大承气汤对实验性肺水肿伴多脏器损害家兔的保护作用

目的 :探讨大承气汤对实验性肺水肿伴多脏器损害的治疗作用 ,为其临床应用提供科学依据。方法 :沿兔耳缘静脉一次性注射油酸 ,复制实验性肺水肿伴多脏器损害动物模型。用大承气汤灌胃法观察该方对模型动物的治疗作用。结果 :油酸在引起急性肺水肿的同时还可引起多脏器的损害。大承气汤在改善家兔实验性肺水肿的同时可明显减轻多脏器损害。结论 :大承气汤对实验性肺水肿伴多脏器损害家兔具有保护作用 ,可稳定内环境 ,促进多脏器功能恢复     

蒿甲醚对大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞DNA的影响

目的:蒿甲醚除了具有良好的临床治疗作用外,对正常组织有极大的副作用。实验拟观察蒿甲醚对大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的影响。方法:实验于2005-09-20/2007-03-10在山东省泰山医学院生命科学研究所、中心实验室和机能实验室完成。①实验材料:蒿甲醚购自昆明制药厂,分析纯,使用前先进行预处理,处理方法:研磨后用溶液配成1g/L的母液,超声助溶解后供实验用。Wistar大鼠70只,体质量(70±15)g,雌雄不拘,由山东大学医学院实验动物中心提供。实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。②实验方法:将大鼠随机分为普通饲料对照组(n=10)和实验组(n=60),实验组分6个亚组,分别在饲料中加入0.1,0.2,0.4,0.8,1.6,3.2mg/kg的蒿甲醚。采用单细胞凝胶电泳技术观察大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞DNA的改变。结果:70只大鼠,饲养过程中实验组死亡6只,死亡原因为饲料添加蒿甲醚造成。当饲料中的蒿甲醚浓度为0.1mg/kg时,大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞DNA损伤率与对照组相比,差异无统计学意义;饲料中的蒿甲醚浓度超过0.2mg/kg时,大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞DNA损伤率明显增加,与对照组相比,差异有统计学意义。且损伤程度与饲料中蒿甲醚含量呈正相关。结论:当饲料中的蒿甲醚浓度超过0.2mg/kg时,蒿甲醚可在一定程度上改变肺泡Ⅱ型上皮细胞的DNA生物学特性。且随着蒿甲醚浓度的升高,这种损害更为明显。     

表皮细胞生长因子促进大鼠肺泡Ⅱ型细胞肺水转运动能的研究

目的观察经气管滴入表皮细胞生长因子(EGF)后正常大鼠肺泡液体清除率(ALC)的变化,探讨EGF对肺泡Ⅱ型细胞(AT2 )肺水转运功能的影响.方法在国内首次建立了以125I白蛋白为示踪剂进行肺灌注检测ALC的方法.将36只SD大鼠随机分为6组,其中5组动物经气管滴入EGF(100 μg/kg),分别于48、72、120、168和240小时各测量1小时的ALC,对照组以生理盐水代替EGF,同时监测ALC测量期间的血气变化.结果对照组ALC为(21.68±3.65)%.气管滴入EGF后48、72和120小时组ALC显著升高,分别为(43.3 3±13.21)%(P<0.01)、(42.52±10.05)%(P<0.01)和(34.35±3.76)%( P<0.05);168小时后恢复正常水平.48小时组和72小时组在肺灌注后60分钟的动脉氧分压也明显高于对照组(P均<0.05).结论EGF可增加AT2的液体转运能力,促进清除肺泡内液体,从而改善肺泡的氧气交换,有可能用于肺水肿和急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的治疗.     

