美诺环素对沙鼠脑缺血再灌注模型的神经保护作用机制研究

目的 探讨美诺环素通过抑制P38促分裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)途径在沙鼠脑缺血再灌注模型中神经保护作用机制.方法 采用夹闭双侧颈总动脉的方法 制作沙鼠脑缺血再灌注模型;在电镜下观察不同时间海马CA1区及额叶脑组织超微结构的变化;用免疫组织化学方法 检测各组沙鼠脑内磷酸化P38MAPK的表达情况.结果 ①在电镜下观察随着缺血再灌注的时间延长神经元损伤逐渐加重,美诺环素干预组明显减轻;②美诺环素干预组磷酸化P38MAPK表达趋势同缺血再灌注组,但其表达明显低于缺血再灌注组,差异有显著性(P<0.05).结论 美诺环素可能通过抑制P38促分裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)途径保护神经元.     

右美托咪啶抑制NF-κB活化减轻肢体缺血再灌注损伤的研究

目的探讨右美托咪啶预处理对抑制NF-κB活化及减轻肢体缺血再灌注损伤的影响及机制。方法将21只成年雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组（Sham组）、缺血再灌注组（I/R组）、缺血再灌注+右美托咪啶预处理组（DEX组）,每组各7只。DEX组在麻醉后腹腔注射右美托咪啶25滋g/kg,其余两组给予相应体积的0.9%氯化钠溶液,30min后单侧股部切口,无创动脉夹夹闭股动脉,用橡皮筋以恒定张力结扎该侧肢体,Sham组仅行股部手术、分离股动脉不夹闭,其余两组缺血3h后去除动脉夹及橡皮筋。采用ELISA法检测血清IL-1、IL-6、TNF-α,Westernblot检测胞核NF-κB,光镜观察腓肠肌形态,并测定湿/干重比值。结果显微镜下可见Sham组大鼠腓肠肌肌纤维排列整齐、间质少有炎性细胞浸润,I/R组大鼠腓肠肌肌纤维排列紊乱并出现明显水肿、间质中出现大量炎症细胞,DEX组大鼠腓肠肌肌纤维排列欠规则、间质中有少量炎性细胞,但较I/R组有所好转。与Sham组相比,I/R组湿/干重比值、IL-1、IL-6、TNF-α、NF-κB水平均明显升高（均P＜0.05）;与I/R组相比,DEX组湿/干重比值、IL-1、IL-6、TNF-α、NF-κB水平均明显降低（均P＜0.05）。结论右美托咪啶可抑制NF-κB信号通路活化,减轻肢体缺血再灌注损伤。     

脑缺血-再灌注损伤的研究进展

缺血-再灌注损伤是指各种原因造成的组织血液灌流量减少使细胞发生缺血性损伤的组织恢复血液再灌注后,部分细胞功能代谢障碍及结构破坏反而加重的现象。脑是一个对缺氧最敏感的器官,一旦脑部血流下降至每分钟20 ml/100g以下时,脑细胞将会丧失其正常的功能,当少于每分钟10 ml/10     

宝灵膏对蒙古沙鼠脑缺血再灌注损伤脑组织Caspase-3表达的影响

目的观察宝灵膏对脑缺血再灌注损伤大鼠Caspase-3表达的影响。方法采用双侧颈总动脉阻断的方法建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型,随机分为假手术组、模型组和宝灵膏高、中、低剂量组。采用连续切片免疫组化技术检测脑组织中Caspase-3表达的部位及数量。结果宝灵膏高、中剂量组皮层、纹状体Caspase-3免疫阳性细胞数与模型组比较有统计学差异(P0.01),与低剂量组比较有统计学差异(P0.05)。结论宝灵膏可以下调沙鼠脑缺血再灌注损伤后脑组织皮层和纹状体Caspase-3的表达,从而起到一定的脑保护作用,并且具有剂量依赖性。     

核转录因子NF-κB与肾脏缺血-再灌注损伤

核转录因子κB（NF-κB）普遍存在于真核生物细胞内,在免疫反应、炎症反应、细胞凋亡、缺血-再灌注损伤等病理生理改变过程中起着重要的调控作用。NF-κB在肾脏缺血-灌注损伤中的起着重要作用,本文就这方面的研究进展进行综述。     

