人外周血CD8+T细胞CD28、CD56及CD57表达水平的老年性改变

目的:通过对健康老年人与青年人外周血CD8⁺T细胞CD28、CD56及CD57表达水平的比较性研究,探讨免疫衰老的细胞学机制。方法:采用三色免疫荧光标记流式细胞术分析青年组(20-35岁)与老年组(60-75岁)外周血CD8⁺CD28⁺、CD8⁺CD56⁺及CD8⁺CD57⁺T细胞水平。结果:老年组外周血CD8⁺CD28⁺T细胞明显低于青年组,阳性百分率分别为34.07±5.29和49.84±7.43(P＜0.05);而老年组CD8⁺CD56⁺T细胞及CD8⁺CD57⁺T细胞均明显高于青年组,前者阳性百分率分别为6.60±2.40和2.10±0.35,后者阳性百分率分别为41.82±6.01和22.89±2.80(P＜0.05)。结论:老年人CD8⁺T细胞CD28、CD56及CD57的表达率均随年龄增长有明显改变;CD28表达下降可能是引起免疫系统功能降低的重要原因,而CD56、CD57表达水平的增加则可能是机体对细胞免疫功能下降的一种代偿性适应。     

CD4+CD25+调节性T细胞的发育与胸腺CD4-CD25+细胞关联性的探讨

目的:探讨CD4 CD25 调节性T细胞(CD4 CD25 regulatoryTcells,CD4 CD25 Tr)的发育及其与胸腺CD4-CD25 细胞的关系。方法:以流式细胞术检测小鼠从出生至发育成熟过程中,胸腺、脾脏、淋巴结和外周血中CD4 CD25 Tr比例变化,以及胸腺CD4-CD25 细胞比例变化;通过磁激活细胞分选(MACS)从小鼠淋巴结纯化CD4 CD25 T和CD4 CD25-T细胞,经CFDA-SE标记,以多种刺激形式诱导增殖。结果:小鼠出生1d到10周的发育过程中,胸腺CD4 CD25 Tr比例一直比较恒定,但在脾脏、淋巴结和外周血,随鼠龄增加而不断升高,从1d龄到1周时升高最迅速,其后的升高速度逐渐减慢,10周龄时达平台期。胸腺中CD4-CD25 细胞在出生1d的小鼠比例非常高,1d龄到1周龄期间迅速下降,10周龄时达平台期。ConA不能诱导CD4 CD25 Tr和CD4 CD25-T细胞增殖,但CD4 CD25 Tr出现一过性细胞增大;佛波醇酯加离子霉素能诱导CD4 CD25 Tr和CD4 CD25-T细胞增殖;包被的抗CD3抗体加可溶性抗CD28抗体能刺激CD4 CD25-T细胞增殖,但CD4 CD25 Tr不增殖,加入高浓度IL-2,CD4 CD25-T细胞增殖更强,CD4 CD25 Tr出现增殖。结论:胸腺CD4-CD25 细胞很有可能是CD4 CD25 Tr的前体。     

镁对哮喘患者外周血CD4+ CD25+调节性T细胞凋亡及Foxp3表达的影响

目的:观察镁对分离培养的健康人和哮喘患者外周血CD4⁺CD25⁺调节性T细胞凋亡及叉头框蛋白3(Foxp3)表达的影响。方法:经磁珠分离法分离出健康人和哮喘患者外周血CD4⁺CD25⁺T细胞,分镁剂干预组(10 mmol/L)及空白组培养72 h后,用流式细胞仪检测CD4⁺CD25⁺T细胞的凋亡率及Foxp3表达情况。结果:(1)健康人外周血CD4⁺CD25⁺T细胞的纯度为77.4％~92.3%,哮喘患者CD4⁺CD25⁺T细胞的纯度为75.2％~93.8％。(2)CD4⁺CD25⁺T细胞占外周血CD4⁺T细胞的比例在健康组为4.12%~7.98%,在哮喘组为4.51%~8.68%,两者没有显著差异(P＞0.05)。(3)镁(10mmol/L)可以诱导健康组及哮喘组外周血CD4⁺CD25⁺T细胞凋亡率增加(P＜0.05),但对Foxp3的表达无影响(P＞0.05)。结论:镁促进CD4⁺CD25⁺T调节细胞凋亡增加可能为其治疗支气管哮喘的作用机制之一。     

