羊栖菜多糖对SGC-7901人胃癌细胞内[Ca2+]i的影响

[目的]观察羊栖菜多糖对人胃癌细胞内Ca^2 含量的变化，揭示其诱导肿瘤细胞凋亡的机制。[方法]采用Fluo-3／AM探针标记，激光共聚焦技术观测细胞内[Ca^2 ]i。[结果]SFPS可使SGC-7901细胞内[Ca^2 ]i先升高然后下降，给CaCl2后，[Ca^2 ]i又升高。[结论]SFPS诱导肿瘤细胞凋亡是通过升高SGC-7901细胞内[Ca^2 ]i而达到的，[Ca^2 ]i升高时Ca^2 来源于细胞内钙库释放。     

羊栖菜多糖体外抗肿瘤作用及其诱导肿瘤细胞凋亡的研究

目的 通过体外抗肿瘤实验观察羊栖菜多糖(SFPS)对6种不同组织肿瘤的抑制作用及其对肿瘤治疗的组织特异性，同时揭示其作用机制。方法 采用MTT法和集落形成实验法观察SFPS的体外抗肿瘤作用；采用流式细胞仪观察SFPS对肿瘤细胞周期及细胞凋亡的影响。结果 SFPS对人胃癌细胞SGC-7901和人直肠癌CO—LO—205有较好的疗效。SFPS可阻滞SGC—7901人胃癌细胞由G0／G1期进入S期，升高细胞凋亡指数(APO)。结论SFPS对人胃癌细胞和直肠癌细胞效果较好，这一作用是通过诱导肿瘤细胞凋亡达到的。     

羊栖菜多糖诱导肿瘤细胞凋亡的研究

目的 :揭示羊栖菜多糖 (SFPS)的抗肿瘤作用机制。方法 :采用流式细胞仪观察羊栖菜多糖对肿瘤细胞周期及细胞凋亡的影响。采用Fluo-3/AM探针标记 ,激光共聚焦技术观测细胞内 [Ca²⁺ ]i。结果 :羊栖菜多可阻滞SGC-7901人胃癌细胞由G₀ /G₁期进入S期 ,升高细胞凋亡指数 (APO% )。可使SGC-790 1细胞内 [Ca²⁺ ]i先升高然后下降 ,给CaCl₂ 后 ,[Ca²⁺ ]i又升高。结论 :羊栖菜多糖通过升高肿瘤细胞内 [Ca²⁺ ]i启动肿瘤细胞凋亡机制而达到抗肿瘤的作用 ,[Ca²⁺ ]i升高时Ca²⁺ 来源于细胞内钙库释放。     

羊栖菜多糖诱导肿瘤细胞凋亡的实验研究

目的研究羊栖菜多糖(SFPS)对人白血病HL-60细胞系增殖抑制和凋亡诱导作用。方法MTT法检测SFPS对HL-60细胞增殖的抑制作用;扫描电镜、透射电镜、琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测细胞凋亡。结果SFPS对HL-60细胞具有显著生长抑制作用,并呈量效和时效关系;药物浓度为300 mg/L和500 mg/L作用HL-60细胞后,观察到典型的细胞凋亡形态学特征;DNA凝胶电泳呈现梯状条带;DNA直方图出现亚G1峰。在一定浓度范围内,SFPS诱导细胞凋亡的作用呈现浓度和时间依赖性,同时G2/M期细胞比例增多。结论SFPS抗肿瘤作用与诱导细胞凋亡和G2/M期细胞阻滞有关。     

肾衰合剂对急性肾衰竭大鼠肾脏超微结构的影响及作用机理研究

目的 观察中药复方“肾衰合剂”对ARF大鼠的防治作用，并揭示该方药的作用机理。方法 除正常对照组外，予肌注甘油造模，同时分正常组、模型组、西药维拉帕米组、中药肾衰合剂4组灌胃。观察造模24h大鼠各项指标的变化。结果 肾衰合剂及维拉帕米均能显著改善ARF大鼠的肾功能，一定程度上保护初发期ATN时肾小管上皮细胞超微结构；同时SSM显著降低血清TNF—α浓度，其作用明显优于维拉帕米。结论 肾衰合剂通过拮抗肾小管上皮细胞钙超载、抑制炎症介质释放达到减轻肾组织病变、防治A1N的功效。     

