腰椎间盘退变性疾病与外周血淋巴细胞亚群的关系

文题释义：淋巴细胞亚群：淋巴细胞是白细胞的一种,是机体免疫应答功能的重要细胞成分,是淋巴系统几乎全部免疫功能的主要执行者,占外周血白细胞总数的20%-40%,按其发生迁移、表面分子和功能的不同,主要分成T淋巴细胞、B淋巴细胞和自然杀伤细胞三大类。 自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)：是机体重要的免疫细胞,不仅与抗肿瘤、抗病毒感染和免疫调节有关,而且在某些情况下参与超敏反应和自身免疫性疾病的发生。 背景：既往研究认为椎间盘退变的主要原因为遗传、衰老、营养不良和负荷史,免疫系统在椎间盘退变过程中的作用尚不清楚。 目的：观察腰椎间盘退变患者外周血淋巴细胞亚群的变化,并研究腰椎间盘退变程度与外周血各淋巴细胞亚群的关系。 方法：收集76例腰椎间盘退变性疾病患者和56例健康志愿者(对照组)的血样,用流式细胞仪检测外周血各淋巴细胞亚群,包括CD3⁺T细胞、CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞、CD19⁺B细胞、CD3^-CD16⁺CD56⁺自然杀伤细胞等淋巴细胞亚群的百分率,计算CD4⁺/CD8⁺比值。采用Pfirrmann分级标准评估2组腰椎间盘退变程度和分级,进一步评估外周血各淋巴细胞亚群与腰椎间盘退变程度的相关性。研究经郑州大学第一附属医院伦理审查委员会批准(伦理批号：2019-KY-285),所有受试者都签署了知情同意书。 结果与结论：①腰椎间盘退变性疾病组的腰椎间盘退变程度明显高于对照组(P < 0.05);②腰椎间盘退变性疾病组CD4⁺T细胞百分率、自然杀伤细胞百分率和CD4⁺/CD8⁺比值明显高于对照组(P < 0.05);腰椎间盘退变性疾病组CD8⁺T细胞百分率较对照组显著降低(P < 0.05);③对照组腰椎间盘退变程度与外周血各淋巴细胞亚群无相关性;腰椎间盘退变性疾病组腰椎间盘退变程度与CD4⁺ T细胞百分率、CD4⁺/CD8⁺比值、自然杀伤细胞百分率成线性正相关(r =0.412,P=0.000;r=0.715,P=0.000;r=0.494,P=0.000),与CD8⁺ T细胞百分率成线性负相关(r=-0.737,P=0.000);④结果表明,腰椎间盘发生退行性改变可能与外周血各淋巴细胞亚群改变有关,且CD4⁺T细胞增多、自然杀伤细胞增多以及CD4⁺/CD8⁺比值增高可能加速腰椎间盘退变。提示,免疫系统改变预示腰椎间盘退变发生的可能,其有望成为腰椎间盘退变性疾病的防治靶点。 ORCID: 0000-0002-8087-2356(冯阳) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

使用活化诱导标记法评价HIV-1感染者特异性CD4+T细胞免疫应答的研究

目的:建立一种检测HIV-1特异性CD4⁺T细胞亚群功能的活化诱导标记法(activation-induced markers,AIM),从而更有效地评价HIV-1抗原特异性CD4⁺T细胞免疫应答水平。方法:选取12例未经抗病毒治疗的HIV-1慢性感染者及6例未感染HIV-1的健康人,分别以基于多色流式细胞术的AIM法和细胞内因子染色法(intracellular cytokine staining,ICS)检测抗原特异性T淋巴细胞功能,并探讨两种方法用于评价HIV-1感染者抗原特异性T细胞免疫应答的能力。结果:AIM法检测HIV-1慢性感染者中HIV-1抗原特异性PD-1⁺CD25⁺CD4⁺T、CD69⁺CD200⁺CD4⁺T、CD69⁺ICOS⁺CD4⁺T细胞阳性的比例为11/12、8/12和7/12,检测CD69⁺ICOS⁺CD8⁺T、CD137⁺CD69⁺CD8⁺T、PD-1⁺CD25⁺CD8⁺、OX40⁺PD-1⁺CD8⁺T细胞阳性的比例为8/12、8/12、7/12、7/12。ICS法检测HIV-1抗原特异性IL-2⁺CD4⁺T、IFN-γ⁺CD4⁺T、TNF-α⁺CD4⁺T细胞阳性的占比为2/12、2/12、0;IFN-γ⁺CD8⁺T、TNF-α⁺CD8⁺T、IL-2⁺CD8⁺T细胞阳性的占比为12/12、10/12、5/12。结论:AIM法在评价CD4⁺T细胞功能方面更为敏感,可作为ICS法的补充,两种方法联合使用可更全面地评估抗原特异性T淋巴细胞反应。     

