HCV-RNA与HCV-Ab,HCV-cAg相关性分析研究

目的 探讨丙型肝炎患者中HCV-RNA与HCV-Ab,HCV-cAg三种检测指标的相关性和临床应用效果。方法 采用酶联免疫法分别检测实时荧光定量PCR法检测阳性的140例HCV患者血清中的HCV-Ab和HCV-cAg,以了解检测结果及符合率。结果 在140例HCV-RNA阳性血清中,HCV-cAg阳性127例,符合率90.71%; HCV-Ab阳性110例,符合率78.57%; 对不同HCV-RNA浓度的血清进行HCV-cAg检测结果其阳性检出率随着HCV病毒含量的升高而增高; 不同HCV-RNA浓度的血清进行HCV-Ab检测结果无明显变化。结论 通过对HCV-RNA阳性患者中HCV-Ag和HCV-Ab的检测观察分析,HCV-cAg检测与HCV-RNA的检测结果具有较高的符合率。因此HCV-cAg检测可作为HCV-Ab的补充检测,为HCV“窗口期”感染以及免疫低下人群感染的筛查提供简便、廉价方法; 同时为不具备HCV-RNA检测条件的基层医疗单位,作为HCV感染的快速筛查提供诊断依据。     

HCV-Ab、HCV-cAg和HCV-RNA联合检测的临床价值

目的评价丙型肝炎病毒抗体(HCV-Ab)、丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-cAg)以及HCV-RNA联合检测在HCV诊断中的应用价值。方法采用ELISA法对2 023例输血和手术前住院患者的血液标本进行HCV-Ab和HCV-cAg的测定,并对阳性标本采用RT-PCR法进行HCV-RNA的测定。结果 2 023例筛查标本中HCV-Ab(+)55例,其中HCV-cAg(+)30例,HCV-RNA(+)40例;1 968例HCV-Ab(-)的样本中检出HCV-cAg(+)9例,其中HCV-RNA(+)7例,HCV-cAg与HCVRNA符合率为83.0%(39/47)。结论 HCV-Ab检测结合HCV-cAg或者HCV-RNA检测可以有效缩短HCV的窗口期,降低漏检率。对于条件受限的基层医院HCV-cAg可以作为HCV-Ab常规检测的补充指标,提高检出率。     

HCV-IgG、HCV-cAg与HCV-RNA对丙型肝炎诊断的评价

目的评价丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-cAg)、丙型肝炎病毒抗体(HCV-IgG)及丙型肝炎病毒RNA(HCV-RNA)3种检测方法在丙型肝炎实验室诊断中的意义。方法收集84例丙型肝炎疑似患者和87例健康对照者血清,采用ELISA法检测HCV-cAg和HCV-IgG,实时荧光定量聚合酶链式反应法(RT-PCR)检测HCV-RNA。结果 84例丙型肝炎疑似患者中HCVIgG阳性率为84.5%,HCV-cAg阳性率为13.1%,HCV-RNA阳性率为52.4%;71例HCV-IgG阳性患者中HCV-RNA阴性35例,假阳性率为49.3%,11例HCV-cAg阳性患者中HCV-RNA阴性5例,假阳性率为45.5%;44例HCV-RNA阳性的丙型肝炎确诊患者中HCV-IgG假阴性率为18.2%,HCV-cAg假阴性率为86.4%;HCV-cAg和HCV-IgG联合检测的假阴性率为13.6%,真阳性率为100.0%。结论 HCV-cAg和HCV-IgG在丙型肝炎的实验室诊断中均存在一定的假阴性和假阳性,将二者联合检测或在必要时与HCV-RNA三者联合检测可降低漏诊率。     

