微小RNA与肿瘤坏死因子-α对成骨分化调控作用研究进展

目前口腔临床中牙周炎的发病率日益升高,炎症环境中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和微小RNA(microRNAs,miRNAs)对成骨分化各个阶段可产生调控作用。本文就miRNAs和TNF-α对成骨分化的调控作用作一综述。     

龋齿牙髓组织中肿瘤坏死因子-α的检测

目的对比研究检测正常、深龋和炎症牙髓组织中TNF-α含量的变化,以了解TNF-α在龋病发生和发展过程中的作用和意义。方法收集30颗正常牙齿、38颗临床诊断为深龋和32颗深龋所致牙髓炎患牙的牙髓组织。称重后加入100μpH 7.0PBS缓冲液,碾碎,2500r/min离心5min,上清液用ELISA方法检测TNF-α含量。结果正常、深龋和炎症牙髓组织均检出TNF-α,含量分别为45.67±23.35pg/g、338.96±87.54pg/g和975.13±362.87pg/g。正常牙髓与深龋和炎症牙髓组织中TNF-α的含量有极显著性差异(P<0.01)。深龋和炎症牙髓组织中TNF-α的含量有显著性差异(P<0.05)。结论深龋和炎症牙髓组织中存在TNF-α,它是反应龋病牙髓状态的重要细胞因子。     

慢性牙周炎中核因子κB受体活化子、护骨素和肿瘤坏死因子-α的蛋白表达

目的　比较慢性牙周炎牙槽骨吸收处肉芽组织中的核因子κB受体活化子 (RANKL)、护骨素 (OPG)和肿瘤坏死因子(TNF) -α的水平 ,研究慢性牙周炎牙槽骨吸收与这些调节因子间的关系。方法　应用鼠抗人单克隆抗体、半定量分析及数字成像技术分析慢性牙周炎组织中RANKL、OPG和TNF α的蛋白表达。结果　慢性牙周炎牙槽骨吸收处肉芽组织中有较高的RANKL和TNF α蛋白表达 ,OPG蛋白表达相对较低 (P <0 .0 5 ) ;非牙周炎组织中显示较强的OPG蛋白表达和较弱的RANKL和TNF -α蛋白水平 (P <0 .0 5 ) ;OPG蛋白表达与牙周组织中内皮细胞相关。结论　RANKL可能与慢性牙周炎牙槽骨吸收相关 ;RANKL和OPG平衡的变化在慢性牙周炎骨吸收的分子机制中起重要调节作用 ;TNF α可能协同参与牙槽骨的吸收     

肿瘤坏死因子α及其抑制剂的研究进展

肿瘤坏死因子(TNF)α是一种在多种生物效应中起作用的细胞因子,主要由单核细胞、巨噬细胞和胸腺依赖淋巴细胞产生,分为溶解型和膜结合型.TNFα通过与其受体(TNFR)特异性结合引起一系列细胞因子改变,进而实现促细胞生长和程序性细胞死亡并促进牙周炎、种植体周围炎以及局限性肠炎和类风湿性关节炎等疾病发展的作用.TNFα抑制剂分为大分子抑制剂和活性小分子抑制剂,种类繁多,作用机制复杂,已大量应用于临床治疗并取得了优异的疗效;而新型TNFα抑制剂TNFR1前配体结合序列复合物对于TNFα引起的程序性细胞死亡、关节炎破骨活动有明显的抑制作用,具有治疗TNFα参与的炎性疾病的潜能.     

重组人肿瘤坏死因子-α联合肿瘤坏死因子受体1基因转染杀伤舌癌细胞的实验研究

目的 :观察重组人肿瘤坏死因子 α(rhTNF α)对建系细胞 (T T)作用效应与机制。方法 :反转录PCR方法克隆人TNFR1基因 ,并将其稳定转染入舌癌细胞中 ,建系并鉴定 ;通过MTT法检测、DNA降解片段琼脂糖凝胶电泳及电镜观察检测rhTNF α对T T细胞的作用效果与机制。结果 :成功构建含TNFR1基因的真核表达质粒 pcDNA3 TNFR1,并建立表达TNFR1蛋白活性的舌癌细胞系T T ;较之亲本Tca 8113细胞及转染空载体的T pc细胞 ,rhTNF α对T T细胞具有更强的细胞毒作用 ,且通过介导细胞凋亡的方式发挥其作用。结论 :重组人肿瘤坏死因子 α联合肿瘤坏死因子受体 1基因转染可有效地杀伤舌癌细胞 ,为舌癌基因治疗提供理论依据。     

肿瘤坏死因子α与口腔扁平苔藓

肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)主要由单核巨噬细胞合成和分泌,并通过与其相应受体结合,参与自身免疫的炎症过程,是介导自身免疫反应的重要效应因子之一[1].口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)为一种慢性皮肤粘膜疾病,研究显示免疫反应在口腔扁平苔藓的发病中占有重要地位[2].     