急性淋巴细胞白血病的免疫分型及CD4+CD25+T调节细胞检测

背景：在急性淋巴细胞白血病发病过程中,CD4⁺CD25⁺T调节细胞对机体免疫反应可能起着一定的调节作用。 目的：观察急性淋巴细胞白血病患者的免疫分型及外周血CD4+CD25+T调节细胞的变化情况。 方法：采用流式细胞仪对35例急性淋巴细胞白血病患者进行免疫分型,并检测外周血CD4⁺CD25⁺T调节细胞的数目,与18名健康对照作比较。 结果与结论：急性B细胞淋巴细胞白血病22例,急性T细胞淋巴细胞白血病13例;22例急性B细胞淋巴细胞白血病中CD19的阳性表达率最高(100%),而13例急性T细胞淋巴细胞白血病中CD7阳性表达率最高(100%)。急性B细胞淋巴细胞白血病患者外周血CD4⁺CD25⁺T调节细胞和急性T细胞淋巴细胞白血病患者差异无显著性意义(P > 0.05),但均高于健康对照(P < 0.05)。表明急性B细胞淋巴细胞白血病中CD19阳性表达率最高,急性T细胞淋巴细胞白血病中CD7阳性表达率最高,同时急性淋巴细胞白血病患者外周血CD4⁺CD25⁺T调节细胞水平显著增高。     

不同致敏模式支气管哮喘患儿外周血T淋巴细胞亚群比较及临床意义

目的：分析比较不同过敏原致敏模式下支气管哮喘患儿外周血T淋巴细胞亚群,为进一步明确不同变应原致敏哮喘患儿机体的免疫功能状态差异提供更多依据。方法：入组374例在北京儿童医院过敏反应科确诊的哮喘患儿,行过敏原皮肤点刺试验确定患儿致敏模式,流式细胞术测定外周血T细胞（CD3⁺CD19⁺）、CD4⁺T细胞（CD3⁺CD4⁺）、CD8⁺T细胞（CD3⁺CD8⁺）、Tregs（CD4⁺CD25⁺FOXP3⁺）、Th1（CD4⁺IFN-γ⁺T）、Th2（CD4⁺IL-4⁺T）以及Th17细胞亚群（CD4⁺IL-17A⁺T）,横断面比较上述免疫学指标在不同致敏模式哮喘患儿组间是否存在差异。结果：根据SPT检出阳性过敏原数量,将哮喘患儿分为未致敏哮喘组、单一致敏哮喘组及多重致敏哮喘三组。与健康对照组儿童相比,未致敏哮喘组、单一致敏哮喘组以及多重致敏哮喘三组哮喘患儿的外周血T细胞、CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞、CD4/CD8比值、Th1细胞、Th2细胞、Th1/Th2比值、Tregs、Th17细胞、Tregs/Th17比值等指标的组间差异均具有统计学意义。进一步对三组患儿进行两两比较发现,Tregs、Th17细胞以及Tregs/Th17比值在三组间差异具有统计学意义（均P<0.05）。根据SPT阳性检出过敏原种类,将入组哮喘患儿致敏谱主要分为尘螨组、霉菌组、动物皮屑组、花粉组及其他组。与健康对照组儿童相比,尘螨组、霉菌组、动物皮屑组、花粉组以及其他组过敏原致敏患儿的外周血T细胞、CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞、CD4/CD8比值、Th1细胞、Th2细胞、Th1/Th2比值、Tregs、Th17细胞、Tregs/Th17比值等指标的组间差异均具有统计学意义（均P<0.05）。同样地,行两两比较发现,五组患儿的外周血Th1细胞、Th2细胞、Th1/Th2比值、Tregs、Th17细胞以及Tregs/Th17比值在三组间差异具有统计学意义（均P<0.05）。结论：不同致敏模式的哮喘患儿外周血T淋巴细胞亚群分布状态存在差异,因此应注意不同致敏模式的哮喘患儿免疫应答状态差异。     

