益气补肾方药对肾虚小鼠细胞因子IL-1、IL-2及IL-12基因表达的影响

目的　探讨益气补肾中药对醋酸可的松致肾虚小鼠腹腔巨噬细胞IL 1及脾脏细胞因子IL 2、IL 12活性及脾脏IL 1、IL 2、IL 12mRNA表达的影响。方法　用醋酸可的松制备肾虚动物模型 ,经益气补肾方药灌胃给药 6周后 ,生物学方法观察腹腔巨噬细胞IL 1、脾脏淋巴细胞IL 2、IL 12的活性水平 ,RT PCR方法观察脾脏IL 1、IL 2及IL 12mRNA的表达。结果　模型动物IL 1、IL 2及IL 12的活性水平较正常小鼠下降 ,其mRNA表达均受到抑制 ,与正常对照组比差异显著 (P <0 0 5 ) ;经益气补肾方药治疗后 ,三种细胞因子活性水平及其mRNA表达均有不同程度的提高。结论　益气补肾方药可能是改善外源糖皮质激素所致肾虚及由此而导致的免疫衰老较理想的方法     

益气化瘀补肾方对D-半乳糖诱导小鼠腰椎间盘衰老的影响

目的:观察益气化瘀补肾方对D-半乳糖诱导小鼠腰椎间盘衰老的影响。方法:8周龄雄性健康C57BL/6J小鼠30只,随机分为空白对照组、诱导盐水灌胃组及益气化瘀补肾方组。空白对照组皮下注射生理盐水,其余2组均皮下注射D-半乳糖复制腰椎间盘衰老模型;盐水灌胃组灌胃等容量生理盐水,益气化瘀补肾方组灌胃中药水溶液。连续给药10周后处死小鼠,取下腰部椎间盘,进行免疫组化分析以及实时定量RT-PCR检测。结果:免疫组化染色显示,益气化瘀补肾方可以明显降低软骨终板及纤维环中p16INK4a和p27KIP蛋白表达;实时定量RT-PCR分析发现,益气化瘀补肾方可显著增加Bmi1、CDK4和C-myc mRNA的表达,降低p16INK4a、cyclin D1、RB、p19ARF、Mdm2和p53 mRNA表达。结论:益气化瘀补肾方具有延缓D-半乳糖诱导小鼠腰椎间盘衰老的作用,并且这种延缓作用与调控衰老相关基因及细胞周期相关蛋白表达相关。     

补肾健脾方药对老年大鼠肝脏衰老有关基因表达的影响

目的：比较补肾、健脾方药对老年大鼠肝脏衰老有关基因表达的调控作用。方法：以自然衰老大鼠为衰老模型,随机分为老年对照组、老年补肾组、老年健脾组,并设青年大鼠对照组。予药物干预4个月后,采用RT-PCR和Western blot方法检测大鼠肝脏抑癌基因p16、抑癌基因p21、细胞周期素D1（Cyclin D1）、增殖细胞核抗原（PCNA）、细胞周期素E（CyclinE） mRNA转录和蛋白的表达。结果：老年大鼠肝脏p16、p21和Cyclin D1 mRNA/蛋白的表达明显增高,而PCNA和Cyclin E mRNA/蛋白的表达明显降低。补肾方药可明显下调肝脏p16和Cyclin D1,上调PCNA和Cyclin E基因mRNA与蛋白的表达;健脾方药能明显下调肝脏Cyclin D1,上调PCNA和Cyclin E基因mRNA与蛋白表达,但对p16作用不明显。结论：补肾、健脾方药均能不同程度调控肝脏衰老有关基因表达,促进老年大鼠肝细胞增殖,但补肾方药作用似更明显。     

益气活血方药对老年大鼠肝脏衰老相关基因表达的影响

目的:观察益气、活血方药对老年大鼠肝脏衰老相关基因表达的影响.方法:以自然衰老大鼠为衰老模型,采用RT-PCR、Western blotting法研究益气、活血方药对老年大鼠肝脏p16、p21、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、cyclin D1和cyclin E mRNA转录和蛋白表达的影响.结果:老年大鼠肝脏p16、p21、cyclin D1 mRNA转录和蛋白的表达增加;PCNA、cyclin E mRNA转录和蛋白的表达降低.与老年大鼠比较,益气、活血方药可下调老年大鼠肝脏cyclin D1 mRNA转录和蛋白表达,上调促进增殖基因cyclin E mRNA转录和蛋白表达,但对p16、p21和PCNA的调节作用不明显.结论:益气、活血方药主要通过调控cyclin D1和cyclin E mRNA转录和蛋白表达而促进细胞增殖.     