肿瘤坏死因子-α在口腔鳞癌中的表达及临床意义

目的:研究肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)在口腔鳞癌组织中的表达,并探讨其在口腔鳞癌生物学行为中的意义。方法:应用免疫组化SABC法检测41例口腔鳞癌组织中TNF-α的表达,并用10例正常口腔黏膜组织作为对照。结果:口腔鳞癌组织中TNF-α的表达较正常组织增加,其差异具有统计学意义。口腔鳞癌中TNF-α阳性表达主要分布在癌细胞和间质细胞的胞质中,TNF-α表达与口腔鳞癌的分化、TNM分期及淋巴结转移有关。结论:TNF-α可能参与了口腔鳞癌的发展和转移。     

肿瘤坏死因子受体相关因子6与破骨细胞

肿瘤坏死因子受体相关因子是细胞胞浆内的一类重要的接头分子。其中肿瘤坏死因子受体相关因子6，通过与破骨细胞表面的核因子κB受体激动剂结合，并将信号下传，激活c-Src、Jun氨基末端激酶、核因子κB，在破骨细胞的分化与成熟过程中起着重要的作用。     

肿瘤坏死因子α与OLP癌变的关系

口腔扁平苔藓（OLP）是一种常见的口腔黏膜慢性炎症性疾病。其发病原因和病理机制至今尚未明确。肿瘤坏死因子α是介导自身免疫反应的重要效应因子,许多研究表明肿瘤坏死因子。在OLP的发生发展过程中起着至关重要的作用。本文从肿瘤坏死因子α与口腔扁平苔藓癌变的关系方面做一综述。     

肿瘤坏死因子-α与复发性阿弗他溃疡的关系

复发性阿弗他溃疡(recurrent aphthous ulcer,RAU)是口腔黏膜最常见的疾病之一,但其病因及致病机制仍不明,近年对RAU的研究多集中在免疫失调方面,肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)作为细胞因子的一员在RAU的发生和发展中起着重要的作用。研究表明TNF-α在RAU中表达升高,并证明TNF-α的高表达可引起细胞因子网络的失衡,并对细胞毒性作用有一定的影响;另外,TNF-α还可以过作用于黏附分子而促进炎细胞向病变组织的移行。所以TNF-α在RAU炎症反应的发生和溃疡病损的形成中起着起着重要的作用。     

口腔癌中肿瘤坏死因子-α的表达与巨噬细胞关系的研究

目的探讨口腔鳞状细胞癌中肿瘤坏死因子-α（tumornecrosis factor-α,TNF-α）表达与肿瘤中浸润巨噬细胞的关系。方法应用免疫组化的方法检测口腔鳞癌中TNF-α的表达和巨噬细胞的浸润,光镜进行高倍视野下巨噬细胞记数和TNF-α表达的分级。结果在口腔鳞癌中TNF-α的表达与肿瘤分化有关,并与肿瘤内浸润的巨噬细胞有关（P〈0.05）。结论口腔癌中浸润进入肿瘤的巨噬细胞可能受TNF-α趋化作用的影响,参与肿瘤的生长和转移。     

肿瘤坏死因子-α诱导人牙囊细胞的凋亡作用

目的：研究不同浓度肿瘤坏死因子-α（TNF-α）对体外培养人牙囊细胞凋亡的影响。方法：第五代HDFCs分别与浓度为0（对照组）、50、100、200 ng/mL的TNF-α共孵育24 h,流式细胞仪AnnexinⅤ-FITC/PI双染技术检测牙囊细胞凋亡细胞比率。结果：HDFCs的凋亡率随TNF-α浓度升高而上升,由对照组的2.3%增加到7.1%。结论：TNF-可诱导HDFCs的凋亡,这种作用可能在牙齿发育、萌出过程中起重要作用。     

