益气复生方联合5-Fu对人结肠癌多药耐药裸鼠皮下移植瘤的抑制作用

目的:探讨益气复生方联合5-氟脲嘧啶(5-Fu)对裸鼠移植性大肠癌实体瘤的抑制作用。方法:建立裸鼠人结肠癌皮下移植瘤耐药模型,随机分为模型组、阳性对照组(5-Fu组)及益气复生方低、中、高剂量联合5-Fu组。分别给予相应药物连续干预28 d后,每组随机取部分裸鼠脱臼处死,剥取肿瘤,计算抑瘤率,并检测肿瘤细胞凋亡情况及肿瘤组织内5-Fu含量;其余裸鼠正常摄食饮水,观察其生存期。结果:益气复生方低、中、高剂量联合组的抑瘤率和中位生存时间均明显高于阳性对照组(P0.05),且呈剂量依赖性,其中益气复生方高剂量联合组的抑瘤率与中位生存时间明显高于其他各组(P0.05);益气复生方干预后,肿瘤组织内5-Fu含量明显升高、肿瘤细胞凋亡率增加,并且随着益气复生方浓度的增加而增加,具有剂量依赖性。结论:益气复生方联合5-Fu可抑制人结肠癌多药耐药细胞裸鼠皮下移植瘤的生长,延长裸鼠的中位生存时间,且随着剂量的增加其作用增强。     

Runt相关转录因子3在人结肠癌HCT-116/5-FU耐药细胞株中的表达及其与耐药的相关性

目的 建立耐5-氟尿嘧啶(5-FU)的人结肠癌细胞株HCT-116/5-FU,初步探讨Runt相关转录因子3(RUNX3)与结直肠癌耐药的关系。方法 采用低浓度梯度递增联合大剂量间断冲击法建立人结肠癌耐药细胞株HCT-116/5-FU,CCK-8法检测5-FU对亲本株HCT-116及耐药株HCT-116/5-FU的半数抑制浓度(IC₅₀值),绘制细胞生长曲线,计算细胞群体倍增时间(TD);qRT-PCR和Western blot法检测亲本株HCT-116细胞及耐药株HCT-116/5-FU细胞中RUNX3、P糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)和肺耐药蛋白(LRP)的mRNA和蛋白表达。采用siRNA技术敲低HCT-116细胞中RUNX3的表达,分为RUNX3敲低组(si-RUNX3-1组、si-RUNX3-2组)和阴性对照组(si-NC组),qRT-PCR和Western blot法分别在mRNA水平和蛋白水平验证RUNX3的敲低效率;CCK-8法测定si-RUNX3组和si-NC组的IC₅₀值,Western blot法测定两组中P-gp、MRP1和LRP的表达情况。结果 成功构建稳定的人结肠癌耐药细胞株HCT-116/5-FU,耐药倍数为7.7倍;HCT-116/5-FU耐药细胞株群体TD较HCT-116亲本株明显延长(P<0.001),耐药细胞群体TD是亲本细胞的1.38倍(P=0.002),耐药株细胞形态发生变化。耐药细胞HCT-116/5-FU的RUNX3 mRNA表达水平较亲本细胞株HCT-116明显降低(P=0.048),P-gp(P=0.008)、MRP1(P=0.001)和LRP mRNA(P=0.001)表达水平较亲本细胞株HCT-116明显升高;耐药细胞HCT-116/5-FU的RUNX3蛋白质相对表达量较亲本细胞株HCT-116明显降低(P<0.001),P-gp、MRP1、LRP蛋白的相对表达量较亲本细胞株明显升高(P均<0.001)。成功构建了RUNX3低表达的HCT-116细胞模型,si-RUNX3-1组RUNX3 mRNA的表达与si-NC组相比差异无统计学意义(P=0.064),si-RUNX3-2组明显低于si-NC组(P=0.034);si-RUNX3-1组和si-RUNX3-2组RUNX3蛋白的表达量均明显低于si-NC组(P均<0.001),si-RUNX3-2组的敲低效率更高。选用si-RUNX3-2组完成后续实验,si-RUNX3组的IC₅₀值较si-NC组明显升高,下调RUNX3的表达能明显降低HCT-116细胞对5-FU的敏感性(P<0.001);si-RUNX3组的P-gp、MRP1和LRP蛋白相对表达量均明显高于si-NC组(P均<0.001)。结论 RUNX3表达下调能降低人结肠癌HCT-116细胞对5-FU的敏感性,可能与RUNX3表达的降低上调P-gp、MRP1和LRP等耐药蛋白表达,从而增加细胞的耐药性有关。     