大承气汤对重症急性胰腺炎细胞因子水平的影响

目的探讨早期应用大承气汤治疗重症急性胰腺炎对患者细胞因子水平的影响。方法采用酶联免疫法测定其外周血清中TNF—α、IL-6、sIL-2R水平。结果重症胰腺炎早期，两组治疗1周后TNF-α、IL-6、sIL-2R均有下降，而大承气汤组TNF—α、IL-6、sIL-2R水平明显低于对照组，两组结果相比差异显著。结论早期应用大承气汤治疗重症胰腺炎患者，可降低细胞因子水平，有利于尽快恢复机体免疫调节功能。     

大承气汤及大黄对小鼠免疫功能影响的初探

本文观察了不同剂量的大承气汤及其主要组份药大黄对不同机能状态小鼠免疫功能的影响，并对其作用机制进行了初步探讨。结果显示，大承气汤及其组份大黄对正常小鼠的免疫功能无明显影响，但对感染模型小鼠的免疫功能则有明显的影响。大剂量的大承气汤使感染模型小鼠的胸腺指数、脾指数及血甭溶血素生成减少，而中、小剂量组则使之增高。大黄可使感染模型小鼠的胸腺指数和脾指数增高，并有促进血清溶血素的生成的作用。提示：大承气汤     

短时间高氧对肺泡Ⅱ型上皮细胞线粒体活性氧产生及相关通路的影响

目的探讨短时间高氧对肺泡Ⅱ型上皮细胞（AECⅡ）线粒体Ca²⁺ /烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD⁺）/沉默信息调节因子3（SIRT3）/超氧化物歧化酶2（SOD2）通路及活性氧的影响。 方法将RLE-6TN细胞株细胞分为对照组、高氧组及线粒体钙通道拮抗剂组（拮抗剂组）。对照组细胞置于常规细胞培养箱中，高氧组细胞置于氧浓度为90%的培养箱中，拮抗剂组细胞加入钌红（2 μmol / L）后置于氧浓度为90%的培养箱中，各组均持续培养4 h。随后，对各组细胞线粒体内Ca²⁺、活性氧、NAD⁺、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）含量进行检测，并计算NAD⁺ / NADH比值；同时，采用实时荧光定量PCR检测SIRT3和SOD2信使RNA（mRNA）水平。 结果各组间细胞线粒体内Ca²⁺、活性氧、NAD⁺、NADH、NAD⁺ / NADH比值及SIRT3 mRNA、SOD2 mRNA表达水平的比较，差异均有统计学意义（F = 183.500、135.900、32.140、51.520、128.300、59.970、45.020，P均< 0.001）。且与对照组及拮抗剂组比较，高氧组细胞线粒体内Ca²⁺[（19.5 ± 0.8）、（17.2 ± 0.7）、（24.3 ± 0.3）nmol / L]、活性氧[（491 ± 9）、（480 ± 5）、（530 ± 6）相对荧光单位]及NADH[（0.85 ± 0.03）、（0.87 ± 0.04）、（1.06 ± 0.06）nmol / 10⁴ cells]含量均明显升高，而NAD⁺含量[（3.30 ± 0.12）、（3.24 ± 0.14）、（2.58 ± 0.29）nmol / 10⁴ cells]、NAD⁺ / NADH比值[（3.89 ± 0.15）、（3.71 ± 0.15）、（2.44 ± 0.27）]、SIRT3 mRNA[（1.01 ± 0.11）、（0.96 ± 0.08）、（0.45 ± 0.09）]及SOD2 mRNA[（1.01 ± 0.14）、（1.05 ± 0.11）、（0.48 ± 0.10）]表达水平均显著降低（P均< 0.05）。 结论短时间高氧可通过AECⅡ线粒体内Ca²⁺ / NAD⁺ / SIRT3 / SOD2通路导致活性氧蓄积。     

大承气汤对危重症患者单核细胞表面人白细胞抗原DR表达的影响

目的 观察大承气汤对严重创伤、感染患者的免疫功能的影响及治疗效果。方法 45例严重创伤、感染患者随机分为2组，治疗组24例应用大承气汤鼻饲治疗，对照组21例采用常规治疗。观察患者外周血单核细胞表面人白细胞抗原DR（HLA－DR）表达变化及多脏器功能障碍综合征（MODS）发生情况。结果 对照组HLA－DR恢复缓慢，治疗组HLA－DR恢复迅速；对照组MODS发生率为66．67％，治疗组MODS发生率为29．17％（P＜0．05）。结论 大承气汤可调节患者的免疫功能，降低严重创伤、感染后MODS发生率。     

