检测弓形虫特异性IgM抗体用于弓形虫病血清学诊断

检测弓形虫特异性IgM抗体是诊断弓形虫病的有效方法,但是可出现假阳性或假阴性。其假阳性与血清中含有与弓形虫特异性IgG抗体或抗核抗体相联系的类风湿因子(RF)有关;假阴性IgM抗体则由于弓形     

间接免疫荧光试验与双夹心ELISA法检测弓形虫IgM和IgA抗体的比较

本试验是用酶标记的抗原测定弓形虫IgM和IgA抗体,与用全血清和蔗糖密度梯度离心分出的血清作间接免疫荧光测定以及双夹心ELISA(DS-ELISA)进行比较。试验结果:直接ELISA-IgM检测IgM抗体的特异性,血清组分是用蔗糖密度梯度离心分离的,被检查的分离物中有1份血清呈阳性。研究了类风湿因子(RF)的作用和在直接弓形体标记抗原法作ELISA-IgM上的特性,在78份健康实验室工作人员血清中,有15份血清带有IgM-RF抗体和高滴度的弓形虫IgG抗体;有13份患传染性单核细胞增生症的病人,用EB病毒(EBV)的IgM抗体对EBV进行检测,另外有15份血     

两种抗原检测弓形虫病IgM的效果

目的观察弓形虫P30重组抗原及可溶性抗原检测弓形虫病IgM的效果。方法建立斑点免疫金渗滤法（DIGFA）。采用2种抗原分别包被在两条硝酸纤维素膜（NC）上,与待检血清中的相应IgM抗体结合,通过金标记兔抗人IgM直接显色,以检测弓形虫病IgM。2种抗原的DIGFA分别检测弓形虫IgM抗体阳性、类风湿、支原体肺炎、血吸虫病人和正常人血清。结果两种抗原建立的DIGFA检测试剂共检测5种血清样本166份,其中弓形虫感染IgM抗体阳性病人血清38份,弓形虫P30DIGFA敏感性为92.1%（35/38）,可溶性抗原DIGFA敏感性为81.6%（31/38）,差异无统计学意义（P〉0.05）。正常人群对照血清63份,检测全部阴性,特异性为100%。检测类风湿病人血清30份、血吸虫病人血清25份及支原体肺炎病人血清10份,仅类风湿病人血清出现阳性交叉反应,其中弓形虫P30DIGFA阳性2例,可溶性抗原DIGFA阳性3例。结论弓形虫P30重组抗原检测弓形虫病人血清IgM的DIGFA试剂可用于临床早期或急性期弓形虫病的诊断。     

固相免疫吸附凝集法检测弓形虫IgM抗体

作者用抗人IgM-μ链单克隆抗体包被固相载体，以弓形虫虫体作为颗粒抗原指示剂，建立了检测弓形虫IgM类抗体的固相免疫吸附凝集法。用该方法诊断弓形虫感染的特异性和敏感性高，试验结果不受类风湿因子的干扰，是一种适于基层医疗单位应用的新的免疫学技术。     

有关先天性弓形虫病的预防问题

近年来预防和治疗先天性弓形虫病引起人们的极大兴趣,包括美、英等在内的几个国家都设想了预防规划。法国从1976年起建立了先天性弓形虫病的预防计划,包括血清学普查所有的孕妇,每月随访鉴定为血清学阴性妇女,及对妊娠期急性感染者以每天1克螺旋霉素治疗等。妊娠妇女的血清学普查在法国,妊娠达2个月时作第一次常规检测。阳性结果中93％可鉴别诊断出慢性感染和急性感染,在剩余的7％由于高IgG和/或IgM存在,需间隔3wk,用两种以上的血清学方法再区分感染是发生在妊娠期或妊娠前。以人抗IgG吸附试验或IgM免疫吸附凝集试验核实类风湿因子,鉴定出特异性的IgM抗体。     

间接ELISA检测弓形虫感染鼠NTPase-Ⅱ抗体的研究

目的建立检测小鼠血清中刚地弓形虫NTPase-Ⅱ特异性IgGI、gM抗体的间接ELISA法,探讨用于弓形虫感染早期检测的应用价值。方法以刚地弓形虫NTPase-Ⅱ融合蛋白为包被抗原建立间接ELISA法,动态检测刚地弓形虫实验感染鼠血清NTPase-Ⅱ特异性IgGI、gM抗体变化。试验设脑囊虫病、血吸虫病及肺吸虫病病人血清对照。结果小鼠血清中的抗NTPase-Ⅱ抗体IgM于弓形虫感染后第3 d开始出现阳性反应,IgG抗体于感染后第7 d开始出现阳性反应,脑囊虫病、血吸虫病及肺吸虫病病人血清特异性IgG阳性率分别为0、1.92%和0。结论间接ELISA检测弓形虫感染鼠血清NTPase-Ⅱ抗体的敏感性和特异性较高,有望应用于人感染弓形虫的早期检测。     