老年初诊急性髓细胞白血病患者CD4+CD25+调节性T细胞的表达

背景：研究证实,很多恶性肿瘤患者体内CD4⁺CD25⁺调节性T细胞存在高表达,近期也有研究发现,急性髓细胞白血病患者外周血CD4⁺CD25⁺调节性T细胞同样表现出高比例表达。 目的：分析老年初诊急性髓细胞白血病患者CD4⁺CD25⁺调节性T细胞的表达特点。 方法：纳入初诊急性髓细胞白血病患者92例,将年龄在60岁以下者设为中青年组(n=22),年龄在60岁以上者设为老年观察组(n=70)。在老年观察组中,32例经规范化疗后完全缓解,设为完全缓解组;将余下38例设为老年组,依据FAB分型标准,分为M2 6例、M3 19例、M4 7例、M5 6例。另选择同期体检健康人群42名作为正常对照组。抽取受试者外周静脉血,检测CD4⁺CD25⁺调节性T细胞表达情况。 结果与结论：老年组、完全缓解组CD4⁺CD25^highFOXP3⁺调节性T细胞比例高于正常对照组(P < 0.01),并且老年组CD4⁺CD25^high FOXP3⁺调节性T细胞比例高于完全缓解组(P < 0.01)。老年组、完全缓解组CD4⁺FOXP3⁺T细胞比例高于正常对照组(P < 0.01),并且老年组CD4⁺ FOXP3⁺T细胞比例高于完全缓解组(P < 0.01)。老年组CD4⁺CD25^high FOXP3⁺调节性T细胞与CD4⁺ FOXP3⁺T细胞比例高于中青年组(P < 0.01)。老年组不同分型间CD4⁺CD25^high FOXP3⁺调节性T细胞和CD4⁺ FOXP3⁺T细胞比例比较差异均无显著性意义(P > 0.05)。Pearson相关性检验结果显示,老年初诊急性髓细胞白血病患者外周血CD4⁺CD25^high FOXP3⁺调节性T细胞比例和CD4⁺ FOXP3⁺T细胞比例呈正相关(r=0.87,P=0.019)。表明老年初诊急性髓细胞白血病患者CD4⁺CD25⁺调节性T细胞比例高于健康人群和中青年急性髓细胞白血病患者。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

信号素4A对SLE患者T细胞功能的影响

目的：分析信号素4A(Sema4A)在系统性红斑狼疮(SLE)患者的表达水平，探讨Sema4A对SLE患者T细胞的影响。方法：(1)收集37例SLE患者为实验组，28例健康体检者为对照组。采用ELISA检测血浆中可溶性Sema4A的浓度，流式细胞术(FCM)分析各组外周血细胞中CD3⁺CD8^-IFN-γ⁺(Th1)、CD3⁺CD8^-IL-4⁺(Th2)、CD3⁺CD8^-IL-17⁺(Th17)细胞在Th细胞中的占比；(2)采用密度梯度离心法和免疫磁珠法分选SLE患者及健康体检者外周血CD4⁺T细胞后加入抗人CD3和抗人CD28，并在有或无人重组Sema4A蛋白/抗Sema4A抗体的条件下培养5 d后，采用FCM检测CD4⁺T细胞膜上CD25的表达；在上述相同培养体系中加入荧光染料CFSE，同样培养5 d，采用FCM检测CD4⁺...     

