石棉纤维诱导的细胞因子对肺成纤维细胞作用的研究

用肺泡灌洗法获取兔肺巨噬细胞，进行体外培养，取其上清液分别用同位素掺入法和MTT比色法测定上清液中炎性细胞因子TNF和IL－6的活性．并将上清液与人胚肺成纤维细胞（WI－38）培养，用同位素掺入法测定成纤维细胞生长增殖和胶原合成。用氯氨-T法分析肺成纤维细胞总羟脯氨酸含量，并用抗TNF抗体和IFNγ进行成纤维细胞增殖和胶原合成抑制试验。结果显示，石棉纤维能刺激AM释放TNF和IL－6，其活性分别为1198U／m、1511U／ml，均高于TiO2对照组。浓度与效应之间有剂量反应关系（P＜0.05）．石棉纤维诱导的AM上清液能促进肺成纤维细胞增殖和胶原合成，用3H－TdR掺入法，cpm均值为2669，14C－Pro掺入法cpm均值为27952，高于TiO2对照和阴性对照，HOP含量明显增高．抗TNF抗体和IFNγ能抑制肺成纤维细胞增殖和胶原告成。     

细胞因子对瘢痕成纤维细胞影响的研究进展

瘢痕组织是创伤修复的必然产物，由于某些异常因素的调控，导致成纤维细胞过度增殖，同时过度分泌胶原形成瘢痕。最新研究表明，细胞因子介导的免疫应答对瘢痕形成起到了调控作用，这标志着创伤修复的研究已进入了一个全新的阶段。     

细胞因子与病理性瘢痕成纤维细胞作用机制研究进展

病理性瘢痕包括增生性瘢痕和瘢痕疙瘩。其组织学特点为大量成纤维细胞增生，细胞外基质中胶原、蛋白多糖、糖蛋白等过度沉积、胶原纤维排列紊乱。该病发病机制与多种细胞因子有关，它们调节成纤维细胞转化、增殖、代谢、凋亡。成纤维细胞是瘢痕形成的效应细胞。深入研究细胞因子与病理性瘢痕成纤维细胞，可为临床了解病理性瘢痕发病机制和生物学治疗提供依据。     

表皮生长因子对角膜成纤维细胞生长的影响

目的　研究表皮生长因子 (EpidermalGrowthFactor,EGF)对角膜成纤维细胞生长的影响。方法　通过含不同浓度EGF的培养基培养角膜成纤维细胞 ,分别于 2 4、48和 72h用 0 .5 %台盼蓝法对每组进行细胞活力的测定。结果　 0 .1、1.0mg/L的EGF在细胞培养 48、72h后对细胞生长有一定的促进作用 (P <0 .0 5 ) ,但在 2 4h时对细胞生长无明显影响 (P >0 .0 5 )。浓度为 0 .0 1mg/L的EGF对角膜成纤维细胞生长无明显影响 (P >0 .0 5 )。结论　一定浓度的EGF对角膜成纤维细胞的生长具有促进作用     

补肾强脊颗粒对细胞因子诱导下的强直性脊柱炎成纤维细胞成骨型表达的影响

[目的]探讨补肾强脊颗粒对细胞因子诱导下的强直性脊柱炎（AS）成纤维细胞成骨型表达的影响。[方法]以体外培养的AS髋关节囊组织的成纤维细胞为实验对象,观察在细胞因子BMP-2与TGF-β的诱导刺激下,AS成纤维细胞成骨型表达标志物ALP活性、胶原含量、骨钙素含量的变化。[结果]细胞因子作用后,AS成纤维细胞的ALP活性、胶原含量、骨钙素含量较正常对照组与AS对照组有明显提高（P〈0.01）。药物作用后,补肾强脊颗粒含药血清对细胞因子诱导下的AS成纤维细胞ALP、胶原含量、骨钙素含量活性有明显的抑制作用（P〈0.01）;而兔空白血清组SASP含药血清组则作用不明显（P〉0.05）。[结论]补肾强脊颗粒可以通过抑制细胞因子对成纤维细胞成骨型标志物的影响而达到抑制成纤维细胞进一步向成骨型的分化。     