弓形虫IgM-抗体捕捉酶联免疫吸附法的初步探讨

<正> 本文主要报道采用羊抗人IgM(n链特异)抗体包被,加受检血清,然后加弓形虫抗原和抗弓形虫特异性多抗的IgM-抗体捕捉酶联免疫吸附法(I_gM anti-body-capture ELISA)检测抗弓形虫特异性IgM的结果。该法检测肉类加工人员,献血员阳性率分别为44.7％×(38/85)和2.6％(1/36),而用常规间接IgM-ELISA阳性率分别为62.3％(53/85)和13.9％(5/36);同时与抗核抗体阳性血清和类风湿因子阳性血清的交叉反应阳性率,捕捉法为0％(0/36),间接法为0％和42.9％(15/36),并且对其中7份捕捉法检出IgM阳性的类风温因子阳性血清经2-ME吸收试验,结果确     

弓形虫特异IgE的诊断价值

对弓形虫感染的诊断和分期,多根据IgA,IgM和IgG 3种免疫球蛋白的检测结果,而对IgE诊断意义的研究则少见。作者报告用多克隆抗人IgE血清进行改良的免疫吸附凝集试验(ISAGA)检测孕妇血清中弓形虫特异IgE抗体的结果。 检测的孕妇血清共2279份,其中1991份为未经选择的血清,其余288份为经选择的各期弓形虫感染的人血清。1991份血清先用以下试验进行筛选:弓形虫染色试验、直接凝集试验、IgG-ELISA、IgM-ELISA或直     

固相免疫吸附凝集法检测弓形虫IgM抗体

作者用抗人IgMμ链单克隆抗体包被固相载体,以弓形虫虫体作为颗粒抗原指示剂,建立了检测弓形虫IgM类抗体的固相免疫吸附凝集法。用该方法诊断弓形虫感染的特异性和敏感性高,试验结果不受类风湿因子的干扰,是一种适于基层医疗单位应用的新的免疫学技术。1材料与方法1.1抗人IgMμ链单克隆抗体由南京军区总医院全军医学检验中心武建国教授惠赠,最适包被浓度经方阵滴定确定。1.2弓形虫抗原取RH株弓形虫(山东省寄生虫病防治研究所惠赠)的速殖子接种昆明小鼠腹腔,3d后用生理盐水冲洗小鼠腹腔数次,收集腹腔液,用G3号滤器滤除宿主细胞和组织块,…     

应用青霉素酶的酶联免疫吸附试验进行弓形虫病的血清学诊断

作者用羊抗人IgG和羊抗人IgM分别与青霉素酶结合进行酶联免疫吸附试验,测定特异性抗体作弓形虫病的免疫诊断。对390例临床疑似弓形虫病患者(包括     

用特异IgG的低亲和力测定弓形虫近期初次感染

作者建立一种不同寻常的方法,通过测定弓形虫特异IgG抗体的抗原结合活力,对弓形虫近期初次感染进行血清学诊断。第一组病人为近期初次感染弓形虫的四名青年和一名两岁儿童,用间接弓形虫IgG-ELISA检测弓形虫特异IgG抗体的血清阳转作为诊断指标。这些病人血清中IgG和IgM都为阳性。第二组近期感染弓形虫为四名青年和一名六岁儿童,病人血清中抗弓形虫IgG的水平比以前提高四倍以上,抗弓形虫IgM为阳性,此外,取21名原来具有弓形虫免疫力的受试者血清。分离部分以上血清的IgG。用含有8M尿素的PBS稀释弓形虫抗原,至浓度为3μg蛋白/ml,包板,经23℃培育20小时后用含尿素的PBS冲洗两次,然后用含     