白藜芦醇抑制小肠缺血再灌注继发肺损伤中P38MAPK通路及下游凋亡、炎症、氧化应激分子的表达

目的:研究白藜芦醇对小肠缺血再灌注继发性肺损伤的保护作用及其对P38MAPK通路功能的影响。方法:选择成年雄性SPF级SD大鼠并分为对照组、I/R组、Res-L组、Res-M组、Res-H组,建立小肠缺血再灌注模型,Res-L组、Res-M组、Res-H组分别给予5.0mg/kg、10.0mg/kg、15.0mg/kg白藜芦醇干预。检测肺脏中P38MAPK通路分子及下游凋亡分子、炎症因子、氧化应激产物的含量。结果:I/R组大鼠肺组织中P38MAPK、MAPKK、MAPKKK、Fas、FasL、caspase-8、caspase-9、NF-kB、TNF-α、IL-1β的表达量以及显ROS、MDA的含量显著高于对照组;Res-L组、Res-M组、Res-H组大鼠肺组织中P38MAPK、MAPKK、MAPKKK、Fas、FasL、caspase-8、caspase-9、NF-kB、TNF-α、IL-1β的表达量以及显ROS、MDA的含量著低于I/R组。结论:白藜芦醇能够通过抑制P38MAPK通路功能来减轻细胞凋亡、炎症反应和氧化应激反应,进而保护小肠缺血再灌注继发性肺损伤。     

异丙酚在缺血-再灌注损伤中的作用机制及相关问题

随着器官移植、体外循环下心脏手术的开展以及失血性休克抢救成功率的增加，缺血-再灌注（ischemia—reperfusion。IR）损伤是临床中最常见的病理生理变化。近年来随着对麻醉药异丙酚研究的不断深入和临床广泛的应用，发现异丙酚对IR损伤有良好的保护作用，但对其机制众说纷云。笔者就近年来异丙酚对IR损伤的可能机制及相关问题研究综述如下。     

水飞蓟素对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用及机制探讨

目的探索水飞蓟素对大鼠肾脏缺血再灌注损伤（IRI）的保护作用及是否与抑制NF-κB 活化有关。方法将30 只成年雄性SD 大鼠随机为假手术组（S 组）、缺血再灌注模型组（IR 组）及药物组（SM 组）。全自动生化分析仪检测血肌酐、血尿素氮,HE 染色检测肾小管损伤程度,免疫组织化学检测肾脏IL-6 及NF-κB p65 表达,酶联免疫吸附法测定肾组织匀浆上清液NF-κB、IL-6 浓度。结果IR组血肌酐、尿素氮、组织匀浆细胞核内NF-κB 及细胞浆中IL-6 水平较S 组升高（P <0.05）,SM 组较IR 组降低（P <0.05）,IR 组肾小管损伤较重,肾脏IL-6、NF-κB p65 表达增强。而给药组肾小管损伤减轻,肾脏IL-6、NF-κB p65 表达减弱。结论水飞蓟素对大鼠肾脏缺血再灌注损伤具有保护作用,其与抑制NF-κB活化有关。     

丹参乙酸镁减轻脑缺血/再灌注诱导的神经细胞凋亡作用及机制

目的 探讨丹参乙酸镁对于大鼠脑缺血/再灌注损伤中的保护作用及其机制。方法动物实验采用大鼠线栓法缺血/再灌注模型,使大鼠脑缺血2 h后,再灌注24 h。细胞实验采用NG108-15神经细胞株缺氧/复氧模型,低氧无糖培养2 h后,复氧24 h。检测神经细胞凋亡、NADPH氧化酶 (NOX)活性及H₂O₂水平。结果与模型组比较,丹参乙酸镁组大鼠脑组织神经细胞凋亡明显下降,NOX活性和H₂O₂水平均降低。结论丹参乙酸镁具有抗脑缺血/再灌注损伤的作用,其机制与抑制NOX活性,减少H₂O₂生成有关。     

