新型Topo I抑制剂CPUY013对胃腺癌细胞BGC823的体内外作用

探讨CPUY013在体内外对人胃腺癌BGC823细胞的抗肿瘤活性及其机制。采用MTT法、克隆原形成法检测CPUY013对BGC823细胞增殖的抑制作用；体外实验以pBR322 DNA为底物，依据质粒的松弛和超螺旋形式在琼脂糖电泳上泳动度对药物抑制解旋的作用进行定性分析。用AO/EB荧光染色技术、DNA凝胶电泳及JC-1线粒体膜电位检测试剂盒检测细胞凋亡。口服给药CPUY013后观察其对裸鼠移植瘤的生长抑制作用；用流式细胞术观察CPUY013对BGC823细胞周期的影响；采用Western blotting分别检测CPUY013处理后的BGC823细胞中Topo I及凋亡相关蛋白表达的改变。结果表明，CPUY013呈明显的剂量依赖性抑制BGC823细胞的增殖。随着剂量的增加，CPUY013对Topo I松弛活性的抑制趋势增强。100 μmol·L^-1 CPUY013 和拓扑替康(TPT)对Topo I松弛活性的抑制呈现相似的变化趋势。CPUY013可使大部分BGC823细胞阻滞在S期，并诱导细胞凋亡；出现DNA片段化，亚G1峰显著增加，线粒体膜电位降低，荧光染色后出现凋亡细胞的特征性改变等。同时，CPUY013能明显抑制BGC823裸鼠移植瘤的生长，150 mg·kg^-1剂量组的瘤重抑制率为62.1%。CPUY013使BGC823细胞内Topo I和bcl-2蛋白表达均有所下调， p53和bax蛋白表达有明显上调趋势， bcl-2/bax比值明显降低， caspase-3蛋白表达增高。新型Topo I抑制剂CPUY013在体内明显抑制移植瘤的生长， 体外可诱导细胞凋亡从而抑制BGC823细胞增殖， 其机制可能与抑制Topo I， 从而下调bcl-2，上调bax和p53蛋白的表达有关。     

丹参酮Ⅰ对人胃腺癌细胞SGC-7901 EIF2a和EIF3a基因表达的调控作用

目的分析丹参酮Ⅰ对人胃腺癌细胞SGC-7901真核翻译起始因子2a(EIF2a)、真核翻译起始因子3a(EIF3a)基因表达的调控作用。方法体外培养SGC-7901人胃腺癌细胞株,经丹参酮Ⅰ干预后,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法测定EIF2a和EIF3a mRNA水平;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定丹参酮Ⅰ对SGC-7901细胞株增殖的影响,采用流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡率。结果不同质量浓度丹参酮Ⅰ干预后SGC-7901细胞株EIF2a mRNA和EIF3a mRNA降低,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);EIF2a mRNA与EIF3a mRNA比较,丹参酮Ⅰ1μg/mL>5μg/mL>10μg/mL(P<0.05)。丹参酮Ⅰ1,5,10μg/mL组细胞培养不同时间A值低于空白对照组(P<0.05),抑制率高于空白对照组(P<0.05);不同时间A值比较,丹参酮Ⅰ1μg/mL>5μg/mL>10μg/mL;不同时间抑制率比较,丹参酮Ⅰ1μg/mL<5μg/mL<10μg/mL(P<0.05)。丹参酮Ⅰ不同质量浓度组G1期细胞比例高于空白对照组(P<0.05),S期细胞比例低于空白对照组(P<0.05);G1期细胞比例丹参酮Ⅰ不同质量浓度组对比,丹参酮Ⅰ1μg/mL<5μg/mL<10μg/mL;S期细胞比例丹参酮Ⅰ不同质量浓度组对比,丹参酮Ⅰ1μg/mL>5μg/mL>10μg/mL(P<0.05),丹参酮Ⅰ1,5,10μg/mL组细胞凋亡率均高于空白对照组(P<0.05),不同质量浓度组丹参酮Ⅰ细胞凋亡率比较,丹参酮Ⅰ1μg/mL<5μg/mL<10μg/mL(P<0.05)。结论丹参酮Ⅰ可通过下调人胃腺癌细胞SGC-7901 EIF2a和EIF3a基因表达,抑制癌细胞增殖,促进肿瘤细胞凋亡。     

