P21WAF1／CIP1在大肠癌中的表达

目的探讨Ｐ２１ＷＡＦ１／ＣＩＰＩ与ｐ５３基因大肠癌中的表达意义及其关系，方法应用原位杂交及免疫组化技术检测大肠癌中的抑癌基因Ｐ２１ＷＡＦ１／ＣＩＰ１ｍＲＮＡ及ｐ５３蛋白的表达，统计学采用卡方检验，结果发现大肠癌组织及癌旁组织中Ｐ２１ＷＡＦ１／ＣＩＰＩ表达阳性率分别为８４．１３％（５３／６３）及６１．９０％（３９／６３）两者是差别显著（Ｐ〈０．０５），Ｐ２１ＷＡＦ１／ＣＩＰ１表达程度与癌组织的分化程     

P21WAF1/CIP1在大鼠肾上腺细胞培养中的表达及其意义

目的:探讨细胞周期依赖性激酶抑制剂(CDI)P21在大鼠肾上腺细胞培养过程中的表达及其意义。方法:应用SP免疫组化法,检测细胞周期依赖性激酶抑制剂P21在大鼠肾上腺细胞培养不同时期表达的强度变化,同时测定肾上腺细胞分泌皮质酮功能的动态变化。结果:在肾上腺细胞体外培养过程中,第3,5,7天,P21蛋白表达逐渐减弱,第9,11天与第7天相比,P21蛋白表达重新增强(P<0.05),皮质酮浓度测定显示在第7天皮质酮浓度达到最高峰,随后逐渐下降,与P21蛋白表达的变化趋势一致。结论:肾上腺细胞体外培养在第7天肾上腺细胞增殖最旺盛,而且肾上腺分泌皮质酮达到最高峰。     

抑癌基因 P21CIP1/WAF1研究进展

<正>近年来,细胞周期调控对肿瘤发展的影响越来越受到人们的关注。细胞周期调控有关的分子有:细胞周期蛋白(eyclin),细胞周期蛋白依赖性激酶(cyelin dependent kinese,CDK),磷酸化酶和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白(cyclin dependent kinase inhibitor,CDI)。其中,cyclin的周期性积累与分解对细胞周期进程起着决定性作用,而CDI通过在细胞周期适当的时间点上负调节CDK的活性,从而在细胞周期的进程中起着关键性作用,CDI可划分为二大类:一类为CIP/KIP,包括     

重组核心蛋白聚糖转染对HepG2细胞p21WAF1/CIP1表达的影响

目的：将已构建完成的分泌型核心蛋白聚糖真核表达载体转染到HepG2细胞中并检测核心蛋白聚糖及p21^WAF1/CIP1的表达,探讨核心蛋白聚糖抗肿瘤作用的机制。方法：HepG2细胞分为转染pcDNA3.1-DCN载体的转染组和转染pcDNA3.1空载体的对照组,脂质体介导核心蛋白聚糖真核表达载体及质粒pcDNA3.1载体分别转染到HepG2细胞中,经G418筛选建立稳定转染的细胞株,采用RT-PCR法检测核心蛋白聚糖和p21^WAF1/CIP1 mRNA表达;Western blotting法检测核心蛋白聚糖和p21^WAF1/CIP1蛋白质的表达;免疫组化法检测核心蛋白聚糖蛋白质的表达。结果：RT-PCR检测转染组细胞核心蛋白聚糖及p21^WAF1/CIP1 mRNA表达的灰度比值均高于对照组 (P<0.05),Western blotting检测核心蛋白聚糖及p21^WAF1/CIP1 蛋白质表达的灰度比值也高于对照组 (P<0.05),免疫组化检测转染组细胞核心蛋白聚糖蛋白质表达的阳性细胞计数高于对照组 (P<0.05)。结论：成功建立了稳定转染核心蛋白聚糖的HepG2细胞株,并证实核心蛋白聚糖能够提高p21^WAF1/CIP1mRNA和蛋白质的表达。     