大鼠脑出血后血肿周围组织活化凋亡蛋白酶3表达与大承气汤的干预

目的：观察大鼠脑出血后血肿周围神经元活化凋亡蛋白酶3的表达和血肿变化，及大承气汤的干预作用。方法：实验于2003-10／2004-03在中南大学湘雅医院中西医结合研究所完成。健康SD大鼠65只随机分成4组，分别为正常组(5只)，假手术组(20只)，模型组(20只)，大承气汤组(20只)。除正常组外，其余3组设4个时间点：6h，1，3，5d。每个时间点5只。采用免疫组化方法检测大鼠脑内血肿周围活化凋亡蛋白酶3的表达，用直尺测量不同时间点大鼠脑内血肿的最大直径。结果：65只大鼠进入结果分析。①活化凋亡蛋白酶3阳性细胞计数：正常组未见阳性细胞表达。造模后模型组血肿周围于6h出现阳性表达细胞．1d阳性细胞计数达高峰，3d出现轻度下降，5d明显下降[模型组：6h(24．600&;#177;2．338)个，1d(115，900&;#177;2．215)个，3d(91．940&;#177;3，177)个。5d(67．900&;#177;2．261)个[。与假手术组比较差异明显[假手术组：6h(3．120&;#177;2．235)个，ld(1．360&;#177;2．097)个，P&;lt;0.01]。大承气汤组与同时间点模型组比较：6h计数无明显差异，1，3，5d均存在明显差异[大承气汤组：1d(114．440&;#177;3．239)个，3d(84．420&;#177;3，648)个，5d(51．460&;#177;3，038)个．P&;lt;0．05或P&;lt;0.01]。②血肿体积变化情况：造模后血肿于1d达到最大，3d有所变小，5d变小明显；大承气汤组在5d缩小程度与模型组比较有明显差异[大承气汤组5d(2．000&;#177;0．187)mm，模型组5d(2．480&;#177;0．148)mm，(t=4．496，P&;lt;0．01)]。但在6h，ld，3d与模型组比较血肿缩小程度差别无显著性意义。结论：大鼠脑出血后血肿周围神经元活化凋亡蛋白酶3表达明显上调；大承气汤能减少活化凋亡蛋白酶3的表达，阻止神经元的凋亡，同时也具有一定的促进血肿吸收的作用。     

大承气汤对家猫脑出血性期的保护作用及一氧化氮改变的研究

目的：探讨大承气汤对家猫脑出血脑保护作用机制,方法：采用家猫脑出血模型,观察脑出血后及药物作用后1．5,12h脑组织中一氧化氮（NO）含量及Na^ K^ -ATP酶活性变化。结果：药物作用后12h脑吕NO含量,及Na^ K^ －ATP酶活性变化,与模型组比较有显著差异,（P＜0．05）,结论：大承气汤可降低NO的毒性,增加Na^ K^ -ATP酶的活性,对出血脑组织有保护作用。     

高氧液对油酸型急性肺损伤家兔动脉血气的影响

目的 :研究高氧液 (HO)对油酸型急性肺损伤 (ALI)家兔平均动脉压及血气的影响。方法 :以林格氏液(RS)为基液制备HO。采用油酸型ALI模型 ,将 2 2只家兔随机分为油酸组 (OA组 ) ,高氧液组 (HO组 ) ,每组 11只。分别在ALI模型制备前 (0min)、注射油酸后 3 0min ,60min、12 0min时间点进行动脉血气分析 ,测定平均动脉压(MAP)。结果 :静脉注射油酸后MAP、PaO2 、PaCO2 明显下降 (P <0 0 5 ) ,与OA组比较 ,HO组MAP、PaO2 、PaCO2 显著增高 (P <0 0 5或P <0 0 1)。结论 :HO对油酸型ALI家兔有治疗作用。     

大承气汤对家猫脑出血急性期的保护作用及一氧化氮改变的研究

目的探讨大承气汤对家猫脑出血脑保护作用机制.方法采用家猫脑出血模型,观察脑出血后及药物作用后1.5、12h脑组织中一氧化氮(NO)含量及Na+K+-ATP酶活性变化.结果药物作用后12h脑组织中NO含量,及Na+K+-ATP酶活性变化,与模型组比较有显著差异.(P<0.05).结论大承气汤可降低NO的毒性,增加Na+K+-ATP酶的活性,对出血脑组织有保护作用.     