Graves病患者131I治疗前后CD4+CD25+ Foxp3+调节性T细胞的变化

目的:通过对Graves病患者131I治疗前后外周血各淋巴细胞亚群和CD4+CD25+ Foxp3+调节性T细胞含量以及相关基因Foxp3mRNA表达水平的测定,探讨131I治疗方法是否可以通过改变调节性T细胞的含量从而改善Graves病患者的免疫功能异常。方法:采集30例Graves病患者131I治疗前及治疗后1个月的外周血,流式细胞仪检测外周血CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3-CD19+、CD3-CD16+CD56+淋巴细胞亚群及CD4+CD25+ Foxp3+调节性T细胞的百分率,Real-TimePCR检测外周血单个核细胞Foxp3mRNA的表达水平。结果:和治疗前相比,Graves病患者131I治疗1个月后外周血CD3+CD4+T细胞和CD3-CD19+B细胞百分率都明显减少(P<0.05),CD3-CD16+CD56+NK细胞百分率明显增加(P<0.05),CD3-CD8+T细胞、CD4+CD25+ Foxp3+调节性T细胞百分率和Foxp3mRNA的表达水平无明显变化。结论:131I不能通过增加调节性T细胞的含量而改善Graves病患者的免疫耐受障碍,但可以通过减少CD4+T和B淋巴细胞的含量和增加NK细胞的含量来控制过度的免疫应答。     

急性HIV感染者外周血T淋巴细胞CD57抗原动态表达及临床意义分析

目的 研究CD57在HIV急性感染者外周血T淋巴细胞的动态表达情况及临床意义.方法 随机选取2006年11月-2009年12月期间确诊为HIV-1急性感染的17位患者为研究对象,15例健康体检者为对照组,收集HIV感染者1、3、6个月时间点及对照组外周血单个核细胞(PBMC),以流式细胞仪双色、三色分析法分别分析CD3+ CD57+T淋巴细胞、CD3+ CD4+ CD57+T淋巴细胞、CD3+CD8+CD57+T淋巴细胞的比例,并分析其与病毒载量、CD4+T细胞计数间的相关性.结果 在感染1、3、6个月外周血淋巴细胞中,CD57+T淋巴细胞比例分别为15.24％±1.49％、13.51％±2.45％及14.65％ ±1.83％,正常对照组CD57+T淋巴细胞比例为3.72％±0.56％,HIV感染1、3、6个月CD57+T淋巴细胞比例较正常对照组明显增高,差异有统计学意义(P均＜0.0001).在感染的1个月、3个月外周血中CD8+CD57+在淋巴细胞中的比例分别为7.79％ +2.10％、9.88％±2.36％,与对应时间点的病毒载量成正相关关系,R2分别为0.3700、0.3768,P值分别为0.0096、0.0088;与对应时间点CD4+T细胞计数成负相关关系,R2分别为0.3768、0.4235,P值分别为0.0215、0.0017.急性HIV感染1个月时间点,6例病情快速进展患者与11例病情非快速进展患者,CD8+ CD57+T细胞比例分别为11.20％±2.21％、6.16％±1.09％,CD4+ CD57+T淋巴细胞比例分别为2.79％ ±0.31％、1.40％±0.30％,病情快速进展患者CD8+CD57+T、CD4+CD57+T淋巴细胞比例均高于病情非快速进展组,P值分别为0.0338、0.0106.结论 HIV感染急性期CD57+T淋巴细胞比例增加,其中CD8+ CD57+T淋巴细胞百分比可反映HIV病毒载量变化及CD4+T淋巴细胞的计数情况,HIV急性感染早期CD57在淋巴细胞高表达提示病情进展迅速.     

CD8+CD25+调节性T细胞在疾病中的研究进展

CD8⁺CD25⁺Treg具有抑制免疫反应和诱导免疫耐受作用。本文综述了CD8⁺CD25⁺Treg在恶性肿瘤、自身免疫性疾病及其他常见病如哮喘、过敏性疾病、2型糖尿病、子痫前期中的变化及相应的作用机制,CD8⁺CD25⁺Treg在不同疾病中的变化不一致,在恶性疾病中升高,而在自身免疫性疾病中降低。进一步加深对CD8⁺CD25⁺Treg的认识将为疾病的防治及预后提供依据。     

