紫花牡荆素对人结肠癌SW480细胞生长和凋亡的影响

目的观察紫花牡荆素（CAS）对人结肠癌SW480细胞生长和凋亡的影响。方法体外培养人结肠癌SW480细胞,平皿克隆形成法测定细胞锚定依赖性生长能力,PI染色流式细胞术（FCM）分析细胞凋亡率,Western Blotting分析CAS对上调死亡受体-5（DR5）、抑制核因子κB（NF-κB）（p65）蛋白表达的影响。结果平皿克隆形成法检测显示CAS呈浓度依赖性抑制SW480细胞生长。PI染色FCM结果表明CAS呈时间和浓度依赖性诱导SW480细胞凋亡。Western Blotting检测显示CAS呈时间和浓度依赖性上调死亡受体-5（DR5）表达和抑制核因子κB（NF-κB）活性。结论 CAS具有抑制人结肠癌SW480细胞增殖和诱导凋亡的作用,其诱发结肠癌细胞凋亡作用与DR5表达和NF-κB活性有关。     

姜黄素与5-氟尿嘧啶联用对人结肠癌HT-29细胞凋亡及环氧合酶-2表达的影响

目的:探讨姜黄素是否能增强5-氟尿嘧啶(5-FU)的抗癌作用,并探讨其与细胞凋亡及COX-2蛋白表达的关系。方法:采用MTT法观察不同浓度姜黄素、5-FU单独或联合应用对HT-29细胞的生长抑制作用;流式细胞仪和荧光显微镜检测对HT-29细胞凋亡的影响;并且应用Western blotting分析联合应用后对于COX-2蛋白表达的影响。结果:姜黄素和5-FU可明显抑制HT-29细胞的生长,并呈剂量依赖性,半数生长抑制率(IC50)分别为(15.9±1.96)μmol/L和(17.3±1.85)μmol/L;当二者联合应用时,在较高的作用水平可以定量地观察到对HT-29细胞的协同抑制作用。流式细胞仪结果表明,单独应用姜黄素以及联合应用姜黄素与5-FU均能使HT-29细胞在加药后24和48 h出现凋亡峰,但联合用药所诱导的细胞凋亡比例较单独应用姜黄素低;荧光显微镜观察的结果与流式细胞仪的结果相同;免疫印迹实验结果显示两种药物联合作用可以使COX-2的表达降低约75%。结论:姜黄素与5-FU联合应用可协同抑制大肠癌细胞的增殖并协同抑制HT-29细胞内COX-2的表达。     

过氧化氢酶对SW480细胞线粒体和凋亡的影响

OBJECTIVE: To investigate the effects of catalase on the mitochondria and apoptotic behavior of SW480 cells treated by lipopolysaccharide (LPS), and the changes in intracellular expression of nuclear factor kappaB (NF-kappaB). METHODS: LPS-stimulated SW480 cells were treated with catalase and the changes in their mitochondria and apoptotic behavior were observed by transmission electron microscopy. The expression of NF-kappaB was detected by immunohistochemical method. RESULTS: Mitochondria damages and apoptosis were slightly diminished in the LPS-stimulated cells with catalase pretreatment, and the NF-kappaB expression was also decreased. CONCLUSION: Catalase protect the mitochondria of SW480 cells from damages by LPS and inhibit the cell apoptosis, possibly due to the activation of NF-kappaB.     

姜黄素对人结肠癌细胞SW480增殖周期及凋亡的影响

目的探讨姜黄素对人结肠癌细胞SW480细胞生长的抑制作用及其对细胞增殖周期和凋亡的影响。方法采用甲基噻唑（MTT）比色法和生长曲线测定不同浓度姜黄素在不同作用时间内对在体外培养SW480细胞增殖的影响，同时应用流式细胞术检测细胞增殖周期及凋亡率的变化。结果姜黄素可在G0／G1期阻滞人结肠癌细胞SW480的增殖，使S期细胞比率降低；在一定范围内，姜黄素的浓度越高、作用时间越长，对肿瘤细胞生长的抑制作用越强，凋亡率也越高。结论姜黄素能抑制人结肠癌细胞SW480细胞生长，并诱导细胞凋亡而阻止细胞周期。     

