缬沙坦治疗免疫性肝纤维化大鼠及其对Bcl-2/Bax表达的影响

目的 评价缬沙坦对免疫性大鼠肝纤维化的治疗作用,并观察其对免疫性肝纤维化大鼠肝组织中凋亡相关因子Bcl-2/Bax表达的影响.方法 36只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、模型组和治疗组.治疗组在造模第6周开始予以缬沙坦干预;第10周实验结束后,观察三组在肝组织纤维化程度、血清透明质酸(HA)、羟脯氨酸(Hyp)水平的变化,免疫组化检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Bcl-2、Bax的表达.结果 治疗组大鼠肝纤维化程度、炎症活动度均较模型组明显减轻.模型组和治疗组肝胶原面积分别为(12.5±2.15)%和(5.21±1.21)% (P＜0.05).与模型组比较,治疗组血清HA、Hyp水平均降低(P＜0.05).模型组肝组织α-SMA、Bcl-2和Bax的表达较空白对照组明显增强(P＜0.05);而治疗组α-SMA表达明显低于模型组(P＜0.05).治疗组Bcl-2表达较模型组显著降低(P＜0.05), Bcl-2/Bax比值降低(P＜0.05).结论 缬沙坦能明显减轻猪血清诱导的肝纤维化大鼠的肝纤维化程度、炎症活动度,其机制可能与下调Bcl-2的表达及降低Bcl-2/Bax比值有关.     

免免疫细胞在肝硬化组织中的分布及局部免疫功能

目的探讨各种免疫细胞在肝硬化组织中的分布和患者的局部免疫状态.方法肝硬化62例,正常肝23例,以免疫组化SP法进行CD3、CD57、CD20、CD68、GrB染色,对阳性细胞数进行定量分析.结果(1)肝硬化组织、正常肝组织病灶局部均有不同程度的免疫细胞浸润,主要是T、B淋巴细胞、自然杀伤(NK)细胞和巨噬细胞(Mψ).(2)肝硬化组织中T和B淋巴细胞数量明显多于正常肝组织.(3)在肝脏GrB阳性细胞中,大部分为CD57阳性细胞,少量为CD3阳性细胞.结论通过检测各种免疫细胞的数量,可了解肝硬化细胞损伤的程度与患者免疫状态,为病情观察指标及疗效判定均有一定参考价值.     

免疫细胞在肝硬化组织中的分布及局部免疫功能

目的：探讨各种免疫细胞在肝硬化组织中的分布和患者的局部免疫状态。方法：肝硬化62例，正常肝23例，以免疫组化SP法进行CD3、CD57、CD30、CD68、GrB染色，对阳性细胞数进行定量分析。结果：（1）肝硬化组织、正常肝组织病灶局部均有不同程度的免疫细胞浸润，主要是T、B淋巴细胞、自然杀伤（NK）细胞和巨噬细胞（Mφ）。（2）肝硬化组织中T和B淋巴细胞数量明显多于正常肝组织。（3）在肝脏GrB阳性细胞中，大部分为CD57阳性细胞，少量为CD3阳性细胞。结论：通过检测各种免疫细胞的数量，可了解肝硬化细胞损伤的程度与患者免疫状态．为病情观察指标及疗效判定均有一定参考价值。     

软肝化坚颗粒对肝纤维化模型C57小鼠肝组织Bcl-2及Bax表达的调节作用

摘要 目的 研究软肝化坚颗粒对肝纤维化模型C57小鼠肝组织中凋亡调控相关基因表达的作用。方法 40只C57小鼠随机分为4组,分别为正常对照组、模型对照组、软肝化坚颗粒低剂量组及高剂量组,每组10只。采用四氯化碳腹腔注射诱导形成小鼠肝纤维化模型。采用免疫组织化学染色方法检测肝组织中Bcl-2和Bax的表达,同时进行肝组织纤维化评分(S)。结果 Bcl-2和Bax均主要表达于中央静脉周围凝固性嗜酸性变肝细胞,模型对照组尤为明显,软肝化坚颗粒高、低剂量组凝固性嗜酸性变肝细胞明显减少。模型对照组肝组织肝纤维化评分、Bcl-2和Bax阳性表达量均高显著于正常对照组,（P值分别为0.000;0.000;0.000）,而Bcl-2/Bax比值显著低于正常对照组（P＝0.003）。软肝化坚颗粒高、低剂量组肝组织Bcl-2阳性表达较模型对照组和正常对照组均明显增强,差异均具有统计学意义（P＜0.05）, Bax阳性表达量较模型对照组显著减少,但较正常对照组显著增强,差异均具有统计学意义（P＜0.05）,Bcl-2/Bax比值均显著高于模型对照组和正常对照组（P＜0.01,P＜0.01）。结论 软肝化坚颗粒可能通过调节肝组织细胞中凋亡相关基因Bcl-2 和Bax的表达,抑制肝细胞凋亡进而发挥抗肝纤维化的作用。      

