CX43蛋白磷酸化在大鼠逼尿肌过度活动症中的作用

目的 评价CX43蛋白磷酸化在大鼠逼尿肌过度活动症(detrusor overactivity,DO)中的作用,并初步探讨PP1和PP2A对CX43蛋白磷酸化修饰状态的影响.方法 建立大鼠DO模型作为实验组,假手术组作为对照组,Western blot检测CX43蛋白磷酸化水平、PP1及PP2A的表达变化,免疫荧光双染对CX43与PP1、PP2A的定位及表达变化进行检测,荧光漂白恢复实验(FRAP)比较正常组、DO组、DO+碱性磷酸酶(AP)组的细胞间通讯功能(gap junction intercellular communication,GJIC)的差异.结果 与正常组相比,DO组膀胱中的CX43蛋白的不同磷酸化修饰状态(P0、P1、P2)的表达水平均明显升高(P＜0.05),PP2A的表达明显降低(P＜0.05),PP1的表达未发现明显改变(P＞0.05).DO组的GJIC较正常组明显增加(P＜0.05),DO+ AP组的GJIC较正常组和DO组明显降低(P＜0.05).结论 CX43蛋白的磷酸化水平上调可能在DO的发病过程中发挥着重要的作用,这种磷酸化水平的上调可能与PP2A的表达减少相关.     

膀胱过度活动症

膀胱过度活动症(Overactive Bladder,OAB)是一种以尿急症状为特征的征候群,常伴有尿频和夜尿症状,可伴或不伴有急迫性尿失禁[1];不包括由急性尿路感染或其他形式的膀胱尿道局部病变所致的症状.尿动力学上可表现为逼尿肌过度活动(Detrusor instability,or detrusor overactivity)[2].是一种常见病,严重影响患者的生活质量.过去有关名词较混乱,如女性尿道综合征、逼尿肌反射亢进、逼尿肌不稳定、不稳定膀胱等.2001年9月国际尿控学会(ICS)正式确立该病名.正确地处理OAB,将减少尿失禁的发生,提高患者的生活质量.     

继发性膀胱过度活动症126例临床分析

目的：探讨继发性膀胱过度活动症(OAB)的尿动力学(UDS)特征，为临床有效的治疗原发疾病提供必要的信息。方法：将126例住院患者中继发于膀胱出口梗阻(BOO)的OAB患者110例分成两组，以观察术后情况。实验组：普鲁本辛15mg Bid，舒乐安定lmgHs；对照组：按常规术前、术后予以处理。结果继发性OAB患者首选抗OAB治疗，对治疗原发疾病及术后并发症治疗有显著影响。结论；继发于BOO的OAB是梗阻后引起膀胱容量及压力改变致使逼尿肌不稳定(DI)的结果。     

尿动力学判定的逼尿肌过度活动在女性膀胱过度活动症中的意义李宁

 目的 探讨尿动力学判定的逼尿肌过度活动(DO)在女性膀胱过度活动症（OAB）患者中的意义。方法 91例女性OAB患者,均行膀胱过度活动症评分（OABSS）、自由尿流率检查和压力流率测定（PFS）。以PFS过程中出现DO为标准,将患者分为DO组和单纯OAB组。比较2组的年龄、OABSS和尿动力学参数。结果 DO组的年龄（49.7±18.4）岁与单纯OAB组（48.5±17.1）岁差异无统计学意义,其初始尿意容量及膀胱测压容量明显低于（P＜0.01）单纯OAB组,分别为[（67.4±36.8） vs（91.8±41.2）] ml及[（108.1±45.3） vs （254.2±97.1）] ml,同时OABSS（10.9±4.1）、夜间排尿次数评分（2.1±0.8）、尿急评分（3.9±0.9）及急迫性尿失禁评分（3.5±1.6）明显高于单纯OAB组的8.2±5.3、1.3±0.6、3.1±0.7及2.3±1.9,其差异具有统计学意义。结论 DO的出现,会导致OAB症状的加重,主要表现为夜尿、急迫性尿失禁的发生率增加,以及尿急症状的加重,但仍需要进一步的大样本、多中心研究来进一步证实。     

膀胱过度活动症诊断治疗指南

膀胱过度活动症是指尿急、尿频和急迫性尿失禁等临床症状构成的综合征。过去有关名词较混乱，如女性尿道综合征、逼尿肌反射亢进、逼尿肌不稳定、不稳定膀胱等。 1定义 膀胱过度活动症（overactive bladder，OAB）是一种以尿急症状为特征的综合征，常伴有尿频和夜尿症状，可伴或不伴有急迫性尿失禁；尿动力学上可表现为逼尿肌过度活动，也可为其他形式的尿道一膀胱功能障碍。     

膀胱过度活动症发生机制研究进展

膀胱过度活动症(overactive bladder,OAB)是一种常见的膀胱功能障碍,指以尿急为主要表现,伴或不伴急迫件尿失禁的一种症候群,通常伴有尿频和夜尿增多[1].     