红海杆菌属海洋细菌产物Blue-Ⅰ对人胃腺癌细胞生长的影响

目的研究一种新的红海杆菌属(Rhodomari-nobacter)海洋细菌所产生的次级代谢产物Blue-Ⅰ是否抑制胃腺癌细胞生长。方法用MTT法测得Blue-Ⅰ对人胃腺癌细胞MCG803的IC50;单细胞凝胶电泳观察MCG803细胞是否发生DNA损伤;用Hoechest33258染色法和流式细胞仪检测MCG803细胞凋亡及细胞周期的改变。结果Blue-Ⅰ抑制MCG803细胞的生长,IC50为(4.6±1.1)mg·L-1;Blue-Ⅰ引起MCG803细胞基因组的降解,2.5,5和10mg·L-1Blue-Ⅰ处理后MCG803细胞彗星实验的拖尾率由对照组(4.2±1.2)%上升到(23.2±4.9)%,(51.4±6.9)%和(68.7±6.5)%,拖尾细胞的平均尾长随着处理浓度的升高而显著升高;用Hoechest33258染色,观察到Blue-Ⅰ引起MCG803细胞核呈典型的凋亡形态;经流式细胞仪分析,2.5,5和10mg·L-1的Blue-Ⅰ处理24h,凋亡细胞率分别由对照组的(3.5±0.6)%上升为(11.4±3.5)%,(32.4±4.9)%和(50.7±6.6)%。Blue-Ⅰ还能导致MCG803周期细胞比例发生改变。结论Blue-Ⅰ具有抑制胃腺癌细胞增殖的作用,其机制可能主要是通过诱导肿瘤细胞凋亡。     

四嗪二甲酰胺对肺癌细胞株A549的体内外作用

为了观察四嗪二甲酰胺(ZGDHu-1)体外抑制肺癌细胞株A549增殖、诱导细胞凋亡和体内抗肿瘤活性的作用及其机制，将不同浓度的ZGDHu-1与A549细胞在体外培养，用台盼蓝染色、SRB法、5′-溴-2′脱氧尿苷-ELISA法，观察ZGDHu-1对A549细胞增殖的作用；用细胞形态学、DNA凝胶电泳、DNA含量及细胞周期分析、Annexin V/PI双标记、Hoechst 33258荧光染色等技术检测细胞凋亡。腹腔注射ZGDHu-1后观察其对裸鼠移植瘤生长的抑制作用。用RT-PCR和流式细胞术观察A549细胞bcl-2，bax，p53基因和蛋白质的表达改变。结果表明，ZGDHu-1能抑制A549细胞的增殖和活力，呈现作用时间和剂量的依赖关系。A549细胞经ZGDHu-1作用后，大部分细胞阻滞于G₂-M期；出现DNA片段化，亚G₁峰显著增加，Annexin V+/PI-表达升高，Hoechst 33258荧光染色后出现凋亡细胞的特征性改变等。ZGDHu-1以10，20及40 mg·kg^-1剂量给裸鼠体内用药14 d后，移植瘤生长抑制率分别为43.7%，56.9%和60.0%。A549细胞经ZGDHu-1作用后，bcl-2基因和蛋白有所下调，但主要是上调bax基因和蛋白，导致bax/bcl-2比值明显增高，p53基因和蛋白表达也上调，均呈现剂量依赖性。ZGDHu-1在体内能明显抑制移植瘤的生长，体外通过诱导细胞凋亡抑制A549细胞增殖，其机制可能与上调bax和p53基因的表达有关。     

戊地昔布对人胃癌细胞生长的抑制作用

目的　探讨选择性环氧化酶 2 (COX 2 )抑制剂戊地昔布对人胃癌BGC 82 3细胞的作用及其作用机制。方法　用MTT法检测戊地昔布对人胃癌BGC 82 3细胞生长的作用 ,用流氏细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期分布 ,用激光共聚焦显微镜、透射电镜和DNA片段进一步检测细胞凋亡 ,用乳酸脱氢酶 (LDH)试剂盒测定BGC 82 3细胞的LDH含量。结果　戊地昔布 (2 5～ 4 0 0 μmol·L-1 )可时间和浓度依赖性抑制人胃癌BGC 82 3细胞的生长 ,作用 72h后 ,对细胞生长抑制率可达 2 4 0 %～ 92 0 % ,凋亡率由 (2 6± 0 7) %增加到 (7 6±1 5 ) %～ (1 6 5± 1 5 ) %。 1 0 0～ 4 0 0 μmol·L-1 也降低增殖指数 ,减少细胞周期S期细胞 ,增加G0 /G1 期细胞。随浓度增加 ,戊地昔布引起的LDH释放率有增加趋势 ,但只有 4 0 0μmol·L-1 戊地昔布可显著增加LDH释放率。结论　戊地昔布可通过诱导凋亡和细胞周期停滞而抑制人胃癌BGC 82 3细胞生长 ,4 0 0 μmol·L-1 戊地昔布抑制BGC 82 3细胞生长作用与细胞坏死有关     