IgM IgA型抗核周因子对类风湿关节炎的诊断意义

抗核周因子 (antiperinuclearfactor,APF)被认为是诊断类风湿关节炎 (rheumatoidarthritis,RA)较为特异性的抗体 ,近年来研究较多 ,并认为APF以及抗角蛋白抗体 (AKA)、抗纤聚蛋白抗体 (AFA)同属对RA诊断具有高特异性的瓜氨酸相关自身免疫系统。国内也已有关此系列抗体的研究[1 3 ] ,但绝大多数检测的都是IgG型抗体 ,有关IgA、IgM型抗体对RA诊断价值则罕见报道。本文试通过检测此系列抗体中之一 ,即APF的IgM、IgA型抗体 ,并与IgG APF及IgM型类风湿因子 (IgM RF)比较 ,了解它们对RA的诊断价值。1　对象与方法1 1　研究对象 …     

乳胶凝集试验与间接免疫荧光抗体试验诊断弓形虫病的比较研究

作者用乳胶凝集试验与间接免疫荧光抗林试验(IFAT)对150份成人血清进行弓形虫病抗体的检测。IFAT按照Fletcher(1965)操作步骤,滴度≥1:16为阳性。乳胶凝集试验反应物用弓形虫抗原与聚苯乙烯质粒混合制成,可测出IgG和IgM抗体,血清经甘氨酸缓冲液(pH8.2)作1:4;1:8;1:16;     

微量ELISA技术在检测森脑病人特异IgM抗体中的应用

本文报告用间接微量酶联免疫吸附试验检测森脑特异IgM抗体。在37份采自病后不同时期的森脑患者血清中,共检出25例阳性。试验发现森脑特异IgM在病后1周内即以较高滴度存在,2周左右达到高峰,然后迅速下降,至5月后基本消失。未发现血清中同时存在的特异IgG对IgM检测有明显影响。通过对类风湿因子阳性血清的检测、SPA吸收试验、阻断试验、酶抗体结合物试验等,证实了检测结果的可靠性。这一方法简单、敏感、特异,适用于森脑的早期诊断。     

包虫病人血清特异性抗包虫IgG和IgM的检测及其临床意义探讨

本文报告应用IFAT法检测包虫病人血清中特异性包虫IgG和IgM的初步结果。44例正常人血清特异性IgG和IgM的假阳性率均为0％,83例包虫病患者血清特异性IgG和IgM的阳性检出率分别为96.36％和19.28％,二者有极显著性差异(P<0.01)。提示现症包虫病患者血清中的特异性抗包虫抗体主要为IgG。在16例特异性IgM阳性病人中,有9例存在包虫囊破裂,7例为肺包虫或肝肺混合包虫病患者,表明特异性IgM在包虫囊破裂时升高,肺包虫病人比肝包虫病人检出率高。提示包虫病人血清中的特异性IgM抗体水平与包虫囊的生活状态有关。     

酶联免疫吸附试验检测弓形虫体IgA抗体及其临床应用的初步研究

试用弓形虫膜抗原ELISA对先天性弓形虫感染的畸形围产儿和后天获得性弓形虫感染者进行了特导性IgA抗体检测。11例先天性弓形虫宫内感染畸形围产儿的15份标本,6份检出IgA抗体,7份同时检出IgA;IgM抗体,两份仅检出IgM抗体。8份弓形虫抗体阳性的孕妇血清皆检出较强的IgA抗体。后天获得性弓形虫近期感染者32份血清,IgA抗体阳性3份,IgA、IgM抗体阳性8份,IgM抗体阳性21份;30份慢性感染者血清未有测到IgA抗体。对照组30份抗体阴性的孕妇血清及其围产儿的脐血检测结果抗体皆为阴性。IgA抗体是弓形虫感染早期的一个重要标志物,与IgM、IgG抗体同时检测,对临床急性弓形虫感染的诊断和疗效观察有着极其重大意义。     