脑缺血再灌注损伤发生机制及治疗进展

近年来,脑血管病的发病率逐年升高,在这一疾病及其相应的治疗过程中,脑缺血／再灌注损伤（ ischemia -reperfusion in -jury）的病理生理过程起着重要的作用。脑缺血再灌注损伤是一个复杂的过程,包括许多环节,如：线粒体损伤、钙超载、氧自由基的累积、炎症反应及细胞凋亡等。通过对发病机制的深入研究有助于开发新的脑保护药物,并进一步明确各种脑保护药物的治疗靶点和疗效。本文就脑缺血再灌注损伤相关机制及治疗情况进行综述。     

神经生长因子与丹参对脑缺血再灌注海马神经元的保护作用

目的研究神经生长因子(NGF)与丹参对缺血再灌注后海马神经元的保护作用。方法 54只健康成年雄性Z:ZCLA长爪沙鼠随机分为生理盐水对照组、NGF治疗组、丹参治疗组,通过尼氏染色观察各组缺血再灌注后不同时间点(6h、3d和7d)海马CA1区锥体神经元的存活状况,通过免疫组化染色观察免疫组化结果。结果全脑缺血再灌注6h后,海马CA1区基本未见死亡神经元;与6h组相比,3d组和7d组死亡神经元明显增加(P<0.05);与生理盐水组相比,NGF或丹参治疗3d组和7d组死亡神经元明显减少(P<0.05);两个治疗组第3天神经细胞元死亡数无明显差别,而第7天NGF治疗组效果明显优于丹参治疗组(P<0.05);Bcl-2在NGF组表达最高;同组内不同时间相比,Bcl-2在6h表达最高;Bax在生理盐水组有阳性表达,同组内不同时间相比,Bax表达没有明显差异。结论 NGF与丹参均对脑缺血再灌注后损伤有保护作用,NFG优于丹参,为中风病人使用脑保护剂或中药治疗可减轻缺血造成的再损伤提供了依据。     

Role of mitochondria in neuron apoptosis during ischemia-reperfusion injury

To investigate the role of mitochondria in neuronal apoptosis, ischemia-reperfusion mediated neuronal cell injury model was established by depriving of glucose, serum and oxygen in media. DNA fragmentation, cell viability, cytochrome C releasing, caspase3 activity and mitochondrial transmembrane potential were observed after N2a cells suffered the insults. The results showed that N2a cells in ischemic territory exhibited survival damage, classical cell apoptosis change, DNA ladder and activation of caspase3. Apoptosis-related alterations in mitochondrial functions, including release of cytochrome C and depression of mitochondrial transmembrane potential (△ψm) were testified in N2a cells after mimic ischemia-reperfusion. Moreover, activation of caspase3 occurred following the release of cytochrome C. However, the inhibitor of caspase3, Ac-DEVDCHO, couldn‘t completely rescue N2a cells from apoptosis. Administration of cyclosporine A, an inhibitor of mitochondria permeability transition pore only partly inhibited caspase3 activity and reduced DNA damage. Interestingly, treatment of Z-IETD-FMK, an inhibitor of caspase8 could completely reverse DNA fragmentation, but can‘t completely inhibit caspase3 activity. It was conclud edthat there were caspase3 dependent and independent cellular apoptosis pathways in N2a cells suffering ischemia-reperfusion insults. Mitochondria dysfunction may early trigger apoptosis and amplify apoptosis signal.     

