匹罗卡品癫痫模型中蛋白质netrin-1的表达与苔藓纤维出芽的动态变化

目的：探讨神经诱向因子蛋白质netrin-1在癫痫持续状态后海马苔藓纤维出芽（MFS）中的作用。方法：氯化锂-匹罗卡品建立大鼠颞叶癫痫（TLE）模型,采用Timm染色和免疫组化的方法分别检测MFS和netrin-1在大鼠海马组织中的表达。结果：TLE组大鼠在模型形成的第2周和第4周,海马齿状回内netrin-1的表达较正常对照组明显增加,并可见到MFS,穿越齿状回颗粒细胞层到达内分子层,并形成一条致密的层状带。结论：癫痫状态后在海马齿状回netrin-1的表达上调,证明其可能参与了癫痫后MFS过程。     

人参皂甙Rg1对慢性应激大鼠空间学习记忆能力的影响

目的　探讨人参皂甙Rg1对慢性应激大鼠空间学习记忆能力的影响及初步机制。方法　采用电击足底结合噪声建立慢性应激大鼠模型 ,Morris水迷宫观察动物的空间学习和记忆能力 ,Niss染色观察和计数海马神经元为数量 ,Fara 2荧光法测海马突触体内游离钙浓度。结果　腹腔注射 5 0mg/kg人参皂甙Rg1对慢性应激引起的空间学习和记忆能力下降 ,海马神经元数量减少 ,海马突触体内游离钙浓度增高有明显保护作用 ,而注射 10mg/kg人参皂甙Rg1的效果不明显。结论　人参皂甙Rg1对慢性应激性认知障碍有保护作用 ,其机制可能是通过调节海马细胞内的钙浓度 ,防止海马神经细胞丢失有关。     

人参皂甙对睡眠剥夺大鼠学习记忆和活动性的影响

目的:探讨人参皂甙(ginsenosides,GS)对睡眠剥夺(sleep deprivation,SD)大鼠学习记忆和活动性的影响。方法:用小平台水环境法建立SD模型。选用Sprague-Dawley大鼠,根据SD时间的不同(0～96h),随机分为5组,每组又分为实验组(E)和对照组(C),实验组给予GS,观察各组大鼠SD前后“Y”迷宫、跳台和旷场实验中的行为变化。结果:①“Y”迷宫实验:24h、48h、72h和96h的正确反应率,E显著高于C(P<0.05),48h、72h和96h的触电时间,E显著低于C(P<0.05),72h差别最为明显(P<0.01);②跳台实验:48h、72h和96h的第一次触电潜伏期,E显著高于C(P<0.05),触电时间,E显著低于C(P<0.05),72h和96h的触电次数,E显著低于C(P<0.05),72h的差别最为显著(P<0.01)。③旷场实验:72h和96h的中央格停留时间,E显著低于C(P<0.05);48h和72h的水平活动得分和垂直活动得分,E显著高于C(P<0.05),72h差别最为明显(P<0.01)。结论:GS对SD造成的大鼠学习记忆和活动性的损害有明显保护作用。在一定SD时间内,这种保护作用随SD时间的延长而增强。     

颞叶切除术治疗癫痫及其对记忆的影响

颞叶切除术特别是切除颞叶中部结构 ,对药物难以控制的复杂部分性癫发作有明显的治疗效果。然而 ,切除单侧颞叶中部结构后可以造成记忆功能减退。据报道 ,切除左侧大脑语言控制区后可以引起语言记忆障碍。但是 ,并不是所有的颞叶切除术患者都存在言语记忆障碍[1 ] 。在许多病例中 ,手术治疗癫发作有较好的效果 ,但是术后记忆功能减退将影响患者的生活质量。因此 ,人们开始重视因手术治疗颞叶癫后所产生的并发症。1　评价记忆功能临床研究中 ,通过主观和客观方法评价颞叶切除术后记忆功能改变情况。最新研究证实有许多因素与主观记忆有…     

颞叶癫痫患者语言相关功能区的fMRI研究

目的：通过功能磁共振成像（fMRI）检查,了解颞叶癫痫（TLE）患者语言相关功能区的分布,初步探讨影响其不典型分布的因素,评价fMRI对癫痫患者进行无创语言功能定位检查的临床可操作性。方法：健康对照组和成人发病的左、右一侧性TLE患者组各6例,均为右利手。所有受试者进行动词产生任务fMRI检查,以按键记录受试者的反应。使用统计参数图2（statisticalparametricmap-ping2,SPM2）对fMRI的图像进行个体和组分析。结果：所有受试者顺利完成任务,fMRI的结果显示左侧组较对照组有明显差异,语言激活出现不典型化表现,优势侧有向右侧转移的趋势,其偏侧化指数（1ateralityindex,LI）与病程呈相对的负相关。结论：左侧TLE患者的语言功能区出现不典型分布,偏侧化程度可能与病程有关。fMRI检查评价语言功能相关区结果基本可靠,受试者耐受性好,具有一定的临床可操作性。     

