Graves’病患者外周血T细胞表面膜型CD28及血清中可溶性CD28的表达及其意义

目的分析Graves′病(Graves′disease,GD)患者外周血T细胞表面膜型CD28及血清中可溶性CD28的表达水平,探讨CD28分子在GD免疫病理机制中的作用。方法选取105例GD患者为试验组,67例健康者为对照组,通过溶血及流式细胞术检测所有受试对象外周血T细胞表面膜型CD28的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中可溶性CD28的含量。结果试验组外周血CD4+CD28+T细胞为(23.367±8.562)%,CD8+CD28+T细胞为(10.156±3.114)%,较对照组[分别为(30.786±5.143)%和(17.200±3.624)%]显著减少(P<0.0.5、P<0.0.1),血清中可溶性CD28水平观察组[(2.35±0.58)μg/L]较对照组[(0.53±0.23)μg/L]显著增加(P<0.01)。结论共刺激分子CD28很有可能参与了GD的免疫病理机制。     

门静脉高压症患者外周血CD80/CD28的表达

目的检测门静脉高压症(portal hypertension,PHT)患者外周血淋巴细胞中CD80/CD28的表达情况,分析其与患者淋巴细胞亚群以及免疫功能的关系。方法采用流式细胞分析技术对30例门静脉高压症患者和30例正常人进行研究,对两组人群外周血CD80/CD28和淋巴细胞进行检测。结果流式细胞仪检测显示门静脉高压症患者外周血T细胞的CD80、CD28表达明显下降,PHT患者CD4+、CD4+/CD8+以及CD19+细胞均低于正常对照,与正常人对照组相比差异均有显著性。结论 PHT患者外周血T细胞低表达CD80、CD28,不能有效激活其通路,导致免疫功能低下。     

健康汉族人外周血CD4~＋CD8~＋双阳性和CD4~-CD8~-双阴性T淋巴细胞的分布

目的：观察健康汉族人外周血中CD4＋CD8＋双阳性（double positive,DP）T细胞和CD4-CD8-双阴性（double negative,DN）T细胞的分布频率。方法：利用三色流式细胞术分析36例健康成人（〈65岁）、34例健康老年人（≥65岁）和22例免疫抑制者外周血DP T细胞和DN T细胞的分布。结果：老年组外周血DP T细胞比例1.93%±1.52%显著高于免疫抑制组1.23%±0.81%（P=0.05）;但与成人组1.54%±1.24%相比,老年组外周血DP T细胞比例虽然有增高的趋势但未见显著差异。老年组、成人组和免疫抑制组外周血DP T细胞绝对计数分别为（0.028±0.022）×109细胞/L、（0.024±0.017）×109细胞/L和（0.021±0.019）×109细胞/L,三组间差异无显著性。成人组外周血DN T细胞比例为8.81%±5.56%,明显高于老年组的5.52%±3.49%和免疫抑制组的3.72%±1.21%（P值分别为0.012和0.000）;老年组DNT细胞比例也高于免疫抑制组（P=0.025）。老年组、成人组和免疫抑制组外周血DN T细胞绝对计数分别为（0.083±0.069）×109细胞/L、（0.150±0.111）×109细胞/L和（0.057±0.027）×109细胞/L,成人组外周血DN T细胞的绝对数明显高于老年组（P=0.011）及免疫抑制组（P=0.000）,而免疫抑制组与老年人比较则未见显著差异（P=0.155）。成人组外周血更常出现CD3分子表达增高（CD3high）的T细胞。与CD3分子表达正常（CD3norm）的T细胞相比,CD3highT细胞群体中包含大量DN T细胞。结论：年龄≥65岁的健康汉族老年人外周血DP T细胞未见明显增多,但外周血DN T细胞随着年龄增高而明显减低。     