姜黄素对胃癌BGC-823细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用

目的探讨姜黄素对胃癌BGC-823细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法采用MTT法检测姜黄素对胃癌BGC-823细胞的增殖抑制作用;流式细胞术检测姜黄素对胃癌BGC-823细胞凋亡的影响;Hoechst 33258荧光核染色法观察姜黄素对胃癌BGC-823细胞的形态学改变的影响。结果姜黄素80μmol·L-1和160μmol·L-1剂量在24、48和72 h均可显著抑制胃癌BGC-823细胞对MTT的摄取能力(P0.05或P0.01),并呈现一定的时间依耐性;姜黄素20μmol·L-1和40μmol·L-1剂量在短时间内对胃癌BGC-823细胞摄取MTT的能力无显著作用,但随作用时间的增长,也表现出显著的抑制作用(P0.05);流式细胞术和Hoechst 33258荧光核染色法结果表明姜黄素40、80和160μmol·L-1剂量均可显著提高胃癌BGC-823细胞的凋亡率(P0.05或P0.01)。结论姜黄素可能通过介导胃癌BGC-823细胞凋亡而发挥其抑制肿瘤细胞增殖的作用。     

MEK抑制剂CQN系列化合物对A549细胞体外抗肿瘤作用

目的观察丝裂原激活蛋白激酶的激酶(MEK)抑制剂CQN系列化合物对A549细胞体外抗肿瘤作用。方法采用非小细胞肺癌A549细胞(K-ras突变)体外抗肿瘤增殖抑制实验对9个CQN系列MEK抑制剂进行筛选,得到具有显著抗肿瘤活性的化合物。通过流式细胞术检测化合物对细胞周期和凋亡的影响;并通过ELISA法检测化合物对肿瘤发生关键蛋白ERK1/2磷酸化的抑制作用;通过细胞划痕实验检测化合物对细胞迁移能力的影响。结果细胞增殖实验筛选出高活性化合物CQN-4和CQN-5,两者的体外抗A549细胞增殖抑制活性与对照药曲美替尼(trametinib)相当。CQN-4和CQN-5可将A549细胞阻滞于G1期,与对照相比可使细胞凋亡率明显增加(P<0.01),且呈浓度依赖性。与对照相比,CQN-4和CQN-5对A549细胞ERK1/2磷酸化均有抑制作用(P<0.01),且具有浓度依赖性。细胞划痕愈合实验显示CQN-4和CQN-5对A549细胞迁移有显著的抑制作用,且具有浓度依赖性。结论 MEK抑制剂化合物CQN-4和CQN-5对A549细胞具有显著的体外抗肿瘤活性。     

联合化疗对腺样囊性癌细胞作用的实验研究

目的观察体外应用羟基喜树碱(HCPT)、平阳霉素(PYM)两种药物单用和两两联合应用对人腺样囊性癌Acc-M细胞的生长抑制作用.方法采用MTT法研究用药前后细胞增殖活性的影响,用流式细胞仪观察细胞凋亡及细胞周期变化.结果①两种药单用及两药合用对细胞均有很好的抑制作用,且以HCPT和PYM合用最强.②HCPT和PYM单用和合用可使细胞的群体倍增时间显著延长,克隆形成率降低,细胞凋亡率增加,以联合用药为佳.结论HCPT、PYM单独及联合用药均对Acc-M细胞在体外有很好的抑制作用且与以联合应用效果更佳.     

