复发转移乳腺癌中FAK、Ezrin、Paxillin、Integrinβ3表达的意义及其与ERK/MAPK通路关系的研究

目的:探讨在复发转移乳腺癌中ERK/MAPK通路的激活情况以及FAK、Ezrin、Paxillin、Integrinβ3表达的意义及其与ERK/MAPK通路激活的关系。方法:收集1994～2006年住院接受根治手术的女性乳腺癌患者共100例,进行随访。分两组:实验组为术后复发转移者共46例,对照组为手术时间及发病年龄相近的术后未发生复发转移者共54例。常规病理蜡块切片,应用免疫组化、核酸原位杂交技术,检测ERK、FAK、Ezrin、Integrinβ3、Paxillin在两组中表达情况。结果:ERK、FAK、Ezrin、Integrinβ3在实验组中表达率均较对照组高(均P<0.05),实验组中ERK的表达分别与FAK、Ezrin呈正相关(均P<0.05)。多因素分析显示ERK、FAK、Ezrin是乳腺癌根治手术后复发转移的独立危险因素。结论:复发转移乳腺癌中,ERK/MAPK通路明显激活;Ezrin、FAK协同作用激活ERK/MAPK通路。FAK、Ezrin、Integrinβ3可作为乳腺癌术后复发转移的独立预测指标。     

乳腺癌复发转移的相关分子生物学指标临床意义的研究

目的:探讨细胞外信号调节激酶(ERK)、黏着斑激酶(FAK)、雌激素受体(ER)表达与乳腺癌复发转移的相关性及临床意义.方法:收集1994~2006年住院接受根治手术的女性乳腺癌患者共100例,进行随访.实验组为术后复发转移者共46例,对照组为手术时间及发病年龄相近的术后未发生复发转移者共54例.常规病理蜡块切片,应用免疫组化技术,检测ERK、FAK、ER在两组中表达情况.结果:ERK、FAK在实验组中表达率均较对照组高(均P<0.05),ER在实验组中表达率较对照组低(P<0.01).多因素分析显示FAK、ERK阳性表达的患者,根治手术后复发转移的风险增高;ER阳性表达的患者,根治手术后复发转移的风险降低.结论:复发转移乳腺癌中,ERK/MAPK通路明显激活;ERK、FAK是乳腺癌根治手术后复发转移的独立危险因素,ER是乳腺癌根治手术后复发转移的独立保护因素;ERK、FAK、ER可作为乳腺癌术后复发转移的独立预测指标.     

ERK及JNK/MAPK通路在宫颈癌及癌前病变组织中的表达及临床意义

目的 探讨在宫颈癌的发生发展及预后中ERK及JNK/MAPK通路表达的意义.方法 收集正常宫颈组织、宫颈CINⅠ级、CINⅡ/Ⅲ级、宫颈癌的病例各30例,应用免疫组化技术检测ERK、JNK在四组中的表达.结果 ERK的表达率呈递增趋势,相邻两组间ERK表达率比较差异有统计学意义（P＜0.05）,说明ERK由CINⅠ级到CINⅡ/Ⅲ级的变化过程在宫颈癌的发展中起着至关重要的作用.JNK的表达率相邻两组之间比较无统计学意义（P＞0.05）.结论 ERK及JNK/MAPK通路的激活与抑制和宫颈癌的发生发展有密切相关,且ERK/MAPKs通路的激活在CINⅠ级到CINⅡ/Ⅲ级的变化过程与宫颈癌的发生较为密切.     