HCV抗原检测与HCV-RNA和HCV抗体检测的比较研究

目的 评价丙型肝炎病毒核心抗原(HCV抗原)、丙型肝炎病毒抗体(HCV抗体)及丙型肝炎病毒RNA(HCV-RNA)三种检测方法在丙型肝炎实验室诊断中的作用.方法 HCV抗原采用双抗体夹心法;HCV-RNA采用实时荧光定量PCR技术(RT-PCR),HCV抗体采用酶联免疫技术(间接法),对44例HCV抗体阳性标本进行HCV抗原和HCV-RNA检测.结果 在HCV抗体阳性标本中,HCV抗原阳性检出率为43.2％,HCV-RNA阳性检出率为82.5％;在HCV-RNA阳性标本中,HCV抗原阳性检出率为45.5％.结论 三种丙肝标志物中,实时荧光定量PCR技术检测HCV-RNA是判断丙肝感染最可靠的方法而HCV抗原诊断丙肝,仍有54.5％的漏检率,其应用于临床还有距离.所以在没有条件应用实时荧光定量PCR技术检测HCV-RNA的医院,在用HCV抗原对HCV抗体阳性标本进行确认,来判断HCV既往感染或现症感染时,应结合肝功能指标及临床表现以明确诊断.     

联合检测血清HCV-RNA、HCV-cAg与HCV-Ab对丙型肝炎的诊断价值分析

目的探讨联合检测血清HCV-RNA、HCV-c Ag与HCV-Ab对丙型肝炎的临床诊断价值。方法收集本院2015年3月至2016年4月门诊及住院部3000例受检者的血清标本,均采用ELISA方法检测血清HCV-c Ag与HCV-Ab,采用PCR技术对HCV-c Ag(+)/HCV-Ab(+)、HCV-c Ag(-)/HCV-Ab(+)与HCV-c Ag(+)/HCV-Ab(-)血清标本进行血清HCV-RNA检测。以检测出的血清HCV-RNA的阳阴性分为HCV-RNA阳性组和HCV-RNA阴性组,并计算两组血清标本的灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值与Youden指数,通过卡方检验统计分析两组结果的相关性。结果在对3000例患者进行血清HCV-c Ag与HCV-Ab联合检测的血清标本中,共检测出HCV-c Ag(+)/HCV-Ab(+)、HCV-c Ag(-)/HCV-Ab(+)与HCV-c Ag(+)/HCV-Ab(-)血清标本有60例,血清HCV-RNA(+)有50例,血清HCV-RNA(-)有10例。算得血清HCV-c Ag的灵敏度为20.0%,血清HCV-Ab的灵敏度为95.3%,差异具有统计学意义(P0.05);而血清HCV-c Ag的阳性预测值为93.4%,血清HCV-Ab的阳性预测值为85.7%,差异具有统计学意义(P0.05),结果表明进行血清HCV-c Ag与HCV-Ab联合检测可以提高血清HCV-RNA的检出率。结论血清HCV-c Ag与HCV-Ab的联合检测可以互补两者的缺点,提高血清HCV-RNA的临床检出率,有效降低丙型肝炎窗口期的漏检率,对于丙型肝炎患者的早期发现、早期诊断、早期治疗有着重要意义,此联合检测值得临床广泛推广。     

3种方法检测丙型肝炎患者的早期诊断价值

目的探讨采用丙型肝炎病毒抗体(HCV-Ab)、丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-cAg)、HCV-RNA 3种方法联合检测丙型肝炎患者的早期诊断价值。方法收集该院西宁地区203例HCV-Ab阳性患者及5例HCV-Ab阴性HCV-cAg阳性的患者,使用荧光定量PCR法进行HCV-RNA检测,化学发光法检测HCV-Ab,ELISA法检测HCV-cAg。结果 203例HCV-Ab阳性患者中HCV-cAg阳性例数为67例、HCV-RNA1×103 U/L 143例;72例HCV-Ag阳性患者中HCV-RNA阳性例数69例,符合率达95.83%,其中5例HCV-Ab阴性HCV-cAg阳性患者中,HCV-RNA阳性3例,符合率达60.00%。结论 HCV-cAg、HCV-Ab和HCV-RNA 3种方法联合检测可用于丙型肝炎患者的早期诊断,同时可有效缩短HCV窗口期,降低HCV感染的漏检率。     