慢性乙型肝炎肝组织T淋巴细胞亚型表达与病变关系

目的探讨HBeAg阳性和HBeAg阴性慢性乙型肝炎肝组织T淋巴细胞亚型CD4^＋、CD8^＋表达情况与病变的关系。方法选择83例总T淋巴细胞（CD3^＋）阳性的病人,进行淋巴细胞亚型CD4^＋、CD8^＋免疫组化观察。结果两种不同临床类型慢性乙型肝炎肝组织内T淋巴细胞亚型CD4^＋．CD8^＋有以下特点：（1）两种不同临床类型慢性乙型肝炎肝组织CD4^＋、CD8^＋表达无显著差异（P〉0．05）。（2）两种不同临床类型的肝炎肝内CD4^＋表达均与肝组织炎症程度相关,随肝脏病变损伤加重,CD4^＋增多（P〈0．05）。（3）HBeAg阴慢性乙型肝炎肝内CD8^＋表达与肝组织炎症程度有相关性（P〈0．05）,与HBeAg阳性慢性乙型肝炎无相关性（P〉0．05）。结论提示CD8^＋在HBeAg阴性慢性乙型肝炎肝脏损伤中起到一定作用,与HBeAE阳性慢性乙型肝炎所引起的免疫应答有所不同。     

斑秃患者皮损处T淋巴细胞表型的研究及Fas的表达

目的　研究斑秃患者皮损处浸润T淋巴细胞的表型及Fas的表达情况。方法　应用免疫组织化学技术检测斑秃患者皮损处CD4和CD8T淋巴细胞及Fas的表达。结果　CD4和CD8:活动期和稳定期斑秃患者皮损处无论是毛囊周围还是血管周围CD4T淋巴细胞浸润数量均明显多于CD8T淋巴细胞 (P <0 .0 5 ) ;斑秃活动期的CD4和CD8T淋巴细胞浸润数量与稳定期和对照组相比较差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。Fas :与对照组相比较 ,斑秃患者皮损处毛囊角质形成细胞Fas的表达例数较多 (P <0 .0 5 )。结论　斑秃患者皮损处浸润T淋巴细胞以CD4T细胞占优势 ;Fas在斑秃皮损处毛囊角质形成细胞异常表达。     

肝纤维化形成过程中大鼠肝组织Bcl-2、Bax表达的动态研究

目的研究CCl4肝纤维化模型形成过程中Bcl-2、Bax蛋白在大鼠肝组织中的动态表达。方法雄性wistar大鼠制备CCl4肝纤维化动物模型,设正常对照组、4周模型组、8周模型组。实验结束后用v-G法染色观察肝纤维化程度并分级,同时用免疫组织化学法(SABC法)检测各组大鼠肝组织Bcl-2、Bax的表达情况。结果模型组大鼠肝纤维化程度均达肝纤维化的Ⅲ-V期以上。BcI-2在正常组、4周及8周模型组表达量分别为(3.19±0.79)％、(12.36±4.71)％及(17.39±5.98)％(P<0.01或P<0.05)。Bax在正常组、4周及8周模型组表达量分别为(2.04±0.58)％、(18.05±5.64)％及(13.56±4.77)％(P<0.01或P<0.05)。凋亡指数、Bax/Bcl-2比值在CCl4肝纤维化模型组中明显增加,尤以4周模型组增加最明显,且凋亡指数与Bax/Bcl-2比值呈正相关(r=0.347,P<0.05)。 结论肝纤维化时Bcl-2、Bax的表达加强,且在肝纤维化发生过程中存在动态变化。     

虫草多糖调节小鼠T淋巴细胞及其亚群数量的机制研究

目的 研究冬虫夏草菌丝体多糖（虫草多糖）对正常小鼠T淋巴细胞及其亚群数量的影响及可能的机制。方法 ICR小鼠,随机分成空白对照组、阳性组（香菇多糖1 mg·kg^-1）和虫草多糖高、中、低剂量（200,100,50 mg·kg^-1）组,连续腹腔注射10 d后,流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞（CD³⁺细胞）及其亚群细胞CD4⁺CD8^-和CD4-CD8+数量、CD³⁺细胞凋亡率;MTT法测定小鼠脾淋巴细胞转化功能;实时荧光定量PCR检测脾脏组织Bcl-2 mRNA、Bax mRNA的转录水平,并测定胸腺和脾脏指数。结果 与空白对照组比较,虫草多糖能提高小鼠脾脏质量、促进未经ConA诱导的脾淋巴细胞增殖转化能力,并呈现剂量依赖性;虫草多糖高剂量组能明显增加外周血CD³⁺细胞和CD4⁺CD8^-细胞亚群的数量,降低CD4^-CD8⁺细胞亚群数量,显著提高CD4⁺CD8^-/CD4-CD8⁺的比值;高剂量虫草多糖能明显降低小鼠外周血CD³⁺细胞凋亡率,显著升高脾组织Bcl-2 mRNA转录水平和Bcl-2/Bax比值,而对Bax mRNA转录水平没有明显影响。结论 虫草多糖可刺激小鼠主要免疫器官（胸腺和脾脏）增生,提高T淋巴细胞及CD4^-CD8⁺亚群的数量,其作用机制可能与上调抑制凋亡基因Bcl-2 mRNA的转录,提高Bcl-2/Bax比值,从而抑制淋巴细胞凋亡有关。     

