槲皮素对人前列腺癌PC-3细胞自噬及磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路的影响

目的观察槲皮素对人前列腺癌PC-3细胞活力、凋亡、自噬及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的影响。方法体外培养PC-3细胞,采用CCK-8法检测PC-3细胞活力,TUNEL染色检测PC-3细胞凋亡,吖啶橙染色观察PC-3细胞自噬小泡,GFP-LC3质粒转染分析观察PC-3细胞自噬小体,Western blot分析检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3融合蛋白(LC3)、Beclin-1和PI3K/Akt/mTOR信号通路蛋白的表达。结果槲皮素以浓度-时间依赖性的方式抑制PC-3细胞活力,并诱导细胞凋亡;能够增加PC-3细胞自噬小泡和自噬小体的数量;能够升高PC-3细胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ及Beclin-1表达,同时降低磷酸化-PI3K、磷酸化-Akt和磷酸化-mTOR的表达。结论槲皮素可能是通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路诱导PC-3细胞发生自噬。     

细胞自噬与PI3K/Akt/mTOR信号通路在黑色素瘤耐药性中的研究进展

黑色素瘤是一种恶性皮肤肿瘤,对手术、放疗、化疗等治疗的反应差,虽然基因靶向药物对黑色素瘤有明显的治疗效果,但多数患者很快产生耐药,限制了靶向药物在黑色素瘤临床治疗中的应用.因此,深入研究黑色素瘤细胞产生耐药的分子机制非常必要.细胞自噬的异常是肿瘤发生耐药的一种重要机制,磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素...     

针药并用诱导自噬对ApoE基因敲除小鼠认知功能的影响

观察针药并用干预手段对ApoE基因敲除小鼠海马组织中自噬水平的影响,探讨针药并用干预手段通过磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（AKT）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路发挥调控自噬的作用机制。     

沉默CENP－N基因表达对胃癌细胞增殖、凋亡及PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响

目的 探究着丝粒蛋白-N(CENP-N)对胃癌细胞增殖、凋亡的影响,并分析其可能机制。方法 利用基因表达谱交互式分析网站(GEPIA)中的癌症基因组图谱(TCGA)数据分析CENP-N基因在503例胃癌组织和125例癌旁组织中的表达水平;以收集的143例胃癌患者癌组织、癌旁组织以及人胃癌细胞株SNU-1、HS-746T、AGS、MGC-803及人胃黏膜细胞GES1为研究对象,qRT-PCR法检测CENP-N mRNA水平,Western blot检测CENP-N蛋白表达;体外培养胃癌SNU-1细胞株,分为空白对照组、siRNA-NC组(阴性对照组)、CENP-N-siRNA组(沉默CENP-N表达组)、通路激活剂组(CENP-N-siRNA+740Y-P组)。qRT-PCR法检测CENP-N mRNA水平;CCK-8法、流式细胞仪分别检测细胞增殖、凋亡情况;免疫印迹法检测细胞增殖相关核抗原(PCNA)、凋亡蛋白[B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)]及磷脂肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)通路相关蛋白表达情况。结果 ...     

雷帕霉素抑制人神经母细胞瘤细胞株生长及诱导凋亡的机制研究

目的研究雷帕霉素对人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y的生长抑制和诱导凋亡作用,以及对靶向信号通路磷脂酰肌醇3-激酶／蛋白激酶B／哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（P13K／AkCmTOR）的影响。方敞用不同浓度的雷帕霉素（10、15、20μmol／L）处理SH-SY5Y细胞（雷帕霉素干预组）,以加入相同体积二甲基亚砜（DMSO）的SH-SY5Y细胞作为阴性对照组,设立空白对照组。CCK．8法测定细胞生长率;采用流式细胞仪检测细胞周期,通过AnnexinV-FITC／PI双染法检测细胞凋亡率;Westernblotting检测easpase-3剪切体及P13K／Akt/mTOR信号通路上下游分子PDKp85、Akt、mTOR、4E-BPl表达及其磷酸化水平的变化。结果与阴性对照组和空白对照组比较,雷帕霉素干预组细胞生长率显著降低（P〈0．05或P〈0．01）;G。／G,期细胞百分比显著增高（P〈0．05）;细胞凋亡率显著升高（P〈0．01）。Westernblotting检测结果显示：与阴性对照组和空白对照组比较,雷帕霉素干预组easpase-3剪切体表达水平较高;P13K／Akt/mTOR信号通路上下游分子的活性均被抑制,P13Kp85、Akt、mTOR、4E-BP1的磷酸化水平均明显降低。结论雷帕霉素对人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y具有抑制生长和诱导凋亡的作用,其机制可能与抑制P13K／Akt/mTOR信号通路有关。     

