红霉素耐药葡萄球菌中erm和msrA基因检测

目的检测临床分离的葡萄球菌（金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌）对红霉素耐药的基因型别。方法在299株红霉素耐药葡萄球菌（金葡菌158株,表葡菌141株）中,聚合酶链反应（PCR）检测耐药基因ermA、ermB、ermC和msrA。结果158株红霉素耐药金葡菌中,ermA、ermB、ermC、msrA基因的阳性率分别为3．2％、7．0％、39．9％、7．0％;141株红霉素耐药表葡菌中,ermA、ermB、ermC、msrA基因的阳性率分别为2．8％、2．1％、55．3％、14．2％;少数菌株同时存在两种耐药基因。结论本地区葡萄球菌对红霉素的耐药基因主要是ermC。     

大环内酯类及诱导型克林霉素对金黄色葡萄球菌的耐药表型研究

目的 对金黄色葡萄球菌的大环内酯类、林可酰胺类、链阳霉素类抗生素耐药状况进行研究.方法 临床患者的金黄色葡萄球菌74株,头孢西丁纸片法检测甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌(MRSA);双纸片法检测葡萄球菌诱导型克林霉素耐药.结果 MRSA检出率为63.5%(47/74),对红霉素和克林霉素的耐药率分别为97.8%(46/47)、78.7%(37/47);MSSA对红霉素和克林霉素的耐药率分别为70.4%(19/27)、59.3%(16/27);红霉素、克林霉素同时耐药株87.5%(56/64);8株对红霉素耐药,克林霉素敏感,有7株D-试验阳性,其中一株进行D-试验时,在克林霉素抑菌环内有散在菌落存在.结论 大环内酯类、林可酰胺类的耐药性MRSA明显高于甲氧西林敏感的葡萄球菌(MSSA);红霉素、克林霉素同时耐药即结构型耐药是金黄色葡萄球菌对大环内酯类、林可酰胺类抗生素耐药的主要原因;存在诱导型克林霉素耐药.     

甲氧西林耐药溶血葡萄球菌大环内酯类和林可酰胺类耐药基因型与表型分析

目的研究甲氧西林耐药溶血葡萄球菌（MRSH）大环内酯类和林可酰胺类的耐药机制。方法琼脂稀释法测定3种抗菌药对63株溶血葡萄球菌的最低抑菌浓度（MIC），PCR技术检测mecA、ermA、ermB、ermC、msrA／msrB和linA／linA’耐药基因。结果62株MRSH均携带mecA，最常见大环内酯类和林可酰胺类耐药基因为msrA／msrB（59．7％），其次linA／linA’（50％）和ermC（32．3％），50％菌株携带2种耐药基因，3．2％菌株携带3种耐药基因；21株携带erm均对红霉素高耐（MIC≥256μg／ml），对克林霉素结构型MLSB或诱导型MLSB耐药；14株携带msrA／msrB对红霉素中度耐药（MIC=32或64μg／ml）；31株携带linA／linA’，3株对克林霉素耐药，其余均对克林霉素敏感。结论MRSH携带msrA／msrB、linA／linA’和ermC基因是其对大环内酯类和林可酰胺类产生耐药的主要原因。     

MSSA携带耐药基因erm与泰利霉素体外敏感性的关系

目的调查临床分离的甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)中红霉素耐药相关基因erm的分布情况,并分析耐药基因erm对新型大环内酯类药物泰利霉素体外敏感性的影响。方法实验用菌株为华中科技大学协和深圳医院鉴定并保存的2011～2015年非重复的各科室各标本来源的MSSA121株,通过微量肉汤稀释法及K-B纸片法测定菌株对泰利霉素和10种抗菌药的MIC值,并进一步对所有红霉素耐药的菌株进一步行D-试验以区分红霉素耐药菌株的MLS_B耐药表型,之后采用PCR法检测erm基因中三种最常见亚型ermA、ermB、ermC的分布情况。结果MSSA对泰利霉素中介1株,耐药51株,耐药率达43.0%,对红霉素耐药率则高达61.2%。所有MSSA均对替考拉宁、利奈唑胺、万古霉素、阿莫西林/克拉维酸及苯唑西林敏感;121株MSSA中有74株(61.2%)携带erm基因,其中25株(20.7%)携带ermB,且均为cMLS_B表型;10株(8.3%)携带ermA,且均为iMLS_B表型;40株(33.1%)携带ermC,其中cMLS_B     