系统性红斑狼疮患者外周血CD4+和CD8+T细胞PD-1的表达和意义

目的 探讨程序性死亡分子1 (PD-1)在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD4+和CD8+T细胞上的表达及临床意义.方法 应用流式细胞仪检测51例SLE患者和38例健康对照者外周血T细胞亚群表面PD-1表达水平,比较SLE稳定组、活动组和健康对照组以及狼疮肾炎组和无狼疮肾炎组之间CD4+和CD8+T细胞表面PD-1表达的百分比,并分析其与临床表现及实验室检查数据的相关性.结果 SLE活动组CD4+T细胞PD-1表达水平高于健康对照组和不活动组,差异均有统计学意义(P＜0.05).SLE活动组、稳定组CD8+T细胞PD-1表达水平均高于健康对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).狼疮肾炎患者CD4+PD-1+和CD8+PD-1+T细胞分别高于无狼疮肾炎患者(P＜0.01).SLE患者中抗dsDNA抗体、抗Sm抗体、抗核小体抗体阳性组外周血CD4+和CD8+T细胞PD-1表达水平均高于对应阴性组.SLE患者CD4+和CD8+T细胞PD-1表达百分率与SLE疾病活动度指数(SLEDAI)、尿蛋白定量呈正相关,与补体C3呈负相关.结论 SLE患者外周血CD4+和CD8+T细胞PD-1表达异常,与SLEDA1和自身抗体产生有明确的相关性.     

T细胞CD4+/CD8+比值及CD4、CD8编码基因单核苷酸多态性与系统性红斑狼疮的关联研究

目的 分析T细胞CD4⁺/CD8⁺比值及CD4、CD8编码基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms, SNP)与系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus, SLE)的关联。方法 检测119例SLE患者及117例健康人T细胞亚群水平及CD4、CD8A、CD8B基因14个标签SNP位点基因型,比较组间T细胞亚群及各基因型、等位基因的分布差异,计算比值比(OR)及其95%可信区间(CI)。结果 SLE组CD4⁺ T细胞低于对照组(P>0.05),CD8⁺ T细胞高于对照组(P<0.01),CD4⁺/CD8⁺比值低于对照组(P<0.01)。携带CD4 rs1055141C>T/CT基因型(OR:2.280, 95%CI:1.261～4.123,P<0.01)及T等位基因(OR:2.210, 95%CI:1.293～3.778,P<0.01)、CD8B rs...     

慢性心衰患者CD4+T淋巴细胞亚群及相关细胞因子与预后的关系研究

目的：探究慢性心衰患者CD4⁺T淋巴细胞亚群及相关细胞因子与预后的关系。方法：对锦州医科大学附属第三医院2018年1月至2020年11月收治的200例慢性心衰患者相关资料予以回顾性分析,所有患者均测定T淋巴细胞及相关细胞因子,接受1年随访以评估其预后情况,并依据预后情况分为预后良好组与预后不良组,测定患者CD4⁺T淋巴细胞水平及相关细胞因子水平,收集患者各项资料分析其预后影响因素。结果：患者预后不良发生率为20.5%;预后不良组患者Th1细胞水平及Th1/Th2均显著高于预后良好组,Th2细胞水平明显低于预后良好组(P<0.05);预后不良组患者肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)水平高于预后良好组,而IL-4与IL-6水平低于预后良好组(P<0.05);单因素与多元Logistic回归分析结果显示,Th2细胞、Hb水平下降,Th1细胞、BNP、心功能分级上升为患者预后影响因素(P<0.05)。结论：慢性心衰患者的CD4⁺T淋巴细胞亚群及相关细胞因子水平异常,并且与患者预后关系密切。     

晚期肺癌患者血CD4+CD25+调节T细胞水平的变化

为探讨晚期肺癌患者CD 4CD 25去调节T细胞水平的变化及其与其它T细胞亚群和NK细胞的相互关系,对86例肺癌组患者和64名对照组测定和比较CD 4CD 25调节T细胞、T细胞亚群(CD 3、CD 4、CD 8、CD 8CD 28)和NK细胞的水平,探讨其临床意义.CD 4CD 25细胞和T细胞亚群均用流式细胞仪检测.结果表明,晚期肺癌患者血CD 4CD 25细胞明显高于对照组(18.4%±6.2%vs7.1%±0.4%,P<0.01),CD 4细胞、CD 8CD 28细胞和NK细胞明显低于对照组(32.4%±8.7%vs44.9%±8.4%,P<0.01;7.4%±3.5%vs16.5%±2.7%,P<0.01;10.2%±4.1%vs18.5%±7.2%,P<0.01),CD 8细胞明显高于对照组(36.7%±7.5%vs31.8%±5.1%,P<0.01).CD 4CD 25细胞与CD 8CD 28细胞、NK细胞呈明显负相关.表明CD 4CD 25细胞增多是晚期肺癌患者免疫功能紊乱的一个证据.     