过氧化氢酶对SW480细胞线粒体和凋亡的影响

目的观察过氧化氢酶(CAT)对SW480细胞线粒体形态、细胞凋亡的影响及细胞内核转录因子(NF)κB表达的变化。方法用脂多糖(LPS)刺激SW-480细胞,再用过氧化氢酶预孵育和治疗;应用透射电镜观察各组细胞内线粒体形态和细胞凋亡的变化;采用免疫组织化学方法检测细胞内NF-κB的表达水平。结果经过过氧化氢酶预孵后,细胞凋亡明显减少,线粒体损伤减轻,同时NF-κB的表达较LPS组和治疗组明显降低(P<0.01),但较正常对照组仍明显增加。结论CAT对SW480细胞的致炎因子刺激后的应激反应有保护作用,能减少细胞的凋亡和线粒体的损伤,这一作用可能与NF-κB的激活有关。     

姜黄素对子宫内膜癌孕激素抵抗的影响

目的 观察不同浓度姜黄素对子宫内膜癌孕激素耐药细胞的影响,探讨相关信号通路在影响子宫内膜癌孕激素耐药中的作用.方法 采用ETCM、GEPIA数据库分析姜黄素的靶点基因,进而筛选出与子宫内膜癌及耐药相关的基因;测定已建立的子宫内膜癌Ishikawa细胞的孕激素耐药模型(IshikawaPR细胞系)的耐药性,将耐药细胞按不...     

姜黄素对糖尿病大鼠血脑屏障的影响

目的 探讨姜黄素对链脲佐菌素诱导的糖尿病(DM)大鼠血脑屏障(BBB)的作用。方法 实验动物分为正常对照组、DM组、DM+姜黄素组,3个月后检测各组大鼠BBB通透性、BBB紧密连接蛋白claudin和occludin的表达,ELISA法检测大鼠皮层白细胞介素(IL)-10、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的蛋白含量,Western blot法检测各组大鼠核因子κB(NF-κB)的表达。结果姜黄素对DM大鼠的血糖没有显著影响,但可降低DM大鼠的体质量。DM组大鼠BBB通透性显著增加(P<0.01),claudin和occludin的表达显著降低(P<0.01),IL-10的表达降低(P<0.01),IL-6和TNF-α的蛋白含量明显升高(P<0.01),NF-κB的表达显著增加(P<0.01)。给予姜黄素可升高claudin和occludin的表达(P<0.05),降低BBB通透性(P<0.05),减少IL-6和TNF-α的含量(P<0.05),提高IL-10的含量(P<0.05),并显著抑制NF-κB的表达(P<0.01)。结论 应用姜黄素可通过抑制DM诱导的炎性反应,升高claudin和occludin的表达,降低DM大鼠BBB通透性,保护DM大鼠的BBB。其保护作用可能与NF-κB通路有关。     

姜黄素对人结肠癌Lovo细胞VEGF表达的影响

目的 研究姜黄素体外对人结肠癌Lovo细胞血管内皮生长因子VEGF表达的影响。方法不同浓度（0μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L）姜黄素处理2013年8月—2014年2月中南大学提供的人结肠癌细胞株Lovo24 h后,用Real-time PCR检测姜黄素对人结肠癌细胞株血管内皮生长因子VEGF m RNA表达的变化,用Western blot法检测姜黄素对人结肠癌细胞株VEGF蛋白表达的变化。结果人结肠癌Lovo细胞经过姜黄素处理24 h后,5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L姜黄素组VEGF m RNA及蛋白的表达均明显下降,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论姜黄素能下调人结肠癌Lovo细胞VEGF的表达,并呈剂量依赖,这可能是姜黄素抑制结肠癌Lovo细胞增殖及侵袭性的机制之一。     