Analysis of drug resistance and five drug resistance genes in MRSA from differeut populations in Naning district

目的 探讨南京地区成年健康人群鼻咽部携带的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和医院下呼吸道感染患者痰液中分离的MRSA的耐药性及耐药基因分布特点.方法 收集南京地区成年健康人群(健康组)鼻咽部分离的19株MRSA和医院下呼吸道感染患者(临床组)痰液中分离的51株MRSA,K-B法测定其药敏情况,多重PCR法检测mecA基因,氨基糖苷修饰酶基因aacA-aphD,大环内酯类23s rRNA甲基化酶基因ermA、ermC,四环素类核糖体保护蛋白基因tetM、tetK.结果 所有菌株对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺敏感,对多种抗生素的耐药率在90％以上,携带mecA基因；aacA-aphD、ermA、ermC、tetM、tetK五种耐药基因的MRSA菌株在健康组和临床组的检出率分别为94.8％、100.0％、21.0％、100.0％、10.5％和98.0％、96.1％、19.6％、96.1％、23.5％.结论 南京地区成年健康人群鼻咽部携带的MRSA和医院下呼吸道感染患者分离的MRSA均表现出多重耐药,相关耐药基因检出率高.     

南京地区不同人群呼吸道耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性及五种耐药基因分析

目的探讨南京地区成年健康人群鼻咽部携带的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和医院下呼吸道感染患者痰液中分离的MRSA的耐药性及耐药基因分布特点。方法收集南京地区成年健康人群(健康组)鼻咽部分离的19株MRSA和医院下呼吸道感染患者(临床组)痰液中分离的51株MRSA,K-B法测定其药敏情况,多重PCR法检测mecA基因,氨基糖苷修饰酶基因aacA-aphD,大环内酯类23srRNA甲基化酶基因ermA、ermC,四环素类核糖体保护蛋白基因tetM、tetK。结果所有菌株对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺敏感,对多种抗生素的耐药率在90%以上,携带mecA基因;aacA-aphD、ermA、ermC、tetM、tetK五种耐药基因的MRSA菌株在健康组和临床组的检出率分别为94.8%、100.0%、21.0%、100.0%、10.5%和98.0%、96.1%、19.6%、96.1%、23.5%。结论南京地区成年健康人群鼻咽部携带的MRSA和医院下呼吸道感染患者分离的MRSA均表现出多重耐药,相关耐药基因检出率高。     

医院环境中葡萄球菌诱导克林霉素耐药及基因分析

目的 了解医院环境中存在的葡萄球菌属细菌分布,检测环境分离株对红霉素和克林霉素的耐药性,并检测红霉素对克林霉素诱导性耐药的发生率。方法 按照院内感染管理环境采样标准采集医院环境包括空气、物体表面、工作人员手、样品。分离其中葡萄球菌属细菌,用k-b法检测其对红霉素及克林霉素的耐药性,并做纸片法D试验检测红霉素诱导克林霉素耐药发生率。结果 210株葡萄球菌中金黄色葡萄球菌16株,表皮葡萄球菌162株,其他凝固酶阴性葡萄球菌32株;其中红霉素耐药克林霉素耐药62株,占29.52%,红霉素敏感克林霉素敏感29株,占13.81%,红霉素耐药或中介克林霉素敏感或中介119株,占56.67%,其中D试验阳性82株,占39.05%,D试验阴性37株,占17.62%.红霉素核糖体甲基化酶基因ermC是诱导耐药的主要基因,占56.09%（46/82）。结论 医院环境中葡萄球菌分布以表皮葡萄球菌为主,D试验阳性率与临床分离标本基本一致,常规D试验检测有助于临床合理使用大环内酯类及林可霉素类抗菌药物,ermC是诱导耐药的主要基因。     