系统性红斑狼疮患者外周血 CD19+ CD25+ Breg比例和细胞表面PD-1和PD-L1的表达及其与临床指标的相关性

目的 研究程序性死亡蛋白1(PD-1)与其配体PD-L1在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD19⁺CD25⁺调节性B细胞(Breg)的表达及临床意义。方法 收集50例SLE患者和41例健康人(HC)外周血标本,采用流式细胞仪检测外周血中CD19⁺CD25⁺ Breg的比例,以及CD19⁺CD25⁺Breg的PD-1、 PD-L1表达,同时采集患者的临床表现和实验室指标等临床信息。使用免疫磁珠分选CD4⁺ T细胞与CD19⁺ B细胞,体外细胞共培养,检测Breg的分化。结果 SLE患者活动组外周血中CD19⁺CD25⁺Breg比例低于HC,CD25⁺B细胞PD-1、 PD-L1的表达高于HC; SLE患者有胸腔积液、关节炎、 C反应蛋白(CRP)上升的患者Breg频率高于对应阴性组;SLE患者有IgM下降、抗核糖核蛋白(RNP)抗体阳性的患者Br...     

慢性乙型肝炎患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的变化和意义

目的 观察慢性乙型肝炎感染者外周血CD4 CD25 调节性T细胞(Treg)的频率,特征性表型及与临床指标的相关性.方法 采集44例慢性乙型肝炎,29例健康人外周血,多色流式分析Treg的频率,CD4 CD25 Foxp3 调节性T细胞的频率.所有病例均经酶联免疫吸附实验(ELISA)检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb,实时荧光定量RT-PCR检测血清HBV DNA载量及肝功能的检测.结果 慢性乙型肝炎组Treg的频率(5.02%±2.07%)显著高于正常对照组(3.35%±1.51%,P＜0.05);Foxp3在Treg上特异性表达,慢性乙型肝炎组CD4 CD25 Foxp3 调节性T细胞的频率(2.05%±1.03%)显著高于正常对照组(1.30%±0.68%,P＜0.05);慢性乙型肝炎组Treg的频率与病毒载量呈正相关.结论 Treg在慢性乙型肝炎感染者中明显增高,并与病毒载量相关,提示Treg在慢性乙型肝炎中担负着重要的免疫调节作用,可能是造成乙肝病毒感染慢性化的重要因素.     

强直性脊柱炎患者外周血CD4+调节性T细胞的变化及意义

目的 探讨强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)患者外周血中CD4+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)的表达、功能及意义.方法 采用流式细胞术检测78例AS患者和50例健康志愿者外周血中CD4+CD25+CD127lo/- Treg、细胞毒性T细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTL)和NK细胞,采用ELISA法检测血清中β型转化生长因子(transforming growth factor-β,TGF-β)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的表达水平.从患者外周血单个核细胞中磁珠分选出CD4+CD25+ Treg细胞,混合淋巴细胞培养(mixed lymphocyte culture, MLC)分析其免疫抑制功能.结果 AS活动期患者外周血中CD4+CD25+CD127lo/-Treg占CD4+ T淋巴细胞的百分比为(4.36±1.21)%,MLC中CD4+CD25+ Treg抑制同种异体T淋巴细胞增殖功能低下,与其Treg分泌TGF-β减少相关,CD4+ Treg含量及功能均低于健康志愿者(P<0.05).AS患者外周血中CD4+CD25+CD127lo/- Treg水平与TGF-β呈正相关,与TNF-α呈负相关.结论 AS患者外周血中Treg表达水平低,且存在功能缺陷,导致体内诱导免疫耐受机能不足,可能参与AS免疫发病.     

类风湿关节炎患者外周血和滑液中CD4~+CD25~+调节性T细胞的水平变化

了解具有抑制功能的CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)在类风湿关节炎(RA)中的水平变化。分离32例RA患者及35例正常对照者外周血和15例RA关节滑液中的单个核细胞,用荧光抗体标记细胞膜表面CD4、CD25分子和细胞内Foxp3转录因子,进行流式细胞分析,同时用RT-PCR方法测定单个核细胞中Foxp3 mRNA水平。实验发现RA外周血中CD4+CD25hT细胞比例(1.90±1.68)与健康人(1.81±1.79)无明显差异,而RA关节滑液中CD4+CD25+和CD4+CD25hT细胞含量却明显增高(14.98±12.52,8.94±9.67,P<0.01)。RA患者外周血单个核细胞中Foxp3+/CD4+T细胞比值(2.35±2.06)较正常人(7.25±3.98)明显降低(P<0.01),RA外周血中Foxp3 mRNA含量较正常人Treg减少,而RA关节液中Foxp3 mRNA含量较RA外周血更为低下(P<0.01)。RA患者存在CD4+CD25+Treg的异常改变,其外周血和关节液中具有抑制作用的Treg含量明显降低提示RA患者Treg数量减少及抑制功能下降可能是RA自身免疫反应亢强不能控制的原因之一。RA关节液中CD4+CD25hT细胞增高考虑与RA炎症反应造成T细胞过度活化有关。     