RhoA/Rho激酶与膀胱过度活动症的关系

膀胱过度活动症(overactive bladder,OAB)是指排除感染及其它明确病理改变的前提下,出现尿急,伴或不伴有急迫性尿失禁的症候群,通常伴有尿频和夜尿,这些症状可单独出现,也可以任何复合形式出现,其中膀胱逼尿肌过度活动是其主要的发生机制。OAB可分为两种类型:①逼尿肌反射亢进:有明确的神经系统疾病;②逼尿肌不稳定:非神经系统疾病所致,为储尿期逼尿肌异常收缩引起的相应临床症状,     

心肌梗死后心脏交感神经重构与生长相关蛋白-43、神经生长因子（NGF）的研究进展

心肌梗死后心脏不同区域出现不同程度的去迷走神经支配、去交感神经支配以及交感神经过度再生，这种心脏交感神经的不均一重构加重了心肌梗死后心肌的电生理异质，导致了心肌梗死后室性心律失常易感性增加。长期以来国内外多局限在对心肌梗死后电重构的研究。而近年研究发现，心肌梗死后出现心脏交感神经支配密度与生长相关蛋白-43、神经生长因子（NGF）的动态表达密切相关的现象，而心肌梗死后的主要致死原因心律失常与交感神经分布、密度改变有密切的关联，目前交感神经重构干预已经成为一个热点，该研究可能为心肌梗死后患者的治疗和预后提供一个新方向。     

tau蛋白过度磷酸化在阿尔茨海默病发病机制中的作用

阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease, AD)是最常见的老年痴呆病,神经纤维缠结(neurofibrillary tangles, NFT)是AD患者脑内主要的病理特征之一,而NFT的主要成分是过度磷酸化tau蛋白.tau蛋白过度磷酸化被认为是AD发病的重要因素,能产生细胞毒性并介导神经元凋亡,但其如何影响NFT形成并引起毒性的具体机制尚不清楚.文中综述了tau蛋白过度磷酸化的分子机制,及其在AD中的影响和针对tau蛋白进一步研究的突出问题.     

补肾活血方治疗BPH合并膀胱过度活动症疗效观察

目的：观察补肾活血方对BPH合并膀胱过度活动症的疗效。方法：选取2012年10月到2013年12月在我院泌尿外科门诊就诊确诊前列腺增生合并膀胱过度活动症的患者共50例,随机分为可多华组和补肾活血方 可多华组,分别治疗3个月时,采用国际前列腺评分(IPSS)、膀胱过度活动症症状评分(OABSS)、生活质量评分(QOL)进行疗效评价。结果:在年龄等一些基础临床材料无明显差异的情况下,补肾活血方 可多华组较可多华组在IPSS、OABSS、QOL上占有显著优势。结论：补肾活血方能明显改善BPH合并膀胱过度活动症患者的症状,提高患者生活质量。     

Effects of NGF and TrkA on GAP-43^＋ nerve regeneration in rat autotransplanted splenic tissue

Objective：To study the time-course of the regeneration of GAP-43^＋ nerve, and the effects of NGF and TrkA on this process. Methods： Adult Wistar rats underwent splenectomy and splenic autotransplantation, or sham-operation. On day 7, 14, 30, 60, 90, 120, and 180 after surgery, the density of GAP-43^＋ nerve fibers in spleen tissues were measured with the immunohistochemistry followed by computer image analysis. The expressions of GAP-43, NGF and TrkA were determined with in situ hybrdization, and their mRNA levels were detected with RT-PCR and image analysis qualification. Results： （1） The GAP-43^＋ nerve fibers began their regeneration on 30 d after operation and extended from greater omentum into splenic autotransplants. Density of the nerve fibers gradually became greater and almost normal 180 d after operation. （2） In splenic autografts, the mRNA expression of GAP-43, NGF and TrkA appeared on day 30 after the operation, gradually reached the peak on day 90. Conclusion： The renascent GAP-43^＋ nerve fibers may come from the greater omentum packaging the splenic autografts and NGF and TrkA can promote the nerval regeneration in the autotransplant spleen tissues.     