老年肺癌患者外周血T淋巴细胞及亚群CD28的表达

目的:检测老年肺癌患者外周血中T淋巴细胞及亚群CD28的表达.方法:采用三色免疫荧光标记流式细胞术检测32例老年肺癌患者与35例老年正常人外周血T淋巴细胞及亚群CD28的表达.结果:老年肺癌组CD3 、CD4 、CD8 T细胞及CD4 CD28 、CD8 CD28 T细胞亚群明显低于老年正常对照组(P＜0.01);CD8 CD28T细胞亚群(P＜0.01)明显高于老年正常对照组;均有明显的统计学差异;两组间CD4 CD28T细胞亚群无明显统计学差异(P＞0.05).结论:老年肺癌患者较正常老年人存在明显的免疫功能紊乱,抗肿瘤能力明显下降,并导致病情恶化.     

强直性脊柱炎患者外周血单核及T淋巴细胞CD147的表达及意义

目的 观察强直性脊柱炎(AS)患者外周血单核及T淋巴细胞中CD147的表达情况,初步探讨CD147在AS发病及疾病活动中的意义.方法 入组AS患者、类风湿关节炎(RA)患者及健康对照者(HC)各30例,以流式细胞术分析比较各组间外周血单核及T淋巴细胞CD147表达的差异,并经逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测比较其外周血单个核细胞(PBMC)CD147 mRNA表达的差异;进而将AS患者单核及T淋巴细胞CD147表达水平与常用的疾病活动性指标行相关分析.结果 AS、RA及HC组外周血单核细胞CD147的平均荧光强度(MF1)分别为213.5±37.8、228.7±49.7及163.6±44.8,T淋巴细胞CD147的MFI则分别为36.8±10.1、40.2±10.5及28.3±10.6,AS组单核及T淋巴细胞CD147的表达水平均略低于RA患者,但差异均无统计学意义(均P＞0.05),而AS与RA组单核及T淋巴细胞CD147的表达水平均高于HC组,差异均有统计学意义(均P＜0.05);AS与RA组PBMC中CD147 mRNA表达水平均高于HC组(P＜0.05),而AS与RA组间差异无统计学意义(P＞0.05);AS患者单核及T淋巴细胞CD147 MFI与其ESR及CRP均存在正相关(P＜0.05).结论 AS患者单核及T淋巴细胞中CD147的表达较正常升高,其水平与患者ESR及CRP存在正相关,提示CD147可能是AS患者疾病发生发展的重要影响因素.     

非小细胞肺癌外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节T细胞分析

目的分析非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节T细胞（Treg）占CD4^＋T细胞的比例变化,探讨其临床意义。方法采用流式细胞仪检测32例非小细胞肺癌患者和15例正常健康者（对照组）外周血中CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg占CD4^＋T细胞的比例。结果健康对照纽外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg占CD4^＋T细胞比例为（0．54±0．51）％;NSCLC患者外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg占CD4^＋T细胞比例为（1．40±0．98）％。两组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论NSCLC患者外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg占CD4^＋T细胞的比例明显升高,提示与肺癌免l癌逃逸有美。     

梅毒患者外周血淋巴细胞CD28-B7分子的表达及意义

目的探讨CD28-B7 T淋巴细胞活化协同刺激分子在梅毒发病、发展及转归中的作用。方法应用流式细胞仪和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）对60例梅毒患者（早期梅毒患者和血清固定患者各30例）和30例正常人外周血淋巴细胞中B7（CD80/CD86）及CD4＋T淋巴细胞中CD28的表达进行检测。结果①梅毒患者外周血淋巴细胞表面CD28的表达水平低于正常对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）;血清固定组和早期梅毒组比较,CD28表达水平的差异无统计学意义（P〉0.05）。②梅毒患者外周血淋巴细胞CD80及CD86的表达水平明显低于正常对照组（P〈0.05）,但CD80和CD86的表达水平在血清固定组和早期梅毒组间无统计学意义（P〉0.05）。结论本研究提示梅毒患者外周血淋巴细胞表面CD80、CD86及其受体CD28的表达下调,通过影响CD28-B7协同刺激通路,抑制T细胞尤其是CD4＋T淋巴细胞活性功能,可能参与了梅毒的发病、发展及转归过程。     