LIPUS对骨性关节炎动物模型中炎症因子、细胞凋亡及整合素信号通路的影响

目的:研究低强度脉冲超声波(LIPUS)对骨性关节炎动物模型中炎症因子、细胞凋亡及整合素信号通路的影响。方法:选择雄性新西兰大白兔作为实验动物并随机分为假手术组(Sham)组、骨关节炎模型组(OA组)、LIPUS干预组(LIPUS组),建立右后肢膝关节的骨性关节炎动物模型后给予LIPUS干预。干预后6周,分离关节软骨并检测炎症因子、细胞凋亡分子及整合素信号通路分子的表达量。结果:OA组实验动物关节软骨中骨桥蛋白(OPN)、一氧化氮(NO)、白介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α、Fas、FasL、LC3-II、Beclin-1、Integrinβ1、FAK、ERK1/2、JNK、p38MAPK、基质金属蛋白酶(MMP)-1、MMP-3的蛋白表达量显著高于Sham组,Col-I、Col-II的蛋白表达量显著低于Sham组;LIPUS组实验动物关节软骨中OPN、NO、IL-1β、TNF-α、Fas、FasL、LC3-II、Beclin-1、Integrinβ1、FAK、ERK1/2、JNK、p38MAPK、MMP-1、MMP-3的蛋白表达量显著低于OA组,Col-I、Col-II的蛋白表达量显著高于OA组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:LIPUS对骨性关节炎动物模型关节软骨中的炎症反应、细胞凋亡、整合素信号通路具有抑制作用,能够促进关节软骨的修复。     

17β-雌二醇对机械牵拉诱导心肌细胞肥大Integrin?1/FAK/p38 MAPK信号通路的影响

【】目的：研究17β雌二醇(17β-estradiol,E2)对体外机械牵张诱导心肌细胞肥大Integrin?1/FAK/p38 MAPK信号通路的影响。方法：以机械牵张刺激体外培养的新生大鼠心肌细胞,建立心肌细胞肥大模型,采用免疫共沉淀方法检测Integrin?1和FAK的结合情况,Western blot方法检测FAK和p38 MAPK磷酸化水平的变化。结果：机械牵拉心肌细胞24小时后,Integrin?1和FAK的结合显著增加,FAK和p38 MAPK磷酸化水平亦明显增强。100nmol/L E2预处理30分钟可明显减轻机械牵拉诱导的心肌细胞Integrin?1和FAK的结合增加,及抑制FAK和p38 MAPK磷酸化的水平增强,该效应可被雌激素受体非特异性拮抗剂ICI182780逆转。结论：一定水平的E2能够抑制机械牵拉诱导心肌细胞肥大发生发展过程中 Integrin?1/FAK/p38 MAPK信号通路的激活发挥心血管保护作用。     

MAPK信号传导通路与乳腺癌关系的研究进展

乳腺癌是妇女最常见的恶性肿瘤之一,我国乳腺癌发病率呈逐年增高趋势,在部分大城市已居女性恶性肿瘤发病率之首.MAPK通路是细胞内重要的信号传导途径,在细胞的恶性转化和肿瘤的发生发展中起重要作用;MAPK主要包括以下四类:细胞外信号调节激酶(ERK),c-Jun氨基末端激酶(JNK),p38激酶以及大丝裂原活化蛋白激酶(BMK1/ERK5).其中ERK的激活与细胞增殖有关,JNK与细胞应激和细胞凋亡有关,p38与炎症反应有关,BMK1/ERK5可能与细胞增殖、细胞周期有关.据研究它的激活与多种恶性肿瘤发生有关~([1]).研究MAPK通路与乳腺癌的关系,有助于了解乳腺癌的发病机制,可能对乳腺癌治疗有意义.本文对MAPK信号传导通路与乳腺癌关系的研究进展综述如下.     

Integrin介导的ERK信号传导通路对滋养层细胞侵袭行为的影响

目的：探讨Integrin介导的ERK信号传导通路在滋养层细胞侵袭过程中的作用.方法：利用人绒毛外细胞滋养层细胞体外侵袭模型,将不同浓度的integrin α1和integrin β1混合抗体分别加入绒毛外细胞滋养层细胞（EVCT）培养液中,培养4 h,观察integrin α1和integrin β1混合抗体对EVCT的生长、体外侵袭、FAK和ERK1/2磷酸化的影响.结果：integrin α1和integrin β1混合抗体呈浓度依赖方式抑制EVCT中FAK磷酸化程度,同样呈浓度依赖方式抑制磷酸化的ERK1/2表达,P〈0.05.结论：细胞外基质（ECM）成分能通过细胞表面的相应受体integrin α1β1,激活滋养层细胞中重要的蛋白激酶FAK和ERK.ERK信号传导通路对滋养层细胞的侵袭行为起到重要的调节作用.     

