灵芝乙醇提取物抗肿瘤活性研究

目的:探究灵芝乙醇提取物体内外抗肿瘤的活性。方法:体外实验:采用6种人肿瘤细胞系(胰腺癌SW1990、肺癌A549、宫颈癌Hela、肝癌Hep G2、胃癌MKN45、乳腺癌MCF-7),用灵芝乙醇提取物处理肿瘤细胞,观察细胞生长形态、绘制生长曲线、进行MTT实验及平板集落形成实验。体内实验:采用裸鼠胰腺癌SW1990移植瘤模型,以灵芝乙醇提取物50、100、150mg/kg剂量灌胃,计算瘤体积、抑瘤率及脏器系数。结果:体外实验:灵芝乙醇提取物对胰腺癌SW1990、肺癌A549、宫颈癌Hela、肝癌Hep G2、胃癌MKN45、乳腺癌MCF-7细胞的半数抑制率分别为96.62、44.21、78.66、117.60、44.34、73.28μg/ml。体内实验:70%灵芝提取物50、100、150mg/kg剂量组抑瘤率分别为37.2%、39.2%、43.9%。结论:体外实验表明灵芝乙醇提取物对上述6种肿瘤细胞均具有抑制增殖的作用,且浓度在40μg/ml以上时抑制增殖的作用较强。体内实验表明灵芝乙醇提取物能抑制胰腺癌SW1990生长。     

松茸多糖体外抗肿瘤活性研究

目的:研究松茸多糖的体外抗肿瘤活性。方法:采用MTT法结合显微镜下细胞形态学观察的方法,实验考察了不同浓度的松茸多糖作用不同时间对人舌癌细胞Tca8113、人肝癌细胞HepG-2、人胰腺癌细胞HS766T、人宫颈癌细胞Hela、人乳腺癌细胞MCF-7的增殖抑制作用及细胞形态的改变。结果:松茸多糖在低浓度时对HepG-2、HS766T的生长影响较小,但对Tca8113、Hela和MCF-7的抑制作用明显,随着浓度升高对5种肿瘤细胞的抑制作用都随之增强,并呈现出一定的量效关系及时间依赖性,在100μg.mL-1作用72 h对上述5种肿瘤细胞最大抑制率分别为67.71%,74.89%,83.83%,75.57%,76.15%。从细胞形态改变上观察,松茸多糖对上述5种肿瘤细胞均能引起不同程度的细胞凋亡。结论:松茸多糖具有较广的抗瘤谱,对体外培养的细胞有直接的细胞毒作用,其作用机理有待进一步深入研究。     

中蒙药并头黄芩乙醇提取物体外抗肿瘤实验研究

目的:研究并头黄芩乙醇提取物对人宫颈癌细胞Hela细胞的体外抗肿瘤作用。方法:采用MTT法检测出并头黄芩乙醇提取物对Hela细胞增殖的抑制作用;ELISA检测Bax、Bcl-2蛋白表达的变化。结果:并头黄芩乙醇提取物可明显抑制肿瘤细胞的增殖;并头黄芩乙醇提取物对Hela细胞处理48h后,与对照组相比,并头黄芩乙醇提取物组Bax蛋白表达显著升高,Bcl-2蛋白表达显著降低(P0.05和P0.01)。结论:并头黄芩乙醇提取物体外对Hela细胞有抑制作用,其作用机制与诱导肿瘤细胞的凋亡有关。     

多蕊蛇菰甲醇提取物体外抗肿瘤活性研究

目的:研究多蕊蛇菰甲醇提取物的体外抗肿瘤活性。方法:采用MTT法检测多蕊蛇菰甲醇提取物对人肝癌细胞Bel-7402和宫颈癌细胞Hela生长增殖的影响。结果:多蕊蛇菰甲醇提取物对人肝癌细胞Bel-7402和宫颈癌细胞Hela的细胞毒性IC50值分别为22.77μg/m L和28.42μg/m L。结论:多蕊蛇菰甲醇提取物对人肝癌细胞Bel-7402和宫颈癌细胞Hela均有抑制作用,并呈现出剂量-效应关系;多蕊蛇菰甲醇提取物具有显著抗肿瘤活性。     

