酶偶联法测定血清血管紧张素转换酶

目的 建立一种测定血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）的酶偶联法，方法 血清与底物马尿酸双甘肽（Ｈｉｐ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ）混合温育３０分钟，生成马尿酸（Ｈｉｐ）与双甘肽（Ｇｌｙ－Ｇｌｙ）再加入Ｌ－γ－谷氨酰－３－羧基－４－硝基苯胺（ＧＧＣＮ）和γ－谷氨酰基转移酶（ＧＧＴ），催化ＧＧＣＮ与Ｇｌｙ－Ｇｌｙ偶联，产生的３－羧基－４－硝基苯胺于４１０ｎｍ波长测定其吸收度，结果 当底物ｐＨ８．０，ＧＧＣＮ１．０ｍｍｏｌ     

血清谷胱甘肽过氧化物酶偶联连续监测法

应用偶联连续监测法测定血清谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－ＰＸ），特异性强，灵敏度高，快速、准确。本法批内ＣＶ为３．９％，批间ＣＶ４．９％。在最适条件下，反应的吸光度差（ΔＡ）４ｍｉｍ之内呈线性。胆红质高于正常１０倍不影响结果，避免溶血。测定２３９例年龄５８～８２岁健康中老年人，参考值为７．５５±１．４３μｋａｔａｌ／Ｌ。     

3-磷酸甘油醛脱氢酶偶联法测定血清醛缩酶活性

建立血清醛缩酶活性的３－磷酸甘油醛脱氢酶偶联剂测定法。用底物１，６－二磷酸果糖妄动酶促反应，连续监测ＮＡＤＨ生成速率。反应条件：温度３７℃，ｐＨ８．３，各反应物的终末浓度：三乙醇胺５０ｍｍｏｌ／Ｌ，１，６－二磷酸果糖４．５ｍｍｏｌ／Ｌ，砷酸钠１０ｍｍｏｌ／Ｌ，氧化型辅酶１６ｍｍｏｌ／Ｌ，３－磷酸甘油醛脱氢酶２５００Ｕ／Ｌ，磷酸丙糖异构酶５００Ｕ／Ｌ，乳酸脱氢酶１５００Ｕ／Ｌ，血清与试剂容积比０．４     

3—磷酸甘油脱氢酶偶联法测定血清醛缩酶活性

探讨用３－磷酸甘油脱氢酶偶联法测定血清中醛缩酶（ＡＬＤ）活性的最佳反应条件。反应体系的终末浓度；ＴＥＡ１００ｍｍｏｌ／Ｌ，ＦＤＰ４ｍｍｏｌ／Ｌ，磷惭酸０．２２ｍｍｏｌ／Ｌ，ＮＡＤＨ０．２６ｍｍｏｌ／Ｌ，ＧＤＨ≥１０００Ｕ／Ｌ，ＴＰＩ≥１５００Ｕ／Ｌ，ＬＤ≥１０００Ｕ／《Ｌ。最适ＰＨ在７．８－８．０，Ｋｍ为７．２×１０＾－３ｍｍｏｌ／Ｌ批内ＣＶ；酶活性在７．３４Ｕ／Ｌ和６５．０９６Ｕ／Ｌ时，ＣＶ分别     