TNF-α对瘢痕成纤维细胞影响的研究

目的探讨肿瘤坏死因子(tumor necrosis factorα,TNF-α)对瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响、病理改变及其对瘢痕的作用机制,为临床预防和治疗瘢痕提供分子水平的理论依据。方法对瘢痕及正常皮肤成纤维细胞进行体外培养,采用倒置显微镜、MTT测定、流式细胞术等方法进行观察、分析,以研究细胞因子TNF-α对瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响。结果体外培养瘢痕成纤维细胞和正常皮肤成纤维细胞倒置显微镜、流式细胞术以及MTT测定结果显示,与相应的对照组相比,加入细胞因子TNF-α后,显示对细胞起明显的促增殖作用。结论细胞因子TNF-α对成纤维细胞的生长趋势与增殖活性有明显的促进作用,刺激了胶原纤维的合成、增生和沉积。但本实验中高浓度时对成纤维细胞的抑制作用表现得并不明显,而促进作用更为明显。     

兔角膜成纤维细胞的两种培养方法

角膜组织细胞培养中有关成纤维细胞培养的报道极少，而成纤维细胞在许多角膜疾病、外伤及角膜手术的修复及愈合过程中起着重要的作用。近年来，随着准分子激光屈光性角膜切削术（ＰＲＫ）被广泛接受，关于角膜成纤维细胞在ＰＲＫ后角膜愈合过程及并发症形成过程中所起的重...     

TNF-α对瘢痕成纤维细胞影响的实验研究

[摘要] 目的 探讨细胞因子TNF-α对瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响、病理改变及其对瘢痕的作用机制,为临床预防和治疗瘢痕提供分子水平的理论依据。 方法 对瘢痕及正常皮肤成纤维细胞进行体外培养,采用倒置显微镜、MTT测定、流式细胞术等方法进行观察、分析,以研究细胞因子TNF-α对瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响。 结果 体外培养瘢痕成纤维细胞和正常皮肤成纤维细胞倒置显微镜、流式细胞术以及MTT测定结果显示,与相应的对照组相比,加入细胞因子TNF-α后,显示对细胞起明显的促增殖作用。 结论 细胞因子TNF-α对成纤维细胞的生长趋势与增殖活性有明显的促进作用,刺激了胶原纤维的合成、增生和沉积。但本实验中高浓度时对成纤维细胞的抑制作用表现得并不明显,而促进作用更为明显。     

成纤维细胞超微结构的研究

本文用实验组织学的方法系统地观察了成纤维细胞的六种基本细胞形态的超微结构。发现成胶原细胞有前、中、后期三个功能阶段,中期细胞又有合成期和分泌期之分;破纤维细胞可区分出吞噬型和溶酶体型两种亚型;纤维细胞亦存在静止型和衰老型两种亚型。成胶原细胞和破纤维细胞分别是胶原合成和胶原降解的主要细胞。本文还证实了成纤维细胞来源于毛细血管旁未分化间充质细胞,少分化成纤维细胞是其他形态的成纤维细胞的始祖。成纤维细胞各种成熟的细胞形态可以互相转化,在功能上互相协调。本文提出了“成纤维细胞系统”的概念,该系统包括上述成纤维细胞的六种基本细胞形态,系统的主要机能是合成胶原蛋白和其他细胞间质,降解胶原和使结缔组织(包括疤痕组织)收缩。     

Notch1在TGF-β1诱导心肌成纤维细胞向肌成纤维细胞转化中的作用

目的：研究转化生长因子β1（TGF-β1）诱导心肌成纤维细胞（CFs）向肌成纤维细胞（MFB）转分化过程中Notch1的变化情况,探讨在此转分化过程中Notch1的可能作用.方法：体外分离培养CFs,以10μg/LTGF-β1诱导CFs向MFB转分化.实验分为对照组,TGF-β1作用24,48,72h组,采用消化法测定羟脯氨酸（HYP）含量;免疫荧光、免疫印迹法测定α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达;实时定量PCR、免疫印迹法测定Notch1 mRNA及蛋白表达.利用γ分泌酶抑制剂DAPT（75μmol/L）阻断Notch1受体活化.实验分对照组,DAPT作用24,48,72h组,检测SMA及胶原的表达变化.结果：TGF-β1作用后,与对照组相比较α-SMA,HYP表达量随TGF-β1诱导时间的增加呈上升趋势,而Notch1则呈下降趋势,均以72h最显著（P〈0.01）;加入DAPT后,与对照组相比较α-SMA,HYP表达量随DAPT作用时间增加呈上升趋势,以72h最显著（P〈0.01）.结论：TGF-β1可以诱导CFs向MFB转分化,Notch1在此过程中的表达呈下降趋势,而DAPT阻断Notch1活化后可以促进CFs向MFB转分化.     

