小型香猪组织工程皮肤移植后基底膜重建的实验研究

目的研究贵州小型香猪来源的组织工程皮肤自体及同种异体移植后基底膜形成情况,为复合壳多糖组织工程皮肤临床应用提供实验依据。方法按我科已建立的方法构建猪的组织工程皮肤,然后进行自体及同种异体移植实验,观察移植的猪组织工程皮肤的存活及创面愈合情况,并于移植后1、4、8周取标本,行组织学检查和免疫组化染色,观察移植后猪组织工程皮肤基底膜形成情况。结果猪组织工程皮肤自体及同种异体移植后均存活,创面达到理想的愈合效果,组织学检查显示表皮明显增厚,表皮突明显,真皮胶原束显著增粗变密,新生血管网丰富。PAS染色基底膜带呈完整连续阳性。免疫组化染色显示:表、真皮交界处层粘连蛋白抗体免疫组化染色阳性。结论我们构建的猪组织工程皮肤自体及同种异体移植后,可获得理想的创面愈合效果,组织工程皮肤基底膜形成完整,与正常皮肤相似。本实验为复合壳多糖组织工程皮肤临床应用提供了有力的实验依据。     

BrdU单抗免疫组化法观察人工皮肤种子细胞生长

目的研究贵州小型香猪来源的组织工程皮肤自体及同种异体移植后种子细胞生长情况,为复方壳多糖组织工程皮肤临床应用提供实验依据。方法构建猪的组织工程皮肤并于移植后第1、4、8周采集标本,BrdU单抗免疫组化染色,观察移植后种子细胞存活情况。结果猪组织工程皮肤移植后8周 BrdU单克隆抗体免疫组化染色阳性。结论笔者构建的组织工程皮肤自体及同种异体移植后种子细胞存活良好。本实验为复方壳多糖组织工程皮肤临床应用提供了有力的实验依据。     

小型香猪复方壳多糖组织工程皮肤的构建及组织学特点

目的评价制备的小型香猪复方壳多糖组织工程皮肤在组织学方面的特性,为其修复皮肤缺损创面提供实验依据。方法采用传代培养的角质形成细胞和成纤维细胞作为种子细胞,I型胶原作为真皮基质。采用气—液界面方式进行培养,通过苏木精—伊红(HE)染色、比较小型香猪的体外构建组织工程皮肤与正常皮肤的组织学特征,包括表皮、真皮结构。结果制备的复方壳多糖组织工程皮肤表皮细胞增殖活跃,分层分化良好,厚约150μm,真皮层细胞生长正常,排列有序,与机体皮肤结构相似。结论复方壳多糖组织工程皮肤组织结构良好,符合新型皮肤替代物在治疗皮肤缺损时的组织学要求。     

猪肢体移植模型建立的临床病理研究

目的　在大型动物 (猪 )上建立同种异体肢体移植模型 ,探讨同种异体肢体移植中肉眼观察与组织学之间的关系 ,以及皮肤排斥反应的机理。方法　对 9只不同窝的实验猪进行异体前肢移植 ,其中 3例为未用药组 ,6例为用药组。分别在术后不同时间对移植体的皮肤进行了肉眼观察及 72次活检病理组织学检查 ,并采用S -P免疫组化法进行CD3、CD4、CD8检测。结果　术后皮肤均在不同时期发生了不同程度的排斥反应。未用药组发生了严重排斥反应 ,移植肢体在 1周内坏死。用药组在免疫抑制剂的作用下 ,移植肢体获得了长期存活。对皮肤的肉眼观察和组织学检查 ,在确定早期的排斥反应。皮肤的排斥反应中CD3均有不同程度表达(10 0 % ) ;CD4及CD8表达分别为 (2 3 6 1% )及 (9 72 % ) ,后二者主要表达在发生严重排斥反应的病例中。结论　同种异体肢体移植在免疫抑制剂的作用下可获得长期存活。肉眼观察可以观察早期的排斥反应 ,病理组织学检查是诊断排斥反应的可靠依据。皮肤的排斥反应可能主要为一种T细胞介导的细胞免疫反应 ,T淋巴细胞亚群的监测有助于判断移植肢体的存活和诊断排斥反应的发生     