TLR7介导日本血吸虫感染C57BL/6小鼠脾脏的T细胞反应

目的 探究日本血吸虫感染后小鼠脾脏TLR7对T细胞反应的调节作用。方法 使用日本血吸虫感染6周的C57BL/6小鼠（WT）和TLR7-KO小鼠,并设立相应对照组。然后观察组织病变情况,分离脾脏淋巴细胞,运用qRT-PCR、流式细胞术检测脾脏中CD4⁺T和CD8⁺T细胞数量改变以及TLR7分子表达;进一步通过流式细胞术检测WT和TLR7-KO小鼠感染前后CD4⁺T和CD8⁺T细胞CD25、CD69、CXCR5、CD40L等活化表型的变化;经PMA和离子霉素的刺激,使用细胞内细胞因子染色的方法检测CD4⁺T和CD8⁺T细胞IFN-γ、IL-4分泌情况。结果 日本血吸虫感染后,小鼠肝脏和脾脏明显增大,脾脏中CD4⁺T和CD8⁺T细胞发生大量聚集;感染后CD4⁺T和CD8⁺T细胞多种活化及功能相关指标均显著上升,且IL-4⁺CD4⁺T...     

母B族链球菌定植致新生儿巨噬细胞相关细胞因子及免疫功能改变的研究

目的：探讨母B族链球菌(GBS)定植致新生儿巨噬细胞相关细胞因子及免疫功能改变的研究。方法：前瞻性选取2020年3月至2022年1月广州医科大学附属第二医院收治确诊为母GBS定植的新生儿43例(研究组)及同期健康新生儿40例(对照组)。对比两组巨噬细胞相关细胞因子及T淋巴细胞亚群水平、NK细胞水平。分析母GBS定植后新生儿的临床表现。结果：研究组CD3⁺T、CD19⁺T、CD3⁺CD8⁺T、CD4⁺/CD8⁺T、NK细胞水平均高于对照组,CD3⁺CD4⁺T低于对照组(P<0.05)。研究组患儿IFN-γ、IL-13、IL-4、IL-10水平均高于对照组(P<0.05)。研究组患儿血清巨噬细胞移动抑制因子(MIF)、CXCL9、CXCL10、CCL3水平均高于对照组(P<0.05)。Person相关性分析显示,血清CD3⁺T、CD19⁺T、CD3     

系统性红斑狼疮患者外周血 CD19+ CD25+ Breg比例和细胞表面PD-1和PD-L1的表达及其与临床指标的相关性

目的 研究程序性死亡蛋白1(PD-1)与其配体PD-L1在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD19⁺CD25⁺调节性B细胞(Breg)的表达及临床意义。方法 收集50例SLE患者和41例健康人(HC)外周血标本,采用流式细胞仪检测外周血中CD19⁺CD25⁺ Breg的比例,以及CD19⁺CD25⁺Breg的PD-1、 PD-L1表达,同时采集患者的临床表现和实验室指标等临床信息。使用免疫磁珠分选CD4⁺ T细胞与CD19⁺ B细胞,体外细胞共培养,检测Breg的分化。结果 SLE患者活动组外周血中CD19⁺CD25⁺Breg比例低于HC,CD25⁺B细胞PD-1、 PD-L1的表达高于HC; SLE患者有胸腔积液、关节炎、 C反应蛋白(CRP)上升的患者Breg频率高于对应阴性组;SLE患者有IgM下降、抗核糖核蛋白(RNP)抗体阳性的患者Br...     

