超速离心-高效液相色谱测定血清高密度和低密度脂蛋白胆固醇

目的 建立一种新的预期用作参考方法的高密度脂蛋白胆固醇（HDLC）和低密度脂蛋白胆固醇（LDLC）准确测定方法。方法 血清与含2-琉基乙醇（ME）和脯氨酸的溴化钠溶液混合，使背景密度为1．063，超速离心分离高密度脂蛋白（HDL）；血清与含脯氨酸的溴化钠溶液混合，使背景密度为1.006，超速离心分离HDL和低密度脂蛋白（LDL）；用高效液相色谱测定两种脂蛋白组分胆固醇。结果 ME和脯氨酸可有效消除脂蛋白（a）对超速离心法分离HDL的影响；新方法测定HDLC和LDLC的总变异系数分别为0．96％～2、07％和0．65％～1．12％。结论 建立血清HDLC和LDLC准确测定方法，方法可靠、精密、简便，可望用作HDLC和LDLC测定参考方法。     

电泳法测定血清各种脂蛋白胆固醇

目的　采用琼脂糖凝胶电泳分离脂蛋白 ,结合胆固醇酶染色同时测定血清脂蛋白HDL C、LDL C、VLDL C和Lp(a) C。方法　运用HelenaREP全自动快速电泳系统分离血清HDL、LDL、VLDL和Lp(a) ,经胆固醇酶染色同时扫描测定HDL C、LDL C、VLDL C和Lp(a) C的百分比 ,输入血清TC ,计算各脂蛋白中胆固醇含量。结果　本法HDL C、LDL C、VLDL C批内CV分别为3 88%～ 5 96 %、1 36 %～ 3 2 5 %、5 19%～ 6 6 8% ,批间CV分别为 4 33 %～ 6 6 8%、2 98%～ 4 37%、8 15 %～ 11 8% ;灵敏度为每条带胆固醇 0 11mmol/L ,检测线性为TC 1 2 6～ 10 36mmol/L ;平均回收率HDL C、LDL C、VLDL C分别为 86 8%、93 5 %、94 2 % ;胆红素 <342 μmol/L、血红蛋白 <3 5g/L、Trig <11mmol/L对结果无显著影响 ;当Trig <2 2 6mmol/L ,HDL C、LDL C电泳法与直接法相关性良好 (r分别为 0 99、0 97)。结论　电泳法可同时测定血清各脂蛋白胆固醇含量 ,当Trig <2 2 6mmol/L与直接法有良好的相关性。该法简便经济快速 ,能精密准确定量各脂蛋白中胆固醇含量 ,尤其适用于对高脂血症的常规检查和研究。     

血清脂蛋白（a）在慢性肺原性心脏病中的临床意义

目的观察血清脂蛋白（a）[Lp（a）]在慢性肺原性心脏病（下称肺心病）的临床意义。方法采用全自动生化分析仪分别检测50例慢性阻塞性肺病（COPD）、35例慢性肺心病及45例健康志愿者血清三酰甘油（TG）、总胆固醇（TCH）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、载脂蛋白A1（ApoA1）、载脂蛋白B（ApoB）及Lp（a）水平。结果CPPD及肺心病组TG、TCH、HDL、Lp（a）、ApoB升高,LDL、ApoA1、ApoA1／ApoB降低,肺心病组Lp（a）水平较COPD组升高更为明显,各组间比较提示Lp（a）差异有统计学意义。结论脂蛋白（a）的异常更能反映慢性肺原性心脏病的脂质代谢异常,Lp（a）高低与慢性肺原性心脏病发病有相关性。     

更年期女性脂蛋白(a)及血脂水平的检测及意义

目的：观察更年期女性脂蛋白（a）[Lp(a)]及血脂水平与女性心脑血管病发生、发展的关系。方法：研究对象为更年期女性247例，其中绝经前106例，绝经后141例；心脑血管病127例，对照组为健康体检者120例。测定空腹静脉血中Lp(a)、总胆固醇（TC）、载脂蛋白B（APOB）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL－C）、低密度脂蛋白（LDL－C），将各指标分绝经前与绝经后组、心脑血管病组与对照组分别比较。结果：心脑血管病组Lp(a)、TC、TG、APOB、LDL－C均高于对照组，而HDL－C、HDL－C／TC则低于对照组。绝经后组Lp(a)、TC、LDL－C、APOB显著高于绝经前组，而HDL－C／TC低于绝经前组。结论：女性绝经后，血清Lp(a)、TC、LDL－C、APOB增高，而HDL－C／TC较绝经前降低，便增加 了更年期女性心脑血管病发生、发展的危险性。     