独角莲乙醇提取物体外抗肿瘤实验研究

目的：通过独角莲20%乙醇提取物对人胃腺癌MGC-803、肝癌Hep-2、肺癌A549、乳腺癌MCF-7细胞杀伤率、半数抑制浓度的测定,确定对独角莲20%乙醇提取物的最佳敏感瘤株并通过透射电镜观察药物作用后该肿瘤细胞形态的变化。方法：1.采用体外细胞培养技术用MTT法,检测药物对各肿瘤细胞的生长抑制作用。2.透射电镜观察药物作用96h的肿瘤细胞形态。结果：独角莲20%乙醇提取物对胃癌MGC-803、肝癌Hep-2、肺癌A549、乳腺癌MCF-7细胞的生长有抑制作用,与细胞作用72h时的IC50分别为（74.14±5.29）mg/mL、（81.61±6.14）mg/mL、（128.26±11.43）mg/mL、（120.26±9.46）mg/mL,与细胞作用48h时的IC50分别为（94.55±6.85）mg/mL、（108.94±8.69）mg/mL、（187.78±9.87）mg/mL、（280.54±14.51）mg/mL;透射电镜观察结果表明独角莲20%乙醇提取物能使MGC-803细胞发生凋亡。结论：独角莲20%乙醇提取物对胃癌MGC-803瘤株最敏感且可使该瘤细胞发生凋亡。     

蛴螬提取物诱导人肺癌A549细胞凋亡的机制研究

目的:观察蛴螬提取物对人肺癌A549细胞增殖的影响及其机制。方法:采用MTT法检测蛴螬提取物对人肺癌A549细胞的生长抑制率;用HE染色方法观测凋亡细胞的形态学变化;运用免疫组织化学SP法检测用药前后细胞周期蛋白D1(CyclinD1)的表达改变。结果:用蛴螬提取物处理的人肺癌A549细胞生长抑制率明显高于对照组;施药早期细胞出现凋亡形态学变化;A549细胞经蛴螬提取物处理后CyclinD1表达均下降。结论:蛴螬提取物在体外对人肺癌A549细胞株有显著的增殖抑制作用,其机制与下调CyclinD1的表达有关。     

透骨草提取物对人肺癌A549细胞凋亡及其PUMA/Bcl-2/Caspase-3蛋白表达的影响

目的:观察透骨草提取物对人肺癌A549细胞PUMA(P53上调凋亡调空因子)、Bcl-2(B淋巴细胞瘤-2)、Caspase-3(天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3)蛋白表达的影响,从凋亡诱导的角度探讨透骨草提取物抑制A549细胞增殖的作用机制。方法:将A549细胞分为实验组和对照组;吖啶橙染色观察透骨草提取物对A549细胞形态的影响;免疫组化法检测透骨草提取物对A549细胞PUMA、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达的影响。结果:吖啶橙染色结果显示,39.7 mg/L透骨草提取物处理的A549细胞皱缩,胞核固缩、呈边集,出现凋亡小体。免疫组化检测结果显示,39.7 mg/L透骨草提取物处理的A549细胞PUMA蛋白显著高于对照组(P0.05),而Bcl-2蛋白和Caspase-3蛋白表达显著低于对照组(P0.05)。结论:透骨草提取物对A549细胞具有凋亡诱导作用,机制与促进A549细胞PUMA蛋白表达、抑制Bcl-2和Caspase-3蛋白表达有关。     

