小鼠2.5 s神经生长因子对2,5-己二酮诱导的PC12细胞损伤的保护作用

目的 建立神经生长因子（NGF）对2,5-己二酮（HD）诱导的PC12细胞凋亡保护作用的模型,并探讨其作用机制.方法 以PC12细胞为神经元的细胞模型,将HD和不同浓度的NGF加入培养的PC12细胞中,四甲基偶氮唑盐检测细胞活性,琼脂糖凝胶电泳检测DNA断裂,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot检测p53蛋白表达,比较各组间的差异.结果 随NGF浓度增加,细胞存活率升高,差异有统计学意义（P＜0.01）;DNA断裂减少;细胞凋亡率减小（P＜0.01）;p53表达量下降（P＜0.05）.结论NGF对PC12细胞可能具有直接的神经营养作用,且可保护PC12细胞免于2,5-HD诱导的损伤以及具有抗凋亡作用.     

单唾液酸神经节苷脂对2,5-己二酮诱导的PC12细胞凋亡的影响

目的研究单唾液酸神经节苷脂(GM1)对2,5-己二酮(2,5-HD)诱导PC12细胞凋亡的保护作用,并探讨其作用机制。方法以PC12细胞为神经元的细胞模型,2,5-HD、GM1及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-K)抑制剂LY294002单独或联合处理细胞,MTT法检测细胞存活率,Giemsa染色法观察细胞形态,琼脂糖凝胶电泳检测DNA断裂,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率,免疫印迹检测蛋白激酶B(Akt)和磷酸化-Akt(P-Akt)蛋白的表达。结果GM1可以有效地改善凋亡引起的细胞形态学改变,提高细胞存活率(P<0.05),最高可提高36.35%;降低DNA断裂程度,减少凋亡率(P<0.001),最明显可降低69.36%。GM1能够促进Akt磷酸化,LY294002可以阻断这种作用。结论GM1对2,5-HD诱导的PC12细胞凋亡有保护作用。该保护作用可能是通过启动PI3-K信号通路,激活Akt及其下游信号而产生的。     

核因子-kB、p53及Bcl-2在铅诱导PC12细胞凋亡中的作用

目的 探讨核因子kB(NF-KB),p53及Bcl-2在铅诱导PC12细胞凋亡中的作用.方法 应用细胞培养、流式细胞术、RT-PCR、Western Blot的方法分析NF-kB、p53、Bel-2基因的表达情况,研究醋酸铅诱导PC12细胞凋亡及其分子机理.结果 PC12细胞经不同浓度醋酸铅(100、200和400μmol/L)处理24h后,用流式细胞仪检测其凋亡率(n=3),铅组凋亡率明显高于对照组,改变呈剂量依赖性.差异有显著性(P<0.05).RT-PCR结果显示NF-kB p65 mRNA、p53 mRNA转录水平随铅剂量升高而升高(P<0.05),两基因表达的改变呈剂量依赖性.Western Blot结果显示,表明随着铅浓度的增加,Bcl-2蛋白表达逐渐降低.结论 铅诱导PC12细胞凋亡的这种效应可能与增强NF-kB及D53基因的活性、降低Bcl-2基因的活性有关.     

2,5-己二酮对运动神经元钙稳态的影响

目的 研究正己烷代谢产物2,5-己二酮对运动神经元钙稳态的影响,探讨正己烷中毒致周围神经损伤的机制.方法 对运动神经元细胞系VSC4.1细胞不同浓度的2,5-己二酮体外染毒,用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞活性的变化;同时检测Ca^2＋-Mg^2＋ATP酶和Na^＋-K^＋-ATP酶活力.以Fluo-3/AM为荧光指示剂,激光共聚焦方法检测细胞内游离钙浓度的瞬时变化状况;用流式细胞仪检测细胞内钙平均浓度的变化.结果 经2.5、5.0、7.5、10.0、15.0、20.0 mmol/L浓度的2,5-己二酮对VSC4.1细胞染毒后与对照组比较,Ca^2＋-Mg^2＋ATP酶和Na^＋-K^＋-ATP酶的活力均下降.33.5 mmol/L的2,5-己二酮可在10 s内引起VSC4.1运动神经元细胞内钙浓度升高,40s后恢复到基线水平.VSC细胞与2,5-己二酮接触后即刻引起细胞内钙水平的增加,10 min后达到最高.结论 2,5-己二酮可能通过干扰细胞钙稳态产生神经毒性.     