脂多糖处理人皮肤成纤维细胞培养上清液对肝脏急性期反应物的诱导

采用生物化学分型、药敏谱分型与质粒及其限制性内切酶分型方法，对64株来自住院病人与医疗用品上的肺炎克雷伯菌进行了分型，分别分为27、24与46型。前二法具有简便、实用等优点，但用于医院感染监测时其分辨力偏低。质粒分析的操作虽稍复杂，但其分辨力却较高．7株无质粒菌株，仍需借助前二法分型．在医院感染监测中，本文运用前述3法联合分型，能较好地查明与肺炎克雷伯菌相关的医院感染病例的感染源与传播途径。     

碱性成纤维细胞生长因子对视神经损伤的保护作用

目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对视神经损伤的保护作用。方法：以30只新西兰成年白兔制作视神经挫伤模型，随机分为bFGF 800 U组、bFGF 1600 U组和对照组。伤前、伤后1h和30d，分别检测并记录闪光视觉诱发电位（FVEP），取P1波峰潜时为观察指标。结果：眼挫伤后1h，FVEP的P1波潜时明显延长，与伤前比较差异有统计学意义（P〈0.001）；伤后30d,对照组P1波潜时比急性损伤时明显延长（P〈0．05）。两个bFGF治疗组F-VEP的P1波潜时与急性损伤时比较均明显缩短（P〈0．05）并接近正常。结论：bFGF对损伤后的视神经具有显著的保护及促进功能修复作用。     

脂多糖处理人皮肤成纤维细胞培养上清液对肝脏急性期反应物的诱导

目的:观察皮肤成纤维细胞在某些条件下释放的细胞因子对肝细胞急性期反应的影响。方法：用细菌脂多糖孵育人的皮肤成纤维细胞，测定培养液中IL－1β和IL－6浓度；并用不同浓度和组合的细胞培养液、重组IL－6（rhIL－6）和地塞米松孵育鼠肝瘤H4细胞，观察白蛋白、α1酸糖蛋白、α1抗胰蛋白酶和转铁蛋白mRNA表达的变化。结果：发现细菌脂多糖刺激成纤维细胞合成IL－6，而地塞米松抑制这一作用。IL－6和细菌脂多糖孵育的成纤维细胞培养液抑制白蛋白mRNA的表达，成纤维细胞培养液。地塞米松促进α1酸糖蛋白、α1抗胰蛋白酶mRNA的表达、单用IL－6即能抑制白蛋白和转铁蛋白mRNA的表达，地塞米松加强IL－6和成纤维细胞培养液的抑制作用。结论：（1）细菌脂多糖处理的成纤维细胞能够分泌IL－6，但不分泌11－1β；（2）成纤维细胞产生的细胞因子能够调节急性期反应时的肝脏蛋白合成；（3）地塞米松抑制成纤维细胞产生IL－6，但加强其刺激急性期反应的能力。     

rhIFN-α对增生性瘢痕成纤维细胞超微结构影响的实验研究

目的 研究细胞因子rhIFN-α对增生性瘢痕成纤维细胞超微结构的影响，以探讨细胞因子对增生性瘢痕的作用机理．方法 对增生性瘢痕成纤维细胞进行体外培养，采用透射电子显微镜观察、分析，以研究细胞因子rhIFN-α对增生性瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响以及病理改变．结果 加入rhIFN-α后细胞表现为生长趋势及增殖活性被明显抑制，部分细胞见空泡样及残体样结构，线粒体肿胀，嵴溶解，并出现细胞凋亡现象、结论 细胞因子rhIFN-α对成纤维细胞的生长趋势及增殖活性有明显抑制作用，促进成纤维细胞凋亡,提示rhIFN-α是成纤维细胞负性调节因子，在增生性瘢痕的治疗中有一定的应用价值.     

碱性成纤维细胞生长因子对牙周膜成纤维细胞的影响

碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)是近年来研究较为热门的生物因子,为具有多种功能的多肽生长因子,能广泛促进来源于中胚层及神经外胚层细胞的增殖,是体内重要的创伤愈合因子之一。bFGF有主动诱导分化和加速生长作用,可以促进牙周膜成纤维细胞的分化和增殖,促进牙周组织的修复和再生。     

