肿瘤作用的有效部位。     

水红花子总提取物及各化学部位体外抗肿瘤活性研究

目的:研究水红花子乙醇总提取物(SH1)及各化学部位对人肺高转移细胞株95D增殖的抑制作用,筛选水红花子抗肿瘤主要活性部位.方法:以人肺高转移细胞株95D作为实验用细胞株,采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比象(MTT)法对水红花子总提取物(SH1)、石油醚部位(SH2)、乙酸乙酯部位(SH3)、丙酮部位(SH4)和甲醇部位(SH5)进行抗肿瘤活性研究.结果:水红花子各化学部位对人肺高转移细胞株95D有明显的抑制作用,水红花子乙酸乙酯部位和丙酮部位的半数抑制浓度分别为199.1 mg·L-1、261.2 mg·L-1.结论:水红花子乙酸乙酯部位和丙酮部位对人肺高转移细胞株95D细胞增殖的抑制作用较强,为水红花子主要活性部位.     

玉屏风散中抗氧化成分的研究

目的：筛选玉屏风散具有抗氧化活性的有效部位,为药剂学以及药理学的研究奠定基础。方法：采用水提醇沉法提取玉屏风散中的粗多糖,用Sevag法除蛋白得到精制多糖,另外用乙醇回流提取药材粉末后用旋转蒸发仪蒸干得到醇提浓缩浸膏,然后分别溶解在去离子水中,用四种不同极性的溶剂萃取,得到四种不同极性部位的浓缩物,将总多糖与四种不同极性溶剂的萃取物分别用邻苯三酚自氧化法分别测定其抗氧化活性。结果：正丁醇层具有较高的超氧阴离子自由基清除率,乙酸乙酯层的清除率次之,玉屏风散水提液的超氧阴离子自由基清除率略高于石油醚层与二氯甲烷层。结论：玉屏风散具有较强的超氧阴离子自由基清除能力的活性物质的混合物,其极性可能比较大,易被正丁醇和乙酸乙酯萃取出来,而被非极性的石油醚和二氯甲烷萃取的量很少。     

瓜蒂催吐作用有效部位的初步筛选

目的：分离并初步筛选瓜蒂催吐作用的有效部位。方法：以80%乙醇回流提取制得的瓜蒂总提取物后,以用硅胶柱溶剂极性依次递增分离法（石油醚-乙酸乙酯-甲醇连续洗脱）制得的分段提取物（石油醚I,乙酸乙酯II,甲醇III）为药效研究对象,筛选对犬致吐作用有活性的有效部位,最后通过特殊颜色反应确定有效部位化学性质。结果：瓜蒂中乙酸乙酯提取物具有催吐作用,与蒸馏水组相比有显著性差异（P<0.01）。颜色反应说明该部位主要含有葫芦素类等物质。结论：瓜蒂总葫芦素类部位可能是其催吐作用有效部位。     

甘草总黄酮物质组分提取纯化工艺研究

目的：考察甘草中黄酮类的最佳提取纯化工艺,建立纯化黄酮类的合理有效的提取纯化方法。方法：采用回流提取结合均匀设计试验提取制备甘草黄酮物质组;通过树脂纯化工艺结合有机试剂萃取制备纯净甘草总黄酮。结果：甘草总黄酮的最佳提取工艺条件：乙醇浓度为90%,12倍乙醇量,提取1次,提取时间1h,提取前浸渍时间为5h。甘草总黄酮的最佳纯化工艺条件：提取液石油醚1：1萃取1次,水层乙酸乙酯1：1萃取2次,乙酸乙酯层挥散溶剂制成水溶液过聚酰胺树脂,上样液pH值为5,流速为1ml/min,径高比为1/10,上样浓度为150/1000（g/ml）。结论：采用均匀设计结合有机萃取的方法有效地提取纯化甘草黄酮物质组分,纯度为90.12%。为基础研究提供重要的物质基础;采用HPLC、UV方法同时控制甘草黄酮的提取纯化工艺更为准确有效。     