上颌窦鳞癌中P21WAF1/CIP1和P27KIP1的表达及意义

目的检测上颌窦鳞癌、上颌窦内翻性乳头状瘤及上颌窦炎性粘膜中P21WAF1/CIP1和P27KIP1的表达情况,分析其表达与上颌窦鳞癌临床病理特性的关系.方法应用免疫组织化学法检测50例上颌窦鳞癌、20例上颌窦内翻性乳头状瘤、10例上颌窦炎性黏膜中P21WAF1/CIP1和P27KIP1的表达情况.结果(1)在上颌窦鳞癌、上颌窦内翻性乳头状瘤及上颌窦炎性黏膜中,P21WAF1/CIP1阳性表达率分别为80.0%、65.0%、40.0%(P＜0.05);P27KIP1阳性表达率分别为70.0%、75.0%、40.0%(P＜0.05).(2)P21WAF1/CIP1和P27KIP1阳性表达率与上颌窦鳞癌的型别、T分型无显著性差异(P＞0.05).(3)P21WAF1/CIP1在高、中和低分化的喉癌中阳性表达率分别为73.2%(11/15)、58.9%(11/19)、25.0%(4/16)(P＜0.05);P27KIP1在高、中和低分化的喉癌中阳性表达率组间比较无显著性差异(P＞0.05).结论在上颌窦炎性黏膜、上颌窦内翻性乳头状瘤及上颌窦鳞癌中,随病变加重,P21WAF1/CIP1、P27KIP1阳性表达率呈逐渐降低的趋势.     

P21WAF1/CIP1 、Survivin在人脑星形细胞瘤中的表达及其相关性

目的 检测P21WAF1/CIP1 和survivin在脑星形细胞瘤中的表达情况,探讨其与肿瘤恶性程度的关系及相关性。方法 采用ElivisionTMplus免疫组化技术,检测10例正常脑组织、60例脑星形细胞瘤中P21WAF1/CIP1 和survivin的表达,计算阳性细胞百分率,分析P21WAF1/CIP1 和survivin的表达与肿瘤病理分级的关系。结果（1）P21WAF1/CIP1 在正常脑组织和星形细胞瘤Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ级中的阳性表达率分别为：0,81.25％,62.50％;42.86％,27.27％,其表达与病理分级呈显著负相关（rs= -0.548,p<0.001）;（2）Survivin在正常脑组织和星形细胞瘤Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ级中的阳性表达率分别为：0,56.25％,68.75％;92.86％,100％,其表达与病理分级呈显著正相关（rs=0.539,p<0.001）;（3）P21WAF1/CIP1表达阳性的32例中survivin阳性表达20例,阳性率62.50％,P21WAF1/CIP1表达阴性的28例中survivin阳性表达27例,阳性率96.43％,两者呈显著负相关（rs=-0.5148,p<0.001）。结论 P21WAF1/CIP1,survivin的阳性表达可在一定程度上反映脑星形细胞瘤的恶性度,联合检测两者可间接反映其生物学行为。     

大肠癌组织P21~(WAF1/CIP1)的表达与p53基因突变的关系

目的 :探讨大肠癌组织P2 1WAF1/CIP1的表达与p5 3基因突变的关系及其意义。方法 :应用RT -PCR、RCR -SSCP方法对 42例新鲜大肠癌组织中上述两种基因的表达进行研究。结果 :p5 3基因在大肠癌组织中的突变率为47.6 % (2 0 / 42 ) ,且在中、低分化大肠癌组织中的突变北显著高于高分化者 (P <0 .0 5 ) ;P2 1WAF1/CIP1在中、低分化大肠癌组织中的表达显著低于高分化癌组织 (P <0 .0 1)。 2 0例p5 3基因突变组中 ,P2 1WAF1/CIP1表达阳性率明显低于 2 2例p5 3基因未突变组 (P <0 .0 5 )。结论 :大肠癌组织中P2 1WAF1/CIP1的低表达可能与p5 3基因突变有关。     

喉鳞癌中P21~(WAF1/CIP1)、C-erbB-2的表达及其临床意义

目的:研究喉鳞癌组织中P21WAF1/CIP1、C-erbB-2的表达,探讨它们在喉鳞癌的增殖、侵袭、转移中的作用。方法:选取60例喉鳞癌作为研究对象,15例声带息肉组织作为对照,所有标本均切片作HE染色。用链霉素亲生物素-过氧化酶法(S-P法)研究肿瘤及声带息肉组织中P21WAF1/CIP1和C-erbB-2蛋白的表达,显微镜下计数阳性细胞,并分析阳性细胞百分率。结果:(1)P21WAF1/CIP1在声带息肉组织中低表达,在喉癌组织中高表达,二者阳性率差异有显著性(P<0．05);P21WAF1/CIP1在喉癌组织中的表达与肿瘤组织分级(P<0．05)及临床分期(P<0．05)有关,与年龄、性别、肿瘤部位及有无淋巴结转移无显著相关性;(2)C-erbB-2在声带息肉组织中低表达,在喉鳞癌中高表达,两者差异有显著性(P<0．05);C-erbB-2在喉癌组织中的表达与各临床病理因素无显著相关;(3)经Spearman等级相关分析,P21WAF1/CIP1、C-erbB-2在喉鳞癌中表达呈正相关(P<0．05)。结论:P21WAF1/CIP1可以作为一种独立的预后预测因子;C-erbB-2在某种程度上反应了肿瘤的生长特性,但不能判断喉癌预后;在喉鳞癌中P21WAF1/CIP1和C-erbB-2间存在正调控机制。     