锰诱导PC12细胞凋亡与P53、MDM2蛋白表达

目的 探讨锰对嗜铬细胞瘤细胞(PC12 cells)凋亡的诱导作用及与抑癌基因P53、原癌基因MDM2蛋白表达的关系.方法 以PC12细胞作为多巴胺能神经元的模型细胞,取对数生长期的PC12细胞,用含200,400,800μmol/L MnCI2的培养液分别染毒培养24,36,48 h.四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测细胞的生长情况,流式细胞仪(FMC)和原位缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡状况;用免疫细胞化学法检测细胞P53、MDM2蛋白表达强度.结果 氯化锰可呈时间和剂量依赖性抑制PC12细胞的增殖和诱导细胞凋亡,抑制率为11.8%～73.6%,凋亡率为8.72%～53.60%.免疫化学法检测结果显示,随锰浓度的增高,P53蛋白的表达增加(P<0.01),而MDM2蛋白表达下降,差异有统计学意义(P<0.01),且呈剂量依赖关系.结论 锰可诱导PC12细胞凋亡,上调P53基因的表达和下调MDM2基因的表达可能在其诱导PC12细胞凋亡中起着重要的作用.     

枸杞多糖对人白血病细胞株凋亡的影响

目的 :　探讨枸杞多糖 ( LBP- X)对人白血病 HL- 60细胞凋亡的影响。方法 :　 LBP-X与 HL- 60细胞共培养 ,MTT法检测 LBP- X对 HL- 60细胞增殖的抑制作用 ;以 DPH为荧光探针检测细胞膜流动性的变化 ;用 Hoechst332 5 8染色在荧光显微镜下观察细胞核形态学变化 ;琼脂糖凝胶电泳法和流式细胞仪检测法定性定量检测细胞凋亡。结果 :　LBP- X2 0～ 1 0 0 0 mg/L呈剂量依赖性抑制 HL- 60细胞增殖 ,且可降低 HL- 60细胞膜的流动性 ;LBP- X作用 48h后 ,荧光显微镜下细胞核固缩、凝聚和断裂 ,出现浓染致密的颗粒块状荧光 ;DNA琼脂糖凝胶电泳可见明显的“DNA条带”;流式细胞仪分析图上出现凋亡峰。结论 :　 LBP- X对诱导人白血病 HL- 60细胞凋亡有一定作用。     

神经生长因子对2,5-己二酮致运动神经元线粒体功能损伤的影响

目的探讨神经生长因子(NGF)对2,5-己二酮所致运动神经元细胞线粒体功能损伤的影响。方法用10mmol/L和20mmol/L2,5-己二酮给运动神经元VSC4.1细胞处理12h后,检测VSC4.1细胞活性,NGF的蛋白表达以及线粒体膜电位的变化;20mmol/L2,5-己二酮与VSC4.1细胞作用12h后,去除2,5-己二酮加入不同浓度的NGF,检测细胞活性和线粒体膜电位的变化。结果10mmol/L和20mmol/L2,5-己二酮与运动运动神经元VSC4.1细胞共同培养12h后,细胞活性分别下降了17%和23%;VSC4.1细胞内NGF的表达分别下降了33.5%和34%;线粒体膜电位由39.36分别下降到29.57和23.80。VSC4.1细胞与2,5-己二酮作用12h后用50ng/ml和100ng/mlNGF处理,细胞的活性增加了6.38%和23.40%;细胞线粒体膜电位也由26.03增加到30.18和31.50(P<0.05)。结论NGF可以通过改善线粒体膜电位来修复2,5-己二酮导致的运动神经元线粒体功能损伤。     