雷公藤内酯醇体内外对HL-60细胞作用的研究

目的探讨雷公藤内酯醇(triptolide,TPL)在体内外对人髓系白血病细胞株HL-60的作用。方法运用MTT比色法检测TPL对HL-60细胞的增殖抑制作用,采用TdT酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测TPL对HL-60细胞的诱导凋亡作用;建立HL-60裸鼠异种移植瘤模型,观察经TPL治疗后的肿瘤抑制率。结果在体外,TPL对HL-60细胞的增殖具有明显的抑制及诱导凋亡作用,呈时间和剂量依赖性;在体内,TPL可抑制HL-60细胞裸鼠异种移植瘤生长,抑制率最高可达53.5%。结论TPL在体内外均可抑制HL-60细胞增殖,并诱导其凋亡。     

千金子Ⅰ号体内外抗肿瘤药理作用的实验研究

目的　观察千金子Ⅰ号体内、外抗肿瘤活性及对免疫器官的影响。方法　体外药效试验用MTT法 ,观察千金子Ⅰ号对人宫颈癌细胞 (HeLa)增殖作用的影响 ;体内用小鼠移植性肿瘤 ,采用荷瘤小鼠瘤重、抑瘤率检测千金子Ⅰ号对肉瘤 180 (S180 )和艾氏腹水癌 (EAC)的抑制作用 ;通过检测胸腺指数、脾脏指数等指标观察千金子Ⅰ号对免疫器官的影响。结果　千金子Ⅰ号体外对HeLa细胞的增殖有显著的抑制作用 ;对荷瘤小鼠肉瘤 180 (S180 )和艾氏腹水癌 (EAC)也有抗肿瘤活性。结论　千金子Ⅰ号具有一定的体内外抗肿瘤活性 ,同时对免疫功能又无影响     

新疆胀果甘草粗提物和精制物对宫颈癌细胞的影响

目的研究新疆胀果甘草(Glycyrrhiza inflata Batalin)粗提物和精制物体外抗宫颈癌的活性。方法利用超声辅助乙醇对新疆胀果甘草进行粗提取,得到粗提物后,进一步利用大孔树脂柱层析法对粗提物进行精制,得到精制物,并利用紫外分光光度法对粗提物及精制物总黄酮的含量进行测定,测得粗提物总黄酮含量为5.6%,精制物总黄酮含量为56.4%。将粗提物和精制物分别作为试药,顺铂为阳性药。采用人宫颈癌HeLa和SiHa细胞作为体外实验对象,用MTT法测定对宫颈癌细胞抑制率,用流式细胞仪测定胀果甘草精制物对人宫颈癌细胞的凋亡作用。结果新疆胀果甘草粗提物和精制物均能明显抑制宫颈癌HeLa和SiHa细胞的生长,且2种药的抑制效应呈时间和质量浓度依赖性,但在同一质量浓度下,精制物的抑制率更高。流式细胞测定结果显示,甘草粗提物、精制物能够显著诱导宫颈癌HeLa和SiHa细胞凋亡。结论新疆胀果甘草粗提物和精制物能够有效抑制宫颈癌细胞增殖,促进宫颈癌细胞凋亡,且精制物的抗癌活性明显优于粗提物。     

长链非编码 RNA HOTAIR 影响人舌鳞癌细胞 Tb3.1 增殖与凋亡的体内外研究

目的 研究长链非编码 RNA HOTAIR 对人舌鳞癌细胞系 Tb3.1 增殖与凋亡的影响 。 方法 使用 HOTAIR siRNA（siHOTAIR）敲低 HOTAIR 的表达; 实验分为 siHOTAIR 组、无义序列组和空白对照组。 前 2 组分别用 siHOTAIR 和无义序列转染舌鳞癌细胞, 空白对照组细胞不做任何处理。 实时定量 PCR 检测 HOTAIR 的表达水平; 四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测 Tb3.1 细胞增殖; Western blot 检测 B 细胞淋巴瘤 2（Bcl-2）、活化型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Cleaved Caspase-3）、BAX 的表达; 流式细胞仪检测细胞凋亡; 平板克隆形成实验检测细胞增殖情况;并行细胞衰老检测 。 动物实验建立 Tb3.1 裸鼠皮下荷瘤模型, 通过免疫组织化学染色及 TUNEL 法评价干扰 HOTAIR 后对 Tb3.1 细胞增殖、凋亡的作用。 结果 siHOTAIR 处理后 HOTAIR 的表达水平降低; Western blot 结果示 Cleaved Caspase-3 和 BAX 表达水平升高, Bcl-2 表达水平降低。 MTT 结果显示 siHOTAIR 组细胞增殖受到抑制;流式细胞示 siHOTAIR 组细胞凋亡升高; 细胞衰老实验显示 siHOTAIR 组细胞衰老数目增加; 免疫组化结果显示, siHOTAIR 组较对照组 Ki-67、Bcl-2 表达减少, Caspase-3、BAX 表达增加; TUNEL 结果显示, siHOTAIR 组较空白对照组肿瘤细胞凋亡水平升高。 结论 干扰 HOTAIR 可以促进舌鳞癌细胞的凋亡并抑制其增殖, HOTAIR 可以作为舌鳞癌治疗的研究方向。     