MAPK 通路蛋白在百草枯中毒致急性肺损伤大鼠肺组织中的表达及意义

目的：观察MAPK通路蛋白在百草枯中毒致急性肺损伤大鼠肺组织中的表达并探讨其意义。方法36只SD雄性大鼠随机平均分成两组：PQ组予腹腔注射20 mg／kg百草枯,对照组予腹腔注射生理盐水1 mL。在注射百草枯后8 h、1 d和3 d时,收集血清和肺组织标本。分别使用生化法检测血清中超氧化物歧化酶（ SOD）活性和丙二醛（ MDA）含量,采用ELISA方法检测血清中白细胞介素－1β（ IL－1β）和肿瘤坏死因子－α（ TNF－α）含量,利用血气分析仪检测大鼠动脉血氧分压（ PaO2）,行组织切片HE染色进行肺损伤评分,利用Western blot方法检测肺组织中p－p38MAPK、p－JNK、p－ERK1／2蛋白表达水平。结果百草枯中毒后,与对照组比较,PQ组大鼠血清中SOD活性降低（P＜0.05）,MDA、IL－1β和TNF－α含量明显增加（P＜0.05）;PaO2逐渐下降（P＜0.05）,肺损伤评分时间依赖性增加（P＜0.05）;肺组织中p－p38MAPK、p－JNK、p－ERK1／2表达量均明显上调（P＜0.05）。结论百草枯产生氧自由基,可以激活包括 p38MAPK、JNK、ERK1／2在内的MAPK通路,导致急性肺损伤发生发展。     

刃针疗法对膝骨关节炎白兔膝关节软骨组织黏着斑激酶/丝裂原活化蛋白激酶信号通路的调控作用

目的探讨刃针疗法对膝骨关节炎(KOA)白兔膝关节软骨组织黏着斑激酶(FAK)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的调控作用。方法选取54只白兔,采用前交叉韧带切断术建立KOA模型;将造模成功的48只白兔随机分为模型组、刃针组、电针组、模型抑制组、刃针抑制组、电针抑制组,每组8只,另纳入8只白兔作为空白组。空白组和模型组不予治疗;刃针组和刃针抑制组均采用刃针治疗,电针组和电针抑制组均采用电针治疗;刃针抑制组和电针抑制组均在治疗前2 h给予关节腔注射抑制剂PF-562271,模型抑制组同时给予关节腔注射抑制剂。干预结束后,取各组白兔膝关节软骨组织,检测整合素β1、FAK、细胞外调节蛋白激酶(ERK)1/2、c-Jun氨基末端激酶(JNK)和p38的蛋白表达水平。结果与空白组对比,模型组整合素β1、FAK、p38、JNK及ERK1/2蛋白表达水平升高(均P<0.05)。与模型组比较,刃针组、电针组整合素β1、FAK、p38、JNK及ERK1/2蛋白表达水平均降低(均P<0.05)。与电针组对比,刃针组整合素β1、JNK及ERK1/2蛋白表达水平降低(均P<0.05),而...     

透骨消痛胶囊对兔骨性关节炎软骨细胞MAPK信号通路表达的影响

目的研究透骨消痛胶囊对兔骨性关节炎软骨细胞MAPK信号通路表达的作用机制。方法成年健康6月龄新西兰兔40只,采用抽签法随机分为正常组、造模组,造模组用4%木瓜蛋白酶双膝关节腔注射建立骨性关节炎模型;造模成功后造模组采用抽签法随机分为模型组、对照组、实验组,实验组用透骨消痛胶囊水溶液100 mL/d灌胃,对照组用壮骨关节胶囊水溶液100 mL/d灌胃,Western Rlot检测MAPK信号通路p—ERK1/2、p—JNK的蛋白表达。结果实验组治疗后,关节软骨中p-ERK1/2蛋白表达高于模型组、对照组（P<0.05）,p—JNK蛋白表达低于模型组、对照组（P<0.05）。结论透骨消痛胶囊可通过上调兔骨性关节炎软骨细胞p—ERK1/2蛋白的表达,下调p-JNK蛋白的表达,促进软骨细胞增殖、分化,抑制其凋亡。     