大承气汤联合针灸治疗对腹部手术后肠道功能恢复的影响

目的 探讨大承气汤联合针灸治疗在促进腹部手术后患者肠道功能恢复中的价值.方法 选择2005年4月至2007年4月中山大学附属第五医院普外科住院治疗的300例腹部手术患者,按随机原则均分为西医组、大承气汤组和联合治疗组.西医组给予常规西医对症处理,大承气汤组在西医常规治疗基础上给予中药大承气汤加味[大黄(后下)10 g,芒硝6 g,枳实12 g,厚朴15 g,丹参12 g,桃仁12 g,赤芍12 g]500 ml保留灌肠或100 ml口服,均每日2次.联合治疗组在大承气汤组治疗基础上针刺双侧足三里、上巨虚及下巨虚穴,每日2次,共治疗4 d.观察术后患者肠道功能恢复情况、术后并发症发生情况,并分析影响肠道功能恢复的因素.结果 大承气汤组和联合治疗组肠鸣音恢复时间(h:35.38±7.47、18.96±9.13)、排气或排便时间(h:47.0g±5.36、24.82±4.05)均较西医组(59.20±6.32、86.74±5.11)明显缩短(均P<0.01),术后腹胀、肺部感染和肠梗阻的发生率均较西医组明显降低(腹胀:27.0%、11.0%比43.0%,肺部感染:11.0%、5.0%比19.0%,肠梗阻:3.0%、1.0%比7.0%,均P<0.01);联合治疗组明显优于大承气汤组(均P<0.05).年龄、手术时间及是否为胃肠道手术均是影响术后肠道功能恢复的因素(均P<0.05),而麻醉方式对患者肠道功能恢复无影响.结论 采用大承气汤联合针灸治疗能明显促进腹部手术后患者肠道功能的恢复,有利于减少术后并发症的发生;且患者年龄、手术时间及是否为胃肠道手术是影响术后肠道功能恢复的因素.     

高氧液治疗油酸型肺损伤家兔的实验研究

目的：研究高氧液(hyperoxia solution，HO）对油酸型急性肺损伤（acute lung injury，ALI）家兔的治疗作用。方法：以林格氏液为基液制备HO。将18只家兔随机分为油酸组（A组），高氧液组（B组）和正常对照组（C组），每组6只。A、B各组均按文献方法经耳缘静脉注入油酸0.06mL/kg建立ALI模型，C组动物注入等量生理盐水。B组于注射油酸30min时经右侧颈外静脉给予HO 20ml/kg，A、C组给予等量林格氏液。各组分别在ALI模型制备前（0min）、注射油酸后30，60，120min时间点经右颈外动脉进行血气分析，并测定肺水含量，肺体比值及病检。结果：与C组相比A组PaO2、PaCO2显著降低（P&;lt;0.01），肺水含量及肺体比值显著增高（P&;lt;0.01），镜下见肺灶性出血，间质、肺泡水肿，大量炎细胞浸润。B组经HO治疗后迅速提升PaO2、PaCO2（P&;lt;0.05），减轻肺水肿（P&;lt;0.01），大部分肺组织无明显病理学改变。结论：HO对油酸型ALI家兔有治疗作用。     

大承气汤对危重症患者胃肠功能衰竭防治作用的研究

目的:观察大承气汤在危重病患者中防治胃肠功能衰竭的作用。方法:将严重创伤、感染性休克、重症胰腺炎等危重症患者随机分为大承气汤预防组和对照组,预防组入院即给予大承气汤,观察胃肠功能障碍出现率和pH值;对照组中发生胃肠功能障碍者再给予大承气汤,观察治疗有效率和治疗前后胃液pH值。结果:大承气汤预防组发生胃肠功能障碍较对照组明显减少,pH值升高;对照组中的胃肠功能障碍者,经大承气汤治疗后功能恢复,pH值升高。结论:大承气汤在防治危重患者的胃肠道衰竭中有重要作用。     