19株诺卡菌的药敏与克拉霉素及四环素类耐药相关基因的关系研究

目的 研究诺卡菌临床分离株的药敏及与克拉霉素和四环素类耐药相关基因的关系。方法 以微量肉汤稀释法检测诺卡菌对15种抗菌药物的耐药性；以PCR法检测19株诺卡菌克拉霉素的耐药相关基因ermA、ermB、mefA、msrD，对四环素类的耐药相关基因tetO、tetM、tetL。结果 19株诺卡菌中，ermA基因检出率为15.8%(3/19)，未检出tetO、tetM、tetL、ermB、mefA、msrD基因。药敏结果显示19株诺卡菌对米诺环素和多西环素耐药率均为5.3%，未见克拉霉素耐药菌株。耐药率最高的为环丙沙星，占78.9%，其次为庆大霉素和头孢吡肟，分别占21.1%和15.8%。对其余药物均具有较高的敏感性。结论 诺卡菌对米诺环素、多西环素耐药与tetO、tetM、tetL基因无关，存在另外的四环素类相关耐药机制。ermA基因并不能引起克拉霉素耐药。     

郴州地区3380株金葡菌感染的临床分布及耐药性分析

目的:分析郴州地区二级以上综合性医院金黄色葡萄球菌感染的临床分布与耐药情况,为临床控制金黄色葡萄球菌感染提供参考。方法:收集各医院细菌室临床感染患者标本,按《全国临床检验操作规程》要求分离、鉴定细菌以及按美国临床和实验室标准化研究所(CLSI)更新的标准判别药敏结果。结果:标本中分离出3380株金黄色葡萄球菌中,其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)2031株,甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)1349株;其耐药率青霉素为92.51%,大环内酯类药物>70%,利福霉素和氯霉素<30%,未检出耐万古霉素和中介菌株;MRSA耐药率高于MSSA,且呈现多重耐药状态。结论:郴州地区MRSA感染率高,其耐药性严重,应加强细菌学培养与药敏试验,合理选用药物,延缓耐药菌的产生。     

大环内酯类耐药卡他莫拉菌23S rRNA基因突变位点与临床特点分 析

目的:研究大环内酯类耐药卡他莫拉菌的临床特点、药敏及耐药机制。方法:留取住院社区获得性下呼吸道感染患儿痰标本分离48株卡他莫拉菌,建株保存,分析卡他莫拉菌对大环内酯类敏感及耐药患儿的临床特点;采用K-B法进行药敏试验,头孢硝噻吩色原法测定茁鄄内酰胺酶,聚合酶链反应(PCR)及序列分析大环内酯类耐药机制。结果: 48株卡他莫拉菌β-内酰胺酶的产酶率为93.8%(45/48);卡他莫拉菌对红霉素和阿奇霉素耐药率分别为56.3%和41.7%。在23S rRNA突变位点检测中,A2982T、C3132T 等突变位点与大环内酯类耐药可能有关,未发现ermA、ermB、mefA 及merE等耐药基因。耐药组更多表现为喘息、肺部喘鸣音,与敏感组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:卡他莫拉菌β-内酰胺酶的产酶率、对大环内酯类的耐药性均日益增加,大环内酯类耐药组患儿更多表现为喘息,卡他莫拉菌耐药机制可能与23S rRNA位点发生突变有关。     

一株沃氏葡萄球菌耐药基因的研究

目的:研究沃氏葡萄球菌多重耐药情况和相关机制。方法:采用聚合酶链反应(PCR)法对一株多重耐药沃氏葡萄球菌进行β-内酰胺酶基因、氨基糖苷类修饰酶基因、大环内酯-林可酰胺-链阳菌素B类(MLSB)基因、四环素类基因、糖肽类基因、消毒剂基因检测。结果:PCR结果显示该株的mecA,TEM,ermA,ermC,msrA,msrB,aac(6′)/aph(2″),qacA基因均为阳性,ant(4′,4″),aph(3′)-,TetM,vanA,vanB基因均为阴性。结论:该株沃氏葡萄球菌存在多重耐药基因,而且对胺类、胍类消毒剂耐受。     