碱性成纤维细胞生长因子对肌成纤维细胞的作用及其对创面愈合的影响

目的　观察碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对烧伤创面内肌成纤维细胞转归的影响 ,深入探讨bFGF在组织修复中的作用机制。方法　利用大鼠 30 %深Ⅱ°烫伤模型 ,采用原位杂交与免疫组化方法检测伤后不同时间点创面愈合时组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 (caspase- 3)mRNA和蛋白的表达情况 ,并运用免疫组化法观察α -平滑肌肌动蛋白 (ASMA)、转化细胞生长因子 - β1(TGF -β1)的变化情况 ,并对照观察创面应用外源性bFGF后以上各项指标的变化。 结果　创面组织中 β -平滑肌肌动蛋白的表达早期变化不明显 ,伤后第 7天明显升高并达到高峰 ,随后逐渐减弱。创面外用bFGF ,伤后 7～ 14dASMA的表达明显增强。伤后 3h开始 ,TGF - β1的表达逐渐升高 ,至 14d略有所下降。外有bFGF后TGF - β1的表达明显增加 ,并强于单纯烫伤组。伤区局部加用外源性的bFGF ,caspasemRNA和蛋白的表达规律与单纯烫伤组相似 ,呈现先升高后降低 ,再升高样的变化。但第一次峰值低 ,第二次的峰值高于单纯烫伤组。结论　肌成纤维细胞数量的增加与凋亡过程是创面愈合的重要环节。外源性应用bFGF可能够通过提高TGF - β1的分泌 ,进而协同其他生长因子对肌成纤维细胞形成和凋亡发挥作用 ,最终影响愈合的结局。     

辛伐他汀对肺成纤维细胞和嗜酸粒细胞相互作用的干预研究

目的 :研究肺成纤维细胞 (FB)和健康人外周血嗜酸粒细胞 (EOS)共同培养对EOS存活率及产生细胞因子粒细胞 巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF)的影响 ,探讨FB在哮喘发病机制中的作用 ;比较辛伐他汀和地塞米松对FB与EOS相互作用的干预效果 ,研究辛伐他汀诱导FB凋亡并抑制EOS性炎症的作用 ,从而为治疗哮喘提供新的途径。方法 :将肺FB和健康人外周血EOS共同培养 ,分别加入辛伐他汀或地塞米松进行干预并与对照组进行比较 ,采用台盼蓝拒染法检测EOS存活率 ,酶联免疫吸附法 (ELISA)检测GM CSF含量 ,TdT介导dUTP缺口末端标记 (TUNEL)法检测FB凋亡。结果 :(1)共同培养组EOS存活率明显高于其它组 (82 2± 10 3 ) % ,加入辛伐他汀或地塞米松干预后 ,EOS存活率下降了几乎 5 0 %〔(3 6 9± 8 1) %〕 ,与其它各组比较均有显著差异 (P <0 0 0 1)。 (2 )共同培养组GM CSF含量最高为 (5 3 9 5± 88 6)ng·L-1,与其余各组比较均有显著差异 (P <0 0 0 1) ,加入辛伐他汀或地塞米松干预后其含量明显下降 ,为 (4 2 2± 4 6)ng·L-1。 (3 )辛伐他汀和地塞米松均能明显诱导FB凋亡〔(5 9 0± 2 6) %、(2 4 1± 4 6) %〕 ,与溶剂组及空白对照组相比均有显著差异。结论 :(1)肺FB在体外能明显提高外周血EOS存活率。 (2 )FB和EOS的     

维甲酸对成纤维细胞作用的体外观察

目的 探讨维甲酸治疗瘢痕的作用机理及其用于临床的可能性，方法 采用成纤维细胞体外培养技术，并将＾３Ｈ－ＴｄＲ（胸腺嘧啶核苷）掺入成纤维细胞ＤＮＡ中，研究维甲酸对体外培养成纤维细胞生长增殖，ＤＮＡ合成及超微结构的影响。结果 维甲酸对成纤维细胞生长增殖，ＤＮＡ合成有不同程度的抑制作用，呈剂量效应关系，扫描电镜和透射电镜观察显示，维甲酸成纤维细胞合成胶原有抑制作用。结论 维甲酸治疗瘢痕的作用机理可能与抑     

Echistatin对人增生性瘢痕成纤维细胞的作用研究

目的研究Echistatin对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖、凋亡及Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达的影响。方法体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞,设Echistatin处理组和对照组,MTT法、流式技术及RT-PCR法检测人增生性瘢痕成纤维细胞增殖、凋亡及Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达。结果Echistatin可明显抑制人增生性瘢痕成纤维细胞增殖,促进凋亡,降低Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达。结论Echistatin可作为防治增生性瘢痕的筛选药物。