山茶花挥发油对癌细胞Hela和HepG2增殖抑制的初步研究

目的观察山茶花挥发油对宫颈癌Hela细胞和人肝癌HepG2细胞的生长抑制作用。方法采用二氧化碳超临界萃取技术从山茶花中萃取出挥发油,对Hela和HepG2两种肿瘤细胞进行体外增殖抑制实验。用不同浓度(0.25,2,16mg/ml)的山茶花挥发油处理Hela和HepG两种肿瘤细胞,CCK法分析细胞增殖浓度。结果山茶花挥发油48 h可以明显抑制Hela和HepG2细胞增殖,山茶花对Hela细胞影响更敏感。结论山茶花挥发油对两种癌细胞增殖的抑制能力均有剂量和时间依赖性。     

地鳖纤溶蛋白含药血清对人肝癌和乳腺癌抑制作用

目的研究地鳖纤溶蛋白(EFP)及含药血清对人肝癌HepG-2和人乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制作用。方法制备EFP,并制备不同浓度EFP小鼠含药血清;采用MTT法分别将EFP和EFP含药血清加入HepG-2和MCF-7细胞悬液中,分别检测增殖抑制效果。结果 EFP直接用药各组均对HepG-2无抑制作用,而EFP含药血清各组对HepG-2细胞均有明显抑制细胞增殖作用;EFP组和EFP含药血清组均能不同程度的抑制MCF-7细胞增殖。结论 EFP有较强的体外抗肿瘤活性;血清药理学方法更能真实的反映药物作用。     

蒲葵根提取物的体外抗肿瘤实验研究

目的:用体外细胞培养法研究蒲葵根提取物对七种肿瘤细胞株生长的抑制作用。方法:采用MTT法、细胞集落形成法、生长曲线法测定蒲葵根提取物对白血病细胞株L1210和P388D1、宫颈癌细胞株Hela、人胃癌细胞株SGC7901、黑色素瘤细胞株B16、神经性肿瘤细胞株NG108-15、人肝癌细胞株Hele 7404生长的抑制情况。结果:MTT法、细胞集落形成法、生长曲线法测定的结果均显示,当蒲葵根提取物浓度在5.0μg/m l以上时,7类肿瘤细胞株的生长均受到明显抑制。结论:蒲葵根提取物在体外具有抗肿瘤作用。     

透骨草提取物对人结肠癌SWⅢ-C细胞增殖及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的:观察透骨草提取物对人结肠癌SWⅢ-C细胞增殖的影响,探讨透骨草提取物对SWⅢ-C细胞增殖影响的分子机制。方法:MTT法检测透骨草提取物对SWⅢ-C细胞增殖的影响,荧光显微镜观察透骨草提取物对SWⅢ-C细胞形态的影响,免疫组化方法检测SWⅢ-C细胞Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果:6.25~100μg/mL透骨草提取物处理的SWⅢ-C细胞增殖抑制率与对照组相比显著增加(P0.05),而且随透骨草浓度的增加,抑制率逐渐增加。透骨草提取物对SWⅢ-C细胞的半数抑制浓度(IC50)为38.36μg/mL。荧光显微镜下可见,38.36μg/mL透骨草提取物处理的SWⅢ-C细胞,体积缩小,细胞核固缩、呈新月状且边集。38.36μg/mL透骨草提取物处理的SWⅢ-C细胞Bcl-2蛋白表达显著低于对照组(P0.05),而Bax蛋白表达明显高于对照组(P0.05)。结论:透骨草提取物可以抑制人结肠癌SWⅢ-C细胞增殖,诱导SWⅢ-C细胞凋亡,其机制可能与下调Bcl-2蛋白表达、上调Bax蛋白表达有关。     

透骨草提取物对人卵巢SKOV-3细胞PI3k/Akt/mTOR信号通路的影响

目的：研究透骨草提取物对人卵巢SKOV-3细胞H3k/Akt/mTOR蛋白表达的影响,探讨透骨草提取物对SKOV-3细胞作用的分子机制.方法：免疫组化法检测透骨草提取物对SKOV-3细胞PI3k/Akt/mTOR蛋白表达的影响.结果：37.8 μg/mL透骨草提取物作用于SKOV-3细胞24h后,SKOV-3细胞PI3k/Akt/mTOR蛋白表达明显低于与对照组（P＜0.05）,表明透骨草提取物可下调SK-OV-3细胞PI3k/Akt/mTOR蛋白的表达.结论：透骨草提取物可能通过PI3k/Akt/mTOR途径抑制SK-OV-3细胞增殖.     