异甘草酸镁对奥沙利铂在人胃癌裸鼠模型中抗肿瘤作用的影响研究

目的:探讨异甘草酸镁对奥沙利铂在人胃癌裸鼠模型中抗肿瘤作用的影响。方法:建立人胃癌SGC-7901细胞裸鼠皮下移植瘤模型,并随机分为高、中、低剂量异甘草酸镁(Mg IG)联合奥沙利铂(L-OHP)组,单纯L-OHP组,单纯Mg IG组和葡萄糖对照组6组,连续尾静脉注射给药14 d,停药24 h后处死裸鼠,称取移植瘤质量,测量移植瘤体积,分别计算质量抑瘤率、体积抑瘤率,用TENEL法检测移植瘤组织的细胞凋亡率,并检测裸鼠肝功等指标。结果:高、中、低剂量Mg IG联合L-OHP组以及单纯L-OHP组的体积抑瘤率和质量抑瘤率均高于葡萄糖对照组,差异有统计学意义(P<0.05);各剂量Mg IG联合L-OHP组的抑瘤率高于单纯L-OHP组,且呈剂量依赖性,差异有统计学意义(P<0.05);与单纯L-OHP组相比,不同剂量Mg IG联合L-OHP组ALT和AST水平均较低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:异甘草酸镁对奥沙利铂的抗肿瘤作用具有协同作用,并能够潜在改善药物性肝损伤。     

个体价值认同的社会主义核心价值观培育探析

目的 建立人结直肠癌耐奥沙利铂(L-OHP)细胞株,检测其多药耐药性并初步探讨可能的耐药机制。 方法 采用药物浓度梯度递增诱导法建立人结直肠癌耐L-OHP细胞株HCT-8/L-OHP。MTT法鉴定药敏性,并检测耐药细胞株的多药耐药性、生长曲线和细胞群体倍增时间。用光镜、电镜、流式细胞术等方法观察亲本细胞和耐药细胞的形态、周期及细胞凋亡。通过实时荧光定量PCR和Western-blot检测HOXB8基因和ABCC1(MRP or MRP1),ERCC1,P-gp,GST-π的mRNA及蛋白表达水平。 结果 建成了肠癌耐药细胞模型HCT-8/L-OHP,半抑制浓度(IC50)为62.33 μmol/L,耐药指数(RI)为10.78。耐药株细胞形态发生变化,代谢率降低,生物活力减弱。HCT-8/L-OHP细胞株具有耐药性,细胞增殖减慢。HCT-8/L-OHP细胞在G₂/M期的比例增多,在S期及G₀/G₁期的比例减少,相较于亲本细胞株,差别具有统计学意义(P<0.01); HCT-8/L-OHP细胞凋亡率低于HCT-8细胞。ABCC1(MRP or MRP1),ABCB1(P-gp)等耐药相关基因在耐药细胞株中高表达; HOXB8基因在HCT-8/L-OHP细胞中表达,较亲本细胞株表达明显升高,差别具有统计学意义(P<0.01)。 结论 成功构建了肠癌耐药细胞株HCT-8/L-OHP,耐药的分子机制可能是ABCC1(MRP or MRP1)及ABCB1(P-gp)等基因的表达升高。HOXB8基因过表达可能与人结直肠癌对L-OHP耐药的机制相关。     