同种异体皮瓣移植实验——一种新的动物模型

为了研究同种异体皮瓣移植事的免疫排斥反应，作者利用皮瓣带蒂（带自体血供）转移这一不同于其它器官组织移植的特点，制作了以同品系大白鼠为材料同种异体皮瓣移植动物模型，初步实验观察表明，这一模型能够延长同种皮瓣移植后的存活天数，其存活时间随皮瓣断蒂的时间的推迟而相应延长，其机理可能是产生了特异性免疫无应答而减弱了排斥反应的强度，该模型为进一步深入研究提供同种皮瓣移植事免疫耐受产生的机制提供了一条新途径，     

深低温冷冻对同种异体气管移植排斥反应的实验研究

目的 探讨深低温冷冻同种异体气管移植细胞凋亡与移植排斥的关系。方法 获取兔颈部气管移植组及新：鲜气管冷冻保存1个月后行同种异体移植，实验分为冻存气管移植组、自体气管移植组及新鲜气管移植组。于术后第2、7、30天分别取移植气管进行病理学检查，采用脱氧核苷酸原位末端标记法(TUNEL)检测移植气管中的凋亡细胞水平。结果 病理学检查显示冻存气管移植组在术后第2、7、30天时与自体气管移植组无明显差异。TUNEL法显示冻存气管移植组于术后第2、7天时，凋亡细胞密度较自体气管移植组高，移植术后30天，与自体气管移植组比较无显著性差异，与新鲜气管移植组比较，有显著差异。结论 深低温冷冻保存能降低同种异体移植气管的排斥反应。     

新鲜异体和自体骨软骨移植实验研究

目的评价异体和自体骨软骨移植的修复软骨缺损的差别。方法采用20只成年新西兰兔,造成直径4mm的软骨缺损,采用压配技术进行移植修复;术后12周行大体观察、HE染色、番红O染色行组织学检查,用改良的Wakitani标准评分,并行透射电镜检查。结果新鲜异体与自体骨软骨移植均成活,得分相近。结论新鲜异体和自体骨软骨移植在修复兔的软骨缺损,在组织学上无明显差异,新鲜异体骨软骨可以作为移植的供体。     

皮肤替代物的研究进展

烧伤创面愈合是一个十分复杂的过程,自体皮肤组织是最理想的烧伤创面修复物,但对于大面积深度烧伤的病人,常因自体皮源的不足,使得自体皮肤移植在应用上受到严重的限制;而生物敷料包括同种异体皮、异种皮和羊膜等各类暂时性皮肤替代物,由于抗原性及其他性能上的缺陷,只能在较短的时间内起到创面保护作用.近些年,由于分子生物学和组织工程技术的发展与应用,使得表皮替代物、真皮替代物和复合皮肤替代物成为了研究的热点.本文就皮肤替代物的研究进展作一简要综述.     

两种材质异体骨移植治疗创伤性骨缺损的临床效果

目的探讨大段异体骨复合自体骨和异体松质骨颗粒复合自体红骨髓移植治疗四肢创伤性骨缺损的方法及临床效果。方法自2002～2006年,我们应用同种异体骨移植治疗创伤所性骨缺损及骨不愈合38例,根据骨缺损的部位及程度选择不同的方法,其中大段同种异体骨复合自体骨治疗大段骨缺损16例,同种异体松质骨颗粒复合自体红骨髓移植治疗局限性骨缺损22例。结果获得10个月以上随访38例,37例骨性愈合。大段异体骨复合自体骨移植15例骨折愈合,愈合时间10～25个月,平均11.5个月,感染复发1例。局限性骨缺损松质骨颗粒复合自体骨髓移植22例骨折全部愈合。愈合时间3～13个月,平均6个月。结论同种异体骨为一种良好骨植入材料,长段异体骨复合自体骨后可用于创伤造成的大段骨缺损。异体松质骨颗粒复合自体红骨髓移植可用于修复陈旧性骨折骨不愈合和局限性骨缺损。     