41株金黄色葡萄球菌耐药性分析及PVL基因检测

目的了解临床分离金葡菌对常用抗生素的耐药性和杀白细胞毒素(PVL)基因携带情况。方法采用头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA),K-B法检测临床分离的41株金葡菌对常用抗生素的敏感性,PCR法检测mecA基因和PVL基因携带情况。结果 41株金葡菌中MRSA占51.2%,MRSA对克林霉素、红霉素、氨基糖苷类和喹诺酮类耐药率明显高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA),MRSA和MSSA对复方新诺明敏感率分别为90.5%和95%,未发现对万古霉素、替考拉林和利奈唑胺耐药株。21株MRSA mecA基因均阳性,41株金葡菌中共检出2株携带PVL基因,MRSA与MSSA各占1株,均分离自骨科病房。结论该院临床分离MRSA耐药率高,应规范临床用药,加强MRSA耐药性监测,加强PVL基因的检测,防止此类菌株的播散。     

在酿脓链球菌中大环内酯和四环素耐药机制及体外对telithromycin敏感性

在酿脓链球菌中 ,对大环内酯类 ,林可酰胺类和链阳菌素B(MLSB)抗菌素的交叉耐药性是由 2个rRNA甲基化酶基因 (ermB和ermA)编码。相反 ,由mef(A)基因编码的膜蛋白介导的大环内酯外排泵仅对 14 -和 15元大环内酯类产生耐药性。本项研究的目地是测定红霉素和四环素耐药性基因的流行性和菌落之间的关系并评价了在体外新的酮内酯telithromycin对红霉素耐药和敏感菌株的活性。从不同的患者中收集分离 70株红霉素敏感和 5 5株红霉素耐药的酿脓链球菌。感染部位是上呼吸道、皮肤和软组织、血液、阴道和尿道。由双碟试验测定了红霉素耐药表型 ,…     

大肠埃希菌对氨基糖苷类抗生素的耐药谱及其产ESBLs的研究

目的了解临床分离的54株大肠埃希菌对氨基糖类苷类抗生素的耐药谱及产ESBLs情况,分析氨基糖苷类修饰酶AAC(3)-II的检出率及该酶的一些特征。方法采用MIC法测定临床分离的54株大肠埃希菌对7种氨基糖苷类抗生素的耐药谱,用NCCLS推荐的酶抑制剂增强纸片扩散法检测产ESBLs菌株,并通过聚合酶链反应、克隆测序和测定重组菌耐药谱对aac(3)-II基因进行研究。结果54株大肠埃希菌对阿米卡星、庆大霉素、卡那霉素、妥布霉素、链霉素、大观霉素和奈替米星的耐药率分别为14.8%、77.8%、59.3%、66.7%、68.5%、61.1%、22.2%;共检测出产ESBLs菌株34株,占63.0%;aac(3)-II基因在54株大肠埃希菌中检出率为88.5%;质粒转化菌产ESBLs且同时检出aac(3)-II基因。重组菌BL21(DE3)/pET26::aac(3)-II对庆大霉素和卡那霉素有耐药性,对其余5种氨基糖苷类抗生素没有表现出耐药性。结论大肠埃希菌对庆大霉素的耐药率最高,对阿米卡星的耐药率最低;耐氨基糖苷类抗生素的大肠埃希菌与其产ESBLs有相关性;重组菌BL21(DE3)/pET26::aac(3)-II仅对庆大霉素和卡那霉素产生耐药。     