氯化锰致PC12细胞凋亡作用及其机制

目的 探讨氯化锰诱导PC12细胞凋亡的作用机制.方法 以PC12细胞为多巴胺能神经元的细胞模型,采用MTT比色法检测细胞生长情况,流式细胞术(FCM)及DNA琼脂糖凝胶电泳(AGE)检测PC12细胞的凋亡情况,免疫组化法检测PC12细胞HSP70、Survivin、Bcl-2和Bax表达情况.结果 锰能抑制PC12细胞的增殖,呈时间-剂量效应关系;并能诱导其凋亡,呈浓度依赖性;凋亡过程中Bax的表达呈浓度依赖性增强,且与凋亡之间呈正相关关系(R1=0.972,P＜0.01),而HSP70、Survivin和Bcl-2的表达呈浓度依赖性下调,且与凋亡之间呈负相关关系(R2=-0.990,R3=-0.976,R4=-0.980,p均＜0.01).结论 锰对PC12细胞的凋亡具有诱导作用,而上调Bax的表达和下调HSP70、Survivin及Bcl-2的表达可能是其诱导PC12细胞凋亡的作用机制之一.     

水翁花对过氧化氢诱导神经细胞凋亡的影响

目的探讨水翁花对过氧化氢(H2O2)诱导神经细胞PC12凋亡的影响及其作用机制。方法构建PC12氧化应激损伤模型,不同浓度的水翁花干预H2O2诱导的PC12细胞,应用流式细胞仪检测细胞凋亡率;检测细胞SOD水平。qRT-PCR法检测水翁花对miR-422a表达的影响;过表达miR-422a或抑制miR-422a表达对H2O2诱导的PC12细胞凋亡及SOD活性的影响。Western blot法测定细胞中Bcl-2、Bax的表达变化。结果 H2O2诱导的PC12细胞凋亡率升高(P<0.05),SOD活性降低(P<0.05),抑制miR-422a表达(P<0.05),而水翁花处理后,PC12细胞凋亡率降低(P<0.05),SOD活性增强(P<0.05),促进miR-422a表达(P<0.05),Bcl-2表达上调(P<0.05),Bax表达下调(P<0.05);过表达miR-422a可抑制H2O2诱导的PC12细胞凋亡(P<0.05),增强SOD活性(P<0.05);抑制miR-422a表达可逆转水翁花对H2O2诱导的PC12细胞凋亡、SOD活性的影响。结论水翁花可通过上调miR-422a表达对H2O2诱导的PC12细胞损伤发挥保护作用,其可能作用机制与抗细胞凋亡及抗氧化作用相关。     

活性氧在氯化锰致PC12细胞凋亡中的作用

目的 探讨活性氧（ROS）在氯化锰（MnCl2）诱导PC12细胞凋亡中的作用机制.方法 构建MnCl2诱导的PC12细胞模型,MTT法检测细胞存活率,流式细胞分析PC12细胞凋亡率;琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段化程度;分光光度法检测培养基中活性氧（ROS）生成量变化;化学发光法检测细胞三磷酸腺苷（ATP）生成量和Caspase-3表达量的变化;RT-PCR法检测凋亡相关基因bcl-xl和bax的表达.结果 PC12细胞存活率与MnCl2诱导浓度和诱导时间呈负相关（P＜0.01）;2 mmol/L MnCl2诱导PC12细胞36 h,细胞凋亡率明显上升（P＜0.01）;核DNA发生明显片段化;细胞ROS生成量明显增加（P＜0.001）,细胞ATP生成量受到明显抑制（P＜0.01）;基因bcl-xl表达被抑制,bax表达上升（P＜0.01）;Caspase-3在细胞凋亡中被激活（P＜0.01）.结论 MnCl2诱导的PC12细胞凋亡与ROS升高、线粒体功能破坏和激活Caspase-3有关.     