无锡地区3类人群弓形虫感染调查

目的　了解无锡地区类风湿性关节炎、恶性肿瘤、精神分裂症等3类人群刚地弓形虫感染情况,为后续该人群弓形虫感染防控提供数据支撑。方法　2016–2019年选择无锡地区经确诊的205例类风湿性关节炎病例、257例恶性肿瘤病例、235例精神分裂症病例作为调查对象,以250例健康体检者作为对照。采集全部研究对象人口学特征等相关数据,并采集血清。采用酶联免疫吸附试验检测研究对象血清弓形虫特异性IgG和IgM抗体水平,比较类风湿性关节炎、恶性肿瘤和精神分裂症病例与健康体检者血清抗弓形虫IgG和IgM抗体阳性率差异。结果　无锡地区类风湿性关节炎、恶性肿瘤和精神分裂症患者血清抗弓形虫IgG抗体阳性率分别为20.98%、24.12%和24.68%,均显著高于健康对照者（χ2 = 31.54、42.12和42.98,P均< 0.01）;类风湿性关节炎、恶性肿瘤和精神分裂症患者血清抗弓形虫IgM抗体阳性率分别为1.46%、2.72%和1.70%,与健康对照者血清抗弓形虫IgM抗体阳性率比较,差异均无统计学意义（χ2 = 0.06、1.52和0.21,P均> 0.05）。结论　无锡地区类风湿性关节炎、恶性肿瘤和精神分裂症患者血清抗弓形虫IgG抗体阳性率均显著高于健康体检者,后续应加强刚地弓形虫感染筛查,防止并发弓形虫感染引起的危害。     

用Sephadex G200层析血清对4种弓形虫病免疫诊断方法的评价

弓形虫感染小鼠血清经Sephadex G 200柱层析后,各层析峰(紫外线OD_(280)吸收峰)用染色试验(DT)、乳胶凝集试验(LAT)、间接荧光抗体试验(IFA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测总抗体、IgM和IgG抗体。结果显示,两类抗体分别存在于第Ⅰ峰和第Ⅱ峰,第Ⅲ峰无抗体活性。ELISA和IFA用于弓形虫病早期诊断(检测IgM)具有高度特异性和敏感性;LAT操作简便、经济快速、但敏感性稍差。IFA可取代DT用于常规个例诊断。     

弓形虫抗体免疫印迹试剂盒的研制

目的 研制敏感、特异的检测弓形虫IgM和IgG抗体免疫印迹试剂盒。 方法 收集人工感染RH株弓形虫速殖子昆明系小鼠的腹腔液，提取弓形虫胞质蛋白，采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分离弓形虫可溶性抗原，并经电泳转印至硝酸纤维膜，以无毒灵敏的四甲基联苯胺（TMB）为底物分别检测30份弓形虫IgM和28份IgG阳性血清，40份健康人血清。通过比较抗原制备方法和使用剂量、封闭剂、洗涤和稀释剂、工作浓度、作用时间以及反应带出现率，选择最佳实验条件，以敏感性、特异性、Youden指数以及稳定性作为试剂盒评价标准。 结果 用免疫印迹试剂盒检测30份弓形虫IgM和28份IgG阳性血清，敏感性分别为90.0%（27/30）和85.7%（24/28），40份健康对照者血清的弓形虫IgM和IgG抗体均为阴性，特异性均为100%，Youden指数分别为0.9和0.86。试剂盒于4℃ 保存约6个月的检测结果一致。 结论 该免疫印迹试剂盒敏感性和特异性均较高，且操作简便、快速。     

无锡地区3类人群弓形虫感染调查

目的　了解无锡地区类风湿性关节炎、恶性肿瘤、精神分裂症等3类人群刚地弓形虫感染情况，为后续该人群弓形虫感染防控提供数据支撑。方法　2016–2019年选择无锡地区经确诊的205例类风湿性关节炎病例、257例恶性肿瘤病例、235例精神分裂症病例作为调查对象，以250例健康体检者作为对照。采集全部研究对象人口学特征等相关数据，并采集血清。采用酶联免疫吸附试验检测研究对象血清弓形虫特异性IgG和IgM抗体水平，比较类风湿性关节炎、恶性肿瘤和精神分裂症病例与健康体检者血清抗弓形虫IgG和IgM抗体阳性率差异。结果　无锡地区类风湿性关节炎、恶性肿瘤和精神分裂症患者血清抗弓形虫IgG抗体阳性率分别为20.98%、24.12%和24.68%，均显著高于健康对照者（χ2 = 31.54、42.12和42.98，P均< 0.01）；类风湿性关节炎、恶性肿瘤和精神分裂症患者血清抗弓形虫IgM抗体阳性率分别为1.46%、2.72%和1.70%，与健康对照者血清抗弓形虫IgM抗体阳性率比较，差异均无统计学意义（χ2 = 0.06、1.52和0.21，P均> 0.05）。结论　无锡地区类风湿性关节炎、恶性肿瘤和精神分裂症患者血清抗弓形虫IgG抗体阳性率均显著高于健康体检者，后续应加强刚地弓形虫感染筛查，防止并发弓形虫感染引起的危害。