人参皂甙Rd对大鼠大脑中动脉栓塞模型NMDA受体磷酸化的影响

目的:研究人参皂甙Rd(Ginsenoside Rd,GSRd)对大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型损伤后,NMDA受体NR2B亚基的表达及其磷酸化的影响。方法:建立大鼠MCAO模型,并在术前及术后给予人参皂甙Rd,之后进行神经行为学评分,通过TTC(2,3,5-氯化三苯基四氮唑)染色观察脑梗死体积变化,采用Western blot方法检测脑缺血区不同时间点NR2B及其磷酸化的Ser1303及Tyr1472的表达情况。结果:GSRd能够改善大鼠神经行为学评分,减小模型大鼠脑梗死体积;MCAO模型大鼠脑缺血损伤处的NR2B亚基、磷酸化Ser1303及Tyr1472的表达量均较假手术组升高;在MCAO术前及术后给予GSRd,能够有效降低损伤侧NR2B亚基、磷酸化Ser1303及Tyr1472的表达量,并且GSRd对于上述各项表达量的影响呈剂量依赖性。结论:人参皂甙Rd能够有效降低MCAO模型中NR2B及磷酸化Ser1303及Tyr1472的水平,提示人参皂甙Rd可能是通过调节脑缺血再灌注损伤后NMDAR中NR2B亚基及该亚基磷酸化Ser1303、Tyr1472位点的水平,从而发挥其对脑缺血再灌注损伤的保护作用。     

人参皂甙Rd对大鼠脑缺血后丘脑远隔损害的保护作用研究

目的:探讨人参皂甙Rd(GS-Rd)对大鼠脑缺血后对丘脑远隔损害的保护作用。方法:成年SD雄性大鼠,线栓法制备大脑中动脉堵塞脑缺血模型(MCAO),随机分为假手术组,MCAO脑缺血组(1、3、5 d),GS-Rd治疗组(5 mg/kg、10 mg/kg),每组五只。GS-Rd治疗组的大鼠在MCAO手术前30 min,腹腔注射5 mg/kg或10mg/kg GS-Rd,之后每天腹腔注射相应剂量。观察并记录每组大鼠的体重变化;收集大鼠丘脑组织,采用Miliplex试剂盒法检测炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-16的含量变化。结果:MCAO脑缺血组大鼠的体重较假手术组减轻(P0.05),而炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-16的含量增多(P0.05);与MCAO脑缺血组相比,给予10 mg/kg剂量GS-Rd治疗组的大鼠体重增加(P0.05),而且炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-16的含量减少(P0.05);但5mg/kg剂量组较MCAO组体重无显著变化(P0.05)。结论:GS-Rd(10 mg/kg)可能通过减少炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-16的含量,减轻大鼠脑缺血后对丘脑等远隔脑区的损害。     

人参皂甙对睡眠剥夺大鼠记忆保持的影响

目的：探讨人参皂甙（Ginsenosides,GS)对睡眠剥夺（sleep deprivation,SD)大鼠记忆保持的影响。方法：用小平台水环境法（Flower Pot)建立大鼠SD模型,选用Sprague-Dawley大鼠24只,根据SD时间的不同,将大鼠随机分为三组：24SD（24小时SD组）,48SD（48小时SD组）和72SD（72小时SD组）,每组又设实验组和对照组。其中实验组用GS连续灌胃5天,对照组以同样方式给予等量生理盐水,然后给予不同时间的SD。观察各组SD前后在跳台实验中的行为变化。结果：SD后各组大鼠跳台测试第一次触电潜伏期均下降,触电次数和触电时间均增加。SD前实验组和对照组的第一次触电潜伏期,触电次数和触电时间无显著差别（P＞0．05）,72SD大鼠的第一次触电潜伏期实验组显著大于对照组（P＜0．05）,触电次数和触电时间,实验组显著低于对照组（P＜0．05）;24SD,48SD的第一次触电潜伏期,触电次数和触电时间,实验组和对照组无显著差别。结论：连续口服GS对SD造成的大鼠记忆保持能力受损有明显保护作用,在一定睡眠剥夺时间内,这种保护作用随SD时间的延长而增强。     