益气化瘀补肾方对大鼠肾虚型颈椎病的作用机制

目的：研究益气化瘀补肾方对大鼠肾虚型颈椎病的作用机制。方法：选择3月龄雌性SPF级SD大鼠30只，随机分为正常对照组、肾虚型颈椎病模型组（简称模型组）和益气化瘀补肾方组，每组10只。除正常对照组不施加任何手术外，采用由动静力失衡大鼠颈椎间盘退变模型和去卵巢肾虚模型复合法建立肾虚型颈椎病模型。手术3个月后，益气化瘀补肾方组大鼠予益气化瘀补肾方灌胃治疗1个月。放射免疫法检测血清雌二醇（estradiol，E2和血浆环磷酸腺苷（cyclic adenosine monophosphate，cAMP）、环磷酸鸟苷（cyclic guanosine monophosphate，cGMP）含量；锥板法检测血液流变学；流式细胞仪检测血小板表面α-颗粒膜糖蛋白（alpha—granular membrane protein，CD62p）表达；HE染色观察颈椎间盘组织病理学改变，免疫组织化学检测颈椎间盘Ⅱ型胶原蛋白表达情况，并通过实时荧光定量聚合酶链式反应法检测聚集蛋白聚糖（aggrecan-1，Agcl）、Ⅱ型前胶原基因（type Ⅱ procollagen gene，Col2al）、基质金属蛋白酶抑制剂-1（tissue inhibitor of metalloproteinase-1，TIMP-1）、基质金属蛋白酶-13（matrix metalloproteinase-13，MMP-13）mRNA表达。结果：与模型组比较，益气化瘀补肾方组大鼠血清E2含量升高（P〈0．05）；血浆cAMP、cGMP含量有所升高，但差异无统计学意义；全血低切黏度、低切还原黏度和CD62p表达百分率下降（Pd0．05或P〈0．01）；颈椎间盘退变有所改善，Miyamoto评分下降（P〈0．05），11型胶原表达增加；Agcl、Col2al和TIMP-1 mRNA表达增加（P〈0．05，P〈0．01），MMP-13 mRNA表达下降（Pd0．01）。结论：益气化瘀补肾方可通过调节免疫系统、代谢系统、凝血系统和内分泌系统等指标，改善肾虚型颈椎病证候指标，并延缓椎间盘退变。     

益气化瘀补肾方治疗气虚血瘀肾虚型颈椎病大鼠的机制研究

目的：研究益气化瘀补肾方治疗气虚血瘀肾虚型颈椎病大鼠的作用机制。方法：选择3月龄雌性SPF级SD大鼠30只,随机分为正常组、模型组和益气化瘀补肾方组,每组10只。气虚血瘀肾虚型颈椎病模型通过病、证模型复合而成。益气化瘀补肾方组采用益气化瘀补肾方治疗1个月。通过放射免疫学、组织病理学、免疫组织化学和分子生物学等技术研究益气化瘀补肾方的作用机制。结果：与正常组比较,模型组动物出现精神萎靡、少动,舌质、尾色瘀紫,体质量减轻,子宫及附件质量降低,环磷酸腺苷与环磷酸乌苷及其比值无明显差异,血黏度、血小板表面α-颗粒膜糖蛋白（alpha-granular membraneprotein,CD62p）增高,血清雌二醇（estradiol,E2）降低。益气化瘀补肾方组与模型组比较,除子宫及附件质量外,上述指标均有不同程度改善。HE染色显示模型组颈椎间盘高度降低,纤维环出现裂隙,胶原纤维排列紊乱,髓核减少,软骨终板变薄;益气化瘀补肾方组椎间盘高度正常,纤维环排列稍紊乱,髓核结构良好,软骨终板变化不明显。与正常组比较,模型组Ⅱ型胶原表达减少;益气化瘀补肾方组Ⅱ型胶原在纤维环的表达比模型组有所增加。模型组与正常组比较Ⅱ型前胶原基因和基质金属蛋白酶抑制剂-1（tissuein—hibitorofmetallopr。teinase1,TIMP1））基因表达降低（P〈0．01）,益气化瘀补肾方组与模型组比较,Ⅱ型前胶原基因和TIMP-1基因表达增高,基质金属蛋白酶-13基因表达降低（P〈0．05,P〈0．01）。结论：益气化瘀补肾方通过调节免疫、凝血和内分泌系统等改善模型动物气虚血瘀肾虚状态,通过调节椎间盘细胞外基质以及相关金属蛋白酶延缓椎间盘退变。     