脑星形细胞瘤CyclinD1、P21WAF1/CIP1和Survivin关系的探讨

目的探讨CyclinD1、P21WAF1/CIP1和Survivin与脑星形细胞瘤的相关性。方法采用ElivisionTMplus免疫组化方法,检测10例正常脑组织、60例脑星形细胞瘤中CyclinD1、P21WAF1/CIP1和Survivin的表达情况。结果在正常脑组织和脑星形细胞瘤Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级中的阳性表达情况:(1)C     

稳定高效表达p21WAF1/CIP1蛋白的Hela细胞株的建立

目的：建立高效、稳定表达p21WAF1/CIP1人宫颈癌细胞株Hela-pcDNA3-WAF1。方法：应用脂质体(lipofectin)将质粒pcDNA3和重组质粒pcDNA3-WAF1分别转入人宫颈癌细胞系Hela细胞；经G418筛选，转染阳性细胞连续传代培养，并应用免疫荧光技术监测重组基因p21WAF1/CIP1翻译水平的表达活性。结果：经G418筛选，Hela细胞全部死亡，转染质粒pcDNA3和重组质粒pcDNA3-WAF1的Hela细胞存活，并可连续传代培养30代；免疫荧光技术监测p21WAF1/CIP1表达结果显示：转染重组质粒pcDNA3-WAF1的Hela细胞p21WAF1/CIP1表达阳性细胞率（92.83%）显著高于转染质粒pcDNA3（12.26%）和Hela细胞组（5.63%）（F=17 218.22，P<0.001）；各代间差异无显著性（F=1.562，P>0.05）。 结论：建立一株高效、稳定表达p21WAF1/CIP1人宫颈癌细胞株Hela-pcDNA3-WAF1。     

CyclinE和p21/WAF1/CIP1在结直肠癌组织中的表达及意义

目的 :研究 Cyclin E、p2 1 /WAF1 /CIP1蛋白在结直肠癌组织中的表达水平及其与生物学行为和预后的关系。方法 :用免疫组化方法检测 5 5例结直肠癌组织中 P2 1 /WAF1 /CIP1、Cyclin E蛋白的表达。结果 :1 0例癌旁结直肠组织中 ,Cyclin E表达均为阴性 ,5 5例结直肠组织中 ,3 4例 Cyclin E表达阳性 ;1 0例癌旁结直肠组织中 ,p2 1表达均为阳性 ,5 5例结直肠癌组织中 2 5例 p2 1表达阳性 ;Cyclin E蛋白表达多见于浸润深、分化差、淋巴结转移、临床分期晚的结直肠癌组织中 ;p2 1 /WAF1 /CIP1蛋白表达多见于分化好、浸润浅、未发生淋巴结转移、临床分期较早的结直肠癌组织中 ;Cyclin E蛋白表达组的 5年生存率低于阴性组 ;p2 1 /WAF1 /CIP1蛋白表达组的 5年生存率高于阴性组。结论 :Cyclin E、p2 1 /WAF1 /CIP1可作为反映结直肠癌恶性生物学行为及预后的指标。     

反义p21WAF1/CIP1基因转染对肾癌细胞凋亡抑制作用的影响

目的 探讨p21^WAF1/CIP1基因在顺铂诱导的GRC-1肾癌细胞凋亡过程中的作用。方法 使用脂质体转染方法将正义p21^WAF1/CIP1基因及反义p21^WAF1/CIP1基因基因分别导入GRC-1肾癌细胞系中，对所获转染细胞进行形态学观察和流式细胞仪检测。结果 在正义p21^WAF1/CIP1基因基因转染后GRC-1肾癌细胞中，顺铂诱导细胞凋亡的作用增强；在反义p21^WAF1/CIP1基因基因转染后GRC-1肾癌细胞中，顺铂诱导细胞凋亡的作用受到抑制。结论 在GRC-1肾癌细胞中，顺铂诱导的细胞凋亡至少部分是通过p21^WAF1/CIP1基因基因发挥作用。p21^WAF1/CIP1基因基因作为一个与细胞凋亡的相关基因可能参与肾癌细胞凋亡的调控。     