大承气汤对脓毒症大鼠肝脏Toll样受体4表达的影响

目的 探讨不同剂量大承气汤对脓毒症大鼠肝脏Toll样受体4(TLR4)表达的影响.方法 将50只SD大鼠随机分为正常对照组、假手术组、模型组及大承气汤低、高剂量组,每组10只.采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备大鼠脓毒症模型.大承气汤低、高剂量组分别于术前2 h、术后每日2次灌胃5 ml/kg、10 ml/kg大承气汤;其他3组同时间点灌胃10 ml/kg生理盐水.各组于术后24 h处死5只动物取肝组织,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定TLR4 mRNA表达.另取5只大鼠于术后2、6、12、48 h取血,测定血浆白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量.结果 与假手术组比较,模型组大鼠肝组织中TLR4 mRNA表达及血浆IL-6、TNF-α含量均较假手术组升高(均P<0.01).以大承气汤干预后,肝组织中TLR4 mRNA表达及血浆IL-6、TNF-α含量均较模型组下降,且高剂量组降低程度更为显著(P<0.05或P<0.01).结论 大承气汤对脓毒症大鼠肝脏TLR4表达有抑制作用,并存在一定的量效关系.     

高氧对胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞Notch受体的影响

目的 检测Notch 1在肺泡Ⅱ型上皮细胞(ACEⅡ)与肺成纤维细胞共培养的高氧损伤模型中表达的变化,初步探讨Notch信号在高氧肺损伤中的作用,为临床防治新生儿急、慢性肺损伤提供理论的依据.方法 Spragne Dawkey雌鼠12只,体质量200～220 g,雄鼠3只,220～250 g,由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供.将共培养的AEC Ⅱ随机分为高氧组和对照组.高氧组按3L/nlin通入950 ml/L O2和250 ml/L CO2,10 min后,立即用封口胶密封培养板,置于37℃、50 ml/L CO2培养箱.于给氧后24、48、72、96 h,收获各组细胞,测氧仪检测培养瓶中的O2体积分数,将低于900mi/L O2的标本弃去.免疫组织化学法鉴定细胞,台盼蓝拒染实验计算细胞纯度,确认共培养造模成功.每24 h更换培养基并给氧.每一时间点同时设对照组,置于37℃、50 ml/L CO2培养箱中培养.NTT法检测AECⅡ增殖活力,绘制生长曲线;免疫组织化学法定位Notch1蛋白;荧光定量PCR检测noteh1 mRNA;流式细胞术双标记法检测AEC Ⅱ、AEC I细胞百分率.结果 免疫组织化学法显示高氧组Notch1活化人核受抑;高氧组各时间点Notch1 mRNA分别下降为对照组的0.43、0.29、0.11、0.03倍(置信限95%),通氧后AECⅡ百分率显著降低[24 h高氧组vs.对照组:(68.92±6.88)%vs.(90.35±4.01)%,P=0.006;48 h高氧组vs.对照组:(38.03±3.27)%、vs.(61.47±4.81)%,P=0.000;72 h高氧组vs.对照组:(20.13±4.45)%vs.(52.05±3.35)%,P=0.000;96 h高氧组vs.对照组:(8.17±1.99)%vs.(52.59±2.93)%,P:0.000].AEC I百分率除96 h外均增高[24 h高氧组vs.对照组:(0.1l±0.03)%vs.(0.01±0.01)%,P=0.006;48 h高氧组vs.对照组:(49.73±3.45)%vs.(16.13±2.13)%,P=0.000;72 h高氧组vs.对照组:(52.43±3.14)%vs.(5.98±0.95)%,P=0.000;96 h高氧组vs.对照组:(19.85±3.26)%vs.(29.03±3.16)%,P=0.0007].结论 高氧可抑制AECⅡNotch1受体的活化,引起AECⅡ增殖减弱,转分化异常.研究如何调控Notch信号通路将为修复肺泡上皮,恢复其正常生理功能打开新思路.     