拓扑异构酶Ⅰ抑制剂对耐阿霉素淋巴瘤细胞株杀伤和诱导凋亡作用的研究

目的 研究拓扑异构酶Ⅰ抑制剂对耐阿霉素淋巴瘤细胞株(L1210/ADM)的杀伤和诱导凋亡的作用.方法 采用噻唑蓝(MTT法)、钙依赖性磷脂结合蛋白(Annexin V)染色、梯状DNA电泳与细胞形态学观察等方法分析不同浓度(0.05、0.10、0.20、0.40μmol/L)拓扑异构酶Ⅰ抑制剂对L1210/ADM细胞的杀伤和凋亡作用,采用半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)8、Caspase-3抑制剂IETD-fmk、DEVD-CHO分析拓扑异构酶Ⅰ抑制剂介导的靶细胞杀伤和凋亡作用与Caspase的关系.结果 0.10 μmol/L拓扑异构酶Ⅰ抑制剂对靶细胞株的杀伤作用,与对照组和0.05 μmol/L组之间差异均有统计学意义(均P＜0.05).加用Caspase酶特异性抑制剂3组各时间点的靶细胞存活率均高于单用拓扑异构酶Ⅰ抑制剂组,差异均有统计学意义(均P＜0.05).靶细胞株经拓扑异构酶Ⅰ抑制剂处理后,部分靶细胞株出现了细胞凋亡;加用Caspase酶特异性抑制剂组中,有部分细胞死亡,但无凋亡小体形成,死亡细胞均为锥虫蓝染色.经拓扑异构酶Ⅰ抑制剂处理的靶细胞株大部分细胞出现胞体解离,并彼此黏附成簇状的、锥虫蓝拒染的凋亡小体,靶细胞株DNA电泳表现为特征性梯状图谱;加入Caspase酶特异性抑制剂的各组可以看到阻断了梯状DNA的产生.结论 拓扑异构酶Ⅰ抑制剂对L1210/ADM细胞株具有较强的杀伤和诱导凋亡作用,其机制可能涉及Caspase-8、Caspase-3的有序性活化.     

新型AKT抑制剂Hu7691对胃癌细胞的抗肿瘤活性及机制研究

目的 考察新型AKT抑制剂Hu7691对胃癌细胞的体内外抗肿瘤活性及作用机制。方法 以人胃癌细胞HGC27和BGC823为体外细胞模型,采用SRB法评价不同浓度的Hu7691对胃癌细胞的体外增殖抑制作用;以流式细胞术考察Hu7691对HGC27细胞周期的影响,采用Western blotting考察Hu7691作用后,细胞内相关蛋白的表达变化;采用HGC27裸小鼠移植瘤模型评价Hu7691的体内抗肿瘤活性。结果 Hu7691在HGC27和BGC823细胞模型上能显著抑制肿瘤细胞增殖;引起肿瘤细胞发生细胞周期阻滞,浓度依赖性地下调AKT通路相关蛋白p-PRAS40（T246）、p-GSK3β、p-S6（S235/236）、p-4EBP1（T37/46）及p-4EBP1（S65）的蛋白表达,上调p-AKT （S473）、p-AKT （S308）的表达;下调细胞周期相关蛋白Cyclin D1的表达;在HGC27裸小鼠移植瘤模型中,Hu7691能显著抑制肿瘤生长,并且对小鼠体质量无显著影响。结论 新型AKT抑制剂Hu7691通过诱导细胞周期阻滞,发挥对胃癌细胞体内外显著的抗肿瘤活性。     

