miR-514b-3p靶向MDM2对肺癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响

目的 探讨miR-514b-3p在肺癌组织中的表达水平,研究miR-514b-3p对肺癌细胞增殖、迁移侵袭的影响和分子机制.方法 qRT-PCR检测52例肺癌组织和与其对应的癌旁组织中miR-514b-3p的表达水平.构过表达miR-514b-3p的A549细胞株,MTT法检测细胞活力,Transwell法检测细胞迁移...     

IFITM2在胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞迁移和侵袭的影响

目的 探讨干扰素诱导跨膜蛋白2(IFITM2)在胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞迁移和侵袭的影响.方法 收集南方医科大学顺德医院2012年1月至2015年1月收治的54例胃癌患者癌组织及对应的癌旁组织样本,检测胃癌与癌旁组织、胃癌细胞MKN45与正常胃黏膜上皮细胞GES-1中IFITM2的表达水平,分析胃癌组织中IFIT...     

小干扰RNA沉默己糖激酶2对人乳腺癌SK-BR-3细胞增殖、迁移与侵袭的影响

目的 在体外研究小干扰RNA(siRNA)沉默己糖激酶2(HK2)对人乳腺癌SK-BR-3细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其分子机制.方法 在SK-BR-3细胞中分别转染siRNA阴性、siHK2-A和siHK2-B,分别采用荧光定量PCR和Western Blot法检测HK2 mRNA和蛋白的表达水平;MTT法检测细胞的...     

人参皂苷CK对人肝癌细胞HepG2迁移及侵袭的影响

目的探讨人参皂苷CK对人肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其可能机制。方法取对数生长期的Hep G2细胞,用不同浓度人参皂苷CK(0、10、20、40、80μmol·L^-1)处理,MTT法检测人参皂苷CK对细胞增殖的影响;细胞划痕实验、Transwell实验检测人参皂苷CK对肝癌细胞迁移、侵袭的影响;Western blot检测人参皂苷CK对Hep G2细胞中E-cadherin、N-cadherin及信号分子p-ERK、ERK、p-Akt、Akt水平的影响。结果 MTT检测结果显示,人参皂苷CK对肝癌Hep G2细胞生长有抑制作用;划痕和Transwell实验结果显示,人参皂苷CK可抑制Hep G2细胞的迁移和侵袭;Western blot结果显示人参皂苷CK可降低N-cadherin表达,明显升高E-cadherin表达水平,同时抑制ERK和Akt信号的磷酸化。结论人参皂苷CK可抑制肝癌细胞的迁移和侵袭过程,可能与抑制ERK和Akt信号有关。     

川芎嗪对肝癌HepG2细胞迁移、侵袭和细胞骨架的影响

目的通过研究川芎嗪(tetramethypyrazine,TMP)对肝癌HepG2细胞迁移能力、侵袭能力和细胞骨架的影响,探讨TMP抑制肝癌细胞侵袭转移的作用及机制。方法以肝癌HepG2细胞为靶细胞,通过细胞迁移划痕实验观察不同浓度的TMP对肝癌HepG2细胞迁移的影响及其时效关系;采用细胞侵袭实验,检测TMP对HepG2细胞侵袭能力的影响;应用高内涵细胞分析系统(HCS)免疫荧光法检测TMP对HepG2细胞骨架的影响。结果 TMP对HepG2细胞的迁移能力有抑制作用,并呈现时间和剂量依赖性;TMP能够明显抑制HepG2细胞的侵袭(P<0.01),并呈现一定的时间依赖性;TMP可减少HepG2细胞微丝数量,降低细胞骨架的面积,差异有显著性(P<0.01),有剂量相关性。结论 TMP能抑制肝癌HepG2细胞迁移及侵袭,具有潜在的抗肿瘤转移作用,其机制可能与TMP能明显降低细胞骨架微丝数量和面积,抑制骨架微丝重排相关。     