姜黄素对脂多糖诱导人脐静脉内皮细胞炎症反应的影响及分子机制

目的 研究姜黄素对脂多糖(LPS)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)炎症因子表达的影响,初步探讨可能的分子机制.方法 使用LPS(1μg)和姜黄素(5μmol/L、15μmol/L或30μmol/L)处理HUVEC细胞24 h,收集细胞总RNA,实时定量PCR(RT-PCR)和ELISA方法检测细胞TNF-α、MCP-1水平;Western blot检测细胞TLR4、MAPKs、NF-κB p65、磷酸化-NF-κB p65及NF-κB抑制蛋白IκBα的表达情况.结果 与空白对照组比较,姜黄素能显著抑制LPS诱导HUVEC细胞TNF-α、MCP-1和TLR4的过表达(P<0.05),明显降低NF-κB p65和MAPKs的磷酸化及IκBα蛋白降解(P<0.05).结论 姜黄素可能基于抑制TLR4/NF-κB,从而影响LPS诱导HUVEC细胞炎症因子的表达.     

5-Fu对人结肠癌细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的:探讨5-氟尿嘧啶（5-Fu）对人结肠癌细胞凋亡及其相关基因表达的影响。方法:Hct/8细胞分为5-Fu组和对照组，通过凋亡细胞数量、形态、基因组DNA片段化及流式细胞仪检测观察5-Fu对人结肠癌细胞凋亡情况的影响，并通过基因芯片测定相关基因改变。结果：吖啶橙染色及基因组DNA电泳显示5-Fu组凋亡细胞数量明显多于对照组（P<0.01）；基因芯片检测显示，5-Fu致多种基因表达发生改变，尤其是与DNA损伤修复相关基因出现表达下调。结论：5-Fu具有致人结肠癌细胞凋亡的作用，其原因是由于多种基因表达改变相互作用影响所致，尤其是DNA损伤修复相关基因的改变致不能及时修复受损的基因，最终致癌细胞发生凋亡。     

术前区域动脉灌注5-Fu联合奥沙利铂对于结肠癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制研究

目的：研究术前区域动脉灌注5-Fu和奥沙利铂对于结肠癌细胞增殖和凋亡的影响。方法：选择在本院确诊为结肠癌的60例患者,随机分为5-Fu联合奥沙利铂组（A组）、5-Fu组（B组）、奥沙利铂组（C组）、对照组（D组）,每组15例。分别于术前区域动脉灌注相应的药物。检测各组肿瘤组织中Ki标记指数（Ki67LI）、凋亡细胞数目、凋亡指数（AL）、凋亡基因含量。结果：A组肿瘤组织中Ki标记指数明显低于B组、C组以及D组;A组肿瘤组织中的凋亡细胞数目和凋亡指数明显低于B组、C组以及D组;A组肿瘤组织中凋亡基因Caspase-3、Caspase-9、Fas、FasL的蛋白质表达量均高于B组、C组以及D组。以上差异均具有统计学意义。结论：术前区域动脉灌注5-Fu和奥沙利铂能够显著性抑制结肠癌肿瘤细胞的增殖,促进肿瘤细胞的凋亡,这种作用的可能机制是上调Caspase-3、Caspase-9、Fas、FasL的蛋白质表达量。     

TRAIL与5-Fu合用对结肠癌细胞系SW480杀伤作用的研究

目的 观察TRAIL与5—Fu联合应用对结肠癌SW480细胞的作用。方法 采用MTT法检测TRAIL与5-Fu联合应用对结肠癌SW480细胞存活分数的影响；TUNEL法检测TRAIL与5—Fu联合应用对结肠癌SW480细胞凋亡率的影响。结果 MTT法证实30～300ng/ml的TRAIL与3．0mmol／L 5—Fu联合应用对结肠癌SW480细胞存活分数的影响有协同作用，TUNEL法表明3．0mmol／L 5—Fu可显著增强TRAIL诱导结肠癌SW480细胞凋亡的作用。结论 5-Fu可提高结肠癌SW480细胞对TRAIL的敏感性。     