葛根素对急性高眼压后大鼠视网膜Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

近年来,很多研究观察了心、脑、肝、肾等组织急性损伤后Bcl-2和Bax蛋白表达与细胞凋亡的关系,但未有视网膜急性损伤后Bcl-2和Bax蛋白表达变化的报道。我科多年来在急性闭角型青光眼患者激光或手术后应用葛根素注射液行视神经保护治疗,临床观察有一定疗效,但具体保护机制不清楚。本实验应用免疫组织化学的方法观察了葛根素对急     

鼻咽癌组织中Bcl-2和Bax的表达与放疗敏感性的关系

目的 研究鼻咽癌组织中Bcl-2及Bax的蛋白表达与放疗敏感性的关系.方法 采用免疫组织化学方法检测52例放疗前鼻咽癌活检组织中Bcl-2和Bax的表达.结果 C组Bcl-2/Bax比值为(1.52±0.20),低于A组(1.71±0.26),两组差异有统计学意义.结论 Bcl-2/Bax比值在一定程度上是反映鼻咽癌放射敏感性和预测鼻咽癌放疗效果的重要指标,而不能单独应用Bcl-2和Bax怍为判断鼻咽癌放疗敏感性的指标.     

慢性HBV感染者外周血淋巴细胞亚群的特征性研究

目的 分析慢性HBV感染者外周血T细胞亚群的特征及病程不同阶段的变化及意义.方法 采用流式细胞分析技术对75例慢性HBV感染者的外周血T细胞亚群进行检测,分析其差异及意义并与正常对照组相比较.结果 乙肝肝硬化患者的外周血白细胞及淋巴细胞绝对数低于慢性乙肝患者、携带者及正常对照组:与正常对照组比较,慢性乙肝、肝硬化患者的外周血CD4 T细胞、CD8 T细胞、NK细胞计数减少,并且随病情的进展逐渐降低.结论 HBV感染者体内存在T淋巴细胞亚群失衡和细胞免疫功能紊乱.外周血T淋巴细胞亚群随病情进展而减少,主要为CD4 T细胞、CD8 T细胞、NK细胞的减少.     

肝硬化患者外周血B细胞和T细胞及其亚群的研究

目的　探讨了肝硬化患者外周血 B细胞和 T淋巴细胞及其亚群的变化。方法　应用单克隆技术测定了 33例肝硬化患者外周血 B细胞和 T淋巴细胞亚群的水平并以 30名正常健康人作比较。结果　肝硬化患者外周血B细胞数显著地高于正常人组 (P<0 .0 0 1 ) ,CD3、CD4 、CD4 / CD8显著地低于正常人 (P<0 .0 1 )。结论　肝硬化患者是一种自身免疫调节异常的疾病     

健脾益肾颗粒对慢性乙型病毒性肝炎患者T淋巴细胞亚群的影响

目的观察慢性乙型病毒性肝炎患者服用健脾益肾颗粒后血液中T淋巴细胞亚群的变化。方法将48例慢性乙型病毒性肝炎患者随机均分为两组，治疗组患者服用健脾益肾颗粒和一般保肝药物，对照组患者服用一般保肝药物。两组疗程均为8周，分别于治疗前后用流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群。结果治疗组治疗8周后，外周血CD3^＋，CD4^＋，CD8^＋T淋巴细胞水平均较治疗前增高，差异有显著性（P〈0.05）；对照组治疗前后外周血CD3^＋，CD4^＋，CD8^＋T淋巴细胞水平无变化，差异无显著性（P〉0．05）。结论健脾益肾颗粒具有促进慢性乙型病毒性肝炎患者外周血CD3^＋，CD4^＋，CD8^＋T淋巴细胞水平增高的作用。     