子宫颈疾病中P~(21WAF1/CIP1)和P~(53)基因的表达及其意义

目的 :探讨抑癌基因 P2 1WAF1/CIP1(简称 P2 1)和 P53 与子宫颈疾病发生、发展的关系。方法 :用原位杂交组织化学技术检测 P2 1与 P53 基因在 50例子宫颈疾病组织和 1 0例正常宫颈组织标本中表达状况 ,并进行相关性分析。结果 :正常宫颈组织 P2 1与 P53阳性表达均为90 %。宫颈疾病组织中 P2 1阳性表达为 3 8% ,P53 阳性表达为 46%。宫颈癌组织中 P2 1与 P53 两基因阳性表达与宫颈慢性炎和正常宫颈组织阳性表达有显著性差异 ( P<0 .0 1 ) ,而与宫颈上皮非典型增生组织中阳性表达无差异 ( P>0 .0 5)。两基因在正常宫颈组织和宫颈疾病组织中表达有相关性 ( P<0 .0 1 )。结论 :P2 1的突变或缺失可能与宫颈癌、宫颈上皮非典型增生的发生、发展有关 ,野生型 P53基因对细胞增殖的抑制作用可能是通过 P2 1实现的     

外源性p21WAF1/CIP1基因转染对人胶质瘤细胞生长和细胞周期的影响

目的：探讨外源性p21^WAF1／CIP1基因对胶质瘤细胞生长和细胞周期的影响．方法：采用脂质体介导法将p21^WAF1／CIP1基因质粒转导人人胶质瘤细胞系SHG44细胞，然后用电镜、流式细胞仪等技术对细胞形态、生长及细胞周期进行观察。结果：酶切电泳和斑点杂交显示p21^WAF1／CIP1基因成功的转染至SHG44细胞。转染p21^WAF1／CIP1基因的细胞光镜及电镜下可见凋亡产生；生长速度明显慢于亲代细胞，其倍增时间约是对照细胞的二倍；细胞周期发生明显改变，G1期明显增多，S期明显减少．结论：外源性p21^WAF1／CIP1基因对SHG44细胞的生长和细胞周期有明显的抑制作用，并可诱导细胞凋亡产生。     

人前列腺癌中P21CIP1/WAF1, Rb的表达意义

目的：研究P21^CIP1/WAF1及Rb在人前列腺癌标本中的表达以及两的相关性,以阐述它们与前列腺癌的病理分级及临床分期的关系。方法：应用免疫组化SABC法染色技术对36例前例腺癌标本进行检测,观察P21^CIP1/WAF1及Rb在前列腺癌各病理分级,临床分期中的表达及相关性。结果：在36例人前列腺癌标本中,P21^CIP1/WAF1和Rb免疫组化阳性染色为棕黄色或棕褐色,分别定位于细胞质和细胞核,其中P21^CIP1/WAF1阳性19例,阳性率52.8%。Rb阳性17例,阳性率47.2%。在不同病理分级、临床分期之间差异均有显性,但实验结果未发现P21^CIP1/WAF1与Rb有显相关性。结论：P21^CIP1/WAF1,Rb的表达与前列腺癌细胞的病理学分级、临床分期呈负相关性,在前列腺癌分子发病机制中可能涉及到P21^CIP1/WAF1,Rb调节通道的异常。     

p21WAF1/CIP1 gene DNA sequencing and its expression in human osteosarcoma

Background Mutation and expression change of p21^WAF1/CIP1 may play a role in the growth of osteosarcoma. This study was to investigate the expression of the p21^WAF1/CIP1 gene in human osteosarcoma, p21^WAF1/CIP1 gene DNA sequence change and their relationships with the phenotype and clinical prognosis.Methods p21^WAF1/CIP1 gene in 10 normal people and the tumours of 45 osteosarcoma patients were examined using polymerase chain reaction-single strand conformation polymorphism (PCR-SSCP) with silver staining. The PCR product with an abnormal strand was sequenced directly. The p21^WAF1/CIP1 gene mRNA and P21 protein of 45 cases of osteosarcoma were investigated by using in situ hybridization and immunohistochemistrv, respectively.Results The occurrence of P21 protein in osteosarcoma was 17. 78% (8/45), and p21^WAF1/CIP1 mRNA expression in osteosarcoma was 42.22% (19/45). The p21^WAF1/CIP1 gene DNA sequencing of amplified production showed that in p21^WAF1/CIP1 gene exon 3 of 36 cases of human osteosarcoma,there were 17 cases (47.22%) with C→T at position 609; 10 normal blood samples‘ DNA sequence analysis yielded 8 cases (80.00%) with C→T at the same position.Conclusions Along with the increase of malignancy, the expression of p21^WAF1/CIP1 mRNA and P21 protein in osteosarcoma tends to decrease. It is uncommon for the p21^WAF1/CIP1 gene mutation to occur in human osteosarcoma. As a result, the possible existence of tumour subtypes of p21^WAF1/CIP1 gnemutation should be investigated. Our research leads to the location of p21^WAF1/CIP1 gene polymorphism of Chinese osteosarcoma patients, which can provide a basis for further research.