两种方法测定LDL-C的比较

本研究的目的是评估低密度脂蛋白胆固醇（LDL－C）三种测定方法在正常及高脂血症时的方法学差异。用经冲剂肝素沉淀LDL方法叫做LipidDi-rect，简称为L－LDL法；用抗apoA1、apoE血清分离HDL、VLDL的方法称为DirectLDL，简称D-LDL法；用超速离心法分离血清脂蛋白的Beta定量法简称BQ－LDL法。用3种方法测定了156例病人（TG波动在0．61～9．95g／L）的LDL-C；另外，来自肥胖及非肥胖的7例Ⅲ型高脂血症及25例对照血清组LDL-C也用三种方法测定。正常及异常高脂血症标本的LDL－C均值，L－LDL法显著高于BQ－LDL及D-LDL法…     

人红细胞膜脂蛋白的分离及其胆固醇含量的测定

建立了分离人红细胞膜脂蛋白的方法并就测定其胆固醇含量及其相关因素进行了探讨。通过此法，成功地分离了人红细胞膜的HDL和LDL成份，但未能分离出VLDL成份，而且可用胆固醇酶试剂测定各自的胆固醇含量，但用甘油三酯酶试剂未能测出甘油三酯。因此，证明人红细胞膜无VLDL或甘油三酯的存在。还用沉淀法所测的LDL－C同计算所得的LDL－C进行了相关分析，结果r＝0．959，Y＝1．08X－0．39，表明相关良好，因此，LDL－C可以直接计算。该法批内CV（CT、HDL－C、LDL－C）分别为4．5％，7．0％，9．6％；批间CV分别为7．2％，12．8％，7．5％。该文所建立的方法将为从细胞水平观察脂蛋白同某些疾病的联系提供了有效的手段。     

血清脂蛋白亚类和高密度脂蛋白胆固醇酯化速率的生物学变异

目的 研究血清HDL亚类(HDL2-C、HDL3-C)、LDL亚类(LDLa-C、LDLb-C)、FERHDL和MERHDL的个体内和个体间的生物学变异(CVI、CVG).方法 选取2010年9-10月卫生部北京医院20名健康成年志愿者,男女各10名.每隔2周采集空腹静脉血1次,共采集4次,用超速离心-高效液相色谱(HPLC)法测定各脂蛋白亚类水平及FERHDL和MERHDL,计算其CVI和CVG,并给出各项指标的分析质量要求.结果 不同血脂指标的生物学变异不同,HDL3-C和HDL2-C的平均CVI分别为5.5％和7.2％,但两者的CVG差别较大,分别为8.7％和45.5％;LDLa-C和LDLb-C平均CVI分别为11.2％和18.7％;FERHDL和MERHDL的CVI分别为11.9％和12.3％,其中FERHDL的CVG (49.5％)大于MERHDL的CVG(30.6％).CVI存在较大个体差异.结论 本研究考察了血清脂蛋白亚类和HDL胆固醇酯化速率的生物学变异,可为这些血脂类危险因素的分析质量控制及心血管病危险分析奠定基础.     

高血压病绝经前后脂蛋白(a)及血脂含量分析

目的　观察女性高血压患者绝经前后血清脂蛋白(a) [Lp(a) ]及血脂水平的变化。方法　本组女性高血压患者113例,分绝经前及绝经后组。测定晨起空腹静脉血中Lp(a)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆因醇(LDL -C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL -C)。将各指标与对照组比较及高血压患者绝经前后组间比较。结果　高血压组,Lp(a)、TC、TG、LDL -C均高于对照组,HDL -C、HDL -C/TG则低于对照组:高血压绝经后组,Lp(a)、TC、TG、LDL -C均高于绝经前组,HDL -C/TG低于绝经前组。结论　女性高血压患者绝经后,血清Lp(a)、TC、TG、LDL -C增高,HDL -C/TG较绝经前降低。     

