胃康宁含药血清对胃癌细胞生长与血管内皮生长因子及其受体KDR、Flt-1表达的影响

目的观察中药胃康宁含药血清对胃癌细胞生长和VEGF及其受体表达的作用。方法分别以高、中、低等不同剂量的胃康宁制剂对Wistar雄性大鼠进行灌胃,制备含药血清,然后分别用不同剂量组合药血清培养胃癌细胞,以倒置显微镜及流式细胞仪观测各组胃癌细胞的生长状况,免疫组织化学SABC法检测各组胃癌细胞中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及其受体Flt-1的表达,RT- PCR法检测各组胃癌细胞中VEGF及其受体KDR,Flt-1 mRNA的表达。结果与对照组比较,用药组胃癌细胞的生长及细胞周期明显改变(P＜0．01),用药组G_0-G_1期细胞增多,S期细胞减少,凋亡率增加,并呈一定的量效关系。VEGF的灰度值由对照组的147．82±0．15升高到低剂量组的174．80±0．81,中剂量组的178．65±0．56,高剂量组的182．44±0．54(P＜0．01)。Flt-1的灰度值由对照组144．31±0．71升高到低剂量组148．20±0．69,中剂量组162．01±0．52,高剂量组168．51±0．81(P＜0．01)。胃康宁含药血清培养的胃癌细胞中V...     

健脾导滞中药对胃癌细胞VEGF及其受体表达的作用

目的：研究中药复方健脾导滞中药对胃癌细胞血管内皮生长因子（VEGF）及其受体F1t、KDR表达的调控作用。方法：以不同剂量的中药复方健脾导滞中药制剂给SD大鼠灌胃制备含药血清，然后以含药血清培养胃癌细胞，共同培养两代后，分别用免疫组化法和RT-PCR检测不同剂量组胃癌细胞中VEGF及其受体Flt、KDR的表达情况。结果：与对照组相比，VEGF及其受体Flt在用药组胃癌细胞中的表达减弱，染色变浅，并且与用药剂量有一定的关系；VEGF mRNA及其受体Flt mRNA、KDR mRNA在用药组胃癌细胞中的表达也受到抑制。结论：中药健脾导滞中药对胃癌细胞血管内皮生长因子及其受体Flt、KDR的表达有抑制作用，是一个值得进一步研究开发的中药复方。     

化浊解毒方含药血清对胃癌细胞VEGF及COX-2表达的影响

目的:研究化浊解毒方对胃癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)及环氧合酶-2(COX-2)表达的调控作用。方法:以不同剂量的化浊解毒方给Wistar大鼠灌胃制备含药血清,然后以含药血清培养胃癌细胞,共同培养2代后,分别用免疫组化法检测VEGF、COX-2的表达情况。结果:化浊解毒方高、中、低剂量组胃癌细胞中VEGF、COX-2的表达减弱,与对照组比较,差异均有显著性意义(P<0.01);而且高剂量组表达减弱更为明显,与低、中剂量组与较,差异均有非常显著性意义(P<0.01)。结论:化浊解毒方对胃癌细胞VEGF及COX-2的表达有抑制作用。     

红花组分HSYA对人胃腺癌BGC-823移植瘤裸鼠VEGF蛋白、KDR与缺氧诱导因子表达的影响

目的:研究红花组分羟基红花黄色素A(HSYA)对人胃腺癌皮下移植瘤裸鼠血管内皮生长因子(VEGF)蛋白、含激酶插入区受体(KDR)和缺氧诱导因子(HIF-1α)mRNA与蛋白表达的影响。方法:采用BALB/C nu/nu裸小鼠接种人胃腺癌细胞株BGC-823于右前肢腋部皮下建立裸鼠人癌移植瘤模型,随机分为模型组、对照组、HSYA高、低剂量组(0.056g/L、0.028g/L),观察抑瘤作用,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测瘤组织VEGF与HIF-1α蛋白以及血清VEGF蛋白表达;蛋白印迹(Western blotting)法测定瘤组织KDR磷酸化蛋白的表达;实时荧光定量PCR(RTFQ-PCR)法检测瘤组织KDR及HIF-1αmRNA表达。结果:HSYA低剂量组抑瘤明显,该组瘤组织及血清VEGF蛋白表达降低,瘤组织KDR磷酸化蛋白表达减弱,与模型组比较差异明显(P0.05,P0.01);HIF-1α蛋白表达较模型组瘤组织明显减少(P0.01)。KDR mRNA表达与模型组相比减弱,差异有统计学意义(P0.05)。结论:一定浓度的HSYA抑制肿瘤生长的可能机制与抑制VEGF、HIF-1α蛋白的表达,减弱KDR蛋白磷酸化及其基因表达,从而抑制内皮细胞活化阻碍肿瘤血管新生以及降低肿瘤缺氧微环境对血管生成的诱导有关。     