3－磷酸甘油脱氢酶偶联法测定血清醛缩酶活性

探讨用３－磷酸甘油脱氢酶偶联法测定血清中醛缩酶（ＡＬＤ）活性的最佳反应条件。反应体系的终末浓度：ＴＥＡ１００ｍｍｏｌ／Ｌ，ＦＤＰ４ｍｍｏｌ／Ｌ，碘乙酸０．２２ｍｍｏｌ／Ｌ，ＮＡＤＨ０．２６ｍｍｏｌ／Ｌ，ＧＤＨ≥１０００Ｕ／Ｌ，ＴＰＩ≥１５００Ｕ／Ｌ，ＬＤ≥１０００Ｕ／Ｌ。最适ｐＨ在７．８～８．０，Ｋｍ为７．２×１０－３ｍｍｏｌ／Ｌ。批内ＣＶ：酶活性在７．３４Ｕ／Ｌ和６５．０６Ｕ／Ｌ时，ＣＶ分别为５．７％和１．４％；批间ＣＶ：酶活性在１１．８９Ｕ／Ｌ和１００．０８Ｕ／Ｌ时，ＣＶ分别为６．０％和３．３％，酶活性线性范围至少可达１８０Ｕ／Ｌ。健康人６０名，ＡＬＤ活性为４．５３±１．１７（ｘ±ｓ）Ｕ／Ｌ，男女两组均值无显著性差异。本文对ＴＥＡ－ＨＣｌ（ｐＨ８．０）、Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ８．０）和Ｃｏｌｉｄｉｎｅ－ＨＣｌ（ｐＨ７．５）三种缓冲液用于ＡＬＤ活性测定效果进行了评价，结果表明在ＴＥＡ缓冲液中所测ＡＬＤ活性最高；ＴＥＡ和Ｃｏｌｉｄｉｎｅ两种缓冲液的浓度在２５～１５０ｍｍｏｌ／Ｌ范围内对ＡＬＤ活性无影响，Ｔｒｉｓ缓冲液在５０ｍｍｏｌ／Ｌ时测得酶活性较高，缓冲液浓度过高或过低，酶活性均有所下降     

血清无机磷的酶法测定

建立了一种酶偶联测定血清无机磷的方法，方法线性范围为０～３ｍｍｏｌ／Ｌ，变异系数批内ｘ＝１．０３ｍｍｏｌ／Ｌ，ｎ＝２０，ＣＶ＝１．２１％，批间：ｘ＝１．２８ｍｍｏｌ／Ｌ，ｎ＝２０，ＣＶ＝３．７％，与钼酸铵紫外光度法相关性为ｒ＝０．９９４２，Ｙ＝０．９５０９Ｘ＋０．０５４１，参考值范围为０．９８～１．５５ｍｍｏｌ／Ｌ。     

酶速率法测定血清镁

镁是机体内许多酶．特别是激酶类的辅助因子，它对人体的各种代谢活动起了至关重要的作用。镁的缺乏或过量，都会造成机体的代谢紊乱和异常。从而导致神经肌肉和心脏的运动传导异常．出现相应的症状。因此·测定血中镁的含量，成了临床检验的一项重要指标。     

酶偶联法测定血清血管紧张素转换酶

目的建立一种测定血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）的酶偶联法。方法血清与底物马尿酸双甘肽（ＨｉｐＧｌｙＧｌｙ）混合温育３０分钟，生成马尿酸（Ｈｉｐ）与双甘肽（ＧｌｙＧｌｙ），再加入Ｌγ谷氨酰３羧基４硝基苯胺（ＧＧＣＮ）和γ谷氨酰基转移酶（ＧＧＴ），催化ＧＧＣＮ与ＧｌｙＧｌｙ偶联，产生的３羧基４硝基苯胺于４１０ｎｍ波长测定其吸收度。结果当底物ｐＨ８０，ＧＧＣＮ１０ｍｍｏｌ／Ｌ，ＧＧＴ６７ｋＵ／Ｌ时，ＡＣＥ活性与吸收度值有良好线性。５５份健康人血清ＡＣＥ（ｘ±ｓ）２８９±８３Ｕ／Ｌ，ＣＶ：批内４６％；批间４８％。１０份肉样瘤患者血清ＡＣＥ（ｘ±ｓ）７４８±３４９Ｕ／Ｌ，批内ＣＶ３９％，回收率９６％～１０３％。结论酶偶联法测定ＡＣＥ活性具有操作简便、迅速、重复性好，适用于手工操作或自动化分析，可用于诊断早期肺损伤和人类免疫缺陷病毒感染。     