雪菊不同极性萃取物对小鼠脾脏CD4+T细胞体外增殖的影响

目的: 观察不同极性雪菊萃取物对小鼠CD4+ T细胞体外增殖的影响。方法: 用95%乙醇和不同极性溶剂萃取分别获得雪菊石油醚萃取物（X 1）、乙酸乙酯萃取物（X-2）、正丁醇萃取物（X-3）和奥卡宁（X-2-1）。免疫磁珠法分离小鼠脾脏CD4+ T细胞,并以5×105 个/孔的密度接种于96 孔板,在加入刀豆蛋白A（ConA）的基础上分别给予不同浓度的萃取物和奥卡宁,共育48 h后采用MTT 法检测细胞的增殖情况。与此同时,进行细胞毒性实验,在不加入ConA的基础上分别给予不同浓度的萃取物和奥卡宁,共育48 h后采用MTT 法检测细胞的存活率。结果： 雪菊乙酸乙酯萃取物（X 2）能显著抑制CD4+ T细胞的增殖,且呈剂量依赖性;X-2中的主要成分奥卡宁（X-2-1）同样表现为对CD4+ T细胞增殖的明显抑制,浓度为10 μmol/L时细胞增殖率为(19.23±0.57)%,且在起效浓度下对正常细胞未表现出显著毒性。结论： 雪菊乙醇提取物的乙酸乙酯萃取物及其含有的主要成分奥卡宁能显著抑制ConA介导的小鼠脾脏CD4+T细胞的增殖。     

茯砖茶不同溶剂提取物抗氧化活性研究

目的 研究茯砖茶不同溶剂提取物体外抗氧化活性,并测定其总多酚、黄酮含量.方法 以抗坏血酸为阳性对照,采用二苯代苦味酰基（DPPH）、[2,2＇-连氨-（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二氨盐]（ABTS）及铁离子还原/抗氧化能力（FRAP）三种抗氧化模型,评价茯砖茶80％乙醇（总提物）、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水5种不同溶剂提取物体外清除DPPH、ABTS＋自由基能力和对铁离子的还原/抗氧化能力.结果 茯砖茶乙酸乙酯提取物总多酚含量最高,正丁醇提取物黄酮含量最高,分别为（291.38±5.24）、（222.86±6.12）mg/g.茯砖茶不同溶剂提取物均具有一定的抗氧化活性,清除ABTS＋自由基和铁离子还原/抗氧化能力为：总提物＞乙酸乙酯提取物＞正丁醇提取物＞水提物＞石油醚提取物;清除DPPH自由基的能力为：乙酸乙酯提取物＞总提物＞正丁醇提取物＞水提物＞石油醚提取物.茯砖茶总提物和乙酸乙酯提取物均具有良好的抗氧化活性,清除DPPH自由基能力的半清除率浓度（IC50）分别为0.048、0.043 g/L,清除ABTS＋自由基能力的IC50分别为0.025、0.027 g/L.茯砖茶抗氧化能力与总多酚含量呈正相关.结论 茯砖茶提取物具有良好的抗氧化能力,为开发功能性抗氧化剂提供科学依据.     

红花中酪氨酸酶抑制成分的快速筛选和分析

目的 通过红花中酪氨酸酶抑制剂的筛选,明确红花中酪氨酸酶抑制剂成分,为美白祛斑剂的研发提供实验依据。方法 采用索氏提取法依次提取红花石油醚、氯仿、醋酸乙酯、正丁醇和水5种提取物,分别检测其对酪氨酸酶的抑制作用;针对活性组分通过UPLC-Q/TOF鉴定活性成分,并结合分子对接和酶学检测验证药效成分。结果 初步筛选结果显示红花水层提取物具有较强的抑制作用,并进一步通过液相色谱分离,质谱检测,以及分子对接预测技术,推测其中9种成分可能具有酪氨酸酶抑制作用,选取代表性单体羟基红花黄色素A进行验证,确认其具有较强的抑制作用。结论 谱效结合构效的筛选模式为天然产物中美白祛斑成分的筛选提供了便捷方法;红花中羟基红花黄色素A对酪氨酸酶具有明显的抑制作用。     

西南白头翁不同提取物的抗肿瘤作用研究

目的探讨西南白头翁不同提取部位的抗肿瘤活性。方法溶剂法提取分离西南白头翁得乙酸乙酯和正丁醇提取物,用MTT法检测不同提取物对细胞生长抑制作用,求得IC50值;用流式细胞术（FCM）比较不同提取物对细胞凋亡的影响。结果乙酸乙酯和正丁醇提取部位均有一定的抑制细胞生长的作用,并有一定的剂量依赖关系;提取物浓度在0．05mg／ml时有促进细胞凋亡的作用,对不同细胞株的结果并不一致。结论西南白头翁正丁醇提取部位作用强,乙酸乙酯部位活动性较弱;诱导肿瘤细胞死亡的主要途径是凋亡。