急性淋巴细胞白血病患者CD4+CD25+调节性T细胞水平变化

目的 观察急性淋巴细胞白血病(ALL)患者外周血中CD4+ CD25+调节性T细胞(Treg)的变化,探讨其临床意义.方法 收集47例ALL初诊患者组、13例经化疗完全缓解组、9例未缓解组及20例健康对照组抗凝血,采用流式细胞仪检测CD4+ CD25+ Treg的水平.结果 CD4+ CD25+ Treg比例在ALL初...     

外周血干细胞动员调节CD34+细胞β整合素及L-选择素的表达

目的观察造血干细胞表面粘附分子的变化在外周血干细胞动员中的作用。方法用双色免疫荧光法研究15例恶性血液病患者经化疗+G-CSF动员外周血干细胞前后、骨髓和外周血CD34+细胞表面β1整合素(CD49d)、β2整合素(CD11a、CD11b)及L-选择素(CD62L)的表达。结果①动员后第7天CD34+细胞表面较动员前CD49d、CD11a、CD62L表达下降(P＜0.01),而CD11b无变化(P＞0.05)。②外周血CD34+细胞表达CD49d、CD11a、CD11b、CD62L较骨髓低(P＜0.05)。③外周血CD34+细胞绝大多数处于GO/G1期,该期的干细胞CD49d的密度低于S+G2/M期。结论化疗+G-CSF通过粘附分子的变化而使造血干细胞从骨髓进入外周血中。     

幼年特发性关节炎患儿外周血CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞比例降低且与细胞因子水平负相关

目的 探讨幼年特发性关节炎(JIA)患儿外周血CD4⁺CD25⁺FOXP3⁺调节性T细胞与白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平及临床意义。方法 采用流式细胞术检测58例JIA患儿及40例体检健康儿童外周血中CD4⁺CD25⁺FOXP3⁺调节性T细胞比例,收集每例患儿对应的血清,化学发光法检测JIA患儿血清中IL-6、 TNF-α水平。Pearson相关性分析JIA患儿外周血CD4⁺CD25⁺FOXP3⁺调节性T细胞比例与血清IL-6、 TNF-α水平的关系。在58例JIA患儿中收集到18例JIA全身型患儿对应的托珠单抗(tocilizumab)治疗后的全血及血清样本,采用以上方法检测托珠单抗治疗前后外周血CD4⁺CD25⁺FOXP3⁺调节性T细胞与血清IL-6、 TNF-α水平。结果 与健康对照组相比,...     

颅内动脉粥样硬化性脑梗死患者外周血CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞检测及意义

目的探讨颅内动脉粥样硬化性脑梗死患者外周血CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞(Treg细胞)的变化及意义。方法入选50例颅内动脉粥样硬化性脑梗死患者,同时以正常人群(30例)为对照。用流式细胞分析法测定外周血中CD4+CD25+FOXP3+占CD4+细胞的比例,定量PCR检测转录因子FOXP3的mRNA水平,ELISA检测外周血血浆Treg相关细胞因子IL-10、IL-6和TGF-β的表达。结果颅内动脉粥样硬化性脑梗死患者外周血Treg/CD4+T细胞比例和FOXP3的mRNA水平显著低于正常人群组。颅内动脉粥样硬化性脑梗死患者的IL-10和TGF-β水平低于正常人群组,IL-6水平高于正常人群组。结论颅内动脉粥样硬化性脑梗死患者外周血Treg比例减少,对炎症反应的抑制作用减弱,由此可以推测Treg细胞参与了颅内动脉粥样硬化性脑梗死的发生发展。     

γδT、CD4 +CD25 +T细胞在HIV感染者/AIDS患者外周血的表达及其相关性研究

目的:了解γδT细胞、CD4 +CD25 +调节性T细胞(Treg)在HIV感染者/AIDS患者外周血中的表达水平,探讨γδT细胞、CD4 +CD25 + Treg在HIV感染/AIDS病情进展中的相关性以及可能的作用机制。 方法:采用免疫荧光单克隆抗体标记技术...