半枝莲总黄酮调控MIIP对人胃腺癌细胞AGS增殖、凋亡和放疗敏感性的作用及机制研究

目的 研究半枝莲总黄酮（TF-SB）对人胃腺癌细胞AGS增殖、凋亡和放疗敏感性的影响和分子机制。方法 采用细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测TF-SB（0、25、50、100、200 μg·mL⁻¹）作用24 h对AGS细胞存活率的影响。将AGS细胞分为对照组、溶剂对照（含相同浓度的甲醇）组、TF-SB（100 μg·mL⁻¹）组、质粒空载体（pcDNA,200 nmol·L⁻¹）组、迁移侵袭抑制蛋白（MIIP）过表达质粒（pcDNA-MIIP,200 nmol·L⁻¹）组、TF-SB（100 μg·mL⁻¹）＋小干扰RNA对照（si-con,200 nmol·L⁻¹）组、TF-SB（100 μg·mL⁻¹）＋MIIP小干扰RNA（si-MIIP,200 nmol·L⁻¹）组,转染质粒后TF-SB处理24 h,CCK-8法检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blotting法检测B细胞淋巴瘤-xl（Bcl-xl）、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（cleaved Caspase-3）、MIIP表达;不同照射量X射线（0、2、4、6、8 Gy）照射后,克隆形成实验检测细胞存活率,并绘制单击多靶模型拟合曲线,Western blotting法检测γ-H2AX蛋白表达。结果 与TF-SB 0 μg·mL⁻¹组比较,TFSB 25、50、100、200 μg·mL⁻¹组AGS细胞存活率显著降低（P＜0.05）;与对照组及溶剂对照组比较,TF-SB 100 μg·mL⁻¹组AGS细胞凋亡率显著升高（P＜0.05）,Bcl-xl蛋白表达显著降低（P＜ 0.05）,cleaved Caspase-3和MIIP蛋白表达显著升高（P＜0.05）;放疗后,TF-SB组细胞存活率显著降低（P＜0.05）,γ-H2AX蛋白表达显著升高（P＜0.05）,放疗敏感性增加。与pcDNA组比较,pcDNA-MIIP组AGS细胞凋亡率显著增加,细胞存活率显著降低,Bcl-xl蛋白表达显著降低,cleavedCaspase-3蛋白表达增加（P＜0.05）;放疗后,pcDNA-MIIP组细胞存活率显著降低（P＜0.05）,γ-H2AX蛋白表达显著升高（P＜0.05）,敏感性增加。与TF-SB＋si-con组比较,TF-SB＋si-MIIP组AGS细胞凋亡率显著降低,细胞存活率显著增加,Bcl-xl蛋白表达显著增加,cleaved Caspase-3蛋白表达显著降低（P＜0.05）;放疗后,TF-SB＋si-MIIP组细胞存活率显著升高（P＜0.05）,γ-H2AX蛋白表达显著降低（P＜0.05）,敏感性降低。结论 TF-SB通过上调MIIP可抑制AGS细胞增殖,诱导细胞凋亡,提高其放疗敏感性。     

原花青素对人胆管癌细胞QBC939抑制的体内外研究

目的研究原花青素(PC)体内外对人胆囊癌细胞的抑制作用。方法常规培养细胞,24 h后随机分为阳性对照组、空白对照组和PC组。MTT法检测PC对人胆囊癌细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期;建立QBC939细胞裸鼠异种移植瘤模型。将荷瘤裸鼠随机分为5组:阴性对照组、5-Fu阳性对照组及PC 3个剂量组,每日腹腔注射给药,每隔3 d测肿瘤大小;12 d后,处死裸鼠,剥瘤称重并计算抑瘤率。结果 PC 3个剂量组显著抑制QBC939细胞增殖,且呈时间和剂量依赖性;将细胞周期阻滞在S期,并诱导QBC939细胞凋亡;PC可抑制QBC939细胞裸鼠异种移植瘤的生长。结论 PC体内外均可抑制SHG-44细胞生长,并诱导肿瘤细胞凋亡。     