静脉输注过氧化氢溶液上调小鼠脾脏和外周血CD4+Foxo3+调节性T细胞

背景：现已证实,天然生成的调节性T细胞在维护机体免疫稳态、抑制炎性反应、抗移植排斥、抑制抗肿瘤免疫应答以及防治自身免疫病中都有重要的功能和作用。 目的：探讨静脉输注过氧化氢对BALB/c小鼠CD4⁺CD25⁺Foxo3⁺ 调节性T细胞的影响。 方法：取BALB/c小鼠12只,随机分为两组。H₂O₂处理组小鼠尾静脉注射含有H₂O₂的PBS;PBS组小鼠静脉注射无菌PBS。分别在注射2周后处死小鼠,采集小鼠外周血、脾脏和胸腺,采用流式细胞仪检测其中CD4⁺CD25⁺ Foxp3⁺T细胞比例。 结果与结论：H₂O₂处理组小鼠外周血和脾脏CD4⁺Foxp3⁺ T细胞比例、CD4⁺Foxp3⁺/CD4⁺细胞比例均高于对照组小鼠(P < 0.05)。提示静脉注射H₂O₂能上调小鼠外周血和脾脏内CD4⁺Foxp3⁺调节性T细胞的比例。     

西藏高原地区成年健康人群外周血淋巴细胞亚群参考范围研究

目的 研究西藏高原地区成年健康人群的淋巴细胞亚群参考范围。方法 挑选2023年4月至6月期间在我院进行体检的161例健康成人,利用流式细胞仪分析淋巴亚群百分比,按年龄和性别分析影响因素,采用百分位数法建立95%置信区间作为正常人参考范围。结果 淋巴细胞亚群正常参考范围CD3⁺%(56.16～81.06)、CD3⁺CD4⁺%(25.02～50.44)、CD3⁺CD8⁺%(14.52～42.02)、CD3^-CD19⁺%(5.83～30.66)、CD3^-CD56⁺%(5.01～18.65)、CD4/CD8(0.68～2.98);在不同年龄阶段,T细胞(CD3⁺)百分比和NK细胞(CD3^-CD56⁺)百分比差异具有统计学意义,特别是(18～30岁)和(>50岁)年龄组差异具有统计学意义(P<0.05),CD4^+<...     

血红素加氧酶1在间充质干细胞上调哮喘患者外周血调节性T细胞中的作用

背景：上调CD4⁺CD25⁺CD127^low/-调节性T细胞是目前治疗哮喘的新靶点。骨髓间充质干细胞在体外可上调正常人外周血的调节性T细胞,但机制尚未明确。 目的：观察血红素加氧酶1对间充质干细胞上调哮喘患者外周血CD4⁺CD25⁺CD127^low/-调节性T细胞的影响。 方法：分别加入0,15,30,45,60 μmol/L氯化高铁血红素和0,5,10,15,20 μmol/L锌-原卟啉对骨髓间充质干细胞进行预处理,荧光定量PCR检测各组间充质干细胞中血红素加氧酶1 mRNA的表达量。密度梯度离心法分离哮喘急性发作期患者和健康对照者的外周血单个核细胞,分别与经氯化高铁血红素预处理、经锌-原卟啉预处理、不经预处理的间充质干细胞共孵育,加入植物血凝素反应72 h,流式细胞仪检测各组CD4⁺CD25⁺CD127^low/-调节性T细胞占CD4⁺T细胞的比例。 结果与结论：人骨髓间充质干细胞中有血红素加氧酶1表达,其表达在体外可被诱导和抑制。间充质干细胞中血红素加氧酶1 mRNA的表达量随氯化高铁血红素浓度增加而增加(P < 0.05),随锌-原卟啉浓度增加而减少(P < 0.05),具有剂量依赖性。间充质干细胞在体外可提高哮喘患者和健康对照者CD4⁺CD25⁺CD127^low/-调节性T细胞的水平(P < 0.01),诱导间充质干细胞中血红素加氧酶1的表达可使共孵育后CD4⁺CD25⁺CD127^low/-调节性T细胞水平提高(P < 0.01),抑制间充质干细胞中血红素加氧酶1的表达可使共孵育后CD4⁺CD25⁺CD127^low/-调节性T细胞的水平降低(P < 0.01),但仍高于对照组(P < 0.01)。提示骨髓间充质干细胞部分通过血红素加氧酶1上调哮喘患者外周血CD4⁺CD25⁺CD127^low/-调节性T细胞。     