中药止喘胶囊对哮喘大鼠糖皮质激素受体及皮质酮的影响

目的 观察中药止喘胶囊对哮喘大鼠外周血白细胞和肺组织中糖皮质激素受体（ＧＣＲ）、血浆皮质酮、血浆及肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中白细胞介素－４,５（ＩＬ－４,５）的影响,以探讨补肾健脾固本法治疗哮喘的作用机制。方法 采用放射性配基结合法、放射免疫法、酶联免疫法测定各组大鼠外周血白细胞和肺组织中 ＧＣＲ、血浆皮质酮、血浆及 ＢＡＬＦ中 ＩＬ－４,５含量。结果 哮喘模型组血浆皮质酮含量、外周血白细胞ＧＣＲ结合位点和肺组织 ＧＣＲ的 ＲＴ值均明显低于正常组（均Ｐ＜０．０１）,中药止喘胶囊组血浆皮质酮含量、肺组织ＧＣＲ的ＲＴ值显著高于正常组（Ｐ＜０．０５,Ｐ＜０.０１）;哮喘模型组血浆和 ＢＡＬＦ中Ｌ－４,ＩＬ－５含量均明显高于正常组（均 Ｐ＜０．０１）,其余各治疗组均明显下降（均 Ｐ＜０．０１）,其中中西药结合组显著低于中药组、西药组（均Ｐ＜０．０１）,接近正常组（Ｐ＞０．０５）。结论 止喘胶囊以补肾健脾固本治法通过阻止哮喘大鼠外周血白细胞和肺组织ＧＣＲ结合位点的下降,上调内源性皮质酮水平,改善下丘脑－垂体－肾上腺功能,下调血浆和 ＢＡＬＦ中 ＩＬ－４,５,从而减轻哮喘气道炎症,止喘胶囊与吸入激素有一定程度的协同作用。     

补肾丹对D-gal致衰老模型大鼠细胞因子IL-2、IL-6的影响

目的:研究补肾丹对亚急性衰老模型大鼠的调节免疫功能的作用。方法:清洁级健康Wistar大鼠,雄性,体重200±20g,77只。随机分为7组:正常对照组、金匮肾气丸组、补肾丹高、中、低剂量组、维生素E组、模型组。采用D-半乳糖致亚急性衰老法,除空白组外,各组腹腔注射D-gal(250mg/kg.d)60d,造成大鼠拟衰老动物模型。正常对照组和模型对照组给等体积的生理盐水,中药对照组同时给予金匮肾气丸0.72g/kg.d灌胃,补肾丹高、中、低剂量组同时分别给予相当于生药2.7g/kg.d、1.35g/kg.d、0.675g/kg.d灌胃。西药对照组每日灌服维生素E0.027g/kg.d,每日1次,共60d。观察血清中白介素2(IL-2)和白介素6(IL-6)的水平变化。结论:补肾丹各剂量组可不同程度升高D-gal所致衰老模型大鼠的IL-2,降低IL-6的含量,从而增强机体免疫功能,起到延缓衰老,增强老年机体的抗病能力的作用。     

益气化瘀补肾方对大鼠血瘀型颈椎病作用机制研究

目的：探讨益气化瘀补肾方对血瘀型颈椎病大鼠的作用机制。方法：选择3月龄雌性SPF级SD大鼠30只,随机分为正常组、血瘀型颈椎病模型组（模型组）和益气化瘀补肾方组（治疗组）,每组10只。正常组不施加任何手术,其余两组采用动静力失衡性大鼠颈椎间盘退变模型复合肾上腺皮质激素和肾上腺素法建立血瘀型颈椎病模型。手术3个月后,治疗组大鼠予益气化瘀补。肾方灌胃治疗1个月。通过放射免疫学、颈椎间盘组织病理学、免疫组织化学、分子生物学等技术研究益气化瘀补肾方作用机制。结果：与正常组相比,模型组动物出现舌质瘀紫、尾色瘀青,血黏度、CD62p增高,cAMP增高,颈椎间盘退变,Ⅱ型胶原表达减少;治疗组与模型组比较,血浆黏度、CD62p、三酰甘油、cAMP降低（P〈0．05或P〈0．01）;颈椎间盘退变有所改善,Miyamoto评分下降（P〈0．05）,Ⅱ型胶原表达增加（P〈0．01）,Agcl、Col2al、TIMP-1表达增高（P〈0．05）。结论：益气化瘀补肾方可通过免疫系统、代谢系统、凝血系统、内分泌系统等改善血瘀型颈椎病大鼠的证候指标,延缓椎间盘退变。     