低浓度神经生长因子对癫痫大鼠空间学习记忆能力的影响及机制研究

目的:探讨低浓度神经生长因子(NGF)对戊四氮(PTZ)点燃癫痫大鼠空间学习记忆能力的影响及其可能机制。方法:将SD雄性大鼠随机分为对照组、癫痫模型组和NGF组。采用PTZ慢性点燃SD大鼠癫痫模型,并对模型组大鼠腹腔注射低浓度NGF,大体观察各组大鼠癫痫行为学;应用Morris水迷宫检测大鼠空间学习记忆能力,应用Western Blotting检测各组大鼠海马转录因子CREB、磷酸化的CREB(p-CREB)和突触后蛋白PSD95的表达变化。结果:模型组和NGF组大鼠出现典型癫痫发作的行为学改变,后者经NGF干预后未出现明显改善。模型组大鼠空间学习记忆能力受损,逃避潜伏期延长,目标象限停留时间较短(P<0.05),p-CREB和PSD95表达水平较对照组和NGF组降低(P<0.05);NGF组大鼠空间学习记忆能力改善,其逃避潜伏期变短,目标象限停留时间明显延长,p-CREB和PSD95表达水平接近对照组。结论:PTZ点燃癫痫大鼠的空间学习记忆能力受损;NGF可以通过提高p-CREB和PSD95的表达水平改善癫痫大鼠的空间学习记忆能力。     

人参皂甙对精神分裂症动物模型大鼠记忆保持的影响

目的:探讨人参皂甙(Ginsenosides,GS)对精神分裂症动物模型大鼠记忆保持的影响。方法:入组大鼠随机分为实验组和对照组,实验组给予人参皂甙灌胃,对照组给予生理盐水灌胃,治疗第5天后,两组大鼠同时注射药物MK801(5-甲基二氢二苯并环庚稀亚氨马来酸或地卓西平马来酸盐)建立精神分裂症的动物模型;在用MK801前、第1、3、5天,采用主动回避反应(AAR)和一次性被动回避反应(OPAR)观察各组大鼠的行为变化。结果:给予MK801后,实验组大鼠ARR第1、3、5习得率明显高于对照组(231·79±18·90/158·28±6·78,134·86±15·49/92·29±9·22,81·64±17·29/36·08±17·12,t=10·35、6·68、5·29,P<0·01),且消退也慢于对照组(199·09±15·78/169·44±13·72,128·94±10·80/108·15±13·45,98·06±11·50/42·33±20·08,t=4·01、3·41、6·81,P<0·01)。给MK801后,OPAR训练到第5天,大鼠的步入潜伏期实验组显著大于对照组(79·25±13·49/51·33±11·09,t=4·53,P<0·01),触电次数和触电时间显著低于对照组(4·25±1·49/8·33±2·09,7·25±3·49/27·33±6·09,t=4·49、8·10,P<0·01)。结论:连续口服GS对精神分裂症动物模型大鼠记忆保持能力受损有明显保护作用。在一定的时间内,这种保护作用随动物模型时间的延长面增强。     

早期安定干预对匹罗卡品诱导颞叶癫痫小鼠学习记忆能力变化的影响

目的:研究早期使用安定麻醉对匹罗卡品(PILO)诱导的颞叶癫痫小鼠的学习记忆能力的变化,从行为学角度评价抑制点燃效应对颞叶癫痫造模程度的影响。方法:腹腔注射PILO建立颞叶癫痫小鼠模型,分PILO癫痫组(A组)、安定麻醉条件下PILO癫痫组(B组)、安定麻醉对照组(C组),正常对照组(D组),对照组腹腔注射与PILO等量的生理盐水。各组小鼠进行Morris水迷宫学习记忆实验,测其寻找到隐藏平台所需潜伏期。结果:Morris水迷宫实验中,A组癫痫小鼠逃避潜伏期时间明显延长(P<0.05),B组癫痫小鼠第一次癫痫发作程度有大幅度的减轻,逃避潜伏期时间延长,但延长时间较正常情况下点燃癫痫小鼠低。结论:早期使用安定麻醉可明显改善颞叶癫闲小鼠学习记忆能力。     