慢性乙型肝炎患者血清瘦素和外周血B细胞、T细胞亚群测定的临床意义

目的探讨血清瘦素表达水平和外周血B细胞、T细胞亚群在慢性乙型肝炎病毒感染造成肝功能损伤过程中的作用。方法分别采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和单克隆抗体法检测36例慢性乙型肝炎患者和30例健康体检者血清瘦素水平和外周血B细胞、T细胞亚群水平,并检测两组肝功能指标。结果慢性乙型肝炎患者瘦素、B细胞数均非常显著地高于正常人组（P〈0.01）,而CD3、CD4、CD4/CD8则显著地低于正常人组（P〈0.01）,且与ALT、TBil水平呈明显的正相关。结论检测慢性乙型肝炎患者血清瘦素水平以及外周血B细胞和T细胞亚群水平的变化在一定程度上反映了机体的免疫功能状态和肝脏的受损程度,具有一定的临床实用价值。     

化疗后T细胞亚群变化与乙型肝炎病毒再激活关系研究

目的 了解患者化疗后出现乙型肝炎病毒再激活时T细胞亚群CD3＋、CD4＋、CD8＋变化情况.方法 采用流式细胞术检测接受化疗的32例发生乙型肝炎病毒再激活和25例未发生乙型肝炎病毒再激活化疗前后外周血T细胞亚群.结果 化疗后CD3＋T细胞、CD4＋ T细胞百分比以及CD4＋/CD8＋较化疗前明显降低（P＜0.05）,CD8＋T细胞百分比较化疗前无明显变化（P＞0.05）.结论 化疗能对T细胞数量及比例产生明显的影响,抑制细胞免疫功能是导致乙型肝炎病毒再激活的原因之一.     

恩替卡韦对慢性乙型肝炎患者外周血B淋巴细胞亚群的影响

目的探讨恩替卡韦抗病毒治疗对慢性乙型肝炎患者外周血B淋巴细胞亚群的影响。方法慢性乙型肝炎患者60例,随机分为对照组、治疗组各30例。对照组仅给予常规治疗,治疗组另外给予恩替卡韦0.5 mg/d,口服,疗程48周。检测治疗前后患者外周血CD5+B细胞(CD5+,CD19+)及传统B细胞(CD5-,CD19+)百分率。结果对照组治疗前后外周血CD5+B淋巴细胞百分率无明显变化,治疗组治疗后较治疗前明显下降,且明显低于对照组(P<0.05)。结论恩替卡韦治疗对于慢性乙型肝炎患者体液免疫失衡有改善作用。     

急性肾炎患儿治疗前后B细胞和T细胞亚群的检测

目的　探讨急性肾炎患儿治疗前后外周血 B细胞和 T细胞亚群含量。方法　应用单克隆抗体技术测定 30例小儿急性肾炎外周血 B细胞和 T细胞亚群 ,并以 35名健康人作对照。结果　急性肾炎患儿外周血 B细胞数显著地高于正常对照组 (P<0 .0 1) ,CD3、CD4、CD4/CD8显著地低于正常人对照组 (P<0 .0 1或 P<0 .0 0 1)。结论　急性肾炎患儿为一种自身免疫调节异常的疾病。     

测定慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群的临床意义

目的研究T淋巴细胞亚群在慢性乙型肝炎患者外周血中的变化及其临床意义。方法应用流式细胞仪检测70例慢性乙型肝炎、10例乙肝肝硬化患者及30例健康人的外周血T淋巴细胞亚群,并进行统计分析。结果与对照组相比较,慢性乙型肝炎组及乙肝肝硬化组的CD4 、CD4 /CD8 有非常显著性下降(P<0.01),CD3 、CD8 、CD56 的变化不明显(P>0.05)。结论慢性乙型肝炎患者细胞免疫功能紊乱,且与疾病的进展有一定关系。     

乙肝患者HBV-DNA载量与外周血T细胞CD127及肝功能的相关性研究

目的通过检测乙型肝炎(乙肝)患者乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)载量,探讨其与外周血T淋巴细胞表面CD127的表达水平及肝功能的相关性。方法将慢性乙肝病毒(HBV)感染患者64例按疾病类型分为慢性乙肝组43例和乙肝性肝硬化21例,另选择健康体检者20例作为对照组,采用流式细胞术检测乙肝患者及健康者外周血T细胞表面CD127的表达水平,实时荧光定量PCR法检测乙肝患者HBV-DNA并进行分析,同时采用全自动生化分析仪检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(TBIL)水平,并对各组检测值进行比较和相关性分析。结果乙肝组CD4+CD127+表达率与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。乙肝组CD8+CD127+表达率、ALT和TBIL值及血清HBV-DNA定量显著高于对照组,且乙肝性肝硬化组ALT值显著低于慢性乙肝组,差异均有统计学意义(P<0.05和P<0.01)。HBV病毒载量的对数值与外周血T淋巴细胞表面CD127的表达呈负相关(r=-0.391,P<0.01),但HBV-DNA载量与肝功能无明显相关性。结论乙肝患者HBV-DNA与外周血T淋巴细胞表面CD127的表达水平明显相关,但与肝功能无明显相关性。