28098名献血者HCV-RNA检测及部分阳性者的随访调查

目的评价逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测献血者HCV-RNA的意义,调查献血者HCV感染的“窗口期”情况。方法用RT- PCR检测大批正常献血者的HCV- RNA,并对其中部分HCV -RNA阳性者做随访研究。结果在28098名常规化验项目均正常的献血者中,HCV-RNA阳性77人,占0.27%,对11名HCV -RNA阳性献血者跟踪,其中9例在随访检查的常规项目中,ALT和(或)抗HCV均出现不正常,出现的时间距首次HCV -RNA阳性至少4周。结论RT- PCR检测血液HCV- RNA能早期发现HCV感染者,为提高输血安全性,宜在献血者中开展HCV-RNA检测。     

ELISA法检测HCVcAg、抗-HCV及RT-PCR法检测HCV-RNA的价值

目的分析探讨采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测丙型肝炎病毒核心抗原(HCVcAg)、HCV病毒抗体(抗-HCV)及反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测丙型肝炎病毒RNA(HCV-RNA)用于丙型肝炎诊断的价值。方法随机选择2014年8月至2015年10月进行HCVcAg、抗-HCV及HCV-RNA检测的疑似丙型肝炎病毒感染患者180例为研究对象,纳入同期体检人员200例为健康对照。对比观察3种检测方法的检测结果。结果 180例受检人员经HCV-RNA定量检测,阳性检出率为61.11%(110/180),抗-HCV阳性检出率为52.22%(94/180),HCVcA阳性检出率42.22%(76/180)。200例健康对照人员HCV-RNA阳性检出率为0.50%(1/200),HCVcAg阳性检出率为7.00%(14/200),抗-HCV阳性检出率为9.00%(18/200)。结论 RT-PCR检测HCV-RNA是丙型肝炎感染最为准确的方法,HCVcAg、抗-HCV联用或者抗-HCV、RNA(HCV-RNA)联用,可提高检测的准确率。     

血清唾液尿液HCV RNA定量检测与分析

丙型肝炎病毒 (HCV)感染常引起慢性活动性肝炎并导致肝纤维化 ,在患病早期使用 IFNa有一定疗效。过去丙型肝炎的检测主要靠转氨酶和 Anti- HCV的测定 ,而血清中 HCV RNA才是病毒复制和肝炎进程的更确切的标准。因此定量 PCR检测 HCV RNA为 HCV感染及其疗效的判定提供了一项重要指标。本室采用定量 PCR法 ,对 12 0例患者同时检测血清唾液尿液中 HCV RNA的含量报道如下。1　对象和方法1.1　对象　本院住院患者。1.2　定量 PCR试剂盒　深圳匹基生物技术开发有限公司生产的 Fluorogenic PCR Kit。1.3　仪器　美国 BIO- RAD…     

抗HCV与血清HBV-M电化学发光检测结果相关性分析

目的回顾性分析患者抗HCV与HBV-M检出情况,探讨HCV与HBV感染之间的相互关系。方法使用电化学发光法(ECL)比较分析196例抗HCV阳性患者与32026例抗HCV阴性患者血清HBV-M单项检出率和不同模式的检出率。结果抗HCV阳性组HBV-M检出率为73.47%;抗HCV阳性组HBsAb单阳性模式检出率低于抗HCV阴性组(P<0.05);而HBcAb单阳性模式、HBeAb和HBcAb双阳性模式、HBsAg和HBcAb双阳性模式检出率却高于抗HCV阴性组(P<0.05);抗HCV阳性组单项HBsAg、HBeAg以及HbsAb的检出率与抗HCV阴性组间差异无统计学意义(P>0.05),而单项HBeAb和HBcAb阳性率却高于HCV抗体阴性组(P<0.05)。结论 HCV与HBV共感染在人群中分布面较广,共感染后存在互相干扰抑制作用,主要表现为HBcAb、HBeAb的产生,及对保护性HBsAb产生过程的干扰与抑制。     