下调miR-19b表达对骨肉瘤MG63细胞侵袭、迁移及Wnt/β-Catenin通路的影响

摘要：目的:探讨下调miR-19b表达对骨肉瘤MG63细胞侵袭、迁移能力的影响,并探讨可能机制。方法:采用脂质体转染法转染人骨肉瘤MG63细胞,实验分为空白组、miR-19b inhibitor NC组、miR-19b inhibitor组,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞增殖情况,通过Transwell小室法检测各组细胞侵袭、迁移情况,通过免疫印迹(WB)法检测侵袭、迁移以及Wnt/β-连环蛋白(β-Catenin)通路相关蛋白表达情况。结果:与空白组、miR-19b inhibitor NC组相比,miR-19b inhibitor组miR-19b相对表达量、转染后48 h、72 h吸光度(A)值、侵袭与迁移细胞数、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、Wnt、细胞核β-Catenin表达水平显著降低(P<0.05),细胞质β-Catenin表达水平显著升高(P<0.05)。结论:下调miR-19b表达可能通过抑制Wnt/β-Catenin信号通路激活,从而抑制骨肉瘤MG63细胞侵袭、迁移。     

阿司匹林对人绒毛膜滋养层细胞迁移和侵袭的影响

目的 探究阿司匹林(ASP)对人绒毛膜滋养层细胞迁移和侵袭的影响.方法 人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/Svneo随机分为对照组(生理盐水)和低剂量实验组(0.05 mmol·L-1 ASP)、高剂量实验组(0.10 mmol·L-1 ASP).给药24 h后,用Wound healing法检测各组HTR-8/Svneo...     

siRNA 靶向沉默 Lipocalin-2基因下调 MMP-9表达对降低人肺癌 A549细胞的侵袭、迁移能力的影响

目的：利用针对 Lipocalin-2的小干扰 RNA（siRNA）,观察 Lipocalin-2基因沉默对人肺癌 A549细胞MMP-9表达及侵袭、迁移能力的影响。方法采用 Real-time PCR 和 Western blot 检测 Lipocalin-2在3种肺癌细胞株（A549、NCI-H661、NCI-H446）及正常人支气管上皮细胞（HBE）的表达情况。设计并构建靶向 Lipocalin-2的 siRNA 转染 A549细胞,采用 Real-time PCR 和 Western blot 检测转染效率及 Lipocalin-2基因沉默对 MMP-9 mRNA 和蛋白表达的影响。Transwell 小室检测细胞侵袭能力。细胞划痕实验检测细胞迁移能力。结果 Lipocalin-2 mRNA 和蛋白在肺癌A549、NCI-H661、NCI-H446细胞株中的表达水平均显著高于 HBE 细胞,差异有统计学意义（ P ＜0.05）。siRNA-Li-pocalin-2转染组 Lipocalin-2 mRNA 和蛋白表达水平与阴性对照组和空载体对照组比较,差异有统计学意义（ P ＜0.05）;siRNA-Lipocalin-2转染组 MMP-9 mRNA 和蛋白表达水平与阴性对照组和空载体对照组比较,差异有统计学意义（ P ＜0.05）;siRNA-Lipocalin-2转染组穿膜细胞数、平均迁移距离与阴性对照组和空载体对照组比较,差异有统计学意义（ P ＜0.05）。结论 Lipocalin-2基因沉默通过下调 MMP-9表达降低了人肺癌 A549细胞的侵袭和迁移能力。     