血浆低密度脂蛋白胆固醇测定参考方法的建立

目的建立一种新的预期用作低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein cholesterol,LDL-C）准确测定的参考方法。方法采用密度梯度超速离心技术,从新鲜血浆中分离出低密度脂蛋白（low density lipoprotein,LDL）和其它各类脂蛋白。参考并筒化应用目前国际上公认的胆目醇测定参考方法Abell—Levy—Brodie—Kendall（ALBK）法,以分离的LDL为检测样本,重复多次测定LDL—C,用Excel软件对结果进行统计分析,计算总不精密度（总变异系数CV）、平均批内不精密度（平均批内变异系数CV）和测量不确定度（u）等精密度检验标度,对所建立方法进行精密度评价;并通过回收实验、干扰实验的结果分析对建立方法进行准确度评价。结果密度梯度超速离心成功分离出LDL和其它几类脂蛋白,用ALBK法测定LDL—C的方法学精密度为：总CV为3．21％～4．51％,平均批内CV为1．78％～4．05％,测量不确定度u为0．031～0．042,胆田醇平均回收率达107．2％,血红蛋白（Hb）〈1．95g／L时对该方法干扰度较小。结论密度梯度超速离心技术分离LDL耗费低、易操作;ALBK法直接测定LDL—C,方法学精密度统计分析结果显示该方法重复性好,回收实验、干扰实验的准确度评价结果显示所建立方法稳定、抗干扰能力强,超速离心结合ALBK法可望用作LDL—C的参考方法。     

载脂蛋白B与其它冠心病患者血脂危险性指标的关系

目的：探讨载脂蛋白B(apoB）与其它冠心病（CHD）患血脂危险性指标的关系。方法：对132例CHD患与对照组124例非CHD健康人进行血脂7项：总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL－C），低密度脂蛋白胆固醇（LDL－C)、载脂蛋白A1（apoA1）、载脂蛋白B（apoB）、脂蛋白（a)(Lp(a)）的测定，将apoB与其它血脂危险性指标做对比性分析。结果：apoB与其它脂指标比较有相似甚至更好的敏感性与特异性。其结果分别为，apoB（47．7％、98．4％）、TC（27．3％、97．6％）、TG（59．1％、70．9％）、HDL－C（2．3％、88．7％）、LDL－C（36．4％、99．2％）、apoA1（9．1％、60．5％）、Lp(a)（66．6％、64．5％），并与LDL－C有显的相关性（P＜0．01，r=0.9173)。结论：apoB应该与LDL－C、TG同样成为第一线的CHD患血脂危险性指标。     

Lipid and lipoprotein analysis of cats with lipoprotein lipase deficiency

BACKGROUND: We have previously described a colony of domestic cats with a naturally occurring mutation in the lipoprotein lipase (LPL) gene. We have now further characterized cats homozygous for LPL deficiency (LPL -/-, homozygotes), and have contrasted these with heterozygotes (LPL +/-) and normal cats (LPL +/+). MATERIALS AND METHODS: Density gradient ultracentrifugation with subsequent lipid analysis, agarose and polyacrylamide gel electrophoresis was used to examine detailed liproprotein differences between the genotypes. Oral fat loading studies and breast milk fatty acid analysis were also performed to further characterize the phenotypic expression of LPL deficiency in this model system. RESULTS: Several lipid abnormalities associated with homozygosity for LPL deficiency were evident. Triglyceride-rich lipoprotein-triglycerides (TRL-TG) and cholesterol (TRL-C) were higher (TRL-TG 2.09 +/- 1.14 vs. 0.15 +/- 0.04 mmol L-1, P < 0.001; TRL-C 0.42 +/- 0.30 vs. 0.11 +/- 0.16 mmol L-1, P < 0.05) in male -/- than in male +/+ cats, as was HDL-cholesterol (HDL-C, 1.75 +/- 0.24 vs. 1.41 +/- 0.14 mmol L-1, P < 0.05). LDL-C levels were lower in homozygous cats than in control cats, similar to what is seen in human LPL deficiency. Oral fat loading studies revealed that homozygous cats have a marked reduced ability to clear plasma TGs in terms of peak time (7 h vs. 3 h), peak height (9.36 vs. 1.1 mmol L-1), area under the TG clearance curve (AUC, 280.3 vs. 2.2 h mmol L-1) and time to return to baseline. Fasting lipid and lipoprotein levels were not significantly different between heterozygous and normal cats. However, oral fat loading in heterozygotes revealed an intermediate phenotype (peak of 2.35 mmol L-1 at 5 h, AUC 13.1 h mmol L-1), highlighting the impaired TG clearance in these animals. CONCLUSION: Thus, LPL deficiency in the cat results in a lipid and lipoprotein phenotype that predominantly parallels human LPL deficiency, further validating the use of these animals in studies on the pathobiology of LPL.     

Hypertriglyceridemia characterized by low-density lipoprotein phenotype and lipoprotein lipase gene mutation.