基底样乳腺癌与ERK信号传导通路关系的研究

目的 检测三阴性乳腺癌中CK5/6,EGFR,P.ERK的表达,探讨基底细胞样乳腺癌与ERK/MAPK信号传导通路的关系.方法 采用免疫组化法检测CK5/6,EGFR,P.ERK在70例三阴性乳腺癌组织中的表达.结果 在(70例)三阴性乳腺癌中,CK5/6与EGFR的阳性表达率分别为68.6%(48/70),57.1%(40/70),共筛出基底细胞样乳腺癌53例.在三阴性乳腺癌中p-ERK在基底细胞样乳腺癌与非基底细胞样乳腺癌的阳性表达率分别为79.2%(42/53),47.1%(8/17),其差异有统计学意义(P＜0.05).CK5/6与EGFR、P-ERK在基底细胞样乳腺癌的表达中具有正相关性(r=0.471;0.389,P＜0.05).结论 CK5/6.EGFR是诊断基底细胞样乳腺癌的重要分子标记物;基底细胞样乳腺癌的发生发展与ERK/MAPK信号传导通路被异常激活有关;CK5/6与EGFR、P.ERK在基底细胞样乳腺癌的表达中具有相关性.     

MAPK信号通路与乳腺癌的研究进展

MAPK位于胞浆,受到刺激后磷酸化进入核内,激活靶基因。主要有ERK1/2、JNK/SAPK和P38三条途径,MPKA信号转导通路与乳腺癌的关系密切,对MAPK信号转导途径的研究,有望找到治疗乳腺癌的新靶点。     

脑溢安对出血性中风大鼠脑内MAPK信号转导通路的影响

目的 :探讨脑溢安对出血性中风大鼠脑内丝裂原活化的蛋白激活酶 (mitorgenactivatedproteinkinase,MAPK)信号转导通路的影响。方法 :根据Rosenberg法复制大鼠脑出血模型 ,采用免疫共沉淀、激酶方法 ,Westernblot检测脑出血大鼠海马ERK、JNK激酶活性变化及脑溢安对ERK、JNK激酶活性的影响。结果 :脑溢安下调脑出血大鼠海马活化的JNK蛋白表达 ,上调活化的ERK蛋白表达。结论 :中药脑溢安对脑出血大鼠海马组织MAPK信号转导通路起双重调节作用 ,表现为促进ERK生存通路 ,抑制JNK凋亡通路。     

黏着斑激酶和细胞外信号调节激酶在SACC-LM和SACC-83细胞中的表达及其意义

目的：检测黏着斑激酶(FAK)及细胞外信号调节激酶（ERK）在涎腺腺样囊性癌(SACC)细胞系SACC-LM和SACC-83中的表达,探讨其与SACC肺转移发生的关系。方法：选择停止在G1/S期的SACC-LM和SACC-83细胞,测定其细胞内FAK和ERK酶活力,采用Western blotting方法检测SACC-LM及SACC-83细胞中FAK及ERK蛋白表达,对其结果进行量化分析。结果：FAK及ERK在SACC-LM细胞中的活性均高于SACC-83细胞（P<0.01）,SACC-LM细胞中FAK酶活性与ERK酶活性呈正相关关系(r=0.62,P<0.05)。Western blotting方法检测到在SACC-LM细胞中两种蛋白的表达水平均高于在SACC-83细胞中的表达水平（P<0.05）。结论：FAK及ERK可能参与了SACC的发生发展过程和转移信号转导通路,FAK及ERK蛋白表达变化与SACC的转移行为有关。     