供体凋亡淋巴细胞预输注对猪肝移植受体CD4+T、CD8+T、CD4+CD25+调节性T细胞的影响

背景：凋亡细胞能够主动调节机体的免疫功能,并能通过调节机体细胞免疫和体液免疫的途径诱导免疫耐受,但这些结果只在大鼠肝脏移植模型中证实。 目的：探讨通过⁶⁰Co γ射线体外处理后的供体淋巴细胞预输注诱导猪肝移植特异性免疫耐受的作用中,对淋巴细胞亚群的影响。 方法：建立非转流小型猪原位肝移植模型。将受体猪随机摸球法均分为2组：空白对照组,受体猪无特殊处理,行肝移植;淋巴细胞组：受体猪在肝移植前7 d经耳静脉注射⁶⁰Co γ射线处理过的5×10⁸个供体淋巴细胞。观察两组受体猪移植后的存活时间,移植后T淋巴细胞亚型CD4⁺T、CD8⁺T、CD4⁺CD25⁺Tr变化及病理。 结果与结论：移植后3 d,两组病理活检均呈急性中、重度排斥反应;移植后6 d,两组均呈急性重度排斥反应。移植后1,3,6 d CD4⁺T、CD8⁺T、CD4⁺CD25⁺Tr升降趋势,两组间差异无显著意义(P > 0.05)。提示,⁶⁰Co γ射线体外处理过的淋巴细胞预输注未能够诱导猪同种异体肝移植特异性免疫耐受,未能引起T淋巴细胞亚群变化有关。     

幽门螺旋杆菌感染与MALT1基因易位对胃MALT淋巴瘤免疫微环境的影响及意义

目的 探究幽门螺旋杆菌(helicobacter pylori, HP)感染和黏膜相关淋巴组织淋巴瘤易位基因1(mucosa-associated lymphoid tissue lymphoma translocation gene 1, MALT1)易位对胃黏膜相关淋巴组织(mucosa-associated lymphoid tissue, MALT)淋巴瘤免疫微环境及患者预后的影响。方法 通过免疫组化染色检测40例胃MALT淋巴瘤患者石蜡活检样本中CD3⁺T细胞、CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞、Foxp3⁺调节性T细胞(Treg)、CD68⁺巨噬细胞、CD163⁺M2型巨噬细胞、CD83⁺树突状细胞(dendritic cell, DC)、CD56⁺自然杀伤细胞(natural killer cell, NK)和CD33⁺髓源抑制细胞(myeloid-derived suppress...     

肝移植后他克莫司血药浓度对外周血单个核细胞内HBV DNA的影响

背景：肝移植后他克莫司等免疫抑制剂的长期应用导致机体细胞免疫功能降低,并有可能影响机体对乙肝病毒的清除。 目的：分析乙肝相关肝移植患者后不同浓度他克莫司对外周血单个核细胞中的HBV DNA含量的影响。 方法：纳入乙肝相关终末期肝病肝移植受者23例,根据移植后12周清晨空腹他克莫司血药浓度,分为高浓度组(≥ 10 μg/L) 9例和低浓度组(< 10 μg/L)14例,同时用荧光标记单克隆抗体结合流式细胞技术检测外周血T细胞亚群的百分比,用实时荧光定量PCR检测外周血单个核细胞内的HBV DNA。 结果与结论：用多元线性回归分析外周血单个核细胞内的HBV DNA含量与CD8⁺CD152⁺呈正相关,与CD8⁺CD28⁺呈负相关。高血药浓度他克莫司的患者外周血单个核细胞内的HBV DNA高于低浓度组,其改变与反映细胞免疫功能的指标CD8⁺CD152⁺和CD8⁺CD28⁺的变化有关。     