PI3K/AKT/mTOR信号通路在卵巢癌中的研究进展

卵巢癌的发生过程中存在磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/m TOR)信号通路的激活,该通路的异常激活可促进细胞增殖、抑制细胞凋亡、促进肿瘤侵袭和转移。PI3K/AKT/m TOR通路靶向抑制剂对卵巢癌显示出一定的疗效,目前该靶向药物的临床试验已开展,并显示出良好的安全性和有效性。针对PI3K/AKT/m TOR的靶向药物将为卵巢癌的治疗指明新方向。     

苦参碱对食管癌Eca-109细胞自噬的影响及作用机制

目的 探讨苦参碱对食管癌Eca-109细胞自噬的影响及其可能的作用机制。方法 将传代培养的Eca-109细胞分为对照组、低浓度苦参碱组、中浓度苦参碱组和高浓度苦参碱组。对照组细胞加入含体积分数10%胎牛血清的RPMI 1640培养基,低、中、高浓度苦参碱组细胞分别加入终质量浓度为1.0、1.5、2.0 g·L^-1的苦参碱溶液;采用四甲基偶氮唑盐法检测各组细胞的活性,免疫荧光细胞化学染色法检测各组细胞中自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3(LC3)的定位及表达,Western blot法检测各组细胞中多聚蛋白62(P62)、LC3蛋白的相对表达量,实时荧光定量聚合酶链式反应法检测各组细胞中Beclin1 mRNA的相对表达量,透射电子显微镜观察对照组和高浓度苦参碱组Eca-109细胞的超微结构。另取传代培养的Eca-109细胞,将细胞分为对照组、自噬抑制剂组、苦参碱组和自噬抑制剂+苦参碱组。对照组细胞加入5 mL含体积分数10%胎牛血清的RPMI 1640培养基,自噬抑制剂组细胞加入终浓度为7μmol·L^-1的3-甲基腺嘌呤(3-MA)溶液,苦参碱组...     

尿毒清颗粒辅助治疗糖尿病肾病的效果

目的 观察尿毒清颗粒辅助治疗糖尿病肾病（DN）的效果。方法 选取成都医学院第二附属医院2021年3月至2022年12月收治的96例DN患者,按随机数字表法将其分为西医组（给予常规治疗及利格列汀）和中西医结合组（西医组基础上给予尿毒清颗粒治疗）,各48例。评价两组临床疗效。比较两组治疗前后血糖指标[空腹血糖（FBG）、餐后2 h血糖（2hPBG）、糖化血红蛋白（HbA1c）],肾功能指标[血肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）、肾小球滤过率（GFR）、24 h尿微量白蛋白、尿液中微量白蛋白与肌酐比值（UA/CR）水平],炎症因子[肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）、γ干扰素（IFN-γ）]和血清磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）、Akt激酶和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）水平。比较不良反应发生率。 结果 中西医结合组临床疗效优于西医组,差异有统计学意义（P＜0.05）。治疗后,两组FBG、2hPBG和HbA1c较治疗前降低,且中西医结合组低于西医组,差异有统计学意义（P＜0.05）。治疗后,两组Cr、BUN、24 h微量白蛋白尿和UA/CR水平较治疗前降低,GFR水平较治疗前升高,且中西医结合组Cr、BUN、24 h微量白蛋白尿和UA/CR水平低于西医组,GFR水平高于西医组,差异有统计学意义（P＜0.05）。治疗后,两组TNF-α、ICAM-1、IFN-γ、PI3K、Akt、mTOR水平均较治疗前降低,且中西医结合组低于西医组,差异有统计学意义（P＜0.05）。两组不良发应总发生率比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。 结论 尿毒清颗粒辅助治疗DN患者效果确切,能有效改善患者肾功能,减轻炎症反应和调节PI3K、Akt、mTOR水平,值得应用。     

清肠解毒汤对溃疡性结肠炎相关癌变的治疗作用及PI3K/Akt/m TOR通路调控机制

目的 观察清肠解毒汤对溃疡性结肠炎相关癌变的治疗作用,并探讨通过PI3K/Akt/mTOR信号通路的调控机制。方法 取50只SPF级大鼠,随机分为5组,模型组、低、中、高剂量组采用氧化偶氮甲烷/葡聚糖硫酸钠（AOM/DSS）复合法建立溃疡性结肠炎相关癌变模型,对照组饮用水不变,生理盐水替换二甲肼（DMH）;低、中、高剂量组灌胃4.5、9、1.8 g/kg的清肠解毒汤,模型组和对照组灌胃生理盐水,持续8周。观察各组大鼠一般情况,并对比灌胃1 d、2周、4周时疾病活动指数评分（DAI）,大肠前、中、后段典型增生/癌变数,结肠黏膜组织病理学变化,PI3K、AKT、m TOR mRNA表达情况及AKT/p AKT差异。结果 模型组大鼠精神萎靡,伴血便、腹泻,3剂量组给药后精神状态逐渐好转,高剂量组好转最为明显。干预期间对照组DAI评分均为0分,DAI组间、时间、交互比较（P<0.05）。对照组大鼠无溃疡性结肠炎相关癌变,其余4组结肠前段、中段及后段不典型增生/癌变数组间比较（P<0.05）。组织病理学观察发现,模型组结肠黏膜上皮细胞脱落,部分可见低度不典型增生、癌变,固有腺体萎缩,...     