透骨草提取物的抑菌效果研究

透骨草分别以水和乙醇为溶剂进行提取,再将提取液浓缩后,配成不同浓度的溶液,选择纸片法对金黄色葡萄球菌、伤寒杆菌、表面葡萄球菌、福氏杆菌、铜绿假单胞菌、肺炎球菌、大肠杆菌等进行抑菌试验,结果表明,透骨草不同浓度的水和乙醇提取物上述菌种均有较强的抑制作用。     

透骨草提取物对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及凋亡相关因子的影响

[目的]观察透骨草提取物对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响,探讨透骨草提取物诱导SMMC-7721细胞凋亡的分子机制。[方法]流式细胞术检测透骨草提取物诱导SMMC-7721细胞凋亡的影响;免疫组化法检测透骨草提取物对SMMC-7721细胞caspase-9、-3、-7和x连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）表达的影响。[结果]40．91μg／mL透骨草提取物处理的SMMC-7721细胞凋亡率为（26．84±1．23）％,明显高于对照组（P〈0．05）。40．9μg／mL透骨草提取物处理的SMMC-7721细胞Caspase-9、-3、-7蛋白表达明显低于与对照组（P〈0．05）,而XIAP蛋白表达明显高于对照组（P〈0．05）。瞄论]透骨草提取物能通过XIAP／Caspase信号通路抑制SMMC-7721细胞凋亡。关键词：透骨草提取物;SMMC-7721细胞;凋亡;Caspase-9中图分类号：R285．5文献标识码：A文章编号：1672—1519（2013）10—0612—03     

透骨草提取物对人卵巢SKOV-3细胞Caspases蛋白表达的影响

目的：研究透骨草提取物对人卵巢SKOV-3细胞凋亡的影响及其机制。方法：吖啶橙染色法观察透骨草提取物对SKOV-3细胞形态的影响;免疫组化法检测透骨草提取物对SKOV一3细胞Caspas-es蛋白表达的影响。结果：37．8μg／ml透骨草提取物作用于SKOV-3细胞24h后,SKOV-3细胞形态不规则,细胞核固缩、呈月牙形紧贴在核膜周围。SKOV-3细胞Caspase-9、Caspase-3、Caspase-7蛋白表达明显低于与对照组（P〈0．05）,表明透骨草提取物可下调SKOV-3细胞Caspase-9、Caspase-3、Caspase-7蛋白的表达。结论：透骨草提取物可以通过Caspases依赖途径诱导SKOV-3细胞凋亡。     

4’-去甲基-4’-氧-环丁甲酰基-去氧鬼臼毒素及鬼臼苦素抑制肿瘤细胞生长作用研究

目的:探讨不同浓度4’-去甲基-4’-氧-环丁甲酰基-去氧鬼臼毒素对宫颈癌细胞Hela和黑色素瘤细胞B16增殖的抑制作用;鬼臼苦素对Hela细胞、肝癌Hep G2细胞、肺癌A549细胞及骨肉瘤MG-63细胞增殖的抑制作用。方法:采用MTT法检测不同浓度的4’-去甲基-4’-氧-环丁甲酰基-去氧鬼臼毒素及鬼臼苦素对以上多种癌细胞的抑制作用。结果:不同浓度4’-去甲基-4’-氧-环丁甲酰基-去氧鬼臼毒素与对照组(0.1%DMSO)相比,对肿瘤细胞生长抑制率明显升高,均有显著性差异(P<0.05);不同浓度鬼臼苦素与对照组(0.1%DMSO)相比,对肿瘤细胞生长抑制率也明显升高,均有显著性差异(P<0.05)。结论:4’-去甲基-4’-氧-环丁甲酰基-去氧鬼臼毒素对Hela细胞和B16细胞增殖具有明显的抑制作用,鬼臼苦素对Hela、MG-63、Hep G2及A549细胞具有明显的抑制作用。     