TUSC3在宫颈癌组织中的表达及其对宫颈癌细胞上皮间质转化、迁移和侵袭的影响

目的 探讨TUSC3在宫颈癌组织中的表达及其对宫颈癌细胞上皮间质转化、迁移和侵袭的影响。方法 采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测宫颈癌组织中的TUSC3表达水平,分析其表达与宫颈癌临床病理特征的关系。构建TUSC3过表达的慢病毒载体（LV11-TUSC3）及对照载体（LV11-NC）,选取过表达TUSC3的SiHa细胞作为LV11-TUSC3组,感染对照载体的SiHa细胞作为LV11-NC组,未感染慢病毒的SiHa细胞作为Con组。采用qRT-PCR检测各组细胞中TUSC3的mRNA表达水平,蛋白质免疫印迹法检测TUSC3、E-cadherin、N-cadherin、GRP78、ATF6的蛋白表达水平,MTT实验检测细胞增殖情况,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力。结果 宫颈癌组织中TUSC3 mRNA表达水平显著低于癌旁组织（P<0.05）。TUSC3表达水平与宫颈癌患者的年龄、肿瘤体积、宫颈浸润深度无关（P>0.05）,而与FIGO分期、淋巴结转移有关（P<0.05）。与Con组和LV11-NC组相比较,LV11-TUSC3组细胞TUSC3 mRNA和蛋白表达水平升高,E-cadherin表达上调,N-cadherin表达下调,细胞增殖、迁移和侵袭能力降低,内质网应激水平降低,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 TUSC3在宫颈癌组织中表达下调,上调其表达可抑制人宫颈癌SiHa细胞的增殖、上皮间质转化、迁移和侵袭、内质网应激。TUSC3可能成为宫颈癌治疗的潜在靶点。     

微小RNA-206调控膜联蛋白A2表达对肺癌细胞增殖与迁移和侵袭能力的影响

目的 分析微小RNA(miR)-206调控膜联蛋白A2表达对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响.方法 取人肺腺癌A549细胞分为miR-NC组、miR-206组、miR-206 inhibitor组、miR-206 inhibitor NC组,依照分组转染质粒;采用荧光素酶报告实验检测分析miR-206与膜联蛋白A2的...     

PLCε对人骨肉瘤细胞迁移侵袭影响的实验研究

目的研究磷脂酶Cε(phospholipase C epsilon,PLCε)对人骨肉瘤细胞株U2OS迁移侵袭能力的影响。方法 siRNA干扰U2OS细胞PLCε的表达,应用CCK-8实验检测PLCε对细胞增殖能力的影响,以划痕实验、Transwell小室模型实验测定细胞迁移能力改变情况,以明胶酶谱实验测定细胞分泌基质金属蛋白酶MMP2的变化。结果体外合成特异性PLCε基因siRNA可明显抑制U2OS细胞中PLCε的表达;沉默PLCε后,U2OS细胞的增殖能力无明显变化,而划痕愈合能力、迁移活力较对照组细胞明显下降,其分泌MMP2的水平也明显下降。结论沉默PLCε可致人骨肉瘤细胞U2OS的迁移和侵袭能力下降。     

miR-96在人乳腺癌中表达及其对乳腺癌细胞侵袭和迁移活性的影响

目的研究miR-96在人乳腺上皮细胞株和乳腺病变组织中表达状况及其对人乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法抽提4株人乳腺上皮细胞系和28例人乳腺病变新鲜组织总miRNA,实时定量PCR方法检测它们miR-96的表达状况;脂质体介导的转染方法将miR-96抑制物转染人乳腺癌MCF-7细胞株;通过MTS试剂盒检测细胞增殖能力,Transwell侵袭和迁移实验检测细胞侵袭及迁移能力。结果miR-96在高侵袭乳腺癌细胞株中表达较低侵袭乳腺细胞明显下调(P<0.01);人乳腺癌组织中miR-96表达较乳腺良性病变组织明显下调(P<0.01);miR-96抑制物转染乳腺癌MCF-7后,乳腺癌细胞侵袭和迁移活力较阴性对照组细胞明显增强(P<0.05),而细胞增殖活力改变无统计学意义(P>0.05)。结论 miR-96在人乳腺癌细胞株和乳腺癌组织中存在表达下调,并对人乳腺癌细胞的侵袭及迁移能力可能存在一定负性调控作用。     

miR-493-5p下调METTL3表达影响鼻咽癌细胞增殖、迁移和侵袭的研究

目的 探讨miR-493-5p对鼻咽癌细胞的增殖、迁移和侵袭的影响及其作用的靶基因.方法 实验分为miR-NC组(转染miR-493-5p模拟物阴性对照)、miR-493-5p组(转染miR-493-5p模拟物)、anti-miR-NC组(转染miR-493-5p抑制剂阴性对照)、anti-miR-493-5p组(转染...     