粘蛋白MUC2,MUC5AC-与卵巢转移性肿瘤

在临床妇科恶性肿瘤中,转移性卵巢癌以难以治疗而著称.转移性卵巢癌不易早期发现,许多患者在初诊时病程已到晚期,手术难以达到根治,患者往往需要术后化疗控制病情,而患者对化疗药物的抗药性更增加了治疗上的困难.来自胃、肠道的肿瘤是最常见的卵巢转移瘤,约占全部卵巢转移性肿瘤的80%左右,卵巢以外的肿瘤转移到卵巢后,其外形往往同原发性卵巢肿瘤相同,因此转移性卵巢肿瘤的诊断率不高,国外报道约45%的结肠转移性卵巢肿瘤在临床被诊断为原发性卵巢肿瘤,因此对于各种卵巢肿瘤的诊断需要特别研究.另外,临床上原发性卵巢肿瘤和转移性卵巢肿瘤的治疗原则不同,因而对于来源于胃、肠道继发性的卵巢肿瘤患者的早期诊断也是十分重要的.首先,找到原发病灶更可以肯定转移性肿瘤的诊断;其次,根据原发病灶定位,可与继发性病灶一起制定出一个较适当的治疗方案.根据一般的规律,转移性肿瘤与原发性肿瘤的组织类型是一致的,尽管分化程度可能有所不同,但组织结构基本上相同.现今有许多方法可用于原发与胃、肠道转移性卵巢肿瘤的鉴别诊断研究,如大体与组织学分类,但有时对于一些特殊病例却不一定适用,近年来单克隆抗体,如CEA,细胞角蛋白20、7等已应用于原发与肠道转移性卵巢癌的诊断之中.本文就粘蛋白MUC2、MUC5AC在卵巢转移性肿瘤诊断中的应用作较全面的综述.     

南京市江宁区2010年气象因素对SO2等大气污染物浓度的影响

目的探讨气象因素对大气污染物浓度的影响,以期建立气象因素与大气污染物浓度关系的模型。方法收集南京市江宁区2010年气象资料(日平均气压、日最高气压、日最低气压、日平均气温、日最高气温、日最低气温、日平均相对湿度、日最小相对湿度、日降水量、日平均风速、日照时数)和大气主要污染物(SO2、NO2、PM2.5)浓度资料,以气象因素对大气污染物浓度进行多元线性回归分析,建立多元回归方程。结果 SO2日平均浓度与日最高气压和日最高气温呈负相关,与最低气压呈正相关;NO2日平均浓度与最低气温呈负相关;PM2.5日平均浓度与日最小相对湿度和日平均风速呈负相关。结论气象因素的变化对于大气污染物浓度有一定影响。在污染物特征及地形地貌基本不变、总的污染物排放相对稳定的情况下,通过建立多元回归方程可以预测气象因素变化对大气污染物浓度的影响。     

5-Aza-2＇-deoxycytidine暴露对新生大鼠精子发生的影响

[目的]探讨暴露于DNA甲基化抑制剂5-Aza-2’-deoxycytidine（5-Aza-CdR）对新生SD大鼠生长发育和成年精子发生的影响。[方法]新生大鼠随机分为3组,每组24只雄鼠。自出生第3天（postnatal day3,PND3）开始经口给予5-Aza-CdR 25、250μg／kg,对照组给予等量的溶剂。连续暴露5d,最后一次暴露结束后24h,处死半数雄鼠（幼鼠。剩余部分继续喂养至12周龄（成鼠）,乙醚麻醉。取睾丸组织做病理学检查、精子头计数等,附睾做精子畸形检查。[结果]随着剂量的增加,幼鼠体重出现下降趋势,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。组织病理学发现幼鼠睾丸组织中出现空泡变性。检查发现染毒结束后继续喂养至12周的成鼠睾丸组织无明显形态和组织学变化;但每克睾丸组织精子头计数及每日精子生成量随幼年时暴露剂量增加呈现下降趋势（P〈0.05）,而精子畸形率随剂量增加呈现上升趋势（P〈0.05）。[结论]新生大鼠对DNA甲基化抑制制5-Aza-CdR生殖毒性作用敏感,低剂量短时间的暴露即可引起成年期生殖功能的异常。     