库血HCV-RNA的检测分析

目的 为探索提高库血丙型肝炎病毒(HCV)的检出率。方法 采用逆转录套式聚合酶链反应(RT-PCR)技术，检测4530份抗-HCV阴性的库血HCV-RNA。结果 4530份库血中HCV-RNA阳性55份，阳性率1．2l％．其中个体献血者血液2110份，HCV-RNA阳性40份，阳性率1．90％；无偿献血者血液2420份，HCV-RNA阳性15份，阳性率0．62％。结论 RT-PCR可用于检测库血HCV-RNA，以减少因输血造成HCV感染。     

丙型肝炎患者血清HCV-RNA拷贝数与甲胎蛋白异质体百分比的相关性分析

目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)患者HCV-RNA与甲胎蛋白异质体百分比(AFP-L3/AFP)的相关性,分析丙型肝炎引起的肝硬化向肝癌发展的进程中HCV-RNA与AFP-L3/AFP变化特点。方法收集临床已确诊的单纯HCV患者80例,其中44例为肝硬化患者,36例为丙型肝炎肝癌组,肝硬化组进行3、6个月的随访,随访结果分为转移肝癌组及治疗有效组,选取60例健康人群作为对照组,采用病例对照研究。不同组间HCV-RNA及AFP-L3/AFP比较采用t检验。结果肝硬化组平均HCV-RNA、AFP-L3/AFP为7.15×10~3 copy/mL、44.3%,与对照组比较(400copy/mL、1.1%),差异有统计学意义(P0.05)。肝硬化组平均HCV-RNA、AFP-L3/AFP为8.33×10~9 copy/mL、3.35%、与丙型肝炎肝癌组(5.71×10~7 copy/mL、94.33%)比较差异有统计学意义(P0.05)。肝硬化患者3个月随访有4例发展为肝癌,6个月后有8例发展为肝癌。结论对HCV引起的肝硬化患者应联合、动态检测HCV-RNA与AFP-L3/AFP,以便早期及时发现肝癌。     

血清与血浆定量检测丙型肝炎病毒的对照研究

目的探讨采用血清和血浆两种标本同时检测丙型肝炎病毒（hepatitis C virus,HCV）感染者HCV病毒含量的差异性。方法同时收集256例HCV感染者血清和血浆标本,采用PCR-荧光探针法（RT-PCR）进行HCV-RNA的定量检测。结果血清HCV-RNA检出率为69.92%（179/256）,血浆的检出率为85.16%（218/256）,差异有统计学意义（χ2=5.25,P〈0.05）。同时对两种标本检测大于103IU/ml的定量结果进行统计分析,差异有统计学意义（P=0.032）。结论采用血浆标本测定HCV-RNA检出率明显高于血清标本,并且分离标本快速,避免溶血和RNaes的影响,值得推广应用。     

HCV核心抗原酶联免疫检测与HCV—RNA定量检测敏感性的比较

[目的]比较ELISA法测定总HCV—cAg与荧光定量PCR法测定HCV—RNA两种检测方法对诊断HCV感染的敏感性,分析HCV—cAg ELISA法诊断试剂的重要意义。[方法]ELISA法测定血清样本中的HCV抗体,改进型ELISA法测定血清样本中的HCV—cAg,实时荧光定量PCR法测定血清样本中的HCV—RNA,阳性样本经重复实验确认。[结果]通过用HCV抗体检测试剂对门诊病人或献浆员进行筛查,获得HCV抗体阳性血清样本264例。对这些病例别进行ELISA法测定总HCV—cAg实验和荧光定量PCR法测定HCV—RNA实验,测到HCV—cAg阳性病例101例,HCV—RNA阳性病例115例。经统计学分析,两种检测方法的敏感性差别不太大（0．01〈P〈0．05）。[结论]HCV—cAgELISA法检测和HCV—RNA定量检测具有相近的敏感性,日存某种稗序上HCV—cAg ELISA法榆测可以作为HCV—RNA定量榆测的有效替代。     

Utility of a commercial quantitative hepatitis C virus core antigen assay in a diagnostic laboratory setting