系统性红斑狼疮患者CD4+、CD8+T淋巴细胞SLAM基因的表达分析

目的探讨系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者CD4 、CD8 T淋巴细胞SLAM基因的表达。方法采用免疫磁珠的方法对20例系统性红斑狼疮患者及10例正常人外周血CD4 、CD8 T淋巴细胞进行分离,RT-PCR对CD4 、CD8 T淋巴细胞SLAM基因表达进行分析。结果SLE患者CD4 、CD8 T淋巴细胞SLAM mRNA表达增加显著高于正常对照。结论SLAM介导的T淋巴信号通路转导异常可能在SLE患者T淋巴细胞激活异常中发挥重要的作用。     

支气管哮喘病人CD8+T细胞CD25,CD30表达状况

目的：通过观察哮喘病人外周血CD8^ T细胞CD25，CD30表达水平，了解哮喘病人CD8^ T细胞功能状态。方法：将所分离出的CD8^ T细胞分别用PPD，PHA刺激，最后用流式细胞仪检测细胞表面CD25，CD30表达水平。结果：PHA刺激组CD8^ T细胞CD25表达水平高于健康对照(P＜0．05)，而CD60表达则无差异；PPD刺激组CD8^ T细胞CD25，CD30表达与健康对照组相比无显著差异；哮喘病人自然状态下(即未受抗原剁激)CD8^ T细胞CD25表达与健康对照无差异，而CD30表达低于健康对照(P＜0．05)。结论：哮喘病人CD8^ T细胞活化状态明显异常。     

慢性丙型肝炎患者治疗前后外周血T细胞CD28、CD152水平变化分析

目的 观察慢性丙型肝炎患者治疗前后外周血T细胞CD28、CD152水平变化,为慢性丙肝临床治疗提供依据.方法 选择40例慢性丙型肝炎患者作为观察组,40例健康人作为对照组,利用流式细胞仪测定用荧光抗体CD4-PECY5、CD8-PE标记过的患者CD4＋淋巴细胞和CD8＋淋巴细胞表面CD28、CD152表达水平,分析其治疗前后变化水平.结果 观察组慢性丙型肝炎患者治疗前CD4＋ CD28、CD8＋ CD28明显低于对照组（P＜0.05）;观察组患者经过治疗后CD4＋ CD28、CD8＋CD28明显升高（P＜0.05）;治疗后观察组患者CD4＋ CD28、CD8＋ CD28与对照组相比较无明显差异（P＞0.05）;观察组慢性丙型肝炎患者治疗前CD4＋ CD152明显高于对照组（P＜0.05）;观察组慢性丙型肝炎患者治疗前CD8＋ CD152与对照组无明显差异（P＞0.05）;观察组患者经过治疗后CD4＋ CD152明显降低（P＜0.05）,CD8＋ CD152＋无明显变化（P＞0.05）;治疗后观察组CD4＋ CD152＋、CD8＋ CD152与对照相比较无明显差异（P＞0.05）;治疗前HCV-RNA阳性率为82.5％ （33/40）,治疗后为17.5％ （7/40）,治疗后HCV-RNA阳性率明显降低（P＜0.05）.结论 外周血T细胞CD28、CD152水平变化能反映慢性丙型肝炎患者HCV RNA复制情况及免疫系统状态.     