肺炎支原体的耐药情况及其对阿奇霉素耐药机制的研究

目的 了解我院社区呼吸道感染肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,Mp)感染状况及耐药机制.方法 收集2007年8月到2008年3月我院社区获得性呼吸道感染病人的咽拭子、痰标本,分离培养Mp,检测对红霉素、阿奇霉素、环丙沙星、洛美沙星、氯霉素的药物敏感性,筛选阿奇霉素的耐药株,检测阿奇霉素耐药株的作用靶位23S rRNA Ⅴ区基因、23S rRNA Ⅱ区基因、rplD基因及rplV基因的耐药基因变异位点.结果 入选者共493例,Mp培养阳性者4株.其中耐红霉素和阿奇霉素2株,耐环丙沙星和洛美沙星3株,4株临床株对氯霉素均敏感.耐阿奇霉素株在23S rRNA的Ⅴ区基因的2063位发生A到G点突变.结论 我院存在对大环内酯类和喹诺酮类抗生素耐药的Mp菌株,并且有多重耐药的现象.Mp对阿奇霉素耐药的机制可能与23S rRNA Ⅴ区基因的点突变相关,与23S rRNA Ⅱ区基因、rplD基因、rplV基因是否相关尚不能肯定.     

2010至2012年临床分离金黄色葡萄球菌耐药性分析

目的：分析2010至2012年两家医院金黄色葡萄球菌耐药性的变化，调查金黄色葡萄球菌感染分布及耐甲氧西林金葡菌（ MRSA）检出动态。方法鉴定、药敏试验及MRSA鉴定采用黑马细菌分析系统，感染分布统计采用WHONET 5览．3软件。结果2010至2012年两家医院临床各类标本中分离出金黄色葡萄球菌242株，前3位分别是：呼吸道标本分离107株，脓、伤口及其他分泌物中分离78株，血中分离27株；242株SA中未发现对万古霉素和替考拉宁耐药的菌株，对利福平的耐药率低于14．3％，抗菌药物耐药率＞90％的为青霉素，对其他抗菌药物耐药率一般都小于80％。 MRSA对大环内酯类、氨基糖苷类、喹诺酮类抗菌药呈多重耐药，且耐药率均在80％以上。 MRSA三年分离率为60．3％。结论3年间SA耐药率持续保持较高的水平，应合理应用抗生素。     

食源性金黄色葡萄球菌分离株肠毒素及耐药性分析

目的 ：对92株食源性金黄色葡萄球菌分离株进行肠毒素及耐药性检测,以了解其致病性和耐药性。方法 ：采用酶联免疫吸附试验测定食源性金黄色葡萄球菌分离株肠毒素携带情况,利用VITEK^?2 Compact全自动微生物分析系统对菌株进行药敏试验,采用聚合酶链式反应对菌株mecA耐药基因进行检测。结果 ：92株食源性金黄色葡萄球菌分离株肠毒素检出率为5.43%(5株),对青霉素、四环素、红霉素、克林霉素4种抗生素的耐药率较高,分别为100%、 30.43%、19.57%、14.13%,检出3株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)。结论 ：食源性金黄色葡萄球菌分离株产生的肠毒素不容忽视,多重耐药及MRSA的检出提示耐药形势比较严峻,加强对食源性金黄色葡萄球菌致病性和耐药性的监测,对降低食品安全风险有重要意义。     

2016-2018年中国医科大学附属盛京医院胸腹水标本中病原菌分布及耐药性分析

目的 分析中国医科大学附属盛京医院住院患者胸腹水标本中分离病原菌的构成和药敏情况,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法 对中国医科大学附属盛京医院2016年1月-2018年12月收集的胸腹水标本进行菌株鉴定和药敏试验,并进行回顾性分析。结果 共分离出病原菌280株,胸水标本分离出105株病原菌,其中革兰阴性菌53株,构成比为50.48%,主要为鲍曼不动杆菌和肺炎克雷伯杆菌;革兰阳性菌45株,构成比为42.86%,主要为金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌;真菌7株,构成比为6.67%。腹水标本分离出175株病原菌,其中革兰阴性菌112株,构成比为64.00%,主要为大肠埃希菌和铜绿假单胞菌;革兰阳性菌58株,构成比为33.14%,主要为屎肠球菌和金黄色葡萄球菌;真菌5株,构成比为2.86%。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、厄他培南、亚胺培南、阿米卡星、替加环素的耐药率较低,均<30%;大肠埃希菌对哌拉西林的耐药率为100.00%,肺炎克雷伯菌对氨苄西林的耐药率为100.00%。鲍曼不动杆菌对多数β-内酰胺类抗生素的耐药率较高。铜绿假单胞菌对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、头孢唑啉、头孢曲松、头孢替坦、呋喃妥因、复方新诺明和多西环素的耐药率为100.00%,对阿米卡星、庆大霉素的完全敏感。屎肠球菌对环丙沙星、克林霉素和利福平的耐药率为100.00%,对喹努普汀/达福普汀、利奈唑胺、替加环素完全敏感;金黄色葡萄球菌对呋喃妥因、达普霉素、喹努普汀/达福普汀、替考拉宁、利奈唑胺、替加环素和万古霉素完全敏感。结论 临床上应及时对患者胸腹水标本进行菌株鉴定和药敏试验,并根据药敏结果合理选用抗菌药物,提高治疗效果。     