ERK/MAPK信号通路激活与乳腺癌细胞浸润性生长的关系

目的：探讨乳腺癌细胞中ERK／MAPK信号转导通路异常激活与乳腺癌细胞浸润性生长的关系及可能机制。方法:采用Western蛋白印迹技术检测乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-435S中磷酸化ERK／MAPK(P-ERK)蛋白表达，以及表皮生长因子(EGF)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)和ERK／MAPK通路抑制剂PD98059对两种细胞ERK／MAPK信号转导通路磷酸化的调节。结果:雌激素受体ER(-)的浸润性乳腺癌细胞系MDA-MB-435S中，p-ERK表达明显高于ER( )的非浸润性乳腺癌细胞系MCF-7；EGF可刺激两种细胞p-ERK的表达增加，但这种刺激作用在MDA-MB-435S细胞中更加明显；IGF-1则仅能刺激MCF-7细胞中p-ERK的表达。PD98059能有效阻滞EGF、IGF-1对p-ERK的激活。结论：ERK／MAPK信号转导通路的异常激活与乳腺癌的浸润性生长有关，而EGF可能是异常激活ERK／MAPK信号转导通路，是刺激ER(-)的乳腺癌细胞浸润性生长的重要因素之一。     

ERK信号通路通过CXCR-4作用于乳腺癌细胞的侵袭转移研究

目的:ERK信号通路与肿瘤的侵袭转移密切相关,本研究拟阻断ERK通路,检测乳腺癌细胞CXCR-4表达变化,分析ERK信号通路对乳腺癌细胞CXCR-4表达的影响,探讨乳腺癌转移的分子机制。方法:以培养的人乳腺癌MDA-MB-435细胞为研究对象,加入ERK特异性阻断剂PD98059为实验组,加入等量生理盐水为对照组,作用于人乳腺癌MDA-MB-435细胞24 h后,采用Western blotting法检测ERK通路重要因子ERK1/2及磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)表达;采用流式细胞术检测细胞表面CXCR-4表达;采用Transwell侵袭实验观察空白对照组、CXCR-4配体SDF-1α组、ERK通路阻断组和SDF-1α+ERK阻断组细胞的侵袭转移情况。结果 :ERK通路被有效阻断后,CXCR-4表达量明显下调;在趋化因子受体CXCR-4的配体SDF-1α的作用下,细胞侵袭能力提高,而在ERK通路阻断后,细胞侵袭能力明显降低且SDF-1α不能逆转这种降低效应反而具有协同作用。结论:在人乳腺癌MDA-MB-435细胞中,ERK信号通路可能通过上调CXCR-4的表达参与乳腺癌细胞的侵袭和转移。     

VEGF通过激活ERK/MAPK通路促进三阴性乳腺癌肿瘤干细胞的形成

目的 探讨血管内皮生长因子（VEGF）对三阴性乳腺癌肿瘤干细胞的调控作用并探索其作用机制。方法 通过Oncomine数据库、UALCAN数据库及Human Protein Atlas数据库分别验证VEGF在乳腺癌中的表达情况,分析VEGF表达与不同分子亚型的关系,利用在线数据库分析VEGF的表达情况与乳腺癌预后的关系。选取三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞,加入外源性hVEGF165通过体外微球形成实验观察体外成球能力,并利用Western blot、RT-qPCR等方法检测肿瘤干细胞相关标志物CD44、c-Myc、Nanog、ALDH1的表达以及相关通路的激活情况。结果 利用Oncomine、UALCAN、HPA数据库分析显示,VEGF在乳腺癌中表达较癌旁组织增高（P<0.0001）,其表达与分子亚型相关,三阴性乳腺癌中VEGF表达显著升高。Kaplan-Meier Plotter数据库分析结果提示高表达VEGF的乳腺癌患者预后更差,总生存期OS缩短,差异具有统计学意义（P<0.0001）。与VEGF低表达患者相比,VEGF高表达的乳腺癌患者无进展生存期、无远处转移生存期以及复发后生存期均显著缩短,差异具有统计学意义（P<0.0001）。体外实验发现加入外源性的hVEGF165后三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的成球能力显著增强,差异具有统计学意义（P=0.0029）。Western blotting、RT-qPCR结果表明乳腺癌MDA-MB-231微球体中VEGF/NRP-1及肿瘤干细胞相关标志物CD44、Nanog、c-Myc的表达量显著升高。加入外源性的hVEGF165促进了肿瘤干细胞相关标志物CD44、c-Myc、Nanog及ALDH1的表达,而CD24的表达量则显著下降,上述作用具有时间依赖性。Western blotting实验提示加入外源性的hVEGF165能够激活三阴性乳腺癌细胞ERK/MAPK通路。 结论 VEGF可能通过激活ERK/MAPK通路促进了三阴性乳腺癌肿瘤干细胞的形成。     