寻常型银屑病TWEAK/CD163在外周血中表达的初步研究

目的 初步探讨肿瘤坏死因子相关弱凋亡诱导因子(TWEAK)及CD163在寻常型银屑病（psoriasis vulgaris，PV）中的作用。方法 2016年6~12月间共收集28例PV患者和15例健康对照者外周血，ELISA法测定血清TWEAK及CD163的表达水平，real time-PCR法测定外周血TWEAK mRNA及CD163 mRNA的表达水平，流式细胞仪检测外周血中TWEAK及CD163的蛋白在单核细胞的表达比例。分析PV患者银屑病严重程度（PASI评分）与TWEAK、CD163表达的相关性。结果 纳入时28例PV均处于进展期，治疗后随访到恢复期的有10例。PV进展期血清TWEAK水平较正常对照组升高，而血清CD163水平较对照组下降，PV恢复期血清TWEAK水平较进展期下降而血清CD163水平升高；TWEAK mRNA 水平在PV低于对照组，而CD163 mRNA水平在PV和对照无明显差异；TWEAK 在单核细胞的表达率在PV进展期和恢复期均高于对照组，而CD163在单核细胞的表达率在PV进展期和恢复期均低于对照组。PV进展期和对照组单核细胞的TWEAK和CD163共表达率均高于PV恢复期（P＜0.05），而PV进展期和对照组比较差异无统计学意义。血清TWEAK水平、血清CD163水平、TWEAK及CD163在单核细胞的各自表达率和共表达率均与PV严重程度无相关性（P>0.05）。结论 TWEAK/CD163炎症信号通路可能参与了PV的发病。     

类风湿关节炎患者CD8+IL-17+T细胞升高及其机制

目的 探讨CD8+IL-17+T细胞在类风湿关节炎(RA)的改变及可能的机制.方法 随机采集39例RA患者和40名健康人的外周血.以流式细胞术测定全部RA患者和27名健康人的外周血CD8+IL-17+T细胞的比例;以ELISA方法测定全部RA患者和健康人的血清白细胞介素(IL)6、IL-23和IL-17水平,并分析这些指标可能的相瓦关系.结果 RA患者CD8+IL-17+T细胞在CD8+T细胞的比例中位数为2.7%,95%可信区间为1.55%-3.74%;而正常人中位数为1.61%,95%可信区间为1.25%-2.61%.RA患者外周血CD8+IL-17+T细胞升高(P<0.05).对CD8+IL-17+T细胞功能相关的IL-17水平测定结果为,RA患者为(429±502)ng/L,而正常人仅为(13±30)ns/L(P<0.01).RA患者血清IL-17水平明显升高.对于CD8+IL-17+T细胞分化相关细胞因子的血清测定结果,IL-23水平在RA患者为(157.83±27.07)ns/L,正常人为(21.97±3.52)ns/L(P<0.01);IL-6水平在RA患者为(32.67±34.50)ns/L,正常人为(1.82±1.51)ns/L(P<0.01);RA患者血清IL-6、IL-23水平明显升高.结论 RA患者CD8+IL-17+T细胞数量增多,作用增强,IL-6和IL-23的升高是引起这些改变的可能原因.     

卵巢癌患者CD8+ T细胞中调节性T细胞相关分子标志物的表达率及临床意义

目的 :检测卵巢癌患者组织及外周血CD8~+T细胞中调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)相关分子标志物的表达率,探讨其在卵巢癌发生发展中的临床意义。方法:用流式细胞术检测31例卵巢癌患者、31例卵巢良性肿瘤患者和31例健康对照者的外周血,以及14例卵巢癌组织和12例卵巢良性肿瘤组织CD8~+T细胞中Foxp3、CD25、CD28、CTLA-4及GITR的表达率。结果:Foxp3和CTLA-4在卵巢癌组织CD8~+T细胞中的表达率显著高于卵巢良性肿瘤组织(P<0.05);CD28在卵巢癌组织CD8~+T细胞中的表达率显著低于卵巢良性肿瘤组织(P<0.05)。卵巢癌患者外周血CD8+T细胞中Foxp3、CD25、CTLA-4的表达率显著高于卵巢良性肿瘤患者和健康对照者(P<0.05),CD28的表达率显著低于卵巢良性肿瘤患者和健康对照者(P<0.05)。结论:卵巢癌组织及外周血CD8~+Treg所占的比例显著高于卵巢良性肿瘤组及健康对照组,且CD8~+T细胞中Foxp3的表达率可能对了解卵巢癌进展状况有一定帮助。     