对正乙烷作业工人神经功能隐蔽性影响的初步观察

目的：探讨正乙烷对作业工人神经功能的隐蔽性影响。方法：采用WHO推荐的神经行为核心测试组合（NCTB）对接触正乙烷的作业工人3名和58名对照工人的神经功能进行测试，并测定工人尿中2，5-乙二酮浓度。结果：接触组的紧张、焦虑、困惑、迷茫消极情绪状态得分显著高于对照组。数字跨度、手提转敏捷度习惯用手、目标追踪不正确打点数两组问差异有显著性。等级相关分析发现工人尿2，5-乙二酮浓度与紧张、焦虑、困惑、迷茫呈显著正相关。结论：职业性接触正乙烷的作业工人可出现神经行为功能的改变，提示对神经功能可呈隐蔽性影响。     

《广州市控制吸烟条例》执行情况调查

目的了解《广州市控制吸烟条例》(以下称《条例》)实施半年后对居民健康行为的影响及各类场所执行情况。方法电话回访1200户居民,了解《条例》对居民健康行为的影响,通过分层抽样方法抽取10类工作场所及公共场所,对禁烟标识张贴、吸烟行为及吸烟痕迹等情况进行现场观察,并使用AM510便携式防爆智能数字粉尘仪进行30 min PM2.5的浓度测试。结果共调查1023名居民,对《条例》的知晓率为83.48%;43.70%的调查对象认为《条例》实施之后广州市公共场所的吸烟现象有所减少,吸烟者中主动减少吸烟量或尝试戒烟等有控烟意识烟民的比例则由43.23%上升为58.33%(χ2=10.69,P=0.001);仅有3.49%的观察点没有张贴禁烟标识,吸烟人数最多的是在食宿场所(61人);全市各类场所的PM2.5浓度中位数为54.00μg/m3,其中交通场所、健身场所和食宿场所高于无吸烟或烟头较少的其他场所(F=2.60,P=0.008)。结论《条例》对广州市控烟工作起到了一定的促进作用,居民控烟意识逐渐增强,社会支持环境逐步形成,但餐饮场所《条例》执行情况仍不理想,需要进一步对场所经营者及管理者开展宣传教育。     

流感世界大流行的预测与应对措施

许多人认为,1997和1999年接连发生在我国香港的H5N1和H9N2亚型禽流感事件是下一次流感世界大流行(pandemic,简称大流感)到来的前奏。这无疑给我们敲响了警钟。本文以近年来流感病毒的研究进展为基础,结合作者所在研究小组的一些科研成果,对下一次大流感究竟会在何时、何地发生,病毒株会是哪一种亚型等问题作了预测;同时提出应对措施,加强流感的监测力度和投入是当务之急。     

Determination of urinary 2,5-hexanedione in the general Italian population

Objective: Determination of the urinary levels of 2.5-hexanedione (2,5-HD) was performed in subjects belonging to the Italian general population to define the reference value for this metabolite. Materials and methods: Urine samples were collected from 123 healthy Italian subjects who had not been occupationally exposed to n-hexane or methyl-n-butyl ketone (60 men and 63 women; 53 living in urban areas and 70 living in rural areas; 36 smokers and 87 nonsmokers; 65 aged above 35 years and 58 aged below 35 years). The determinations were performed by a gas chromatography method using a flame ionization detector (FID). A quality-control step was realized by analysis of 78 of these samples by high-performance liquid chromatography (HPLC) with UV detection. Results and discussion: The distribution of 2,5-HD concentration was log-normal and the corresponding centiles at the 95% confidence interval were as follows: the 50th centile, 0.270 mg/l for men and 0.191 mg/l for women; the 75th centile, 0.352 and 0.330 mg/l, respectively, for men and women; and the 95th centile, 0.762 and 0.582 mg/l, respectively, for men and women. The reference value, calculated as the upper unilateral 95% tolerance interval at 95% of confidence, was 0.795 mg/l for men and 0.627 for women. Received: 20 May 1997 / Accepted: 14 November 1997     