健脾导滞方对人胃癌细胞的作用

目的:观察中药健脾导滞方对胃癌细胞生长、对P53和VEGF及其受体表达的作用.方法:分别以高、中、低等不同剂量的健脾导滞方制剂对Wistar雄性大鼠进行灌胃,制备含药血清,然后分别用不同剂量组的含药血清培养胃癌细胞,以倒置显微镜及流式细胞仪观测各组胃癌细胞的生长状况,并用免疫组化法检测各组胃癌细胞中P53和VEGF及其受体Flt的表达.结果:与对照组比较,用药组胃癌细胞的生长及细胞周期明显改变;P53和VEGF及其受体的表达明显减弱(P＜0.05).结论:健脾导滞方对胃癌细胞的生长,对P53和VEGF及其受体的表达均有抑制作用.     

复胃煎对胃癌前病变大鼠胃粘膜VEGF、COX-2表达的影响

目的：观察中药复胃煎对胃癌前病变大鼠胃粘膜血管内皮生长因子（VEGF）及环氧合酶-2（COX-2）等相关因子表达的影响。方法：建立大鼠胃癌前病变模型,高、中、低剂量中药观察组分别按复胃煎汤剂高、中、低剂量给予每日灌胃,中药对照组予中剂量汤剂每日灌胃,空白对照组和模型对照组大鼠予等体积生理盐水灌胃。采用免疫组化方法检测COX-2及vEGF在大鼠胃组织中的表达;RT-QPCR法检测大鼠胃组织COX-2及VEGFmRNA的表达。结果：高、中、低剂量中药观察组COX-2、VEGF及其mRNA的表达较模型对照组低（P〈0．05）;高剂量中药观察组vEGF及其mR—NA表达量低于中药对照组（P〈0．01）及中药低剂量组（P〈0．05）。结论：中药复胃煎能够降低胃癌前病变大鼠胃组织COX-2、VEGF及其mRNA的表达;并且与VEGF的表达存在一定量效关系。     

化浊解毒和胃方对胃癌前病变大鼠血管生成机制的影响

目的探讨化浊解毒和胃方治疗胃癌前病变（precancerouslesionsofgastriccancer,PL—GC）在血管新生方面的可能机制。方法Wistar大鼠66只随机分为6组：即正常对照组（空白组）,模型组,维甲酸治疗组（维甲酸组）,化浊解毒和胃方高、中、低剂量治疗组,每组11只。采用幽门弹簧插入复合法复制慢性萎缩性胃炎PLGC模型,各组给予相应的药物每天灌胃1次,每次2mL,连续12周。采用免疫组织化学和Westernblot方法,观察化浊解毒和胃方对慢性萎缩性胃炎PLGC大鼠胃黏膜组织缺氧诱导因子-1α（hypoxiainducedfactor,HIF-1α）、血管内皮生长因子（vascularendothelialgrowthfactor,VEGF）的影响。结果与空白组比较,模型组VEGF、HIF-1α的表达增高,差异有统计学意义（P〈0．05）;各治疗组与模型组比较,VEGF、HIF-1α表达降低,差异有统计学意义（P〈0．05）;且化浊解毒和胃方高剂量组与中剂量组降低VEGF、HIF-1α的表达优于维甲酸组及化浊解毒和胃方低剂量组（P〈0．05）,低剂量组与维甲酸组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论化浊解毒和胃方可能是通过降低PLGC大鼠胃黏膜HIF-1α、VEGF的表达,从而抗血管生成达到防治慢性萎缩性胃炎PLGC的治疗效果,并且存在-定的量效关系。     