协同刺激分子CD28/B7及CD40/CD40L在哮喘特异性免疫治疗中的作用

目的探讨协同刺激分子CD28／B7—1、CD28／B7—2及CD40／CD40L在哮喘发病中的作用及在特异性免疫治疗前后表达水平的变化。方法选择30例哮喘患者为实验组,30例健康人群为对照组。采用流式细胞仪方法比较两组间T、B淋巴细胞表面CD28／B7—1、B7—2及CD40／CD40L的表达及与血清总IgE水平的相关性,以及哮喘患者特异性免疫治疗前后T、B淋巴细胞表面CD28／B7—1、B7—2及CEl40／CEl40L的表达水平。结果与健康人群相比,哮喘患者CD28、CD40L、B7—2及CD40表达水平均增高。血清总IgE水平与T淋巴细胞表达CD40L水平呈正相关。特异性免疫治疗6个月后,哮喘患者T、B淋巴细胞表达的CD28／B7—2及CD40／CD40L水平均有所下调,但均未达正常水平。结论协同刺激分子CD28／B7—2及CD40／CD40L表达水平的上调在哮喘发病中可能起重要作用,特异性免疫治疗能下调哮喘患者CD28／B7-2及CD40／CD40L的表达水平,并可能由此间接下调血清总IgE水平,起到相应的治疗作用。     

哮喘患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞与IL- 4,IL- 5的表达

目的:探讨哮喘患者外周血中CD4 CD25 调节性T细胞与IL- 4,IL- 5的水平变化及其相互关系.方法:采用流式细胞技术检测40例哮喘患者和40例健康对照者外周血中CD4 CD25 调节性T细胞的表达水平,采用ELISA法检测外周血中IL- 4,IL- 5水平.结果:哮喘患者外周血中CD4 CD25 调节性T细胞低于健康对照者(P＜0.01);急性发作期哮喘患者外周血中CD4 CD25 调节性T细胞低于非急性发作期(P＜0.01);哮喘患者IL- 4,IL- 5的表达水平高于健康对照者(P＜0.05);急性发作期患者IL- 4,IL- 5的表达水平高于非急性发作期(P＜0.05);急性发作期哮喘患者外周血CD4 CD25 T细胞与IL- 4,IL- 5的表达水平呈负相关(r分别为-0.675,-0.767,P＜0.01).结论:CD4 CD25 调节性T细胞在哮喘的疾病活动中起着重要作用,是导致哮喘患者细胞免疫失调的重要原因.     

食道癌患者CD4^＋、CD25^＋、Foxp3^＋调节性T细胞的变化及意义

[目的]初步探讨CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞在食道癌患者外周血中的变化及临床意义。[方法]59例食道癌患者,分为鳞癌组47例,腺癌组12例,另外30例健康志愿者为对照组,用流式细胞术分别检测外周血中CD4^＋、CD25^＋、Foxp3^＋T细胞占CD4^＋T细胞的比例。[结果]食道癌初诊患者组CD4^＋、CD25^＋、Foxp3^＋T细胞比例为（10．33±5．72）％,明显高于健康志愿者组（4．56±1．06）％（P〈0．01）,而食道鳞癌组和食道腺癌组CD4^＋、CD25^＋、Foxp3^＋T细胞比例没有明显差异。[结论]CD4^＋、CD25^＋、Foxp3^＋调节性T细胞在食道癌初诊患者外周血中比例增加,可能是食道癌免疫抑制的一个重要原因。     