维拉帕米预处理对脑缺血再灌注损伤保护作用的研究

目的 观察不同时间点予维拉帕米预处理对沙土鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及寻找维拉帕米最佳预处理时间点.方法 沙土鼠33只,随机分为正常对照A组(n=6)、缺血损伤B组(n=6)、维拉帕米预处理C～E组(n=7),即脑缺血前48、24、12 h分别予2.5%维拉帕米(2 mg/kg·b.w.)腹腔注射.观察指标为超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)的活性及丙二醛(MDA)、内皮素(ET)、降钙素基因相关肽(CGRP)的含量.每组随机取一大小约1 mm×1 mm左颞前叶脑组织,电镜观察脑组织超微结构的改变.结果 维拉帕米预处理各组的GSH活性显著高于缺血损伤组(P＜0.01),ET的含量显著低于缺血损伤组(P＜0.05).C、D组SOD活性显著高于B组(P＜0.05),E组SOD活性高于B组,但无统计学意义;C、D组MDA含量显著低于B组(P＜0.05),E组MDA含量低于B组,但无统计学意义.C、D、E各组CGRP的含量高于B组,但无统计学意义.维拉帕米预处理各组的脑组织超微结构损伤改变不大或仅有轻微的改变,而缺血组脑组织超微结构表现出严重的损伤.结论 缺血前48～12 h予维拉帕米预处理对沙土鼠的脑缺血再灌注损伤有不同程度的保护作用,以预先给药48 h组的效果较为显著,这种作用与其增加体内抗氧化物质SOD、GSH的活性及拮抗ET的毒性有关.     

二苯乙烯苷对沙鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用及部分机制

目的研究二苯乙烯苷(TSG)对沙鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用及部分机制。方法采用改良法建立沙鼠脑缺血/再灌注模型。沙鼠随机分为6组,假手术组、模型对照组、TSG大、中、小剂量(6、3、1.5 mg/kg),阳性对照药依达拉奉注射组(3 mg/kg)。7 d后通过Morris水迷宫测定学习记忆功能;脑组织匀浆行超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量测定;免疫组化SABC法显示Nestin蛋白在脑组织中的表达。结果与假手术组相比,模型组游出时间和游泳距离明显延长,而TSG治疗组、依达拉奉对照组较模型组明显缩短(P<0.05,P<0.01)。与假手术组相比,模型组沙鼠脑组织中SOD活性、GSH-Px酶活力单位明显降低,MDA含量明显升高。TSG(6、3 mg/kg)可显著提高血清SOD活性和GSH-Px酶活力单位,TSG(6、3、1.5 mg/kg)可明显降低MDA含量;TSG(6、3、1.5 mg/kg)Nestin蛋白的表达水平较模型组有明显增高。结论 TSG对脑缺血/再灌注损伤有明显的保护作用,其机制可能与抗自由基损伤、抑制体内脂质过氧化水平及促进神经细胞的修复有关。     

p38MAPK在沙土鼠脑缺血再灌注海马神经元损伤中的作用

目的　探讨p38MAPK在沙土鼠脑缺血再灌注损伤海马神经元中的作用。方法　采用沙土鼠双侧颈动脉阻断前脑缺血模型 ,随机分成假手术组 (sham组 )、缺血再灌注组 (IR组 )、对照组 (control组 )、SB2 0 2 190组及P7935 0组 ,后 3组分别侧脑室注射 1%DMSO、p38MAPK特异性抑制剂SB2 0 2 190和激动剂P7935 0。每组根据再灌注时间不同再分为 1天、3天和 5天 3个亚组 ,每亚组 6只动物。在预定时间点行开阔法行为学检查 ,显微镜下计数海马CA1、CA3区存活神经元数目 ,TUNEL法检测CA1区凋亡细胞。结果　SB2 0 2 190可以显著减少沙土鼠再灌注 3天、5天的探索活动 ,增加存活海马神经元数目 ,减少CA1区神经元的凋亡 (P <0 .0 5 ,vsIR组 ) ;而P7935 0可以显著增加沙土鼠再灌注 1天、3天、5天的探索活动 ,减少海马CA1、CA3区存活神经元数量 ,增加海马CA1区神经元的凋亡 (P <0 .0 5 ,vsIR组 )。结论　抑制p38MAPK的激活可以减轻脑缺血再灌注引起的海马神经元损伤。     