结肠癌耐药细胞株LoVo/5-Fu中microRNA表达的初步研究

目的 建立结肠癌细胞耐药模型LoVo/5-FU并初步筛选可能的耐药相关的microRNA.方法 采用5-FU浓度递增法建立人结肠癌细胞耐药模型LoVo/5-FU,观察其生长规律并绘制细胞生长曲线;用MTT法鉴定耐药细胞株耐药性并计算耐药指数(RI);用microRNA芯片技术检测耐药细胞株LoVo/5-FU与其亲本细胞株LoVo中mi-croRNA的表达谱,筛选差异表达的microRNA;用实时荧光定量PCR方法对筛选出的部分差异microRNA在耐药细胞及其亲本细胞中的表达情况进行验证.结果 LoVo/5-FU细胞与LoVo细胞相比,生长缓慢,细胞体积增大,耐药株LoVo/5-FU细胞相对于其亲本LoVo细胞的耐药倍数为8.08.microRNA芯片的结果显示,耐药株LoVo/5-FU细胞与亲本LoVo细胞比较,有10个microRNA表达上调,13个microRNA表达下调;实时荧光定量pcr的结果进一步证实mir-210、mir196a、mir-1281在LoVo/5-FU中显著上调,而let-7fmir-1228显著下调,其中mir-210在LoVo/5-FU与LoVo中的表达有明显差异.结论 LoVo/5-FU细胞株耐药性稳定,筛选获得的差异miRNA可能通过调控其靶基因而参与人结肠癌细胞对5-Fu的耐药,为进一步研究microRNA在结肠癌耐药机制中的作用奠定基础.     

血管生成抑制剂SU6668联合5-Fu对人结肠癌裸鼠移植瘤肝转移的影响

目的：探讨血管生成抑制剂SU6668联合5-Fu对人结肠癌肝转移的抑制作用。方法：将结肠癌HT-29细胞注入裸鼠脾脏,建立结肠癌肝转移模型。将裸鼠随机分为联合治疗组、SU6668组、5-Fu组和对照组4组。治疗6周后,处死裸鼠,计数肝转移率和肝转移结节数。采用免疫组化SABC法和图像分析系统对肝转移肿瘤组织的微血管密度(microvessel density, MVD)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(base fibroblast growth factor, bFGF)的表达进行定量分析。结果：各组转移率依次下降,差异有统计学意义(P＜0.01);在肝转移结节数目比较上,对照组结节数大于20个时各组裸鼠所占比例差异有统计学意义(P＜0.01)。联合治疗组和SU6668组分别与5-Fu组及对照组相比,MVD均显著减少(P＜0.05)。联合治疗组、SU6668组、5-Fu组与对照组比较,VEGF、bFGF均显著降低,且联合治疗组、SU6668组、5-Fu组3组间差异有统计学意义(P＜0.05)。结论：SU6668通过抗血管生成抑制结肠癌的肝转移,与5 Fu联合应用具有协同效应,为安全有效的抗肿瘤策略。     

Comparison of 5-Fu concentrations between intra-operational regional chemotherapy and intraluminal chemotherapy for colon cancer

目的:比较结肠癌术中区域化疗( regional chemotherapy,RC)与肠腔化疗门静脉、周围静脉、腹腔液和癌旁组织5-Fu的浓度.方法:结肠癌术中,RC组经区域动脉灌注含5-Fu( 15.0m∥kg)的化疗液100.0 mL,肠腔化疗组经肠腔灌注含5-Fu(15.0 mg/kg)的化疗液100.0 mL,于注药后2、5、10、20、30、60 min分别采集门静脉血液、周围静脉血液、腹腔液和癌旁组织,高效液相色谱法测定样本5-Fu浓度.结果:RC组各样本注药后2min即出现峰浓度,并逐渐降低,其中腹腔液血药浓度最高,周围静脉血血药浓度低于门静脉血.肠腔化疗组,门静脉血液、腹腔液和癌旁组织在注药后2 min即测得5-Fu,但浓度显著低于RC组(P＜0.01),此后,门静脉血5-Fu浓度上升,并于60 min高于RC组(P＜0.01)；周围静脉血未测得5-Fu.结论:结肠癌术中RC可使门静脉血液和腹腔液维持比较高的血药浓度,对术中转移和术后复发具有治疗和预防作用.     