中药复合抗氧化剂对实验性高脂血症家兔的降脂作用

目的：在家兔动脉粥样硬化的模型上观察复合抗氧化剂对实验性高血脂家兔的影响并探讨其可能的作用机制。方法：将雌雄各半，体质量约(1．5&;#177;O．2)kg，3．O～4．O月龄的24只家兔采用完全随机方法分为正常对照组、高脂模型组和复合抗氧化剂组3组。分别给予普通饲料(正常对照组)和在普通饲料中加入lOOg／L蛋黄粉、lOg／L胆固醇、50g／L猪油组成的高脂饲料(其他两组)喂养；复合抗氧化剂组动物在喂饲高脂饲料的同时，每兔每天按照O．06g／kg标准灌胃给予30g／L复合抗氧化剂液。喂养第12周末检测各组血清中总胆固醇、三酰甘油和高密度脂蛋白胆固醇。观察动脉粥样硬化(atherosclerosis，As)斑块病变。结果：高脂模型组显示有不同程度的As形成，中膜平滑肌细胞增生、排列不规则。3组TC、TG和LDL-C含量之间差别非常显著，X^2=l8．25，P(0．001；r=15．37，P&;lt;0．001；r=19．Ol，P&;lt;0．001。HDL—C含量在对比组之间的差别具有显著性的意义，r=9．04，P&;lt;0。05。给予高脂饮食，模型组1℃，TG，HDL-C和LDL—C增至29。34(23。70)，0．87(0．28)，3。83(12．72)，25．57(11．30)mmol／L。在复合抗氧化剂灌胃后，减至14.55(4．30)，0．11(0．21)，2．41(1。59)，12．29(6．51)mmol／L。除HDL-C外，两组间TC，TG和LDL—C差别具有显著性的意义，分别为X^2=6．36，P&;lt;0．05；X^2=11．31，P&;lt;0．01；X^2=8.04，P&;lt;O．01。结论：该复合抗氧化剂对已形成的高脂血症兔具有明显的降血脂及防止动脉粥样硬化形成的作用。     

氧化应激状态下肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡及细胞外信号调节激酶信号转导机制的研究

目的 探讨氧化应激状态下肺泡Ⅱ型上皮细胞（ATⅡ型细胞）修复存活、凋亡及其细胞外信号调节激酶（ERK）对凋亡的调控作用。方法 采用过氧化氢（H2O2）处理体外分离纯化培养的原代大鼠ATⅡ型细胞；用蛋白质免疫印迹法（Western blotting）检测H2O2刺激后ATⅡ型细胞磷酸化ERK1／2（p—ERK1／2）的表达，用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（MTT）检测细胞存活率；用流式细胞仪检测细胞凋亡率，并观察ERK特异性抑制剂PD98059干预后细胞凋亡的变化。结果 与对照组比较，10μmol／L和100μmol／L的H2O2处理对ATⅡ型细胞存活率和凋亡率无明显影响；500μmol／L和1000μmol／L的H2O2处理可导致ATⅡ型细胞的存活率明显降低，凋亡率显著升高（P均＜0．05），呈剂量依赖性。500μmol／LH2O2处理ATⅡ型细胞30min，细胞存活率和凋亡率均无显著变化；处理180min细胞存活率明显降低，凋亡率明显增高（P均＜0．05），呈时间依赖性。500μmol／LH2O2可刺激P—ERK1／2阳性表达，以刺激30min表达最强；使用ERK抑制剂（PD98059）干预后，ATⅡ型细胞凋亡率明显增高。结论 H2O2可以剂量和时间依赖的方式诱导ATⅡ型细胞凋亡，ERK信号转导途径参与了ATⅡ型细胞的凋亡调控，对氧化应激状态下的ATⅡ型细胞可能起到保护作用。     