A high serum triglyceride (TG) concentration is associated with an increased serum concentration of small, dense low-density lipoprotein (LDL). To further characterize the hypertriglyceridemic condition, we examined sera from 240 subjects for small, dense LDL using non-denaturing polyacrylamide gradient gel electrophoresis. We focused on determining the frequency of the pattern B, which is characterized by a higher proportion of small, dense LDL, among hypertriglyceridemic individuals. The subjects were divided into four groups: a control group (TG < or = 1.65 mmol/l, high-density lipoprotein cholesterol (HDL-C) > or =1.17 mmol/l; n = 71), a high TG group (TG > 1.65 mmol/l, HDL-C > or = 1.17 mmol/l; n = 36), a group with high TG and low HDL-C (TG > 1.65 mmol/l, HDL-C < or = 0.91 mmol/l; n = 106), and a low HDL-C group (TG < or = 1.65 mmol/l, HDL-C < or = 0.91 mmol/l; n = 27). We found that pattern B occurs at a high frequency mainly in individuals with high TG and low HDL-C levels. We also observed an increased percentage of LDL within the 20.0 nm to 25.5 nm particle diameter range in this group. Analysis of the lipoprotein lipase gene in this group showed that some mutations seem to be associated with small, dense LDL, resulting in LDL pattern B.     

Oxidized low-density lipoprotein and atherosclerosis

Atherosclerosis is the leading cause of morbidity and mortality in western society. The most important risk factors for atherosclerosis include smoking, hypertension, dyslipidemia, diabetes and a family history of premature atherosclerosis. Several studies indicate that an increased plasma low density lipoprotein (LDL) cholesterol constitutes a major risk factor for atherosclerosis. Many data support a proatherogenic role for oxidized LDL and its in vivo existence. The oxidative susceptibility of LDL is increased with established cardiovascular risk factors, such as diabetes, smoking and dyslipidemia. Supplementation with antioxidants such as ascorbate and alpha-tocopherol can decrease LDL oxidation as well as cardiovascular mortality and thus shows promise in the prevention of atherosclerosis.     

脂蛋白相关磷脂酶A2与急性缺血性脑卒中的相关性研究

目的 通过检测急性缺血性脑卒中患者血浆脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)浓度,探讨两者的关系,为临床诊断、治疗提供依据.方法 选择急性缺血性脑卒中患者(151例)为研究对象,未卒中患者(100例)作对照,血浆Lp-PLA2检测采用酶联免疫吸附法(ELISA).结果 (1)急性缺血性脑卒中组血浆Lp-PLA2浓度高于对照组,差异有统计学意义(t=21.307,P=0.000).血浆Lp-PLA2浓度与急性缺血性脑卒中的风险呈正相关.(2)各型急性缺血性脑卒中血浆Lp-PLA2浓度差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 Lp-PLA2是急性缺血性脑卒中的危险标志物,测定Lp-PLA2浓度有助于制定预防策略,为急性缺血性脑卒中的预防及临床治疗提供依据.     

极低密度脂蛋白受体与脂蛋白代谢

极低密度脂蛋白受体是低密度脂蛋白受体家族的成员 ,其生物学功能尚未完全阐明。关于极低密度脂蛋白受体是否参与脂蛋白代谢的问题 ,一直存在争论。最近 ,这方面的研究取得了一些进展 ,证实极低密度脂蛋白受体参与了脂蛋白代谢的调节     

氧化高密度脂蛋白和氧化低密度脂蛋白单克隆抗体的制备

目的 制备抗氧化高密度脂蛋白(Ox-HDL)和氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)单克隆抗体(McAb).方法 以Ox-HDL和Ox-LDL为抗原,免疫BALB/C小鼠,用杂交瘤技术建立稳定分泌抗相关抗原的McAb.用protein A柱亲和层析法纯化腹水中McAb,用Dot-ELISA和ELISA等鉴定其生物学活性.结果 获得3株不同结合特性的抗Ox-HDL和Ox-LDL的单克隆杂交瘤细胞(IC4Gl2,6H9A4A11和8C1A6),2株为IgG1亚型,1株为lgG2b亚型;腹水效价大干10',Dot-ELISA和ELISA检测证实1C4G12为具有对Ox-HDL和Ox-LDL交叉反应性的McAb,其与Ox-HDL单抗6H9A4A11可构成双抗体夹心体系测定0x-HDL水平,而与Ox-LDL单抗8C1A6构成的体系可测定Ox-LDL水平.结论 本实验通过构建3株不同特性的交叉反应性McAb,可用于测定Ox-HDL和Ox-LDL免疫方法 的建立.