糖尿病大鼠牙槽骨中肿瘤坏死因子-αmRNA表达与骨密度变化相关性研究

目的　研究糖尿病大鼠牙槽骨中肿瘤坏死因子 (TNF α)mRNA表达与骨密度变化之间的关系。方法　SD大鼠随机分成正常组与糖尿病组。实验第 8周 ,应用RT PCR技术检测大鼠牙槽骨中TNF αmRNA表达 ,并对牙槽骨进行X线片、骨密度、病理切片检查。结果　糖尿病组大鼠牙槽骨骨密度较正常组降低 ,TNF αmRNA表达高于正常组。结论　糖尿病组大鼠有骨质疏松倾向 ,而TNF α表达的增高可能参与了骨质疏松的发生与发展。     

核因子κB受体活化因子配体和肿瘤坏死因子α经炎性牙周膜干细胞外泌体促进破骨细胞分化

目的　慢性牙周炎表现的病理性骨吸收非常常见,牙周膜干细胞（PDLSCs）的外泌体（Exo）对骨吸收的作用和影响尚不明确,本研究分析了该Exo蛋白组分对破骨细胞分化的影响。方法　分别从正畸前拔牙患者和慢性牙周炎患者的牙周膜组织中提取PDLSCs,通过流式细胞术检测表面标记物;通过差速离心分别提取2种细胞的Exo,即Exo-WT和Exo-CP,并通过Western blot、透射电子显微镜（TEM）、蛋白浓度检测、纳米粒径追踪检测Exo特征;通过蛋白质谱检测2种Exo的蛋白组分;通过酶联免疫吸附（ELISA）验证了差异表达蛋白肿瘤坏死因子α（TNF-α）、核因子κB受体活化因子配体（RANKL）、白细胞介素（IL）-1α、转化生长因子β（TGF-β）、骨形态发生蛋白2（BMP-2）表达水平;将10、100、1 000 μg·mL^-1的Exo-CP或Exo-WT加入RAW264.7培养基中并于5 d时通过实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）、Western blot、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色检测破骨分化相关指标表达情况;采用SPSS 24.0软件对实验数据进行统计学分析。结果　Exo-CP富集的差异表达蛋白主要与破骨细胞分化的TNF信号通路、核转录因子κB（NF-κB）信号通路相关;ELISA实验证实了Exo-CP中高表达TNF-α、RANKL、IL-1α,低表达TGF-β1、BMP-2（P<0.05）;Exo-CP作用于RAW264.7,显著提高了细胞的破骨分化相关基因及蛋白的表达水平,TRAP染色可见分化的破骨细胞,且呈现浓度依赖性,100、1 000 μg·mL^-1浓度Exo-CP对破骨细胞分化的促进作用显著高于10 μg·mL^-1浓度组（P<0.05）。结论　慢性牙周炎的病理性骨吸收可能由炎性PDLSCs所分泌的Exo通过促进破骨细胞分化引起,Exo中主要的作用蛋白可能为RANKL和TNF-α,本研究为慢性牙周炎骨吸收的发病机制提供了新视角。     

慢性牙周炎患者牙周手术治疗后血清肿瘤坏死因子-α水平的变化

目的 观察牙周手术治疗对慢性牙周炎患者血清肿瘤坏死因子(TNF)-α的影响.方法 将35位完成牙周基础治疗的中重度慢性牙周炎患者随机分为2组,试验组接受牙周手术治疗,对照组接受牙周支持疗法.治疗前和治疗结束后16周分别测量牙周探诊深度(PD)、菌斑指数(PLI)和血清TNF-α水平.结果 同对照组相比较,试验组PD、PLI和血清TNF-α水平显著降低,两组间差异有统计学意义(P<0.05).结论 牙周手术治疗能显著降低慢性牙周炎患者血清TNF-α水平并改善其牙周临床指数.     

大鼠牙周组织中肿瘤坏死因子-α受咬合力增强影响变化的研究

目的　检测咬合力在正常及增强状态下,大鼠牙周细胞TNF-α的动态表达,初探TNF-α在牙周组织改建中的分子机理。方法　采用HE染色和免疫组化的方法,观察牙周形态变化以及牙周组织中TNF-α蛋白表达。结果　咬合力增强引起牙周膜增宽、牙槽骨形成。牙周细胞中TNF-α表达较正常咬合力时明显增强。结论　咬合力增强,促使牙周组织产生TNF-α明显增多,诱发了破骨功能;同时,还激活了成骨功能。本实验从分子水平探讨了牙周组织改建的机理;揭示了牙周组织结构与功能在改建中的一致性。     