p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠胃缺血-再灌注损伤中的作用

目的探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)在小鼠胃缺血-再灌注损伤中的作用。方法C57BL/6小鼠随机分为3组:假手术组、模型组和CNI-1493预处理组,CNI-1493预处理组于术前1h腹腔注射p38MAPK抑制剂CNI-1493(2mg/ml)溶液10ml/kg。通过夹闭小鼠腹腔动脉30min后松开动脉夹再灌注1h制作胃缺血-再灌注损伤模型。再灌注1h后取胃标本,甲醛固定后铺平拍照,计算胃黏膜出血面积百分比。应用蛋白质印迹法检测并比较各组磷酸化及总p38、JNK、ERK,磷酸化NF-κBp65以及分裂型Caspase-3的表达水平。结果与假手术组比较,模型组胃黏膜出血面积明显增大(P<0.05),p38、JNK以及ERK明显激活(P<0.05),磷酸化NF-κBp65以及促凋亡蛋白激活型Caspase-3表达明显增多(P<0.05)。CNI-1493预处理能明显逆转上述改变(P<0.05)。结论MAPK/NF-κB通路活化在胃缺血-再灌注损伤中起到重要作用,p38MAPK抑制剂CNI-1493能抑制MAPK/NF-κB通路活化、减少凋亡蛋白表达,减轻胃缺血-再灌注引起的黏膜出血。     

高氧性肺损伤中MAPK信号途径的表达及其作用机制

目的:探讨丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路三亚族ERK,p38,JNK在大鼠高氧性肺损伤动物模型中的表达及作用.方法:24只3周龄Wistar大鼠随机分成4组:空气对照组和高氧暴露3,7和14 d组,每组动物6只.高氧暴露组置于常压高氧仓中(O2≥95%),空气对照组置于常压空气中(O2=21%).光镜下观察肺组织病理学改变,采用二步法免疫组化检测磷酸化ERK,p38,JNK在肺组织中的分布.Western Blot检测磷酸化MAPK蛋白表达变化.结果:高氧暴露3,7 d组出现急性肺损伤的典型病理学特征,高氧暴露14 d组肺间质及纤维细胞增生明显.免疫组化显示空气对照组仅肺泡上皮细胞及气道上皮细胞见少量磷酸化ERK,p38,JNK阳性表达,高氧暴露组则阳性细胞明显增多,广泛分布于肺内细胞中:肺泡上皮细胞、气道上皮细胞、胸膜间皮细胞、浸润炎细胞及间质纤维细胞,p38阳性表达尤多见于炎性细胞中.Western Blot显示高氧暴露组较空气对照组磷酸化蛋白表达明显增强,ERK,JNK高氧暴露7 d组表达最强(P＜0.05),p38在高氧暴露14 d组表达最为明显(P＜0.05).结论:高浓度氧可激活MAPK信号途径,磷酸化ERK,p38,JNK在高氧损伤肺组织表达明显增加,MAPK三亚族ERK,p38,JNK活性变化在时间上并不具有同步性.     

TrkC在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的 探讨TrkC在乳腺癌中的表达及其临床意义.方法 收集1994～2006年住院接受根治手术的女性乳腺癌患者共100例,进行随访;收集同期接受手术的乳腺纤维腺瘤或乳腺增生症共30例.分3组:实验组为术后复发转移者共46例,对照组1为手术时间及发病年龄相近的术后未发生复发转移者共54例,对照组2为乳腺纤维腺瘤或乳腺增生症共30例.常规病理蜡块切片,应用免疫组织化学技术,检测TrkC在3组中的表达情况.结果 实验组TrkC的表达率均较对照组1、2高(P＜0.05);TNM分期越差,肿瘤越大,TrkC表达越强(均P＜0.05).结论 TrkC是乳腺癌根治手术后复发转移的危险因素;TrkC是评估乳腺癌术后预后的肿瘤标志物;TrkC有望成为乳腺癌生物靶向治疗的新靶点.