双龙丸对过氧化氢所致内皮细胞胞浆钙离子浓度变化的调节作用

本文建立了应用荧光指示剂Fura-2/AM测定培养的牛主动脉内皮细胞胞浆钙离子浓度([Ca2+]i)的方法,分别测定在正常状态下、单独加入过氧化氢(H2O2)时及同时加入H2O2和双龙丸药物血清(阳性与阴性对照组分别为心痛定及生理盐水的药物血清)时培养的牛主动脉内皮细胞胞浆钙离子浓度([Ca2+]i),探讨H2O2作用下[Ca2+]i的变化及双龙丸对这一变化的调节作用。结果:测得正常对照组内皮细胞的[Ca2+]i为96.58±14.20nmol/L,加入H2O2(0.05mmol/L)可使其[Ca2+]i增加到294.41±42.73nmol/L;双龙丸能部分拮抗H2O2升高[Ca2+]i,其高剂量组作用强于低剂量组,但均不及心痛定。实验结果证实了双龙丸能调节Ca2+代谢,具有一定的钙拮抗作用。     

补中益气汤、党参、白术含药血清对离体脾虚大鼠壁细胞胞内[Ca^2＋]i的影响

目的：探讨脾虚大鼠的微观病理状态及补脾方药血清对其的调节作用。方法：采用血清药理学方法，以第三代荧光指示剂Fluo-3／AM负载细胞，用共聚焦显微镜观察大鼠单个壁细胞胃泌素刺激后[Ca^2＋]i的动态变化。结果：睥虚大鼠壁细胞胃泌素刺激后[Ca^2＋]i升高幅度明显高于正常大鼠，达峰时间也有缩短趋势；补脾方药血清治疗后各组中的各项指标介于两者之间。结论：壁细胞胞内[Ca^2＋]i的异常变化可能是脾虚证的微观病理机制之一，Ca^2＋的异常介导可能参与了脾虚证的病理形成；补脾方药血清可不同程度恢复和逆转睥虚状态下的微观病理变化。     

丹参对血管内皮细胞活力的双向调节作用

利用人脐静脉内皮细胞离体增殖实验模型发现，在丹参浓度较低时，具有显著促进血管内皮细胞活力的作用，丹参的这种作用伴随有细胞内有游离钙离子浓度，[Ca^2 ]i的降低；但不伴随有细胞内pH的变化。当丹参浓度超过10mg／ml后，导致细胞活力的显著降低。通过分析认为，这种细胞活力的升高主要体现细胞增殖上调，而细胞活力的下降主要反映凋亡增加。丹参可能通过不同信号途径上调内皮细胞的增殖，其中包括血管内皮细胞特有的细胞周期相关信号通路，如VEGF分泌和VEGFR2基因的表达上调导致细胞增殖的信号转导通路；另一方面，丹参通过多种信号途径增加细胞凋亡。因此，丹参对于血管内皮细胞的活力具有双向调节作用。     

羊栖菜多糖对软脂酸诱导的HL-7702细胞凋亡的保护作用

目的:探讨羊栖菜多糖(SFPS)对软脂酸诱导的肝细胞凋亡的保护作用及其可能机制。方法:SFPS不同浓度(25、50、100μg/mL)预处理24h后,0.5mmol/L软脂酸(PA)作用48h诱导正常人肝细胞株(HL-7702)凋亡。MTT比色法检测SFPS对细胞增殖的影响;Annexin V-FITC标记法检测细胞的凋亡;RT-PCR法检测凋亡调控基因Bcl-2、Bax的表达并计算其比值(Bcl-2/Bax)。结果:0.5mmol/L PA处理48h的HL-7702细胞存活率下降为正常对照组的64.9%,细胞凋亡率为35.1%,Bax表达上升,Bcl-2表达及Bcl-2/Bax比值明显下降(均P<0.05);与模型组相比,SFPS不同浓度(25、50、100 ug/ml)预处理后细胞存活率逐渐升高,细胞凋亡率显著降低,Bax表达逐渐下降,Bcl-2表达及Bcl-2/Bax比值逐渐上升(均P<0.05)。结论:SFPS对PA诱导的肝细胞凋亡有较好的保护作用,其作用机制可能与调节Bcl-2、Bax基因的表达有关。     