核因子-κB与肿瘤坏死因子α、白介素1β在口腔扁平苔藓中的表达及意义

目的检测核因子-kappaB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)、白介素1β(Interleukin1β,IL-1β)在口腔扁平苔癣组织中的表达并探讨3种因子在口腔扁平苔癣发病中的作用。方法采用SP免疫组化方法检测35例口腔扁平苔癣及10例正常口腔黏膜组织中NF-κB及TNF-α、IL-1β的表达情况,并进一步分析三者的相关性及各自与口腔扁平苔癣临床特征的关系。结果 NF-κB阳性染色主要定位于细胞的胞核和胞质,主要表达于棘层和基底层的角化细胞以及固有层淋巴细胞浸润带中。而TNF-α和IL-1β阳性染色定位于细胞质中,主要表达于口腔扁平苔癣中棘层和基底层角化细胞及固有层淋巴细胞浸润带中。三种因子的表达与临床分型有关,但与病损部位、性别、年龄关系不密切。结论口腔扁平苔癣中NF-κB和TNF-α、IL-1β高表达,且NF-κB与两者互为正相关关系,提示在OLP发病中TNF-α及IL-1β的高表达与NF-κB通路的活化密切相关。     

核因子Kappa B与肿瘤坏死因子α在口腔扁平苔藓中的相关性

目的：研究核因子KappaB（NF—KB）和肿瘤坏死因子α（TNF—α）在口腔扁平苔藓（OLP）中的相关性,及其两种因子的表达与OLP临床特征之间的联系。方法：30例OLP患者根据其临床表现分为萎缩-糜烂型及斑纹型,采用免疫组化方法研究OLP两种临床类型NF—KBp65及TNF-α的表达,并计算阳性细胞百分率。选取10例正常组织作为对照。结果：NF—KBp65阳性表达位于OLP上皮基底层及临近细胞的胞核内,而正常组织未见胞核着色。TNF-α阳性表达位于OLP上皮基底层细胞的胞质内,正常组织中仅有散在阳性表达。NF—KBp65和TNF—α的表达在不同临床类型、年龄及病损部位中有显著性差异（P〈0．05）,但与性别无关（P〉0．05）。NF—KBp65的胞核着色与TNF-α的高表达呈正相关（r=0．676,P〈0．01）。结论：OLP中NF—KB被激活与TNF-α的高表达密切相关。在NF—KB和TNF-α之间可能存在一个正反馈调节环,这种正反馈的机制可能加重了OLP的炎性反应,同时也可能保护了上皮细胞,避免了过多的凋亡。     

肿瘤坏死因子-α在正畸牙移动中作用的研究进展

肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）为一种单核细胞因子,参与体内的炎症反应,同时在核因子κ B受体活化因子配体的共同作用下可以促进破骨细胞的形成。正畸牙齿移动是在机械应力作用下牙周组织与骨组织共同改建的过程,需要破骨细胞与成骨细胞及其他牙周因子共同作用。正畸治疗过程中,在正畸力的作用下牙周组织会处于轻微炎症的状态,产生的各种炎症因子对牙周组织改建有促进作用。其中TNF-α在正畸牙齿移动过程中发挥着重要作用,能够促进破骨细胞形成,同时对成骨细胞的形成也有一定影响。本文对肿瘤坏死因子-α在正畸牙齿移动中作用的研究进展进行综述。     

可溶性白细胞介素-1和肿瘤坏死因子受体对大鼠正畸牙移动影响的研究

目的研究局部注射重组人类可溶性受体对大鼠正畸牙移动进程的影响。方法选取64只雄性SD大鼠,从加力第1天起在大鼠牙齿局部分别注射重组人类可溶性白细胞介素- 1受体Ⅱ（sIL- 1- RⅡ）、可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅰ（sTNF- RⅠ）、两者混合物,测量磨牙移动距离,用苏木精- 伊红（HE）染色观察被移动磨牙牙周组织形态学变化,并应用抗酒石酸盐酸性磷酸酶（TRAP）组织化学染色对破骨细胞和破牙骨质细胞的数量及分布的时相性改变进行分析。结果各受体组大鼠磨牙牙周组织形态学时相性变化与对照组相似,但各时间点牙槽骨吸收程度均较轻微,多数大鼠牙根表面很少或几乎没有明显牙骨质吸收迹象。与对照组相比,在第14天所有受体注射组牙槽骨及牙根表面TRAP染色阳性细胞降低了约50%（P<0.05）,但受体组组间差异无统计学意义（P>0.05）。结论在大鼠正畸牙局部注射重组人类可溶性白细胞介素- 1和肿瘤坏死因子受体,可以减少牙齿移动距离并减少牙根吸收。