基于转录组测序探究PM2.5损伤肺上皮细胞 BEAS-2B的相关机制

目的 研究 PM2.5 对肺上皮细胞 BEAS-2B 基因表达的影响,并探讨其可能作用的信号通路。方法 BEAS-2B细胞分为对照组（PBS处理）和PM2.5组（200 mg/L PM2.5处理）,干预24 h后提取各组细胞总RNA进行高通 量测序。所得的序列经质控,与参考基因组比对,获得用于后续转录本组装、表达量计算的 mapped data（reads）后,比 对到 6 大数据库［NR、Swiss-Prot、Pfam、COG（Evolutionary genealogy of genes）、GO（Gene Ontology）、KEGG（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes）］注释,利用差异分析软件DESeq2筛选出差异表达基因（DEGs）,运用生物信息学 分析方法对DEGs进行GO和KEGG生物功能等分析,采用qRT-PCR法检测5个关键基因（FOSB、FOSL1、MUC5AC、 CSF2、IL-6）进行验证。结果 PM2.5组和对照组与转录组的数据比较后共获得961个DEGs,其中PM2.5组上调表达 453个,下调表达508个。通过GO和KEGG功能分析后发现这些DEGs主要参与了细胞蛋白质的磷酸化、免疫调节过 程、信号转导途径的调节以及凋亡途径的调控过程,并显著富集于IL-17信号通路。qRT-PCR结果显示,PM2.5组 FOSB、FOSL1与IL-6的相对表达量显著上调（P＜0.05）,这与RNA-seq测序结果一致。结论 PM2.5可能通过调控 “IL-17信号通路”中关键基因的表达,加重了细胞的炎症反应,促进了细胞凋亡等生命进程。     

miR-573通过调控LAIR2对滋养层细胞的增殖、迁移和侵袭的影响

目的 探讨微小RNA-573(miR-573)是否通过调控LAIR2影响滋养层细胞增殖、迁移及侵袭.方法实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)与蛋白免疫印迹法(Western blot) 检测人滋养层细胞系( HTR8/Svneo、JEG-3、BeWo、JAR)中 miR-573、 LAIR2 的表达水平;分别将 ...     

miR-130a-3p下调STAT3对恶性黑素瘤细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响

目的探讨miR-130a-3p对黑素瘤细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响以及潜在的作用机制。方法运用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测黑色素瘤细胞A2058、WM239和正常人黑色素细胞HEMn中miR-130a-3p和STAT3 mRNA的表达水平;将miR-NC组(转染miR-NC)、miR-130a-3p组(转染miR-130a-3p mimics)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、anti-miR-130a-3p组(转染anti-miR-130a-3p)、miR-130a-3p+pcDNA3.1组(共转染miR-130a-3p和pcDNA3.1)、miR-130a-3p+pcDNA3.1-STAT3组(共转染miR-130a-3p和pcDNA3.1-STAT3)、miR-NC+WT-STAT3组(共转染miR-NC和WT-STAT3)、miR-NC+MUT-STAT3组(共转染miR-NC和MUT-STAT3)、miR-130a-3p+WT-STAT3组(共转染miR-130a-3p和WT-STAT3)、miR-130a-3p+MUT-STAT...     

山慈菇多糖对膀胱癌细胞迁移、侵袭及miR-411表达的影响

目的 考察山慈菇多糖对膀胱癌细胞的迁移和侵袭及miR-411表达的影响.方法 膀胱癌细胞T24分为对照组(正常培养)、低、中、高剂量实验组(1,2,4 mg·mL-1山慈菇多糖处理)、miR-411组(转染miR-411 mimics)和miR-NC组(转染miR-NC).用Lipofectamine?2000转染试剂...