桃叶珊瑚苷对膝骨关节炎小鼠的作用及机制实验研究

目的:探讨桃叶珊瑚苷对膝骨关节炎(KOA)小鼠的作用及对细胞自噬和磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)信号通路的影响。方法:采用改良的Hulth法制备膝关节KOA小鼠模型,随机分为模型组、桃叶珊瑚苷组、激动剂组、桃叶珊瑚苷+激动剂组,另设正常对照组,每组各10只。桃叶珊瑚苷组小鼠给予80 mg/kg桃叶珊瑚苷灌胃;激动剂组小鼠腹腔注射0.5μmol/kg 740Y-P;桃叶珊瑚苷+激动剂组小鼠给予80 mg/kg桃叶珊瑚苷灌胃,同时0.5μmol/kg 740Y-P腹腔注射;正常对照组和模型组小鼠分别灌胃和腹腔注射等体积0.9%氯化钠溶液,1次/d,连续12周。采用HE染色和番红O-固绿染色观察软骨组织病理形态学变化,Mankin评分评估KOA严重程度。ELISA法检测软骨组织中白细胞介素-6(IL-6)、IL-1β和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测自噬相关基因(Atg5、Atg12、Baclin-1、LC3)、PI3K、AKT和mTOR mRNA水平。蛋白印迹法检测自噬相关蛋白、LC3Ⅱ/Ⅰ...     

PI3K/Akt/mTOR信号通路在肝细胞癌中的作用机制研究进展

肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）的异质性强、恶性程度高,患者的治疗效果差、预后生存期短。磷脂酰肌醇3激酶（phosphoinositide 3-kinase,PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B,PKB,又称Akt）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）信号通路是细胞内重要的调控信号通路之一,参与脂代谢、细胞自噬等过程。研究表明,HCC中的PI3K/Akt/mTOR信号通路高度活化,是新药研发的焦点之一。本文综述PI3K/Akt/mTOR信号通路在HCC中的作用机制研究进展,以期为HCC的药物研发提供理论依据。     

基于PI3K/Akt/mTOR通路探讨排石冲剂对草酸钙肾结石大鼠的作用机制

目的 探讨磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)通路在草酸钙结石形成中的作用机制及其在排石冲剂防治草酸钙肾结石中的影响.方法 将40只雄性SPF级Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、排石冲剂组和枸橼酸钾组,每组各10只.除正常组外,其他各组建立草酸钙结石模型.排石冲剂组...     

左金丸调控AMPK/mTOR通路介导的自噬途径逆转胃癌耐药机制研究

目的 探讨左金丸对胃癌细胞自噬及耐药性的影响,并分析可能机制.方法 体外培养人胃癌细胞株SNU-1、SNU-1/5-氟尿嘧啶(5-FU)细胞,采用四甲基偶氮唑盐法检测SNU-1、SNU-1/5-FU细胞存活率,并计算药物半数抑制浓度(IC50);将5-FU处理的细胞分为SNU-1组、SNU-1/5-FU组、左金丸组和左...     

钙黏蛋白17对结直肠癌细胞增殖和凋亡的影响及其PI3K/AKT/mTOR信号通路调节机制

目的：探讨钙黏蛋白17 (Cadherin-17)对结直肠癌(CRC)细胞增殖和凋亡的影响,阐明其可能的机制。方法：构建Cadherin-17基因过表达及小干扰质粒,包装成慢病毒,转染至SW480细胞,构建过表达和干扰病毒稳转株。采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法和Western blotting法检测细胞中Cadherin-17 mRNA和蛋白表达水平,验证转染效率并鉴定稳转株。SW480细胞分为对照组、空载体组、 Cadherin-17过表达质粒(OV-Cadherin-17)组和Cadherin-17小干扰质粒(si-Cadherin-17)组,CCK-8法检测各组细胞增殖活性,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中Cadherin-17、B细胞淋巴瘤2 (Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞色素c(Cyt-c)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3 (Caspase-3)和磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)信号通路相关蛋白表达水平。采用PI3K抑制剂LY294002处理...     