颞叶癫痫大鼠海马差异表达基因和蛋白质的筛选研究

目的：寻找颞叶癫痫大鼠海马组织的差异表达基因和蛋白质，以期为进一步探讨颞叶癫痫的发病机制，寻找新的治疗靶点和研发新的治疗手段奠定基础。方法:运用cDNA微阵列、二维电泳和MALDI-TOF-MS技术，分析氯化锂-匹罗卡品（LiCl-PILO）致痫大鼠模型海马组织的基因表达谱和蛋白质表达谱，并对发现的差异表达基因和差异表达蛋白质进行分析和鉴定结果和。结论：发现LiCl-PILO致痫大鼠海马组织中192个基因差异表达，159条可在GenBank中登陆，其中表达上调的基因84条，表达下调的基因75条；筛选到78个差异表达蛋白质斑点，其中31个在癫痫组表达下调，47个在癫痫组表达上调。有5个蛋白质最终鉴定确认。本研究结果为运用蛋白质组学方法寻找癫痫治疗新靶点研究提供实验依据。     

人参皂甙Rb1对马桑内酯致痫大鼠海马组织蛋白质组的影响

目的: 运用双向电泳技术获得可能与马桑内酯(CL)癫痫发作及人参皂甙Rb1(GRb1)神经保护作用有关的蛋白质成分,探讨海马组织蛋白质在癫痫发生发展过程中的作用和地位以及GRb1对其的影响。方法: 分别提取对照组、CL致痫组和GRb1+CL致痫组动物海马组织蛋白,双向电泳分离,ImageMaster 2D Platinum 5.0软件进行差异表达蛋白质组分析,基质辅助激光解吸附离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定蛋白质。结果: 成功鉴定出6个蛋白质分别是:脑肌酸激酶(brain creatine kinase)、内吞蛋白A1(endophilin-A1)、UPF0628 蛋白 C10orf96 同源物(UPF0628 protein C10orf96 homolog)、细胞色素P-450(cytochrome P-450)、光导素样蛋白(phosducin-like protein)及桥整合蛋白3(bridging integrator 3)。其中前3个蛋白质在GRb1+CL致痫组表达低于CL致痫组,后3个蛋白质在GRb1+CL致痫组表达低于对照组。结论: CL致痫组、GRb1+CL致痫组和对照组表达的蛋白质存在明显差异。鉴定出的6个差异表达的蛋白质可能与GRb1的神经保护作用有关,其中 brain creatine kinase、endophilin-A1和UPF0628 protein C10orf96 homolog可能与CL所致癫痫发作有关。     

老年雌性和雄性大鼠学习记忆能力比较

目的观察老年雌、雄性wistar大鼠的学习记忆能力的差异,进一步探索雌激素对学习记忆的影响。方法26只18月龄健康Wistar大鼠,其中雌性16只,雄性10只,在相同环境中饲养2个月后,用Morris水迷宫测试并分析其学习记忆能力的差异。结果在各时段老年雌性大鼠的逃避潜伏期均长于老年雄性大鼠,第5～9时段雌性大鼠的逃避潜伏期显著高于雄性大鼠(P<0.01),雌性大鼠的穿台次数显著低于雄性大鼠(P<0.05)。结论雌激素撤退在老年雌性大鼠学习记忆能力下降的中起到了主要作用。     

戊四氮点燃大鼠癫痫发作和癫痫形成过程中海马5-HT水平的变化

目的：研究戊四氮（PTZ）点燃大鼠癫痫形成过程中行为、脑电及海马5-羟色胺（5-HT）水平的变化。方法：对大鼠腹腔注射PTZ35mg／（kg·d）,观察行为变化,在不同时间点（第7、14、21、28天）,进行脑电记录,微透析取海马组织间液,活体观察24只自由活动大鼠在点燃过程和诱发发作前后脑电、海马5-HT及其代谢产物5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）水平及其5-HT转化率（5-HIAA／5-HT）的变化。结果：开始PTZ注射后,发作潜伏期逐日缩短,发作程度逐日加重,点燃时间在10～14d。在制模过程中有一只鼠死亡。海马脑电随着发作的加重而出现癫痫波潜伏期缩短,癫痫波量增加,发作间期出现自发放电。点燃早期（第7天）,发作间期大鼠的海马5-HT水平略有升高,随着点燃时间延长,5-HT水平逐渐降低,在点燃后（第14天）维持点燃（第21、28天）5-HT水平持续下降,与点燃前5-HT水平比较,差异无显著意义（P〉0．05）;5-HT转化率在点燃过程变化差异无统计学意义;5-HIAA水平在点燃时期和维持点燃时期呈逐步降低,点燃期、维持点燃期与对照组比较差异有显著意义（P〈0．05）。结论：PTZ点燃大鼠癫痼形成过程中,在点燃前,发作间期的海马5-HT水平呈阶段性升高,点燃后,发作间期的海马5-HT水平逐渐降低;点燃后,发作间期的海马5-HT水平明显低于正常水平;随着维持点燃时间延长,发作间期的海马5一HT水平呈进行性下降。     