结肠癌术中区域化疗与肠腔化疗5-Fu浓度比较

目的:比较结肠癌术中区域化疗(regional chemotherapy,RC)与肠腔化疗门静脉、周围静脉、腹腔液和癌旁组织5-Fu的浓度。方法:结肠癌术中,RC组经区域动脉灌注含5-Fu(15.0 mg/kg)的化疗液100.0 mL,肠腔化疗组经肠腔灌注含5-Fu(15.0 mg/kg)的化疗液100.0 mL,于注药后2、5、10、20、30、60 min分别采集门静脉血液、周围静脉血液、腹腔液和癌旁组织,高效液相色谱法测定样本5-Fu浓度。结果:RC组各样本注药后2 min即出现峰浓度,并逐渐降低,其中腹腔液血药浓度最高,周围静脉血血药浓度低于门静脉血。肠腔化疗组,门静脉血液、腹腔液和癌旁组织在注药后2 min即测得5-Fu,但浓度显著低于RC组(P<0.01),此后,门静脉血5-Fu浓度上升,并于60 min高于RC组(P<0.01);周围静脉血未测得5-Fu。结论:结肠癌术中RC可使门静脉血液和腹腔液维持比较高的血药浓度,对术中转移和术后复发具有治疗和预防作用。     

多西他赛联合奥沙利铂、5-Fu治疗晚期胃癌近期疗效分析

目的 观察多西他赛联合奥沙利铂、5-Fu治疗晚期胃癌的疗效及耐受性.方法 TDF方案Doeetaxel 75mg/m2静脉滴注,第1天,化疗前预处理;奥沙利铂20mg,静脉滴注,第1～5天;5-Fu 2.5g/m2持续静脉灌注120小时,21天为1周期.结果 全组CR 1例、PR 12例、SD 9例、PD 1例,总有效率56.5%.初治组有效率70%,复治组有效率46%,中位生存期为13月,不良反应主要有消化道反应和白细胞下降.结论 TDF方案疗效肯定,不良反应能耐受.     

姜黄素诱导肝星状细胞凋亡的初步研究

目的　观察姜黄素对体外培养肝星状细胞凋亡的影响。方法　体外培养肝星状细胞株HSC -T6 ,流式细胞仪、透射电镜和琼脂糖凝胶电泳法检测细胞凋亡的改变。结果　在 2 0 ,4 0 ,6 0 μmol/L 姜黄素培养 2 4h后 ,①流式细胞术检测到明显的亚G1峰 ,各组的凋亡指数 (% )分别是 15 3± 1 88,2 6 7± 2 79,37 6± 4 38,与对照组(1 9± 0 6 4 )相比 ,差异有显著性 (P <0 0 1) ;②透射电镜观察到细胞皱缩、核染色质浓缩沿核膜排列和凋亡小体形成等细胞凋亡特征性的改变 ;③琼脂糖凝胶电泳可以见到明显的DNA梯度带形成。以 4 0 μmol/L 姜黄素作用 12 ,2 4 ,36 ,4 8h ,流式细胞仪检测各组的凋亡指数 (% )分别是 12 0± 2 35 ,2 6 7± 3 4 7,33 8± 1 78和 4 9 3± 1 5 6 ,与对照组相比差异有显著性 (P <0 0 1)。结论　姜黄素可以诱导HSC凋亡 ,其作用具有剂量和时间依赖性     

WTX基因对结肠癌细胞增殖和凋亡的作用

目的 WTX基因转染结肠癌Lovo细胞株,分析WTX基因对结肠癌细胞增殖和凋亡的影响.方法 将结肠癌Lovo细胞株分为WTX基因转染组和对照组,WTX基因转染组给予WTX质粒转染,对照组给予空载质粒转染.观察WTX基因转染组和对照组WTX基因的表达情况,两组Lovo细胞株结肠癌细胞的增殖情况、凋亡情况及细胞周期变化.结果 WTX基因转染组结肠癌细胞WTX蛋白表达明显高于对照组(P＜0.05);WTX基因转染组结肠癌转染后4、7d光密度值均明显低于对照组(P＜0.05);WTX基因转染组G1期细胞比例明显高于对照组(P＜0.05),WTX基因转染组G2期和S期细胞比例明显低于对照组(P＜0.05).结论 WTX基因抑制结肠癌细胞的增殖,影响结肠癌细胞周期,对结肠癌细胞凋亡没有影响.