益气化瘀补肾方对大鼠气虚型颈椎病的作用机制研究

目的：探讨益气化瘀补肾方对气虚型颈椎病大鼠的作用机制。方法：选择3月龄雌性SPF级SD大鼠30只,随机分为正常组、气虚型颈椎病模型组（模型组）和益气化瘀补肾方组（治疗组）,每组10只。正常组不施加任何手术,气虚型颈椎病模型采用动静力失衡性大鼠颈椎间盘退变模型复合疲劳加饥饱失常法气虚模型建立,手术3个月后治疗组大鼠予益气化瘀补肾方灌胃治疗1个月。通过放射免疫学、颈椎间盘组织病理学、免疫组织化学、分子生物学等技术研究益气化瘀补肾方作用机制。结果：模型组动物出现精神委靡、少动、体质量下降等气虚表现,cGMP降低,cAMP／cGMP增高,三酰甘油和CD62p增高,E2降低,颈椎间盘退变,Ⅱ型胶原减少,Agc1、Col2a1表达减少,MMP-13表达增高;治疗组与模型组相比,动物精神状态恢复稍快,cAMP／cGMP增高,三酰甘油和CD62p降低,颈椎间盘退变有所改善,Ⅱ型胶原增加,C012a1和TIMP-1表达增高。结论：益气化瘀补肾方通过免疫、代谢、凝血等系统改善证候指标并延缓椎间盘退变。     

降糖益肾方对2型糖尿病肾病大鼠影响的实验研究

目的：观察降糖益肾方对2型糖尿病肾病大鼠的药效作用。方法：采用电镜、光镜及生化检查的方法观察降糖益肾方对2型糖尿病大鼠的肾脏结构及功能的影响。结果：降糖益肾方对2h后血糖有显著降低作用（P＜0．05），能有效抑制肾小球系膜基质的增生，减轻血管腔狭窄，降低肾小球滤过率（GFR）、尿微量白蛋白以及β2－微球蛋白（β2－－MG）的排泄率（PM＜0．05），改善高血脂状态，降低血清甘油三酯（TG）、血清总胆固醇（TC）含量（P＜0．05），降低血栓素B2（TXB2）与T／K比值（P＜0．05），改善微血管循环障碍的状态。结论：降糖益肾方可通过参与调节糖代谢、脂类代 及改善血流动力学使肾小球高灌注状态得到改善。     

补肾方药对皮质酮损伤型大鼠海马神经细胞形态结构的影响

目的：探讨补肾方药左归丸与右归丸含药鼠血清对皮质酮（CORT）损伤型大鼠海马病理细胞模型形态结构的影响。方法：以新生SD乳鼠的海马组织为材料,原代培养海马神经细胞;以10^-4mol／LCORT处理培养的细胞制作大鼠海马病理细胞模型,并用RU38486进行拮抗。采用NSE和Nissl染色、FDA／PI、SYTO-13／PI双重染色法等观察模型细胞形态结构变化及左归丸与右归丸含药鼠血清的保护作用。结果：与正常对照组比较,加入1014mol／LCORT以处理培养的细胞,可使海马神经细胞明显受损,死细胞增多;左归丸与右归丸含药鼠血清均可使蓝色荧光的活细胞显著增多,呈红色荧光的死亡细胞明显减少。结论：加入10^-4mol／LCORT处理神经细胞可以制作海马病理细胞模型,补肾方药左归丸或右归丸含药血清对CORT损伤型海马病理细胞模型有明显的保护作用。     

补肾益气利咽方治疗慢性咽炎38例

慢性咽炎属于中医学虚火喉痹的范畴,笔者自2004年以来,用自拟补肾益气利咽方治疗慢性咽炎38例,疗效满意,报道如下:1临床资料76例患者均来自门诊,其中男40例,女36例;年龄最大70岁,最小23岁;病程最长5年以上,最短3个月,按病人就诊先后顺序随机进入治疗组和对照组,治疗组38例,对照     