不同他汀类药物治疗兔心肌缺血再灌注损伤的疗效及机制探讨

目的:比较普伐他汀、氟伐他汀和阿托伐他汀治疗新西兰兔心肌缺血再灌注损伤的疗效并探讨与疗效相关的机制。方法:实验分为普伐他汀、氟伐他汀和阿托伐他汀干预组,缺血再灌注前2 h经灌胃分别给予50 mg.kg-1的干预药物。术后2 h测量心肌梗死面积并检测缺血区内皮型一氧化氮合成酶活性。测定以上他汀类药物诱导血管内皮细胞表达内皮型一氧化氮合成酶的含量,并检测相关的p-Akt信号分子的表达。结果:在50 mg.kg-1剂量下,阿托伐他汀减少缺血再灌注后心肌梗死面积以及增加缺血区内皮型一氧化氮合成酶含量的作用较其它其它两种他汀类药物明显,差异有统计学意义(P<0.01)。阿托伐他汀诱导血管内皮细胞表达内皮型一氧化氮合成酶的作用较其它他汀类药物显著,差异有统计学意义(P<0.05),同时阿托伐他汀上调血管内皮细胞p-Akt蛋白的作用比其它两种他汀类药物更显著。结论:在相同剂量下,阿托伐他汀对于缺血再灌注损伤的疗效优于普伐他汀和氟伐他汀,机制可能为其具有更强的激活p-Akt信号通路并产生更多的具有保护性作用的内皮型一氧化氮合成酶的作用。     

赤芍总苷对沙土鼠全脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 观察赤芍总苷(TPG)对全脑缺血再灌注的保护作用。方法 采用结扎双侧颈总动脉12min再灌注24h建立沙土鼠全脑缺血再灌注模型,观察于造模24h后TPG对沙土鼠脑组织含水量、SOD与MDA及病理组织学的影响。结果 同模型组比较,TPG200、400mg/kg·b.w.组脑组织含水量明显低于模型组;模型组脑组织SOD活性明显降低,MDA含量明显提高,各给药组与模型对照组比较SOD明显升高,MDA含量显著下降;病理检查表明给药组的病理损伤较模型组轻。结论 赤芍总苷对全脑缺血再灌注损伤有明显的保护作用。     

Establishment of immune mediated animal models of MND and investigation of its injury mechanisms

ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｅｔｉｏｌｏｇｙａｎｄｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆｍｏｔｏｒｎｅｕｒｏｎｄｉｓｅａｓｅ（ＭＮＤ）ＭｅｔｈｏｄｓＴｈｒｅｔｙｐｅｓｏｆａｎｉｍａｌｍｏｄｅｌｓ,ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌａｕｔｏｉｍｍｕｎｅｍｏｔ...     

依达拉奉对沙土鼠缺血-再灌注损伤后的脑保护作用机制的探讨

目的:探讨依达拉奉对沙土鼠全脑缺血再灌注后自由基损伤的脑保护机制。方法:实验动物随机分为正常对照组、假手术组、手术组、手术 依达拉奉组,手术 依达拉奉组给予腹腔注射依达拉奉10mg/kg,12h/次。设缺血再灌注6、12、24、36、48、60、72h7个时间点,分别检测脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量,并观察每个时间点电镜下海马CA1区锥体细胞超微结构。结果:每个时间点手术 依达拉奉组动物脑组织中SOD活力较手术组增强,MDA含量较手术组下降,且每个时间点两组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。电镜超微结构显示手术 依达拉奉组细胞病理改变较手术组轻,48h改变最明显。结论:脑缺血缺氧早期使用依达拉奉,可增强缺血脑组织SOD活力;降低MDA含量,从而达到清除氧自由基、抗脂质过氧化、减轻再灌注损伤、保护脑细胞的作用。     

赤芍总苷对沙土鼠全脑缺血再灌注损伤的保护作用

OBJECTIVE: To study the protective effects of the total paeony glycoside (TPG) against global cerebral ischemia-reperfusion injury in gerbils. METHODS: Gerbils models of global cerebral ischemia-reperfusion injury were prepared by bilateral common carotid artery ligation for 12 min followed by 24-hour reperfusion. The effects of TGP on brain edema index, superoxide dismatase (SOD) activity and malonaldehyde (MDA) concentration of the cerebral tissue homogenate and pathology of the brain were examined 24 h after model establishment. RESULTS: Compared with the model group, TPG at the doses of 200 and 400 mg/kg could significantly relieve brain edema, enhance SOD activity and lower MDA concentration in the gerbils. Pathological examination showed that the gerbils with TPG treatment had milder injury of the cells in the hippocampal CA1 region. CONCLUSIONS: TPG has obvious protective effects against global cerebral ischemia-reperfusion injury.