再生多孔丝素膜创面局部运用激活不同部位T细胞的作用

背景：丝素蛋白是从蚕丝中提取的天然高分子纤维蛋白,其具有良好的理化特性及生物相容性。而目前国内外有关再生多孔丝素膜植入体内后对T淋巴细胞的激活作用研究未见报道。 目的：观察再生多孔丝素膜植入大鼠局部创面后对外周血单个核细胞、脾脏及胸腺中T淋巴细胞的激活作用。 方法：切除SD大鼠背部皮肤建立2 cm×2 cm创面,随机分为2组：实验组覆盖经预处理的再生多孔丝素膜,将已切除皮肤的表皮盖在丝素膜上进行缝合,对照组仅覆盖自身表皮层。于术后第3,14,28,56,90天观察创面愈合及丝素膜的残留情况,采用双色免疫荧光及流式细胞术分析大鼠外周血、脾脏及胸腺中CD3⁺CD25⁺/ CD3⁺T细胞百分率。 结果与结论：植入早期,两组均可见局部、轻微的炎症细胞浸润,主要为淋巴细胞;至28 d后,炎症细胞逐渐减少,并且在整个动态观察过程中,两组结果一致。实验组外周血中活化T细胞在14 d之前呈一过性升高,随后开始下降,至28 d以后,活化T细胞水平趋于稳定,与对照组无明显差异(P > 0.05);脾脏与胸腺T细胞均有少量活化,随后即开始下降并趋于稳定,胸腺中CD3⁺CD25⁺/ CD3⁺T细胞的阳性率较脾脏微高,与对照组均无明显差异(P > 0.05)。说明再生多孔丝素膜对T淋巴细胞的激发作用较小,引发机体细胞免疫应答的能力较弱。     

淋巴细胞亚群及炎症因子对新型冠状病毒肺炎患者的临床价值研究

目的 分析新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者外周血淋巴细胞亚群及炎症因子的变化特征，为临床对COVID-19早期预警和病情判断提供数据支持。方法 选取2022年12月10日至12月31日中国中医科学院望京医院收治的81例COVID-19确诊患者作为研究对象，按疾病严重程度分为中型、重型和危重型组。分析3组患者成熟T淋巴细胞(CD3⁺)、辅助/诱导性T细胞(CD4⁺)及细胞毒性/抑制性T细胞(CD8⁺)、B淋巴细胞、NK细胞、PCT、CRP、IL-6、血清铁蛋白(SF)的表达水平差异。采用秩和检验评价以上指标。同时，将重型和危重型合并为重症型组，应用受试者工作曲线(ROC)评价以上指标在中型和重症型患者间的诊断价值。结果 本研究共收集81例新冠肺炎患者，其中危重型12例(男女比例：3∶1)、重型26例(男女比例：17∶9)、中型43例(男女比例：23∶20);平均年龄81.5、77.5和70.3岁(P<0.01)。淋巴细胞亚群中CD3⁺T细胞、CD4⁺T细胞、CD8<...     

CD3+、CD4+和CD8+ T细胞Vβ亚家族中PD-1免疫表型检测方法的建立

 目的：建立分析CD3⁺、CD4⁺和CD8⁺ T细胞Vβ亚家族中免疫抑制性受体程序性细胞死亡蛋白1（PD-1）分子免疫表型的方法,从而了解人体外周血T细胞谱系中PD-1表型细胞的分布频率。方法：收集健康个体（HI）外周血10例,利用抗CD45、CD3、CD4、CD8、PD-1等多色荧光流式单抗,以及T细胞受体（TCR）Vβ谱系试剂盒[IOTest^® Beta Mark TCR Vβ Repertoire Kit,共8管,每一管均为FITC和PE偶联的复合抗体（A~H）,每一管复合抗体包含3个TCR Vβ亚家族的抗体],检测T细胞亚群TCR Vβ亚家族中PD-1的分布情况。结果：在10例HI的检测中,CD3⁺、CD3⁺CD4⁺和CD3⁺CD8⁺ T细胞亚群中检测的24个TCR Vβ亚家族总和符合试剂盒所提供的Quick Reference Card数据,初步结果显示,HI中CD3⁺ T细胞主要优势TCR谱系是Vβ2、Vβ3、Vβ8、Vβ9、Vβ5.1、Vβ13.1和Vβ13.2;而在CD3⁺CD4⁺ T细胞中的优势利用主要集中在Vβ2、Vβ3、Vβ8、Vβ9、Vβ5.1和Vβ13.1;在CD3⁺CD8⁺ T细胞中则主要为Vβ1、Vβ2、Vβ3、Vβ9、Vβ13.1和Vβ13.2等亚家族。进一步分析显示PD-1⁺细胞在HI的CD3⁺、CD3⁺CD4⁺和CD3⁺CD8⁺ T细胞24个TCR Vβ亚家族中均可以检测到,PD-1⁺细胞在T细胞各亚群中分布频率有个体差异,在CD4⁺ T细胞中,以Vβ5.2⁺ T细胞的分布频率较高,而在CD8⁺ T细胞中,以Vβ11⁺和Vβ13.6⁺ T细胞的分布频率较高。结论：本项工作利用健康人样本成功建立了多色荧光流式细胞术检测T细胞亚群TCR Vβ谱系中免疫抑制性受体PD-1分子免疫表型的方法,为进一步应用于分析白血病等病人TCR Vβ谱系的免疫抑制特点提供了新方法。     