氢质子磁共振频谱活体检测结肠癌耐药性的初步探讨

目的 探索1H-MRS活体检测结肠癌耐药性的可能性。方法 5只耐药(耐5-FU)与5只不耐药人类结肠癌SW480荷瘤裸鼠于肿瘤直径大于1.5cm时行1H-MRS检查,随后处死荷瘤鼠,切下肿瘤检测其PKC、P-gp、MRP1蛋白表达(Western Blot),观察肿瘤凋亡(TUNNEL法)。分析结肠癌耐药性与1H-MRS检测代谢物、肿瘤耐药基因表达、肿瘤凋亡的相关性。结果不耐药组人类结肠癌SW480裸鼠肿瘤的cho、lac、Lip及m I峰/cr面积比较耐药组人类结肠癌SW480/5-FU裸鼠增加,差别有统计学差异(P0.05)。耐药组PKC、P-gp、MRP1蛋白表达明显高于不耐药组,差别有统计学差异(P0.05)。在TUNNEL检测切片上,两组肿瘤组织均可见肿瘤细胞凋亡,两者差别无统计意义(P0.05)。肿瘤代谢物cho、Lac、Lip、m I/cr与肿瘤耐药性呈正相关性;cho面积与肿瘤PKC表达光密度呈正相关,与肿瘤Pgp表达光密度呈正相关。结论 肿瘤代谢物cho、lac、Lip的改变有可能有助于利用1H-MRS活体检测结肠癌耐药性改变。     

化痰散结方对 MCF-7／ADM裸鼠移植瘤逆转耐药机理研究

目的：探究化痰散结方对乳腺癌MCF-7/ADM移植瘤的逆转耐药机制。方法制备荷瘤小鼠模型;设立生理盐水空白对照组、阿霉素组、阿霉素＋维拉帕米组、阿霉素＋中药低中高剂量组,观察肿瘤组织内阿霉素蓄积情况,用流式细胞仪（ FCM ）检测各组移植瘤耐药细胞P糖蛋白（ P-gp）表达情况。结果中药组及维拉帕米组均能减轻瘤重,提高抑瘤率,与生理盐水组及阿霉素组比较均有统计学意义（P＜0．05）,中药组及维拉帕米组均能够降低P-gp含量、提高细胞内阿霉素浓度,其中高剂量中药组对细胞内阿霉素、P-gp的影响较维拉帕米组差异有显著性（ P＜0．05）。结论化痰散结方能逆转阿霉素耐药,增减肿瘤组织中阿霉素含量,并呈剂量依赖性,同时降低P-gp的表达。     

苦参素及Mir-181a对人肝癌细胞耐药株HepG2/ADM裸鼠移植瘤中耐药蛋白P-gp的影响

目的探讨苦参素(oxymatrine,OM)及Mir-181a在体内环境中对人肝癌细胞耐药株HepG2/ADM裸鼠移植瘤中耐药蛋白P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的影响。方法选用人肝癌细胞耐药株HepG2/ADM细胞在裸鼠腋下接种,创建裸鼠皮下移植瘤模型。将42只雌性裸鼠随机分成6组(每组7只):miR-181amimic组、苦参素组、苦参素+miR-181amimic组、阿霉素组、mirna mimic NC组、空白对照组。药物干预18d后,取出瘤体,用公式计算肿瘤体积。HE染色法观察组织的细胞病变情况,免疫组化及Western blot法检测耐药指标P-gp蛋白的表达,实时荧光定量PCR检测P-gp对应耐药基因ABCB1表达的情况。结果药物干预18d后,与空白对照组相比,miR-181amimic组的P-gp蛋白及ABCB1基因的表达提高,而苦参素组的P-gp蛋白及ABCB1基因的表达降低;与miR-181amimic组相比,苦参素+miR-181amimic组P-gp蛋白及ABCB1基因的表达降低。结论苦参素在体内环境中不仅可以抑制人肝癌耐药移植瘤的生长,还可提高人肝癌耐药细胞对化学药物的敏感性,而miR-181a在体内环境中可以促进人肝癌耐药移植瘤的生长,提高人肝癌耐药细胞的多药耐药性。     