脂氧素A4对肺泡Ⅱ型上皮细胞水通道蛋白1,3,5的影响

目的 探讨脂氧素A4(LipoxirA4,LxA4)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)攻击的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(typeⅡpenumonocyte,AT Ⅱ)水通道蛋白(aquaporin,AQP)1,3,5的影响.方法 每次取SPF级健康SD雄性大鼠,体质量200～250 g一只,对大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞进行分离、纯化,鉴定,得到纯度为≥90%的肺泡Ⅱ型上皮细胞,将细胞随机分为:①溶剂对照(乙醇,0.7μL/mL)组;②空白组(无血清的培养基不含任何药物);③LXA4(1×10-7moL/mL)组;④LPS(1μg/mL)组;⑤LPS+LXA4(1μg/mL LPS+1×10-7moL/mL LXA4)组.药物刺激4 h后用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞上AQP1,AQP3和AQP5的mRNA的表达,免疫组织化学方法(IHC)检测肺泡Ⅱ型上皮细胞上AQP1,AQP3和AQP5蛋白的表达.试验重复6次.采用方差分析进行统计学处理.结果 RT-PCR和免疫组织化学法结果显示,用1 μg/mL的LPS刺激肺泡Ⅱ型上皮细胞4 h后ATⅡ上AQP1,AOP3和AQP5的mRNA和蛋白表达较空白组明显减低(P＜0.01),而LPS+LXA4组中ATⅡ上AQP1,AQP3和AQP5的mRNA和蛋白表达较LPS模型组有明显增高(LPS+LXA4,AQP1:0.647±0.132,AQP3:0.900±0.856,AQP5:0.879±0.058;LPS.AQP1:0.297±0.133,AQP3:0.512±0.113,AQP5:0.647±0.110;P＜0.01),且LXA4组中ATⅡ上AQP1,AQP3和AQP5的mRNA和蛋白表达较空白组也有明显增高(LXA4,AQP1:0.539±0.142,AQP3:0.818±0.176,AQP5:0.841±0.066;Blank Control,AQP1:0.518±0.139;AQP3:0.138±0.136,AQP5:0.766±0.066;P＜0.01).结论 大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞上表达有AQP1,AQP3和AQP5,LXA4能促进脂多糖攻击的肺泡Ⅱ型上皮细胞上AQP1,AQP3和AQP5mRNA和蛋白表达上调.     

大鼠脑出血后血肿周围组织活化凋亡蛋白酶3表达与大承气汤的干预

目的:观察大鼠脑出血后血肿周围神经元活化凋亡蛋白酶3的表达和血肿变化,及大承气汤的干预作用。方法:实验于2003-10/2004-03在中南大学湘雅医院中西医结合研究所完成。健康SD大鼠65只随机分成4组,分别为正常组(5只),假手术组(20只),模型组(20只),大承气汤组(20只)。除正常组外,其余3组设4个时间点:6h,1,3,5d。每个时间点5只。采用免疫组化方法检测大鼠脑内血肿周围活化凋亡蛋白酶3的表达,用直尺测量不同时间点大鼠脑内血肿的最大直径。结果:65只大鼠进入结果分析。①活化凋亡蛋白酶3阳性细胞计数:正常组未见阳性细胞表达。造模后模型组血肿周围于6h出现阳性表达细胞,1d阳性细胞计数达高峰,3d出现轻度下降,5d明显下降[模型组:6h(24.600±2.338)个,1d(115.900±2.215)个,3d(91.940±3.177)个,5d(67.900±2.261)个]。与假手术组比较差异明显[假手术组:6h(3.120±2.235)个,1d(1.360±2.097)个,P<0.01]。大承气汤组与同时间点模型组比较:6h计数无明显差异,1,3,5d均存在明显差异[大承气汤组:1d(114.440±3.239)个,3d(84.420±3.648)个,5d(51.460±3.038)个,P<0.05或P<0.01]。②血肿体积变化情况:造模后血肿于1d达到最大,3d有所变小,5d变小明显;大承气汤组在5d缩小程度与模型组比较有明显差异[大承气汤组5d(2.000±0.187)mm,模型组5d(2.480±0.148)mm,(t=4.496,P<0.01)]。但在6h,1d,3d与模型组比较血肿缩小程度差别无显著性意义。结论:大鼠脑出血后血肿周围神经元活化凋亡蛋白酶3表达明显上调;大承气汤能减少活化凋亡蛋白酶3的表达,阻止神经元的凋亡,同时也具有一定的促进血肿吸收的作用。