血清酶测定标准化的实验研究

目的　通过酶校 (标 )准品在临床实验室中的应用 ,探讨血清酶测定标准化的新途径。方法　向参加实验室 (15 0家 )发放酶校准品 1支和血清样本 3支 ,各实验室用现行方法分别测定校准品和血清样本 ,记录检验结果 ;用校准品定标后再测定血清样本 1次 ,记录检验结果 ;计算校准品测定结果总体均值与标示值间的偏倚和校准前后血清样本测定结果精密度的变化。结果　丙氨酸氨基转移酶 (ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶 (AST)、淀粉酶 (AMY)和乳酸脱氢酶 (LD)的测定结果均值与标准品标示值的相对偏倚≤± 6 % ,分别为 3 8% ,- 1 8% ,2 3%和 - 5 2 % ;碱性磷酸酶 (ALP)、γ 谷氨酰基转移酶 (GGT)和肌酶激酶 (CK)的实验室检测结果与标准品标示值间的相对偏倚小于 2 0 % ;分别为13 7% ,- 13 9%和 - 19 2 %。在应用校准品后 ,多数项目测定结果的变异系数 (CV % )得到不同程度的改善 ,ALT由 10 %～ 4 4 %下降至 8%～ 4 2 % ,LD由 16 %～ 39%下降至 8%～ 11%。结论　我国临床实验室对血清ALT、AST、AMY和LD的测定结果有较好的向国际标准溯源性 ;使用酶校准品可改善不同分析系统间测定结果的一致性。     

用肌酐亚氨水解酶偶联谷氨酸脱氢酶的酐酶法鉴定

目的 建立适合于自动化分析的人血清和尿肌酐亚氨水解酶偶联谷氨酸脱氢酶指示系统的酶促动力学测定方法。方法 在反应体系中加入异柠檬酸脱氢酶及其作用底物异柠檬酸，再生由主反应前氨消耗的NADPH和α－酮戊二酸，其后加入镁离子络合剂CyDTA和肌亚氨水解酶的启动试剂启动反应，在此同时NADPH和α－酮戊二酸的再生反应被终止，测定NADPH于340nm处吸光度的变化，计算样品中肌酐的浓度。结果 本法测定线性范围为40－2000μmol／L，批内和常规条件下的变异系数均小于5％，回收率为98．5％，与高效液相色谱法具有良好的相关性（r=0.9930)。乳糜、黄疸、溶血、酮体、乳酸盐、临床常用的治疗药物和高至2mmol/L的氨对测定没有干扰。结论 本法操作简便、精确，推荐作为常规测定方法。     

急性中毒患者血清酶和C反应蛋白变化的临床研究

检测各种急性中毒患者血清酶和 C反应蛋白 (CRP)变化 ,报告如下。1　资料与方法1.1　病例组 :77例中毒患者诊断与分级按照文献〔1〕标准。其中 :1急性鼠药(毒鼠强 )中毒组 2 7例 ,男 14例 ,女 13例 ;年龄 12～ 81岁 ,平均 34.2岁 ;轻度中毒 7例 ,中度中毒 8例 ,重度中毒 12例 ;丙氨酸转氨酶 (AL T)升高 3例 ,肾功能受损 2例 ,低血钾 5例 ,心电图 (ECG)提示心肌损害 9例 ,脑电图 (EEG)异常2例。 2急性有机磷农药中毒组 2 5例 ,男 7例 ,女 18例 ;年龄 12～ 70岁 ;平均35 .5岁 ;轻度中毒 7例 ,中度中毒 7例 ,重度中毒 11例 ;敌敌畏中毒 1…     