钙蛋白酶抑制剂Ⅲ MDL 28170对大鼠甲基汞急性神经毒性的拮抗作用

目的为寻找治疗甲基汞急性中毒作用药物新靶点,探讨钙蛋白酶抑制剂ⅢMDL28170对甲基汞急性神经毒性的拮抗作用。方法大鼠随机分为正常对照组、MDL28170(50mg.kg-1,ip)对照组、甲基汞(10mg.kg-1,ig)中毒模型组与MDL28170干预组(同时ig甲基汞和ip MDL28170)。Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,免疫组织化学法观察脑μ-钙蛋白酶免疫阳性神经元,Western蛋白印迹法检测脑μ-钙蛋白酶表达,TUNEL法观察脑神经元凋亡,免疫荧光染色法观察脑皮质神经元微管相关蛋白2(MAP2)含量。结果大鼠ig给予甲基汞3或7d,中毒模型组出现神经系统损害行为学表现,水迷宫逃避潜伏期明显延长(P<0.01);脑皮质神经元内μ-钙蛋白酶的表达和活性明显升高(P<0.01);脑皮质神经元凋亡显著增加(P<0.01);神经元MAP2含量明显降低。同时给予MDL28170可明显减轻上述改变。结论μ-钙蛋白酶可能参与甲基汞中毒导致的神经细胞凋亡。MDL28170可明显抑制甲基汞的神经毒性损害,可能对甲基汞中毒具有治疗作用。     

CLA-PTX对黑色素瘤B16-F10的体内外抗肿瘤作用

本研究旨在探索CLA-PTX对黑色素瘤B16-F10细胞的体内外抗肿瘤作用。选择鼠源B16-F10细胞系作为研究模型。研究CLA-PTX体外细胞毒,细胞凋亡,细胞周期作用,以及CLA-PTX体外细胞摄取作用。用荷瘤C57BL6/N小鼠研究CLA-PTX的体内抗肿瘤作用。体外细胞毒研究结果表明：CLA-PTX的IC50为（4.25±0.43）μM,优于紫杉醇（6.70±0.80）μM（P〈0.01）。与空白组和紫杉醇组相比,CLA-PTX可使细胞总凋亡比例增加（P〈0.01）。与空白对照组相比,CLA-PTX将细胞周期阻滞于S期,而紫杉醇则使细胞在G2‐M期蓄积。CLA-PTX的细胞摄取量显著高于紫杉醇（P〈0.01）。体内抗肿瘤药效显示,CLA-PTX抗肿瘤活性显著高于空白对照组和紫杉醇组（P〈0.01或P〈0.05）。上述结果表明,CLA-PTX对B16-F10细胞有显著体内外抗肿瘤作用。     

选择性COX-2抑制剂对骨肉瘤的作用研究现状

骨肉瘤是来源于间叶组织的恶性肿瘤,好发于青少年长骨干骺端,预后极差,可于数月内出现肺部转移,截肢后3～5年存活率仅为5%～20%,目前以化疗和手术治疗为主.研究表明,选择性COX-2抑制剂可发挥抗骨肉瘤的作用,关于其作用机制有多种观点,现就选择性COX-2抑制剂对骨肉瘤的作用作一综述.     

冬凌草甲素抑制体内外卵巢癌生长的作用

目的:探讨冬凌草甲素对体内外卵巢癌生长的影响及其作用机制。方法:冬凌草甲素作用人卵巢癌细胞株HO-8910PM后,MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;Westernblot检测卵巢癌细胞中核因子(NF)-κB和X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)表达;建立起裸鼠卵巢癌皮下移植瘤模型,观察冬凌草甲素对裸鼠卵巢癌皮下移植瘤生长的影响;免疫组织化学法检测肿瘤组织中Ki-67、NF-κB和XIAP的阳性表达。结果:HO-8910PM细胞经不同浓度冬凌草甲素(10、20、40μmol·L-1)作用24h后,细胞存活率分别为(80.14±9.84)%、(71.68±6.51)%和(64.58±5.24)%,均低于对照组(96.12±4.23)%,差异有统计学意义(P<0.05)。冬凌草甲素(40μmol·L-1)作用HO-8910PM细胞24h后,诱导(15.9±3.4)%的HO-8910PM细胞发生早期凋亡,高于对照组的(1.7±0.3)%,差异有统计学意义。3种浓度(10、20、40μmol·L-1)的冬凌草甲素作用24h,均可抑制HO-8910PM细胞中NF-κB的表达;而低浓度(10μmol·L-1)冬凌草甲素对HO-8910PM细胞中XIAP蛋白无明显抑制作用,高浓度冬凌草甲素(20和40μmol·L-1)明显抑制XIAP蛋白的表达。冬凌草甲素可显著抑制裸鼠卵巢癌皮下移植瘤生长,实验组中Ki-67、NF-κB和XIAP的表达强度均低于对照组(P<0.01)。结论:冬凌草甲素可显著抑制体内外卵巢癌的生长,该作用机制可能是冬凌草甲素通过抑制NF-κB及其调控蛋白XIAP的表达来抑制卵巢癌的生长。