姜黄素联合5-FU对人胃癌SGC-7901细胞作用及机制的研究

目的:探讨姜黄素联用5-氟尿嘧啶(5-FU)对人胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法:用姜黄素(20μmol/L)和5-FU(10、20、40μmol/L)单独或联合应用处理SGC-7901细胞后,MTT法检测生长、流式细胞术观察细胞周期与凋亡、酶标仪比色法检测Caspase-3/-8的活性和Western Blot法观察Bcl-2/Bax蛋白表达。结果:与对照组相比,各实验组均能显著抑制细胞增殖、促进细胞凋亡(P<0.05),姜黄素联合低/中剂量5-FU的增殖抑制率、凋亡率显著高于中/高剂量5-FU单用(P<0.05);各实验组将SGC-7901细胞的细胞周期阻滞在S期(P<0.05);各实验组Caspase-3/-8活性、Bax表达量显著增加,而Bcl-2的表达量显著降低(P<0.05),且姜黄素联合低/中剂量5-FU组的效果优于中/高剂量5-FU单用组(P<0.05)。结论:姜黄素能够增强5-FU对体外培养的胃癌SGC-7901细胞的抑制增殖和促凋亡作用,其机制与增强Caspase-3/-8活性、上调Bax表达和下调Bcl-2表达有关。     

羊栖菜研究进展概述

概述了近5年来羊栖菜生药鉴定、化学成分及其药理作用的研究进展。     

补中益气汤、党参、白术含药血清对离体脾虚大鼠壁细胞内[Ca2+]i的影响

目的:探讨脾虚大鼠的微观病理状态及补脾方药血清对其的调节作用.方法:采用血清药理学方法,以第三代荧光指示剂Fluo-3/AM负载细胞,用共聚焦显微镜观察大鼠单个壁细胞胃泌素刺激后[Ca2 ]i的动态变化.结果:睥虚大鼠壁细胞胃泌素刺激后[Ca2 ]i升高幅度明显高于正常大鼠,达峰时间也有缩短趋势;补脾方药血清治疗后各组中的各项指标介于两者之间.结论:壁细胞胞内[Ca2 ]i的异常变化可能是脾虚证的微观病理机制之一,Ca2 的异常介导可能参与了脾虚证的病理形成;补脾方药血清可不同程度恢复和逆转睥虚状态下的微观病理变化.     

狼疮定颗粒对系统性红斑狼疮患者外周血淋巴细胞凋亡及其[Ca2+]i的影响

目的观察狼疮定颗粒对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血淋巴细胞(PBLC)凋亡及其[Ca2 ]i的影响。方法55例女性SLE患者随机分成中西药组(28例)和西药组(27例)。西药组口服强的松为主治疗,中西药组在西药基础上加狼疮定颗粒治疗。两组连续治疗3个月,比较两组治疗前后PBLC在体外培养不同时间的凋亡率,以及[Ca2 ]i水平变化。结果SLE患者PBLC的0时相凋亡率明显降低,但随体外培养时间延长而增加速率变大,SLE患者PBLC的[Ca2 ]i下降;中西药组能明显改善SLE患者PBLC凋亡的异常,升高[Ca2 ]i水平,且与西药组比较差异有显著性意义(P<0.05)。结论狼疮定颗粒在调整SLE淋巴细胞凋亡异常方面与西药强的松有很好的协同作用,其作用机制可能与其能促进SLE患者PBLC胞外钙内流作用有关。     

Use of Sargassum fusiforme Extract and its Bioactive Molecules to inhibit HIV Infection: Bridging Two Paradigms between Eastern and Western Medicine

AIDS is a global pandemic that has seen the development of novel and effective treatments to improve the quality of life of those infected and reduction in the spread of the disease. While great advancements have been made in HIV/AIDS therapeutics, there is still no cure or viable vaccine in development. The high rate of HIV-1 mutation contributing to virus immune escape, combined with increase in sexual transmission and the significant clinical therapeutics side effects of the currently available treatments highlights the need for novel therapeutics with broad anti-viral activity against both CXCR4(X4) and CCR5(R5)-tropic viruses. In our search for novel modalities against HIV infection, we investigated several aqueous extracts from Traditional Chinese Medicine(TCM) collection and identified Sargassum fusiforme(S. fusiforme) as a potent inhibitor of HIV infection. Following the Western approach of drug discovery and development, we isolated several bioactive molecules from S. fusiforme and determined their mechanism of action. TCM and Western approaches to disease treatment and drug development have been shown to be complementary to each other. The former provides a rich medicinal history for natural compounds that can have clinical impact on a variety of illnesses, while the latter enables the application of chemical informatics with rational drug design approach coupled to mechanistic underpinnings of such therapeutics. This multistep paradigm is demonstrated in the example of S. fusiforme as a treatment to prevent HIV infection, as described in this review.     