应用环磷酰胺构建C57BL/6J小鼠免疫抑制模型

背景：在免疫增强剂的研究中,常用到免疫抑制模型,如何建立免疫抑制模型成为免疫增强剂作用评价的关键。 目的：应用环磷酰胺构建C57BL/6J小鼠免疫抑制模型。 方法：将小鼠随机分为正常对照组、环磷酰胺50 mg/kg 5 d组,环磷酰胺80 mg/kg 3 d组,环磷酰胺80 mg/kg 5 d组,环磷酰胺100 mg/kg 5 d组和环磷酰胺100 mg/kg隔天给药组。正常对照组小鼠腹腔注射生理盐水0.1 mL,连续5 d。环磷酰胺50 mg/kg 5 d组,环磷酰胺80 mg/kg 3 d组,环磷酰胺80 mg/kg 5 d组和环磷酰胺100 mg/kg 5 d组小鼠分别以环磷酰胺50,80,80,100 mg/kg腹腔注射连续5,3,5,5 d。环磷酰胺100 mg/kg隔天给药组小鼠腹腔注射100 mg/kg环磷酰胺,隔天1次,共注射3次。 结果与结论：与正常对照组比较,腹腔注射环磷酰胺可导致小鼠外周血中CD3⁺T,CD3⁺CD4⁺T及CD3⁺CD8⁺T细胞明显下降(P < 0. 05);谷丙转氨酶(除环磷酰胺50 mg/kg 5 d、80 mg/kg 3 d组)、谷草转氨酶、尿素显著升高(P < 0.05),其中环磷酰胺80 mg/kg 5 d组、环磷酰胺100 mg/kg 5 d组和环磷酰胺100 mg/kg隔天给药组对肝肾功能的影响更为明显。提示腹腔注射环磷酰胺可建立CD3⁺T,CD3⁺CD4⁺T及CD3⁺CD8⁺T细胞明显下降的免疫抑制模型,其中以环磷酰胺50 mg/kg 5 d和80 mg/kg 3 d方式对肝肾功能的损伤较小。     

ILC2及Tfh的活性与肺腺癌免疫抑制状态的相关性研究

为探讨ILC2和滤泡辅助性T细胞（follicular helper T cell, Tfh）是否协同促进并维持肺腺癌免疫抑制状态,选择肺腺癌患者为研究对象,采用FACS检测患者外周血中ILC2和Tfh的比例;qRT-PCR检测外周血ILC2及Tfh相关因子的表达水平,并对ILC2及Tfh进行相关性分析。结果显示,与对照组比较,肺腺癌患者外周血中ILC2的比例及其相关因子IL-33、IL-25、胸腺基质淋巴细胞生成素（thymic stromal lymphopoietin,TSLP）、IL-13、IL-5及IL-4 mRNA的表达水平均升高（P<0.05）,CD3⁺CD4⁺CXC趋化因子受体5（CXC chemokine receptor 5, CXCR5）⁺T细胞及PD-1⁺CXCR5⁺Tfh的比例升高（P<0.05）,CD3⁺CD4⁺CXCR5^-T细胞的比例下调（P<0.01）,Tfh相关...