补肾通脉方对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的影响

为观察补肾通脉方对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的影响，采用链脲佐菌素（STZ）静脉注射（30mg/kg)并给予高热量饮食的方法复制型糖尿病大鼠模型，以补肾通脉方、二甲双胍分别进行治疗10周，测量体重，空腹血糖、胰岛素、胰岛素敏感指数，血脂等指标，结果表明：模型组体 重、血脂高于正常对照组，胰岛素敏感指数明显低于正常对照组；与模型组比，补肾通脉方、二甲双胍组体重、血脂降低，胰岛素敏感指数升高。提示补肾通脉方具有增加胰岛素敏感性和降血脂作用。     

补肾通络疏肝方对衰老大鼠阴茎组织一氧化氮合成酶基因表达的影响

观察补肾通络疏肝方对衰老大鼠阴茎组织一氧化氮合成酶 (NOS)基因表达的影响。将衰老大鼠随机分为模型组、西地那非组、丙酸睾酮组、补肾通络疏肝方组与正常组 ( 2月龄大鼠 ) ,并应用PCR测定阴茎组织中NOSmRNA的表达 ,观察各组的变化。结果 :补肾通络疏肝方组阴茎组织中NOSmRNA的表达明显高于其他 4组 ,由多到少排定以下顺序 :西地那非组、正常组、丙酸睾酮组及模型组 ;补肾通络疏肝方组与西地那非组阴茎组织中NOSmRNA内控量较多 ,与其他各组比较有显著性差异 (P <0 .0 5)。结论 :补肾通络疏肝方有提高衰老大鼠阴茎组织中NOSmRNA表达的作用。     

补肾通络疏肝方对衰老大鼠阴茎组织转化生长因子β基因表达的影响

目的探讨衰老大鼠阴茎组织转化生长因子β(TGF-β)基因表达与补肾通络疏肝方在阴茎勃起中的关系。方法将32只雄性大鼠随机分为衰老组、补肾通络疏肝方组、丙酸睾酮组与对照组(2月龄大鼠),其中补肾通络疏肝方组和丙酸睾酮组分别给予补肾通络疏肝方及丙酸睾酮治疗,于24 d取阴茎组织,用PCR检测其TGF-βmRNA的表达。结果衰老组TGF-βmRNA的表达较其他3组增强,而表现TGF-βmRNA减弱的组,由少到多依次排定为对照组、丙酸睾酮组及补肾通络疏肝方组;对照组、丙酸睾酮组及补肾通络疏肝方组其TGF-βmRNA内控量较少,与衰老组比较有显著性差异(P<0.01),丙酸睾酮组及补肾通络疏肝方组之间无显著性差异(P>0.05)。结论补肾通络疏肝方可能通过调节TGF-βmRNA表达而在阴茎勃起中发挥重要作用。     

补肾通络疏肝方对去势大鼠阴茎组织转化生长因子β基因表达的影响

目的探讨补肾通络疏肝方在阴茎勃起中发挥作用的机制。方法将40只成年雄性大鼠随机分为对照组、去势组、补肾通络疏肝方组与丙酸睾酮组。后3组分别切除双侧睾丸,其中补肾通络疏肝方组和丙酸睾酮组在切除睾丸后给予中药及丙酸睾酮替代治疗,于术后3周取阴茎组织,用PCR检测其转化生长因子β(TGF-β)的基因表达。结果去势组TGF-βmRNA的表达较其他3组增强,而表现TGF-βmRNA减弱的组,由少到多排序为对照组、丙酸睾酮组及补肾通络疏肝方组;对照组、丙酸睾酮组及补肾通络疏肝方组TGF-βmRNA内控量较少,与去势组比较有显著性差异(P0.01),而丙酸睾酮组及补肾通络疏肝方组之间无显著性差异(P0.05)。结论补肾通络疏肝方可能通过调节TGF-βmRNA表达而在阴茎勃起中发挥重要作用。     

益气化痰祛瘀方对冠心病大鼠的保护作用

目的：研究益气化痰祛瘀方治疗冠心病（CHD）的相关作用机制。方法：将60只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、复方丹参滴丸对照组和益气化痰祛瘀方高、低剂量组,采用喂饲高脂饲料和腹腔注射垂体后叶素的方法复制冠心病大鼠模型,观察实验大鼠心电图ST段、血清TC、TG含量变化以及心肌和主动脉组织形态学改变。结果：益气化痰祛瘀方能纠正冠心病大鼠心电图ST段的异常改变,降低血清TC和TG含量,改善心肌和主动脉的病理损害。结论：益气化痰祛瘀方对冠心病大鼠具有明显的保护作用。