泻火解毒、消瘀除痰法对脑出血大鼠钙及细胞间黏附分子-1的影响

目的探讨泻火解毒、消瘀除痰法对脑出血（ICH）大鼠钙（[Ca^2＋]i）、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）的作用及可能机制。方法将成年SD大鼠随机分为6组：正常对照组、手术对照组、模型对照组、脑清汤（NQT）大、小剂量组、清开灵注射液（QKL）对照组。胶原酶注入右侧尾壳核ICH造模,荧光示踪法检测对ICH大鼠脑细胞[Ca^2＋]i的影响,免疫组织细胞化学技术观察在ICH不同时段对ICAM-1表达的影响。结果NQT大、小剂量组及QKL对照组能显著拮抗脑细胞[Ca^2＋]i升高（P〈0．01）,显著抑制ICAM-1表达,并使其表达持续时间缩短。结论NQT可阻止钙超载的发生,精密调节细胞因子网络、阻滞细胞因子和炎症介质释放而抗炎,从而保护神经元。     

脑心通胶囊对血管性痴呆模型大鼠海马神经细胞静息态[Ca2+]i的影响

目的观察脑心通胶囊对血管性痴呆模型大鼠海马神经细胞静息态游离Ca2+浓度 ([Ca2+]i) 的影响,初步探讨脑心通胶囊治疗血管性痴呆的机制.方法采用大脑中动脉闭塞法(MCAO)制作血管性痴呆动物模型;使用胰蛋白酶消化法制备海马组织单细胞悬液,Fura-2/AM负载分离的神经细胞,双波长荧光法测定海马神经细胞内静息态[Ca2+]i.结果模型组大鼠海马神经细胞静息态[Ca2+]i为437.42±32.14nmol/L,显著高于假手术组189.83±18.57 nmol/L(P<0.05);脑心通组和喜德镇组大鼠海马神经细胞静息态[Ca2+]i为252.61±20.15 nmol/L、237.34±19.83 nmol/L,较模型组显著降低(P<0.05).结论 脑心通胶囊可降低血管性痴呆模型大鼠海马神经细胞静息态[Ca2+]i,这可能是脑心通胶囊治疗血管性痴呆的作用机制之一.     

青龙衣多糖对S180小鼠红细胞Ca2+,Mg2+-ATP酶活性及[Ca2+]i的影响

目的考察青龙衣多糖对S180小鼠红细胞Ca2 ,Mg2 -ATP酶活性及[Ca2 ]i的影响。方法青龙衣多糖对S180小鼠ip给药7 d,比色法结合试剂盒测定S180小鼠红细胞膜Ca2 ,Mg2 -ATP酶的活性,采用激光共聚焦显微镜结合Fluo-3/AM荧光探针测定红细胞内[Ca2 ]i。结果青龙衣多糖能提高S180小鼠红细胞膜Ca2 ,Mg2 -ATP酶活性(P<0.05);降低S180小鼠红细胞[Ca2 ]i(P<0.05),并且青龙衣多糖的作用呈剂量依赖性,以高剂量组的作用最佳(P<0.01)。结论青龙衣多糖通过提高S180小鼠红细胞膜Ca2 ,Mg2 -ATP酶的活性,排除离子跨膜转运障碍,稳定其能量代谢和物质代谢,有利于维持细胞内Ca2 的正常浓度。     

熊果酸体外抗胃癌细胞SGC7901机制的研究

目的探讨熊果酸(urso lic ac id,UA)体外抑制胃癌细胞SGC 7901生长的作用机制。方法体外培养人胃癌细胞株SGC 7901,M TT法观察不同浓度UA作用不同时间对细胞生长的影响;不同浓度UA(0~40μm o l/L)处理SGC 7901细胞24 h后,倒置显微镜观察细胞形态变化;荧光染料Hoechst 33258染色和流式细胞仪检测细胞凋亡情况;W estern B lotting法检测凋亡相关蛋白B cl-2和B ax的表达。结果20~40μm o l/L UA可抑制SGC 7901的生长,并呈浓度和时间依赖性,其作用12、24、36、48 h的IC50分别为(57.50±1.18)、(34.28±2.05)、(27.54±1.11)、(24.83±1.02)μm o l/L。20~40μm o l/L UA作用24 h后,SGC 7901细胞变圆,出现不同程度的漂浮;同时细胞被阻滞于G0/G1期并发生凋亡,随药物浓度升高,凋亡率增加,凋亡相关蛋白B cl-2表达减少,B ax无明显变化。结论熊果酸对SGC 7901细胞具有较强的抗肿瘤活性,其机制可能与细胞毒作用、增殖抑制作用以及下调凋亡相关蛋白B cl-2表达而促进凋亡有关。