脲酶和亮氨酸脱氢酶偶联法动力学测定血清或尿液中尿素

目的　建立适合于自动化分析血清和尿液尿素的脲酶和亮氨酸脱氢酶偶联的连续监测法。方法　对pH、2 酮基异乙烯酸钠、亮氨酸脱氢酶和脲酶浓度等反应条件进行实验研究 ,并对建立的方法进行评价。结果　用双试剂连续监测法 ,试剂Ⅰ :10 0mmol/LN ,N 二乙醇胺基乙酸缓冲液 (pH 8.80 ) ,含 2 酮基异乙烯酸钠 3.0mmol/L、NADH 0 .3mmol/L、亮氨酸脱氢酶 2 .0kU/L。试剂Ⅱ :试剂Ⅰ中加入脲酶 70kU/L。本法线性范围血清 0 .5～ 15 0mmol/L ,尿液 8.0～ 6 5 0mmol/L。血清和尿液的平均回收率分别为 10 2 .1%和 10 1.5 %。血清批内和批间平均CV分别为 1.0 2 %和 1.70 % ;尿液批内平均CV为 1.98%。本法 (Y)和脲酶偶联谷氨酸脱氢酶法 (X)对比相关良好 (血清Y =0 .992X +0 .0 4 0 ,r=0 .993;尿液Y =0 .990X +0 .6 1,r=0 .991)。胆红素 <32 5 μmol/L、血红蛋白 <5g/L、抗坏血酸 <80 0 μmol/L、三酰甘油 (TG) <7.5mmol/L和NH+ 4 <0 .5mmol/L对测定无明显干扰。结论　本法简便、准确、线性范围广 ,可用于常规自动分析。     

血清酶测定在急性颅脑损伤诊断中的价值

急性颅脑损伤患者的血清酶活性变化,在诊治中有否意义,是普遍关注的问题。本文主要通过对急性颅脑损伤后患者早期血清磷酸肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(L D)、谷草转氨酶酶(AST)、谷丙转氨酶酶(AL T)的活性变化的观察,探讨这些酶活性变化对急性颅脑损伤的诊断、损伤程度及预后判断的价值。1　对象和方法1.1　对象　我院2 0 0 1- 0 1～2 0 0 3- 0 6收治的各类单纯急性颅脑损伤的患者12 8例,其中男10 0例,女2 8例,年龄2～83岁,平均2 4岁。按入院时GCS计分分为3组:13～15分为轻型组4 8例,9～12分为中型组2 1例,3～9分为重型组5 9例。手术治…     

血清CK—MB活性与其酶蛋白浓度测定结果的比较

本文测定了 19例急性心肌梗死 (ＡＭＩ)病人血清ＣＫ ＭＢ酶活性及其酶蛋白浓度 ,并对其在临床中的应用进行了初步比较。1　材料与方法1 1　实验对象　门诊ＡＭＩ病人 19例 ,年龄 55～ 85,男 12例 ,女 7例 ;疾病对照组为非心肌梗死 (ＮＡＭＩ)的急诊病人 17例 ,年龄 35～ 85岁 ,男 12例 ,女 5例 ;正常对照组为健康体检之健康人 2 6例 ,年龄 2 0～ 52岁 ,男 18例 ,女 8例。1 2　仪器与试剂1 2 1　ＣＫ ＭＢ酶蛋白浓度测定　雅培ＡｘＳＹＭ全自动免疫化学发光分析仪及ＣＫ ＭＢ酶蛋白浓度测定试剂盒。1 2 2　ＣＫ ＭＢ酶活性测定　日立 7170…     

血清C反应蛋白与急性冠脉综合征的相关性研究

目的：探讨C-反应蛋白在急性冠脉综合征中的变化及相关性。方法：急性冠脉综合征组(ACS)68例．其中急性心肌梗死(AMI)30例，不稳定性心绞痛(UAP)38例，选择45例冠脉造影排除冠心病患者为对照组。测定C-反应蛋白(CRP)。结果：ACS组CRP高于对照组，其中AMI亚组CRP明显高于UAP亚组与对照组。结论：急性冠脉综合征患者C-反应蛋白升高．尤其急性心肌梗死患者，提示CRP可反应急性冠脉综合征患者炎症的变化。