电磁辐射对大鼠学习记忆和海马神经元的影响

目的 观察电磁波急性辐射对大鼠神经行为功能及海马组织病理的损伤效应。方法 以65 mW/cm2电磁波急性辐照大鼠20 min,通过主动回避反应和一次性被动回避反应观察大鼠学习记忆能力变化,并对海马组织切片进行病理观察和细胞凋亡原位检测。结果 电磁波辐照后可导致大鼠学习记忆功能障碍、海马脑区组织病理损伤和神经细胞凋亡,并于辐照后即刻至3 h以及辐射后24 h形成两次损伤高峰。结论 电磁波急性辐照具有特异性的中枢神经继发损伤效应,其导致的神经行为功能损伤早于组织病理损伤,且电磁波诱导的海马神经细胞凋亡可能是学习记忆功能损伤的主要原因之一。     

人参皂苷Rg1对癫痫大鼠海马神经元损伤和小胶质细胞活化的影响

目的探讨人参皂苷Rg1对癫痫大鼠海马神经元损伤和小胶质细胞活化的影响及其作用机制。方法 SD大鼠分为对照组(control组)、癫痫模型组(model组)、人参皂苷Rg1低剂量组(Rg1-L组)和人参皂苷剂量组(Rg1-H组),采用氯化锂-匹罗卡品腹腔注射制备癫痫大鼠模型;记录各组大鼠行为学发作情况;ELISA检测各组大鼠海马组织的氧化应激水平;qRT-PCR检测各组海马组织中炎症因子的表达;HE染色观察各组大鼠海马神经元结构和病理形态变化;免疫荧光组织化学染色检测各组大鼠小胶质细胞中iNOS、Arg-1蛋白表达。结果 model组大鼠症状达到Ⅲ级及Ⅲ级以上较control组显著增加,人参皂苷Rg1使大鼠的癫痫症状得到改善;与control组相比,model组大鼠海马组织中MDA(P<0.001)、TNF-αm RNA(P<0.001)、IL-1βmRNA(P<0.001)的表达水平上调,SOD(P<0.001)、IL-10 m RNA(P<0.001)的表达水平下调,而人参皂苷Rg1使大鼠海马组织中MDA(P<0.05)、TNF-αm RNA(P<0.05)、IL-1βmRNA(P<0.05)的表达水平下调,SOD(P<0.05)、IL-10 mRNA(P<0.05)的表达水平上调;model组大鼠海马神经元形态不完整,细胞间间隙增大和排列紊乱,人参皂苷Rg1组大鼠海马神经元形态明显改变,可见细胞排列较规则,大部分细胞形态正常;model组大鼠海马神经元凋亡率显著上升(P<0.001),人参皂苷Rg1组使大鼠海马神经元凋亡率下降(P<0.05);与control组相比,model组大鼠小胶质细胞数量显著增加(P<0.001),iNOS蛋白的表达显著升高(P<0.001),Arg-1蛋白表达显著降低(P<0.001),与model组相比,人参皂苷Rg1组大鼠小胶质细胞数量减少(P<0.05),iNOS蛋白的表达降低(P<0.05),Arg-1蛋白表达升高(P<0.05)。结论人参皂苷Rg1降低癫痫大鼠海马组织中iNOS蛋白的表达,增加Arg-1蛋白的表达,抑制小胶质细胞的激活,减轻氧化应激和炎症因子的表达,降低癫痫大鼠发作的等级。     

电针对海洛因成瘾大鼠学习记忆及海马CREB表达的影响

目的：探讨电针对海洛因成瘾大鼠学习记忆的影响及作用机制。方法130只Wistar大鼠随机分为对照组、海洛因成瘾组（简称成瘾组）和海洛因成瘾后作电针治疗组（简称电针组）。进行跳台实验测试大鼠学习记忆能力,并用免疫组化方法检测鼠脑海马环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（CREB）和磷酸化CREP（P—CREB）的表达。结果：成瘾组大鼠学习记忆下降（P％0．01）,电针组大鼠学习记忆有所改善（P〈0．01）;成瘾组大鼠海马CREB、P—CREB表达较对照组增高（P〈0．05）,电针组更高（P〈0．01）。结论：电针治疗可在一定程度上对抗海洛因成瘾大鼠所致的学习记忆下降,其机制可能与海马内CREB、P—CREB表达变化有关;CREB、PCREB参与学习记忆及海洛因成瘾的形成。