苦参素逆转结肠癌细胞多药耐药作用及机制研究

目的探讨苦参素对人结肠癌耐长春新碱细胞(HCT-8/VCR)对多种化疗药敏感性的影响及其可能的作用机制。方法使用MTT法检测苦参素对结肠癌细胞增殖抑制作用,鉴定HCT-8/VCR细胞的多药耐药性及苦参素作用前后细胞耐药性的变化,倒置显微镜下观察苦参素作用前后细胞的形态改变,real-time PCR法检测ABCB1mRNA的表达变化,Western blot法检测苦参素作用前后P-糖蛋白(P-gp)蛋白表达变化,流式细胞术检测细胞内罗丹明123(Rho123)的荧光强度。结果 HCT-8/VCR细胞对长春新碱、顺铂及5-氟尿嘧啶(5-Fluorouracil,5-Fu)均呈现出不同程度的耐药,耐药倍数分别为12.52、3.73、6.34,即为多药耐药细胞。苦参素可抑制HCT-8/VCR及其亲本细胞HCT-8的增殖,呈浓度依赖性。经1 mg/ml苦参素作用于HCT-8/VCR细胞后,各化疗药IC50均降低,逆转倍数分别为3.44、2.15、2.04,ABCB1mRNA及P-gp蛋白表达均较用药前降低(P<0.05或P<0.001),细胞内Rho123外排减少,荧光强度增加(P<0.05)。结论苦参素可逆转结肠癌细胞的多药耐药性,其机制可能与抑制P-gp的表达,提高细胞内药物浓度有关。     

化痰消瘤方对lewis肺癌荷瘤小鼠瘤组织中P-gp、GSH表达的影响

目的:观察化痰消瘤方对lewis肺癌荷瘤小鼠瘤组织中P-gp、GSH表达的影响,探讨其抗多药耐药的作用机制及原理。方法:制备lewis细胞匀浆液,接种40只C57BL/6小鼠,随机分为空白组、环磷酰胺组、中药组、中药联合环磷酰胺组。观察15 d后,处死,剥离瘤组织,计算各用药组的抑瘤率;采用Elisa及RT-PCR检测方法,检测各组荷瘤小鼠瘤组织中P-gp、GSH表达水平的差异,评估其抗肿瘤多药耐药的疗效。结果:与空白组比较,各用药组中荷瘤小鼠体质量变化不明显(P0.05),各用药组荷瘤小鼠平均瘤体质量明显降低,差异有统计学意义(P0.01);与环磷酰胺组比较,中药联合环磷酰胺组及中药组的抑瘤率较高,差异有统计学意义(P0.01);各用药组小鼠瘤组织中P-gp及GSH表达水平均低于空白组,差异有统计学意义(P0.01);中药组及中药联合环磷酰胺组中P-gp的表达均低于环磷酰胺组,差异有统计学意义(P0.01);中药联合环磷酰胺组中GSH的表达低于环磷酰胺组,差异有统计学意义(P0.01)。结论:化痰消瘤方可明显下调lewis肺癌荷瘤小鼠瘤组织中P-gp、GSH的表达水平,这可能是其逆转多药耐药的机制之一。     

COX-2选择性抑制剂联合奥沙利铂对结肠癌HCT-8细胞增殖和凋亡的影响

目的观察环氧合酶-2(COX-2)选择性抑制剂NS-398联合奥沙利铂(L-OHP)对结肠癌HCT-8细胞增殖和凋亡的影响,比较NS-398联合L-OHP与单独应用L-OHP对结肠癌HCT-8细胞的杀伤效应。方法 CCK-8法检测不同浓度的L-OHP(1.25、2.50、5.00、10.00及20.00μmol/L)单独作用及L-OHP联合NS-398(20.00及80.00μmol/L)作用HCT-8细胞24 h的细胞增殖抑制率。分别应用流式细胞术检测细胞早期凋亡率;Hoechst33258染色观察细胞凋亡形态学改变;分光光度法检测Caspase-3的活性。结果细胞增殖抑制实验表明L-OHP、NS-398对HCT-8细胞有剂量依赖性抑制增殖作用(P<0.05)。NS-398联合L-OHP用药组细胞增殖抑制率明显高于同浓度L-OHP单用组,且随着添加的NS-398剂量的增加而增加,联合用药组对HCT-8细胞的诱导凋亡效应明显高于L-OHP单药组,二者具有协同效应。两药均能提高Caspase-3的活性,联合用药组中Caspase-3的活性显著高于L-OHP组和NS-398组(P<0.01)。结论 NS-398和L-OHP均能抑制HCT-8细胞的增殖及诱导凋亡,NS-398能够显著增强L-OHP的癌细胞增殖抑制及诱导凋亡作用。     