In this study, the utility and impact of hepatitis C virus (HCV) core antigen (Cag) detection via a commercial assay have been evaluated in diagnostic laboratory conditions. In a total of 272 samples from 226 individuals, HCV RNA was detected in 81.3% and anti-HCV antibody prevalence was 86.4%. HCV Cag reactivity was identified in 59.9% of the samples and in 75.8% with detectable RNA. The sensitivity and specificity of HCV Cag assay have been calculated as 75.8% and 95.1%, respectively, and agreement between HCV RNA and HCV Cag was moderate (κ = 0.554). HCV Cag and RNA levels were highly correlated (r = 0.915 and 0.937). A viral load threshold of 10³ IU/mL has been recognized, above which the correlation with RNA became statistically significant and sensitivity increased to 90.9%. Detection and quantification of HCV core antigen have been observed as a strong alternative to nucleic acid testing for HCV monitorization.     

乙型肝炎患者血清中HBV cccDNA与HBV DNA、HBsAg和HBeAg定量关系的分析

目的定量检测乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒（HBV）共价闭合环状DNA（cccDNA）、HBV DNA、乙型肝炎表面抗原（HBsAg）和乙型肝炎e抗原（HBeAg）并分析其相互关系,探讨定量检测血清中HBV cccDNA的临床应用价值。方法随机选取HBV感染者83例,采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测血清中HBVcccDNA及HBV DNA,同时采用化学发光法定量检测血清中HBsAg和HBeAg。结果 83例患者中HBV DNA阳性62例,其中HBV DNA载量≥105拷贝/mL者40例,血清HBV cccDNA阳性28例（70.00%）;HBV DNA载量〈105拷贝/mL者22例,血清HBV cccDNA阳性2例（9.09%）,不同DNA载量组HBV cccDNA差异有统计学意义（P〈0.01）。HBeAg阳性组和阴性组HBV cccDNA阳性率分别为70.00%（28/40）和4.65%（2/43）,两组差异有统计学意义（P〈0.01）。HBV cccDNA定量值与HBV DNA、HBsAg呈正相关（P〈0.01）。结论血清中HBV cccDNA水平可同时反应血清HBV DNA和HBsAg水平,血清HBV cccDNA含量可作为观察HBV复制情况和评价抗病毒疗效的相关血清指标。     

不同核酸抽提方法对HCV—RNA检测效果的影响

采用TEK（0．2mol／LTris－HCLpH7．6．250mmol／LEDTA，200mg／L蛋白酶K）作为裂解剂处理样本，再用无水乙醇沉淀HCVRNA作为模板，用于多聚酶链反应检测HCVRNA，该法与AGPC法及TENS法比较，由于不使用SDS，避免TaqDNA多聚酶的强抑制原，省略了酚-氯抽提这一步骤，而又达到分高纯化RNA模板的目的。经对215例抗HCV阳性血清用上述三种方法进行比较分析，结果用三种方法制备的RNA模板进行多聚酶链反应，其HCVRNA阳性率无显著性差异．但TEK法较AGPC法及TENS法操作简单、稳定、不易污染，特异性好等优点，经用加挂生物素的合成寡核苷酸探针对HCVRNA逆转录PCR扩增产物作斑点杂交，显示有很好的特异性，具有明显的实用价值，批量测定在一个工作日可完成，此法的建立为制备RNA模板提供了方法及经验，适合标本量较大的临床单位使用，值得推广应用。     

HBV感染者血清e抗原与HBV-DNA的相关性分析

目的 分析乙型肝炎病毒DNA（HBV-DNA）和乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）的相关性。方法收集乙型肝炎患者695例，时间分辨免疫荧光测定患者血清乙型肝炎e抗原（HBeAg），同时荧光定量PCR测定患者血清HBV-DNA。根据血清HBeAg和HBV-DNA水平各分9组。结果1）HBV感染者血清e抗原与HBV-DNA呈等级相关，（0．508，P〈0．001）。2）血清HBeAg各组与HBV-DNA的桐关性随着HBeAg浓度的增大而减弱（F=32．79，Ⅰ-Ⅳ组P〈0．05）。3）血清HBV-DNA各组间HBeAg没有统计学意义差别（F=0．369，P〉0．05）。结论乙型肝炎患者血清HBeAg和HBV-DNA近低度相关。