姜黄素通过下调PI3K/Akt/mTOR信号通路蛋白表达对胃癌MGC-803细胞增殖和侵袭的抑制作用

目的：观察姜黄素对胃癌MGC-803细胞体内外增殖和侵袭的作用,探讨磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B (Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路的作用机制。方法：胃癌MGC-803细胞分为对照组、低剂量（10μmol·L-1）姜黄素组、中剂量（20μmol·L-1）姜黄素组和高剂量（40μmol·L-1）姜黄素组。采用CCK-8法检测各组MGC-803细胞增殖能力,Transwell法检测各组MGC-803细胞侵袭能力,流式细胞术检测各组MGC-803细胞凋亡率。采用MGC-803细胞建立胃癌移植瘤模型,分别使用低剂量（0.5 mg·kg-1）、中剂量（1.0 mg·kg-1）和高剂量（2.0 mg·kg-1）姜黄素处理小鼠,观察姜黄素对各组小鼠肿瘤生长的抑制作用,TUNEL法检测各组小鼠移植瘤组织中肿瘤细胞的凋亡情况,Western blotting法检测各组小鼠移植瘤组织中PI3K/Akt/mTOR信号通路蛋白表达水平。结果：与对照组比较,不同剂量姜黄素组细胞增殖能力和侵袭细胞数明显降低（P<0.05）,细胞凋亡率明显升高（P<0.05）;低剂量姜...     

PI3K/Akt/mTOR信号通路在骨关节炎中的研究进展

骨关节炎(Osteoarthritis,OA)是中老年人最常见的肌肉骨骼疾病之一,其导致的关节畸形严重影响患者生活质量.目前OA的发病机制仍不明确,多数学者认为与炎症环境中的化学信号分子有关.经典信号通路磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)参与多种疾病的增殖、凋亡及血管生...     

塞拉菌素促进人结肠癌细胞自噬体积累抑制其增殖的研究

目的 研究塞拉菌素(Sela)对人结肠癌细胞SW480自噬的影响及蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路在其中的调控作用。方法 采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测Sela对SW480细胞的半抑制浓度IC₅₀;克隆形成方法检测Sela对SW480细胞的长期增殖能力抑制作用;Sela与不同死亡抑制剂、自噬抑制剂联合处理作用于SW480细胞,MTT法检测Sela对SW480细胞活力的影响;pEGFP-LC3质粒及pmCherry-EGFP-LC3串联质粒转染SW480细胞,荧光显微镜观察检测Sela诱导下自噬体和自噬溶酶体的形成情况;蛋白质印迹技术测定自噬相关蛋白LC3、p62以及Akt/mTOR通路相关蛋白的表达情况。结果 与对照组相比,Sela处理后SW480细胞活力明显下降,且呈浓度依赖性,IC₅₀为18.3μmol/L;克隆形成实验结果表明,与对照组相比,Sela处理对SW480细胞增殖具有长效抑制作用,差异有统计学意义(P<0.001);随着Sela作用浓度的升高,SW480细胞内的LC3-Ⅱ和p62含...     

PI3K/AKT信号通路调控心肌细胞凋亡的研究进展

凋亡作为一种发生在生物体内程序性死亡的过程,受多种基因的调控,对生物的正常发育和组织细胞稳态至关重要。凋亡参与了多种心血管疾病的病理过程,并且是缺血性心功能障碍的主要原因之一。磷酸肌醇3激酶(PI3K)是一种脂质激酶,在细胞存活、心电生理和能量代谢等方面发挥着重要作用,是治疗和预防心脏疾病相关损伤的重要靶点。PI3K可产生磷脂酰肌醇-3,4,5-磷酸膜磷脂(PIP3),进而激活3-磷酸肌醇依赖激酶-1(PDK-1)和AKT,发挥对心脏疾病中心肌损伤的调控作用。通过对PI3K/AKT信号通路的干预,可减轻心肌凋亡程度,表现出对心肌细胞的保护作用。文章对此通路及其与心肌细胞凋亡关系的研究进展作一综述。     

PI3K抑制剂在淋巴瘤中的研究进展

磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB/Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的异常活化与包括恶性淋巴瘤在内的众多肿瘤的发生发展密切相关。目前,针对该通路的分子靶向治疗成为肿瘤领域的研究热点,部分PI3K抑制剂已进入淋巴瘤的临床试验中。PI3K抑制剂包括广谱PI3K抑制剂、选择性PI3K抑制剂及PI3K/mTOR双重抑制剂。由于淋巴瘤发病机制的复杂性,单靶点的PI3K抑制剂疗效往往有限,需联合化疗或其他靶向药物以提升抗肿瘤疗效。未来,应筛选出能预测PI3K抑制剂疗效的指标,使其成为淋巴瘤治疗的有效途径。