CD8+调节性T细胞亚群在系统性红斑狼疮患者外周血中分布的初步研究

目的:研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD8 CD28-调节性T细胞和CD8 CD28 效应性T细胞的比例,以及CD8 CD28-/CD8 CD28 细胞间的比值及其临床意义。方法:对37例SLE患者及15例健康对照新鲜外周全血以双抗体标记流式细胞术测定CD8 CD28-、CD8 CD28 T细胞亚群比例,计算CD8 CD28-/CD8 CD28 细胞间比值,并分析以上数据与SLE活动度、SLE活动性评分(SLEDAI)、免疫球蛋白增高或补体下降或肾损害的关系,观察激素治疗对以上数据变化的影响。结果:(1)稳定期SLE患者外周血CD8 CD28-T细胞群比例较正常对照及活动性SLE显著升高,而高活动性SLE患者CD8 CD28 T细胞群比例显著降低,同时CD8 CD28-/CD8 CD28 细胞间比值显著升高;(2)SLEDAI与CD8 CD28 T细胞亚群比例存在负相关(P<0.05),与CD8 CD28-/CD8 CD28 细胞间比值存在正相关(P<0.05);(3)SLE患者中补体水平降低者较补体水平正常者、有肾损害者较未发生肾损害者CD8 CD28-/CD8 CD28 细胞间比值显著升高;(4)对10例活动性SLE患者进行追踪,经激素治疗达到稳定期后,其CD8 T细胞、CD8 CD28-T细胞比例及CD8 CD28 T细胞比例均显著增高。结论:SLE患者体内免疫系统紊乱可表现在CD8 T细胞亚群比例改变上,其中CD8 CD28 T细胞群比例以及CD8 CD28-/CD8 CD28 细胞间比值改变可能反映了细胞免疫功能的紊乱,而CD8 CD28-调节性T细胞比例增高与病情活动的控制有关;CD8 CD28-/CD8 CD28 比值与病情活动性和补体异常及肾损害相关,可以作为病情监测的指标。     

慢性乙型肝炎患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的表达水平及临床意义

目的：观察抗病毒治疗前的慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血CD4⁺CD25^high调节性T细胞（Treg）和CD4⁺CD25⁺CD127^low/-reg百分比和临床指标的相关性。方法：分离28例CHB患者和24例健康对照的外周血单个核细胞(PBMC),以三色流式分析法分别对CD4⁺CD25^highTreg和CD4⁺CD25⁺CD127^low/-Treg进行分析。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb,实时荧光定量RT-PCR检测血清HBV DNA载量,同时进行肝功能检测。结果：CHB组CD4⁺CD25^highTreg和CD4⁺CD25⁺CD127^low/-Treg占CD4⁺T细胞的百分比分别为 3.36%±2.59% 和 4.05%±1.63% ,均高于正常对照组（1.60%±0.66%和1.75%±0.83%,P<0.01）。ALT大于100 U•L^-1的患者中CD4⁺CD25^highTreg占CD4⁺T淋巴细胞的百分比（4.26%±3.10%）高于ALT小于100U•L^-1的患者（2.52%±2.72% ,P<0.05）。CD4⁺CD25^highTreg占CD4⁺T淋巴细胞的百分比与ALT水平呈正相关（r=0.44,P<0.05）。结论：CHB患者体内CD4⁺CD25⁺Treg的升高可能抑制细胞免疫反应,影响病毒清除。CD25高表达水平易受转氨酶水平的影响,CD127用来作为调节性T细胞的鉴定更为可靠。     

多器官功能障碍综合征患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的检测及临床意义

目的：探讨多器官功能障碍综合征（MODS）患者外周血CD4⁺ CD25⁺调节性T细胞在治疗前后的改变及与病情的关系。方法： 采集10例MODS患者在治疗前和治疗后1周及10例健康人的外周抗凝血，应用CD4（PE-CY5）、CD25（FITC）和CD127（PE）特异性荧光抗体标记后，通过流式细胞仪对CD4⁺ CD25⁺ CD127^-调节性T细胞进行三色荧光抗体检测。结果：MODS患者治疗后外周血中CD4⁺ CD25⁺ CD127^-调节性T细胞的百分比（2.11％±0.33％）低于治疗前(7.44％±1.59％)（P<0.05），但仍高于正常对照组（0.77％±0.09％）（P<0.05）。结论：MODS患者CD4⁺ CD25⁺ CD127^-调节性T细胞的比例增加，并可能在 MODS的发生发展中起抑制作用。