姜黄素逆转结肠癌裸鼠移植瘤多药耐药的研究

目的探讨姜黄素体内对人结肠癌耐长春新碱细胞株HCT-8/VCR多药耐药的逆转作用及其可能机制。方法将HCT-8/VCR种植于裸鼠皮下,建立肿瘤耐药模型。移植瘤裸鼠20只依据治疗方法的不同分为对照组(PBS)、长春新碱(Vincristine,VCR;2 mg/kg)组、姜黄素(50 mg/kg)组、姜黄素联合VCR(50 mg/kg姜黄素+2 mg/kg VCR)4组,每组5只。治疗2周后收集标本,称量各组瘤体质量,采用RT-PCR、Western blot分别检测瘤组织内MDR1 mRNA、survivin mRNA和P-gp、survivin蛋白的表达水平,HE染色观察瘤组织细胞形态学变化,评估姜黄素在不同处理因素中逆转肿瘤多药耐药的效果。结果姜黄素联合VCR能显著抑制瘤体的生长,姜黄素联合VCR组瘤质量[(0.42±0.23)g]明显低于对照组[(1.21±0.25)g]、VCR组[(1.13±0.27)g]、姜黄素组[(0.75±0.27)g](P<0.05)。RT-PCR、Western blot结果显示姜黄素能够下调MDR1 mRNA、survivin mRNA和P-gp、survivin蛋白的表达,姜黄素联合VCR组MDR1 mRNA(0.18±0.05)、survivin mRNA(0.63±0.04)、P-gp(0.15±0.02)、survivin(0.31±0.09)和姜黄素组MDR1 mRNA(0.39±0.11)、survivinmRNA(0.80±0.12)和P-gp(0.34±0.07)、survivin(0.40±0.11)蛋白表达明显低于对照组MDR1 mRNA(0.99±0.23)和survivin mRNA(1.19±0.32)表达,以及P-gp(0.71±0.23)、survivin(0.88±0.15)蛋白表达(P<0.05)。HE病理切片显示姜黄素组和姜黄素联合VCR组较其他2组有较多的淋巴细胞浸润,核固缩较多,核分裂相少,坏死更为广泛。结论多种机制参与姜黄素体内逆转肿瘤多药耐药,姜黄素可能通过下调MDR1、survivin mRNA表达和P-gp、survivin蛋白的表达,促进肿瘤细胞凋亡等多种途径逆转肿瘤的多药耐药性。     

半夏泻心汤含药血清对结肠癌细胞增殖及裸鼠体内人结肠癌移植瘤生长抑制作用研究

目的:分析半夏泻心汤含药血清对结肠癌细胞增殖及裸鼠体内人结肠癌移植瘤生长抑制影响。方法:取结肠癌细胞株SW620,制备半夏泻心含量血清对SW620细胞增殖抑制影响,选取BALB/c雌性裸鼠80只,随机数字表法将裸鼠分成5组,依次为对照组,模型组,半夏泻心汤低、中、高剂量组,每组各15只,制备结肠癌移植瘤模型,造模后半夏泻心汤低、中、高剂量组分别灌胃剂量为2、4、8 mL/kg药液,模型组裸鼠灌胃8 mL/kg生理盐水,1次/d,连续灌胃7d。观察裸鼠瘤体质量与体积,碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血管生成素2(Ang-2)及血管内皮生长因子(VEGF)含量变化和肿瘤组织内VEGFR2 mRNA表达状况。结果:和模型组相比,半夏泻心汤低、中、高剂量组裸鼠肿瘤体积、肿瘤质量下降,差异均有统计学意义(P0.05),半夏泻心汤低、中、高剂量组抑瘤率分别为31.89%、47.83%、72.46%;和正常组相比,模型组大鼠血清bFGF、Ang-2及VEGF含量上升;和模型组相比,半夏泻心汤低、中、高剂量组裸鼠血清bFGF、Ang-2及VEGF含量下降,差异均有统计学意义(P0.05);和模型组相比,半夏泻心汤低、中、高剂量组裸鼠VEGFR2 mRNA相对表达量下降,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:半夏泻心汤对人结肠癌SW620细胞裸鼠移植瘤生长有抑制作用,破坏肿瘤组织生长微环境,VEGFR2表达降低对肿瘤的生长起到抑制作用。     