加味四物汤对荷骨肉瘤小鼠肿瘤VEGF及受体表达的影响

目的:探讨加味四物汤对对荷骨肉瘤小鼠肿瘤VEGF及其受体表达的影响.方法:建立KHOS成骨肉瘤原位移植模型,通过加味四物汤灌胃干预动物模型,采用RT-PCR方法定量检测移植瘤血管内皮细胞生长因子(VEGF)及其受体KDR和Flt-1的表达.结果:加味四物汤高剂量组有明显抑制肿瘤组织VEGF、Flt-1、KDR表达的作用(P<0.05);中、低剂量组抑制肿瘤组织VEGF、Flt-1、KDR表达的作用不明显(P>0.05);中药高剂量组抑制肿瘤组织VEGF、Flt-1、KDR表达的作用优于中、低剂量组(P<0.05).结论:加味四物汤通过抑制VEGF、KDR、Flt-1的表达控制肿瘤新生血管的生长而达到阻止恶性骨肿瘤体内生长、转移的目的,但与药物浓度相关.     

乌鸡白凤丸对衰老血虚大鼠子宫内膜VEGF及其受体表达的影响

目的:探究乌鸡白凤丸对衰老血虚大鼠子宫内膜VEGF及其受体表达的影响,并从分子生物学水平进一步探讨乌鸡白凤丸治疗肾虚血亏型月经不调的作用机理。方法:采用放血、饥饿加灌服羟基脲的方法制备肾虚血亏大鼠模型,并用乌鸡白凤丸进行干预。病理切片HE染色观察子宫内膜形态学结构变化;放射免疫法测定各组大鼠血清雌二醇、孕酮的表达水平;免疫组化检测子宫内膜VEGF、KDR及Flt-1蛋白的表达。结果:乌鸡白凤丸干预后能有效增加肾虚血亏大鼠子宫内膜的厚度;与空白组比较,模型组血清雌二醇水平明显降低(P0.01)、孕酮水平明显增高,均具有显著统计学意义(P0.01);子宫内膜VEGF蛋白、KDR蛋白、Flt-1蛋白表达减少(P0.01);与模型组比较,乌鸡白凤丸高剂量组雌二醇水平增高,具有统计学意义(P0.05);子宫内膜VEGF蛋白、KDR蛋白、Flt-1蛋白表达明显增加,具有显著统计学意义(P0.01)。与模型组比较,乌鸡白凤丸低剂量组与中剂量组血清雌二醇、孕酮水平有升高的趋势,不具备统计学意义(P0.05);子宫内膜子宫内膜VEGF蛋白、KDR蛋白、Flt-1蛋白表达明显增加,具有显著统计学意义(P0.01)。结论:乌鸡白凤丸发挥作用的可能机制为通过升高血清雌二醇水平、降低孕酮水平来提高VEGF蛋白、KDR蛋白、Flt-1蛋白的表达,从而促进子宫内膜修复,达到调节月经的作用。     

中药胃康宁对胃癌细胞周期因子Cyclin E、CDK2和p27表达的影响

目的:观察中药胃康宁含药血清对胃癌细胞Cyc lin E、CDK2(Cyc lin dependant k inase 2,CDK2)和p27mRNA及其蛋白表达的作用。方法:分别以高、中、低不同剂量的胃康宁制剂对W istar雄性大鼠进行灌胃,制备含药血清,然后分别用不同剂量组含药血清培养胃癌细胞,采用免疫组织化学SABC法检测各组胃癌细胞中Cyc linE、CDK2和p27蛋白的表达,RT-PCR法检测各组胃癌细胞中Cyc lin E、CDK2和p27 mRNA的表达。结果:免疫组化法结果显示,胃康宁高、中、低剂量组Cyc lin E和CDK2灰度值均有明显升高,与空白对照组比较,P<0.05~0.01,而p27灰度值则显著降低(P<0.05~0.01);RT-PCR结果显示,与空白对照组比较,胃康宁低、中、高剂量组均能明显降低Cyc lin E和CDK2 OPTD I值(P<0.05~0.01)。同时,还能升高p27 OPTD I值(P<0.05~0.01)。结论:中药胃康宁可抑制胃癌细胞周期因子Cyc lin E、CDK2及其mRNA的表达,促进细胞周期抑制因子p27及其mRNA的表达,这可能是胃康宁抑制胃癌细胞生长的机制之一。