金黄色葡萄球菌对红霉素及克林霉素的耐药性的分析

目的 为了了解红霉素以及克林霉素在金黄色葡萄球菌属中的不同耐药表型,对于金黄色葡萄球菌对红霉素及克林霉素的耐药性进行分析。方法 在进行耐药性的分析上,美国临床实验室标准化委员会推荐的纸片扩散法是作者的首选方法,采用这种方法对金黄色葡萄球菌以及凝固酶阴性金黄色葡萄球菌对克林霉素以及红霉素的耐药性进行分析和判读,采用D-试验检测诱导型克林霉素耐药的表型,并采用酶链反应法对耐药基因进行检测。结果 在选取的340株葡萄菌属中,172株（50.59%）对红霉素以及克林霉素同时耐药;在对红霉素耐药的菌株中,89株（26.18%）对于克林霉素表示敏感,但菌株的D-试验为阳性;在对红霉素耐药的菌株中,有46株（13.53%）对于克林霉素敏感,但D-试验为阴性。在所选出的对红霉素耐药,但对克林霉素敏感的葡萄菌属中,了解到了诱导型克林霉素耐药在甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）、甲氧西林敏感凝固酶阴性金黄色葡萄球菌（MSCNS）、耐甲氧西林凝固酶阴性金黄色葡萄球菌（MRCNS）中的比例分别为57.02%、39.65%、68.79%和64.25%,而除此之外的其他各种均显示为阴性。结论 在这组实验中,得出的是耐红霉素葡萄菌属中诱导型克林霉素耐药的发生几率相对来说是比较高的,耐药性的判断有利于医生在治疗疾病的时候合理的使用药物,减少耐药类型的增加,使治疗效果达到最佳,做好防护,减少院内的菌株感染。     

79株临床分离MRSA的SCCmec基因分型及耐药性分析

目的:了解天津某医院临床分离耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)耐药状况及葡萄球菌盒染色体mec(SCCmec)类型.方法:应用聚合酶链式反应(PCR)技术检测mecA基因,多重PCR方法对MRSA进行SCCmec基因分型.应用微量肉汤法及K-B纸片扩散法测试MRSA对青霉素、苯唑西林、氨苄西林、环丙沙星、莫西沙星、头孢唑林、氯霉素、林可霉素、庆大霉素、头孢曲松、红霉素、利福平、盐酸四环素、万古霉素、替考拉宁、复方磺胺甲恶唑、利奈唑胺、替加环素18种抗生素药物敏感性.大环内酯、林可霉素、链阳霉素B类抗生素诱导耐药的检测采用克林霉素-红霉素双纸片诱导试验(D试验).结果:SCCmec分型显示79株受试MRSA均为SCCmecⅢ型菌株.79株MRSA临床株对包括苯唑西林在内的多种抗生素耐药,对氯霉素、复方磺胺甲嗯唑耐药率相对较低,分别为3.80%、10.13%,对糖肽类抗生素和利奈唑胺、替加环素均敏感.7株红霉素耐药、林可霉素敏感MRSA D试验阳性.结论:天津某医院临床分离MRSA SCCmec基因型均为Ⅲ型,且具有多重耐药的特征,红霉素耐药、林可霉素敏感株存在诱导耐药现象.