不同剂量消瘀散结抑癌灌肠剂对人前列腺癌移植瘤裸鼠的影响

目的:通过建立人前列腺癌移植瘤裸鼠模型,观察不同剂量消瘀散结抑癌灌肠剂对人前列腺癌裸鼠的影响。方法:使用皮下接种法将体外培养的人前列腺癌PC3细胞悬液对裸鼠进行注射造模,将59只荷瘤裸鼠随机分为消瘀散结抑癌灌肠剂低、中、高剂量组4组,每组15只。接种成功10 d后开始,消瘀散结抑癌灌肠剂低、中、高剂量组用方剂水煎剂灌肠,隔天1次,持续30 d,消瘀散结抑癌灌肠剂低剂量组0.44 g/mL、中剂量组0.87 g/mL、高剂量组1.74 g/mL,对照组给予等剂量生理盐水。实验过程中观察裸鼠全身状况,定期测量摄食量变化,裸鼠体质量,给药结束后取出移植瘤计算抑瘤率。结果:消瘀散结抑癌灌肠剂中、高剂量组裸鼠肿瘤体积与对照组比较差异具有统计学意义(P0.05);消瘀散结抑癌灌肠剂低、中、高剂量组抑瘤率分别为6.20%、21.71%、23.26%,抑瘤率与药物浓度正相关;消瘀散结抑癌灌肠剂低、中、高剂量组裸鼠体质量与对照组比较差异具有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论:裸鼠移植瘤瘤体增长受到消瘀散结抑癌灌肠剂抑制,抑瘤率与药物浓度成正比,灌肠剂可以提高荷瘤裸鼠的生存质量,影响其体质量和摄食量变化,二者与药物浓度有密切关系。     

多烯磷脂酰胆碱对奥沙利铂治疗人胃癌裸鼠模型效果影响及其机制

目的 探讨人胃癌裸鼠模型中不同剂量多烯磷脂酰胆碱(易善复)对奥沙利铂治疗效果的影响及其机制.方法 将人胃癌细胞SGC-7901接种于裸鼠皮下,建立人胃癌裸鼠皮下移植瘤模型.随机分为6组:葡萄糖对照组、奥沙利铂组、易善复组及高、中、低剂量易善复联合奥沙利铂组.连续给药2周,停药24 h后处死裸鼠,称取瘤质量,计算抑瘤率,并检测用药后裸鼠的血常规及肝肾功能,检测瘤组织中超氧化物歧化酶(SOD)含量,流式细胞仪测定细胞周期,免疫组化法测定半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、错配切除修复蛋白1(ERCC-1)和谷胱甘肽巯基转移酶(GST-π)的表达.结果 与对照组比较,奥沙利铂有明显抑制肿瘤生长的作用,易善复不能抑制肿瘤生长,各剂量易善复联合奥沙利铂组可抑制肿瘤生长,但与奥沙利铂组比较抑瘤率低;各剂量易善复联合奥沙利铂组随易善复浓度升高,SOD水平升高,caspase-3、ERCC-1和GST-π的表达下降.结论 易善复对奥沙利铂化疗疗效有拮抗作用,且呈剂量依赖性,可能与调节caspase-3、ERCC-1和GST-π表达有关.     

肠胃清对裸鼠结肠癌皮下移植瘤化疗的减毒作用

目的:研究肠胃清对裸鼠结肠癌皮下移植瘤奥沙利铂(L-OHP)化疗的减毒作用。方法:构建裸鼠人结肠癌细胞HCT116皮下移植瘤模型。造模后裸鼠分为空白组、L-OHP组、肠胃清组、肠胃清联合L-OHP组(联合组),每组10只,分别用0.9%Na Cl溶液、L-OHP、肠胃清、肠胃清联合L-OHP干预30 d。观察各组裸鼠体质量的变化,检测裸鼠脾脏质量,计算脾脏指数;检测裸鼠肝功能[天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)],肾功能[尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)],心功能[肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)]的水平。结果:L-OHP组裸鼠体质量减轻18.1%,较空白组明显减轻(P0.01);与L-OHP组比较,肠胃清组及联合组裸鼠体质量下降减少,差异具有统计学意义(P0.05)。各组血清AST、ALT、SCr、BUN水平差异无统计学意义(P0.05);L-OHP组CK、LDH水平较空白组明显升高(P0.05,P0.01);肠胃清组及联合组CK、LDH水平较L-OHP组明显降低,差异有统计学意义(P0.05,P0.01)。L-OHP组脾脏指数较空白组明显降低(P0.01);与L-OHP组比较,肠胃清组及联合组裸鼠脾脏指数明显增加,差异具有统计学意义(P0.01)。结论:L-OHP对裸鼠副作用较大,肠胃清联合L-OHP后可减轻L-OHP化疗的毒副作用。     