白木通醇提取物体外抗肿瘤活性研究

目的:研究白木通乙醇提取物的体外抗肿瘤活性。方法:采用乙醇回流提取制备白木通醇提取物,以MTT法检测白木通醇提取物对人肝癌细胞SMMC-7721、BEL-7404,人鼻咽癌细胞CNE-1的生长抑制情况。结果:白木通醇提取物体外对人肝癌细胞SMMC-7721、BEL-7404,人鼻咽癌细胞CNE-1有抑制增殖作用。结论:白木通醇提取物具有一定的体外抗肿瘤活性。     

姜黄提取物对Na2S2O4诱导SK—N—SH细胞凋亡的保护作用

目的观察姜黄提取物对Na2S2O4诱导SK—N—SH细胞凋亡的保护作用及其机制。方法取相同代的SK—N—SH细胞随机分为正常对照组、模型组、姜黄提取物低浓度（20μmol／L）组、姜黄提取物中浓度（40μmol／L）组、姜黄提取物高浓度（80μmol／L）组。用分光光度法检测姜黄提取物对细胞外SOD、MDA的影响,通过MTT比色法检测细胞存活率,TUNEL法检测细胞凋亡率,采用Westernblot检测法检测细胞Caspase-3蛋白的表达情况。蛄果与模型组比较,姜黄提取物各组细胞存活率升高（P〈0．01）,姜黄提取物各组SK—N—SH细胞培养液内的MDA水平均明显降低（P均〈0．01）,而SOD水平均明显升高（P均〈0．01）,同时Caspase-3活性受到抑制。结论姜黄提取物能够通过抗氧化作用抑制Na2S2O4对SK—N—SH细胞凋亡作用。     

正交实验法优化疏毛吴茱萸提取工艺

目的：优化疏毛吴茱萸提取工艺。方法：以疏毛吴茱萸提取物中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的总量为指标,分别采用L9（34）正交试验法对疏毛吴茱萸水提、醇提工艺进行优选。结果：疏毛吴茱萸总碱水提的最佳工艺路线为：用10倍量水,回流提取3次,每次2小时。醇提的最佳工艺路线为：用6倍量60%的乙醇,回流提取3次,每次2小时。结论：两种提取工艺简单可行,可提供质量均一稳定的疏毛吴茱萸提取物。     

小柴胡汤对体外培养人肝癌细胞株HepG2增殖的影响

目的探讨小柴胡汤45%乙醇提取物对体外培养人肝癌细胞株HepG2增殖的影响及其可能的机理。方法采用ATP-Lite法测定不同浓度小柴胡汤对体外培养的HepG2增殖的作用,同时利用氧自由基清除能(ORAC)法测定样品的抗氧化活性;以LPS刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7产生一氧化氮(NO),Griess法测定NO的终产物亚硝酸盐的含量,观察样品对NO生成的影响。结果小柴胡汤在62.5～500mg/L浓度范围内可以显著抑制HepG2增殖,抑制作用呈剂量相关性,计算半数抑制浓度(IC50)为(90.7±23.7)mg/L。小柴胡汤提取物具有一定的抗氧化活性,其抗氧化能力为阳性对照维生素C的1.3倍。小柴胡汤在3.125～50mg/L浓度范围内均可以显著抑制NO的生成(P0.05,P0.01)。结论小柴胡汤具有体外抑制人肝癌细胞株HepG2增殖的作用,其抑制作用可能与其抗氧化活性及抑制NO生成有关。