脱细胞异体真皮基质在12例小儿疤痕整形中的应用分析

目的：探讨脱细胞异体真皮基质与自体头皮刃厚片复合移植修复在小儿疤痕整形创面的应用疗效。方法：12例小儿疤痕切除后应用北京桀亚公司提供的J-1型脱细胞异体真皮基质与自体头皮刃厚皮片复合移植修复创面14处。结果：12处创面全部愈合,移植皮片生长良好,疤痕增生不明显,皮肤弹性较好,功能和形态良好。有2处由于固定不当出现部分坏死,经换药处理出现坏死处疤痕愈合。结论：脱细胞异体真皮基质与自体头皮刃厚皮片复合移植修复小儿疤痕整形创面愈合良好,无疤痕增生,皮肤外观功能满意,解决了小儿疤痕整形供皮的困难。     

异种去细胞真皮支架与自体皮片复合移植的临床应用

研制一种去细胞的异种真皮支架用于修复深度烧伤的切痂创面。方法选用健康小白猪的全层皮,经特殊处理去除皮皮及真皮中各种细胞成分,制备成保基底膜的网状真皮支架。采用两步法将异种去细胞真皮支架与自体薄皮片复合植于预实验动物,并进而应用于临床深度烧伤的切痂创面,共３２例。     

负压引流术治疗深度难治性创面疗效观察

【摘要】目的探讨负压引流术（VSD）在深度难治性创面修复中的应用效果。方法对本院2010年7月-2011年10月收治的19例深度组织缺损患者实施负压引流术治疗,观察患者的临床治疗效果。结果19例患者使用VSD次数为l～6次,平均2．2次;治疗时间2～7周,平均3周;患者创面修复情况均完全修复;无患者发生死亡及严重并发症。经过2个月随访,19例患者创面外观及功能均恢复良好。11例（57．89％）患者创面使用VSD后,创面与创腔显著缩小,经换药治疗后愈合良好;5例（26．32％）患者创面使用VSD后,肉芽组织生长良好,进行游离植皮,创面愈合良好;3例（15．79％）患者创面使用VSD后,创腔闭合良好,进行皮瓣移植,创面愈合良好。结论负压引流术可以有效清除局部渗出物与创面的坏死组织,显著改善血液循环,加速创面的愈合,对深度难治性创面治疗效果良好。具有重要的临床应用价值。     

犬异位移植气管内骨形态发生蛋白诱导软骨再生作用的研究

目的比较研究骨形态发生蛋白-2在犬的自体、异体、冷冻异体气管移植体内诱导软骨再生的作用。方法54只杂种犬随机等分为3组,分别为自体移植组、异体移植组、冷冻后的异体移植组。3组分别于颈部切除4环气管段作为移植体,植入骨形态发生蛋白．2后埋入腹腔大网膜中。各组分别植入不同的气管移植体。术后5周处死实验动物,通过对标本进行组织学观察、碱性磷酸酶活性和钙含量测定,对各组的新生软骨进行观察和定量分析。结果①半定量法组织学评分,自体移植组、异体移植组、冷冻后异体移植组分别为1．68±0．27、5．57±0．72、1．93±0．24,3组结果有统计学差异（F=152．717,P〈0．001）,自体移植组、异体移植组与冷冻后的异体移植组差异均有统计学意义（P〈0．05）,而自体移植组和冷冻后的异体移植组差异无统计学意义（P〉0．05）。②各实验组骨形态发生蛋白．2植人区均可见新生软骨细胞和软骨岛,自体移植组、异体移植组、冷冻后的异体移植组的新生软骨100倍视野下像素面积分别为2573．6±738．4、1691．3±743．6、2482．9±827．5,组间差异有统计学意义（F=5．711,P〈0．05）,自体移植组、异体移植组与冷冻后的同种异体移植组差异均有统计学意义（P〈0．05）,而自体移植组和冷冻后的异体移植组差异无统计学意义（P〉0．05）。③碱性磷酸酶活性和钙含量：自体移植组[（0．42±0．03）U／mg,（5．48±1．15）mg／g]、冷冻后的异体移植组[（0．42±0．05）U／mg,（5．03±0．91）mg／g]与异体移植组[（0．30±0．04）U／mg,（3．57±0．98）mg／g]差异均有统计学意义（P〈0．05）,自体移植组与冷冻后的异体移植组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论骨形态发生蛋白-2能在气管移植体内有效地诱导出新生软骨,在深低温冷冻后的异体气管移植体内的作用效果与自体气管移植体内相似,明显优于异体气管移植体。     