复方浙贝颗粒联合阿霉素对K562/A02移植瘤抑瘤率影响研究

目的观察复方浙贝颗粒联合阿霉素对多药耐药细胞K562/A02裸鼠移植瘤抑制率的影响。方法将多药耐药K562/A02细胞接种于BALB/c-nu裸鼠腋前皮下构建移植瘤模型,分别测实验各组肿瘤体积,实验结束后处死小鼠,剥离肿瘤称重,并依据公式计算抑瘤率。结果复方浙贝颗粒各剂量组的肿瘤、瘤重与空白对照组比较,有统计学意义（P＆lt;0.05）;复方浙贝颗粒高、中剂量组肿瘤体积、瘤重与阿霉素对照组比较,有统计学意义（P＆lt;0.05）。结论复方浙贝颗粒（高、中剂量）伍用阿霉素能够明显增加阿霉素对多药耐药细胞（K562/A02）移植瘤杀伤的敏感性。     

健脾解毒方对人胃癌裸鼠皮下移植瘤微血管生成的影响

目的:探讨健脾解毒方对人胃癌裸鼠皮下移植瘤微血管生成的抑制作用。方法:通过接种人胃癌MKN45细胞建立裸鼠人胃癌移植瘤模型。将60只荷瘤裸鼠随机分为模型组、5-氟尿嘧啶(5-Fu)组及健脾解毒方低、中、高剂量组,每组12只,各组分别给予生理盐水、5-Fu(30 mg/kg,ip×5,qd)及不同浓度的健脾解毒方醇提物(250、500、1 000 mg·kg~(-1)·d~(-1),21 d)干预。给药21 d后,各组随机处死6只,眼球取血并摘除瘤体,测量瘤体大小和质量,并用免疫组织化学法检测瘤体的微血管密度(MVD)、ELISA法检测血清中血管内皮生长因子(VEGF)的表达;剩余6只观察荷瘤鼠生存时间。结果:与模型组比较,各药物干预组的瘤体质量均有不同程度减轻(P0.01)、荷瘤鼠中位生存时间明显延长(P0.01),其中健脾解毒方中、高剂量组和5-Fu组在瘤体质量、抑瘤率及荷瘤鼠中位生存时间、生命延长率方面均优于健脾解毒方低剂量组(P0.01),且健脾解毒方高剂量组与5-Fu组的作用均无统计学差异(P0.05)。免疫组化结果显示,健脾解毒方能够以剂量依赖性方式下调肿瘤MVD表达,与模型组比较差异显著(P0.01);同时,健脾解毒方能显著下调裸鼠血清中VEGF表达水平(P0.01)。结论:健脾解毒方能够抑制裸鼠人胃癌移植瘤生长、延长生存期,并对血清VEGF表达及肿瘤微血管生成有抑制作用。     