生长相关蛋白GAP-43多肽抗体的制备

目的对生长相关蛋白-43（growth associated proteins-43,GAP-43）进行抗原表位分析并制备兔多克隆抗体。方法通过对GAP-43 cDNA序列及氨基酸序列的结构进行生物信息分析,依据蛋白质的二级结构、亲水性、疏水性、抗原性及理化特性,经过同源性检索后,综合考虑抗体设计的其他因素,选出具有免疫活性的抗原决定簇多肽片段,采用有机固相多肽合成法合成了GAP-43的多肽片段,并与载体蛋白血蓝蛋白（KLH）偶联制备成抗原,免疫新西兰家兔。结果 ELISA测定GAP-43抗体效价为1∶32 000;Western blot检测结果显示：在分子量25kDa出现单一条带;免疫组织化学法检测显示：GAP-43蛋白在小鼠海马神经元中有表达;免疫细胞化学法检测显示：GAP-43蛋白在人神经母细胞瘤株SH-SY5Y中存在表达。结论利用生物信息学软件比较准确地预测GAP-43的抗原决定簇,并成功制备了高效价、高特异性的多肽抗体。     

生长相关蛋白免疫反应神经纤维在大鼠垂体前叶的分布

目的：生长相关蛋白（ＧＡＰ－４３）是神经生长再生的一种标志蛋白，研究大鼠垂体前叶ＧＡＰ－４３的阳性分布为进一步研究垂体前叶内神经可塑性创造条件。方法：免疫组织化学ＡＢＣ染色法，结果：在大鼠垂体前叶有一定数量的ＧＡＰ－４３阳性神经纤维，其分布为周边较中央多，两侧较内侧部多。结论：垂体前叶内有ＧＡＰ－４３阳性神经纤维，表明其具有再生发芽的能力。     

康复训练对脑梗死大鼠脑GAP-43表达的影响

目的：研究康复训练对脑梗死大鼠脑的生长相关蛋白（GAP－43）表达的影响。方法：SD大鼠采用光化学法制成脑梗死模型后,随机分康复组,制动组,自由组及正常组,每组大鼠在1,3,7,14,21,28d取脑组织免疫组化染色,以观察脑梗死大鼠各组不同时期脑的GAP－43表达。结果：1,3,7,14d脑梗死周边区可见GAP－43阳性细胞,21,28d时梗死周边GAP－43阳性细胞逐渐减少,康复组较制动组在7,14d明显增加,尤以胼胝体为。结论：康复训练可引起损伤周边区GAP－43表达的变化。提示该区有促进神经新生枝芽的生长作用。     

GAP-43高表达转基因小鼠的建立

目的构建GAP-43(growth associated protein-43)高表达转基因小鼠,为进一步研究GAP-43对神经发生及损伤修复的作用机制提供基础。方法构建pCEP4-PDGF-GAP-43转基因构件,通过原核显微注射方法将线性化、纯化后的外源质粒pCEP4-PDGF-GAP-43注射入C57小鼠受精卵中,胚胎移植至同期发情的假孕受体母鼠输卵管内,获得子代小鼠。用PCR方法检测子代鼠尾基因组DNA,通过Western blotting法检测GAP-43基因表达,并通过免疫荧光的方法对GAP-43表达位置进行定位。结果经PCR方法检测得到转基因阳性鼠,Western blotting结果显示GAP-43蛋白的表达量高于同胞对照组的小鼠且差异有统计学意义,免疫荧光染色结果显示GAP-43阳性反应物弥散分布于大脑皮质和海马中,且特异性存在于神经元中。结论外源基因GAP-43在小鼠基因组中得到整合并稳定遗传,为神经损伤修复及神经发育的相关研究提供了有价值的动物模型。     

大鼠GAP-43基因的克隆及其在COS-7细胞的表达

目的: 克隆大鼠GAP-43基因,构建其真核表达载体,并观察其在哺乳动物细胞COS-7中的表达。方法: 采用RT-PCR方法,以大鼠少突胶质前体细胞RNA为模板,扩增GAP-43基因,定向克隆到pEGFP-N3载体中。以LipofectamineTM 2000试剂转染pEGFP-N3-GAP-43表达载体至COS-7细胞中进行瞬时真核表达。以免疫荧光方法鉴定GAP-43的表达。结果: 从大鼠少突胶质前体细胞中克隆到序列正确的GAP-43全长编码序列。所构建的GAP-43质粒在COS-7细胞中获得高效表达。结论: 大鼠GAP-43基因的克隆、真核表达载体的构建及在COS-7中的表达获得成功,为进一步研究其功能,尤其是探讨其在少突胶质细胞发育中的作用奠定了基础。     