采用综合措施及分期修复方法修复髌腱部复合组织缺损

目的：报道一种外伤性髌腱部复合组织缺损采用显微外科技术分期进行创面修复和功能重建的步骤及方法。方法髌腱部创面一期急诊清创,用负压封闭引流技术封闭创面,控制创面炎症后游离股前外侧皮瓣吻合腓肠内侧血管修复髌腱部创面,3个月后应用腓肠肌内侧头肌腱前移重建髌韧带。结果髌腱部创面行游离股前外侧皮瓣修复术后均一期愈合,二期用腓肠肌内侧头肌腱前移修复髌韧带,膝关节伸直功能恢复满意,无髌腱再断裂并发症。结论采用综合措施及分期修复方法可以完成外伤性髌腱部复合组织缺损的修复重建,术式操作简单、再造髌腱外形结构接近正常,实用性强,为髌腱部复合组织缺损修复提供了一种良好的方法。     

封闭负压引流技术联合人工真皮修复慢性创面的临床研究

目的 观察封闭负压引流技术（VSD）联合人工真皮修复慢性创面的临床疗效.方法 66例慢性创面患者随机分成两组.对照组33例：予抗感染,改善微循环,聚维酮纱外敷,经换药治疗创面未愈者行植皮或皮瓣修复术.观察组33例：予抗感染,改善微循环,早期应用VSD处理创面,创面有新鲜肉芽组织后植入人工真皮（皮耐克）,待其肉芽生长满意后行植皮术.结果 对照组平均住院天数（55.3±1.2）天,其中植皮或皮瓣修复术修复30例,创面换药愈合者3例,创面愈合后疤痕增生明显.观察组平均住院天数（31.6±1.2）天,其中20例患者创面较大,经外敷人工真皮,肉芽生长满意后予植皮手术,其余患者经植入人工真皮换药,创面治愈后外观满意,疤痕增生轻或不明显.结论 VSD联合人工真皮修复慢性创面可以有效的促进慢性创面愈合,减少疤痕增生,缩短住院时间.     

犬颜面复合组织移植及皮肤附属器变化的观察

目的建立犬颜面部复合组织移植实验动物模型,进一步研究组织瓣移植后皮肤及附属器的变化。方法用3只杂种犬进行解剖学研究,观察犬头颈部动静脉血管的走行、大小及变异情况。2只比格犬作异体移植[免疫抑制剂使用环孢素A（Cs—A）和强的松],术后70、100d于移植皮瓣与受体皮肤吻合处取材,光镜和电镜观察皮肤及附件变化。结果犬头颈部血管走行与人极为相似。比格犬术后皮瓣血运良好,无毛发脱落,皮瓣观察窗毛发生长,1例术后4d见皮瓣红斑,调整Cs—A用量后未再现排斥反应;70、100d,光镜见附属器较正常增多、结构正常;电镜见毛囊部分线粒体肿胀,汗腺线粒体结构正常,无明显炎性细胞浸润。结论Cs—A和强的松能有效预防和控制犬颜面移植后排斥反应。移植后皮肤毛囊、皮脂腺和汗腺数量会增多。     

人工真皮修复慢性创面疗效观察

目的 探索慢性创面治疗方法.方法 回顾性分析我院2008年至2011年62例慢性创面患者的治疗方法.将其随机分成两组:对照组32例,予抗感染,改善微循环,聚维酮纱外敷,经换药治疗创面未愈者行植皮或皮瓣修复术;观察组30例,予抗感染,改善微循环,早期清创,感染控制后外敷人工真皮(皮耐克),诱导真皮重建,促进肉芽组织生长和创面愈合,创面较大者待其肉芽生长满意后行植皮术.结果 对照组平均住院天数( 58.2±1.3)d,其中植皮或皮瓣修复术修复18例,创面换药愈合者14例,创面愈合后疤痕增生明显.观察组平均住院天数( 31.4±1.1)d,其中7例患者创面较大,经外敷人工真皮,肉芽生长满意后予植皮手术,其余患者经外敷人工真皮、换药,创面治愈后外观满意,疤痕增生轻或不明显.结论 应用人工真皮可促进慢性创面愈合,减少疤痕增生,有效缩短住院天数,降低手术率和手术风险,值得借鉴、推广.