索拉菲尼对人肾癌裸鼠移植肿瘤生长的抑制作用

目的 建立人肾癌裸鼠移植肿瘤模型,观察不同剂量索拉菲尼对移植肿瘤生长的抑制作用.方法 BALB/c裸鼠经皮下接种人肾透明细胞癌皮肤转移细胞(Caki-1)建立荷Caki-1裸鼠肿瘤模型.细胞接种1周后,采用小动物18氟-氟代脱氧葡萄糖正电子发射断层显像/X线计算机体层扫描(18F-FDG PET/CT)技术评价实体肿瘤模型.选取肿瘤生长情况接近的荷瘤裸鼠18只,随机分为对照组和索拉菲尼低、高剂量组(n=6),于细胞接种后第35天处死动物,测量各组荷瘤裸鼠的体质量及肿瘤体积和质量,观察移植肿瘤的组织学改变.另选取肿瘤生长情况接近的荷瘤裸鼠15只进行如上分组(n=5),预设观察期100 d,比较存活率.结果 荷瘤裸鼠肿瘤组织18F-FDG吸收代谢水平高于正常组织.与对照组比较,索拉菲尼低、高剂量组荷瘤裸鼠的肿瘤生长均被明显抑制,各组间肿瘤体积和质量比较差异均有统计学意义(P＜0.05).索拉菲尼高剂量组裸鼠的体质量显著低于对照组和索拉菲尼低剂量组(P＜0.05).索拉菲尼低、高剂量组荷瘤裸鼠的存活率显著高于对照组(P＜0.05).结论 小动物18F-FDG PET/CT可用于评价肾癌细胞在宿主体内的生长状况,索拉菲尼对人肾癌裸鼠皮下移植肿瘤模型中肾癌细胞的生长具有显著抑制作用.     

竹节香附素A对耐奥沙利铂肠癌细胞株的作用及机制研究

目的 探讨竹节香附素A(RA)对人结肠癌耐奥沙利铂细胞株HCT116/L-OHP的逆转作用及其可能机制.方法 四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞凋亡率;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测caspase-3、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)、耐多药基因1(MDR1)等基因的表达;免疫荧光试验及蛋白免疫印迹(WB)检测Cleaved-caspase-3、Cleaved-PARP、P-gp、IκB-α、P65蛋白的表达情况.结果 RA可增加HCT116/L-OHP细胞株对奥沙利铂的敏感性,两药联合后的半数抑制浓度(IC50)从原来的(234.12±6.13)μg/mL降低至(140.45±2.25)μg/mL,耐药逆转倍数约为1.67,差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞术显示,单用奥沙利铂时,细胞凋亡率为20.5％,而联合RA后,细胞凋亡率增加至34.4％,差异有统计学意义(P<0.01);RT-PCR及WB结果显示,凋亡关键因子caspase-3、PARP在联合组中表达较单用奥沙利铂组增加;耐药蛋白基因MDR-1及其编码蛋白P-gp在联合组中的表达较单药奥沙利铂组减少;此外,WB结果还显示,核因子-κB(NF-κB)信号通路中IκB-α、P65在联合组中的表达较单药组减少.结论 RA可增加结肠癌耐奥沙利铂细胞株对奥沙利铂的敏感性可能与调节NF-κB信号通路减少P-gp的表达有关.     

基于Wnt/β-catenin信号通路探讨复方土贝母对裸鼠乳腺癌移植瘤的影响

[目的]研究复方土贝母对裸鼠乳腺癌移植瘤生长以及对Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的影响。[方法]40只4～5周龄雌性BALB/C裸鼠皮下接种1×10~7/mL MCF-7细胞悬液0.2mL/只,造模后随机分为荷瘤对照组、复方土贝母低、中、高剂量组。复方土贝母各剂量组分别以0.5、1.0、2.0g·m L~(-1)的复方土贝母连续灌胃30d,对照组予0.9%氯化钠溶液灌胃,灌胃容积均为0.6mL/20g。所有小鼠第30天处死,测量各组移植瘤体积,并计算抑瘤率。实时荧光定量PCR检测β-连环蛋白(β-catenin)、E-钙粘蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)mRNA表达水平,Western blot和免疫组化检测β-catenin、E-cadherin、Vimentin蛋白表达水平。[结果]复方土贝母低、中、高剂量组抑瘤率分别为10.56%、37.06%、33.17%,中、高剂量组移植瘤体积小于荷瘤对照组,差异有统计学意义(P0.05),复方土贝母各剂量组的β-catenin、Vimentin m RNA表达低于荷瘤对照组,E-cadherin mRNA表达高于荷瘤对照组,差异有统计学意义(P0.05)。中、高剂量组β-catenin、Vimentin蛋白表达低于荷瘤对照组,E-cadherin蛋白表达高于荷瘤对照组,差异有统计学意义(P0.05)。[结论]复方土贝母能抑制乳腺癌移植瘤的生长,可能与抑制肿瘤中β-catenin、Vimentin的表达,上调E-cadherin表达有关。