生长相关蛋白43在宫内发育迟缓胎鼠脑组织中表达的研究

目的:探讨生长相关蛋白43(GAP-43)在胎儿宫内发育迟缓(IUGR)鼠脑发育过程中的表达情况.方法:钳夹一侧供应子宫的血管30 min,制成IUGR模型,不钳夹侧为对照组.通过免疫组化方法检测GAP-43在两组鼠脑中顶叶皮质分子层及海马CA1区的表达水平.结果:IUGR组胎鼠大脑顶叶皮质分子层GAP-43的表达水平显著低于对照组(P＜0.05),海马CA1区GAP-43的表达在IUGR组与对照组相比无显著差异.结论:慢性宫内缺血在导致IUGR的同时可引起胎鼠大脑顶叶皮质分子层中GAP-43的表达显著减低,间接反应出IUGR胎鼠有宫内神经系统损伤存在.     

产前束缚应激下调子代大鼠海马生长相关蛋白43的表达

目的：通过检测产前束缚应激子代大鼠脑内海马中生长相关蛋白（GAP-43）的表达,探讨该应激降低大鼠空间学习记忆能力的原因。方法：选用SD大鼠20只,正常饲养7d,使其怀孕,并完全随机分为应激组（n=10）和对照组（n=10）,在母鼠怀孕的13～19d,白天使母鼠钻入一直径7cm,长19cm的圆柱形容器中,实施束缚应激。对照组则正常饲养。待母鼠生产后,于仔鼠出生后1、7和30d时将其处死．取脑组织应用Western Blotting方法检测海马中GAP-43的表达。均有显著性．另外30d两组在处死前先进行Morris水迷宫实验。结果：Morris水迷宫实验中,应激组与对照组相比,寻找站台的潜伏期有明显的延长（P〈0．05）。策略方面,应激组多选择随机式,对照组多选择直线式,差异有统计学意义（P〈0．05）。仔鼠应激组脑海马GAP-43的表达在1和7d高于对照组,在30d时低于对照组（P〈0．叭）。结论：产前束缚应激刺激早期可使GAP-43反应性升高,但长期看,会下调子代大鼠脑海马GAP-43的表达,使神经元轴突发育异常．最终导致子代大鼠认知缺损。     

眼镜蛇毒神经生长因子对去部分背根猫脊髓背角内GAP-43表达的影响

目的观察眼镜蛇毒分离纯化出的神经生长因子(NGF)对去部分背根猫脊髓背角内生长相关蛋白-43(GAP-43)表达的影响。方法对45只成年雄性家猫切除一侧L1-L5、L7-S2背根节,保留L6背根及背根节为备用背根,按给药剂量将动物分成小剂量NGF组(1μg/kg)、大剂量NGF组(2μg/kg)和生理盐水对照组,每组15只,术后分别存活3、6、12d,对L6节段脊髓作GAP-43免疫组织化学检测。结果术后术侧GAP-43阳性反应产物主要分布在脊髓、、板层的神经终末;中央管室管膜细胞呈阳性反应;脊髓前角神经毯呈阳性反应,整个脊髓板层未见阳性反应的神经元。术后3d,三组术侧、、板层即有GAP-43阳性神经纤维的表达;术后6d,三组GAP-43阳性神经纤维数量明显增多,至术后第12d,神经纤维数量增加达高峰,治疗组神经终末数量增加明显,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),不同时间段均以大剂量组的增多尤为显著。结论蛇毒NGF能有效诱导脊髓损伤修复过程中神经元GAP-43的合成而促进保留背根的侧支出芽,其密度与蛇毒神经生长因子的治疗剂量有关。     

外伤性癫痫大鼠海马NCAM及GAP-43的动态表达

目的：动态观察神经细胞黏附分子（NCAM）及颗粒细胞生长相关蛋白-43（GAP-43）在外伤性癫痫（PTE）大鼠海马的表达,探讨有关发病机制。方法：立体定向注射1000nmolFeCl2：于大鼠右侧运动皮层致痫,在不同时间点行为学视频、脑电图监测,用免疫组织化学法检测1、2、3、4周大鼠海马内NCAM及GAP-43的表达。结果：所有大鼠在注射FeCl2后不久记录到癫痫样放电,致痫后1周即可见海马神经元NCAM大量表达,15天达高峰,20天后减少,持续30天;GAP-43表达在5～7天达高峰,2周后明显减少。结论：FeCl2皮层注射可以制成PTE动物模型。与NCAM及GAP-43表达相关的神经元及胶质细胞的动态变化在PTE的发病机制中起重要作用。NCAM表达增加而GAP-43表达减少可能为FeCl2致痫的共同途径。