2005年广州市职业人群H5N1、H9N2血清学监测

目的了解广州地区禽流感病毒H5N1、H9N2在禽类从业人群及生猪从业人群中的感染状况。方法采集广州地区部分禽类、生猪从业人员以及非从事动物相关工作的人员的全血样本,用微量血凝抑制半加敏法检测H5N1、H9N2抗体。结果共调查禽类及生猪从业人员共322名,其中禽类及生猪从业人群H9N2抗体阳性率分别为3.94%(8/203)、1.68%(2/119),两者差异无统计学意义(P>0.05),138名非从事动物相关工作的人员的H9N2抗体均为阴性,三类人群的H5N1抗体均为阴性。结论禽类从业环境是感染禽流感的危险环境,生猪饲养、屠宰等场所也可能增加感染禽流感的风险。     

Internal exposure of nursery-school children and their parents and teachers to di(2-ethylhexyl)phthalate (DEHP)

Di(2-ethylhexyl)phthalate (DEHP) is the main plasticizer for polyvinyl chloride (PVC) products. It has become widely spread in our environment and among people. DEHP is suspected to be responsible for endocrine-disruptor-like effects in mankind. Children are probably most susceptible to these endocrine effects. In this study we determined the internal exposure of nursery school children (aged 2-6 years) to DEHP and compared it to their parents' and teachers' exposure. The DEHP-metabolites mono(2-ethyl-5-hydroxyhexyl)phthalate (5OH-MEHP), mono(2-ethyl-5-oxo-hexyl)phthalate (5oxo-MEHP) and mono(2-ethylhexyl)phthalate (MEHP) were determined in first morning urine. The sum of the three DEHP metabolites in children's and in adults' urine was 90.0 and 59.1 micrograms/l respectively (median values; p = 0.074). Concentrations of the secondary metabolites 5OH-MEHP (median: 49.6 vs. 32.1 micrograms/l; p = 0.038) and 5oxo-MEHP (median: 33.8 vs. 19.6 micrograms/l; p = 0.015) were significantly higher in children than in adults. MEHP concentrations were low both in adults and children (median: 6.6 micrograms/l vs. 9.0 micrograms/l). Creatinine adjusted values should more accurately reflect the dose taken up with respect to body weight when comparing children with adults. Total creatinine adjusted DEHP metabolites in urine were significantly higher in children than in adults (median values: 98.8 vs. 50.9 micrograms/g creatinine; p < 0.0001). This also applied to the concentrations of both secondary metabolites 5OH-MEHP (55.8 vs. 28.1 micrograms/g creatinine; p < 0.0001) and 5oxo-MEHP (38.3 vs. 17.2 micrograms/g creatinine; p < 0.0001). Creatinine corrected concentrations for the monoester MEHP in children and adults were very similar (8.7 vs. 8.6 micrograms/g creatinine; p = 0.908). Based on the sum of the three determined metabolites we estimated the DEHP dose (in microgram/kg body-weight) taken up by children to be about twice as high as the dose taken up by adults. Routes of the ubiquitous exposure to DEHP remain indistinct. In children's urine the mean relative ratios of MEHP to 5OH-MEHP to 5oxo-MEHP were 1 to 7.1 to 4.9, in adults they were 1 to 3.4 to 2.1. This might indicate an enhanced oxidative metabolism in children. To date no information on the biological activity and toxicity of oxidative metabolites of DEHP is available. Since these are the major metabolites of DEHP toxicological data on these metabolites is urgently needed.     

原代培养大鼠睾丸支持细胞PCB153暴露后超氧化物歧化酶活力和丙二醛含量的时间变化特征

目的 探讨PCB153染毒后原代培养大鼠睾丸支持细胞中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量的时间变化特征.方法 原代培养18～20日龄清洁级雄性SD大鼠的睾丸支持细胞.分别加入O(溶剂对照,0.5%DMSO)、10、20、30、40...